1、 肿瘤的肿瘤的诱导分化疗法诱导分化疗法是肿瘤治疗学研究的新领域。诱导分化是肿瘤治疗学研究的新领域。诱导分化(induction of differentiation)是指恶性肿瘤细胞在体内外分化诱导是指恶性肿瘤细胞在体内外分化诱导剂的作用下，向正常或接近正常细胞方向分化逆转的现象。剂的作用下，向正常或接近正常细胞方向分化逆转的现象。全反式维甲酸全反式维甲酸(ATRA)诱导分化治疗已成为治疗急性早幼粒细胞诱导分化治疗已成为治疗急性早幼粒细胞白血病的首选手段。白血病的首选手段。维甲酸耐药维甲酸耐药的机制可能与维甲酸分解代谢作用增强、与胞浆维的机制可能与维甲酸分解代谢作用增强、与胞浆维甲酸结合蛋白的
2、结合增强等作用相关。甲酸结合蛋白的结合增强等作用相关。MDM2p53ApoptosisCell cycle arrestDNA repairDegradation Nuclear export231MDM2p53Stratege1Stratege2Stratege3（Nutlins）MTT法法PI单染结合流式细胞术单染结合流式细胞术*Nutlin-1仅对仅对p53野生型的白血病细胞具有一定的增殖抑制及凋亡野生型的白血病细胞具有一定的增殖抑制及凋亡诱导作用，对诱导作用，对p53突变或缺失的白血病细胞无细胞毒作用。突变或缺失的白血病细胞无细胞毒作用。？Nutlin-1是否与是否与ATRA具有协同诱
3、导白血病细胞分化的作用？若有，具有协同诱导白血病细胞分化的作用？若有，则其分子机制是否与则其分子机制是否与p53相关？相关？CD11b%CountsCD11b表面抗原检测表面抗原检测NBT还原实验还原实验CD11b表面抗原检测表面抗原检测台盼蓝染色结合细胞计数台盼蓝染色结合细胞计数*Nutlin-1仅对仅对HL60或或NB4细胞株（细胞株（p53突变或缺失）具有一定的突变或缺失）具有一定的增强增强ATRA分化诱导能力的作用，而对分化诱导能力的作用，而对U937（p53野生型）无增强作野生型）无增强作用。用。？Nutlin-1增强增强ATRA分化诱导能力的作用是否必须在分化诱导能力的作用是否必须
4、在p53无功能的无功能的细胞株中才能体现？细胞株中才能体现？Western Blotting法法CD11b表面抗原检测表面抗原检测*Nutlin-1增强增强ATRA分化分化诱导能力的作用与诱导能力的作用与p53无关。无关。？Nutlin-1增强增强ATRA分化诱导能力的作用机制是什么？分化诱导能力的作用机制是什么？Real Time PCR法法JC1、Rhodamine123外排实验外排实验MTT法法Western Blotting法法*ATRA能够在能够在HL60及及NB4细胞中诱导细胞中诱导p-gp的高表达，但不能在的高表达，但不能在p53野生型或野生型或p53缺失的缺失的U937细胞中诱
5、导细胞中诱导p-gp的高表达。的高表达。？ATRA诱导诱导p-gp高表达的现象是否与高表达的现象是否与Nutlin-1增强增强ATRA分化诱导分化诱导能力的作用相关？能力的作用相关？p-gp ATPase 活性检测活性检测Nutlin-1aNutlin-1bWestern Blotting法法Real Time PCR法法*Nutlin-1与与ATRA均为均为p-gp的底物，的底物，Nutlin-1与与ATRA共同作用时共同作用时能够抑制能够抑制ATRA的外排，增强的外排，增强ATRA的分化诱导作用。的分化诱导作用。ATRAATRAATRANutlin-1HL60/NB4 cellsp-gpATRA Nutlin-1增强分化能力增强分化能力的作用仅在经的作用仅在经ATRA诱导诱导高表达高表达p-gp的细胞株中的细胞株中发挥，而与发挥，而与p53通路无关。通路无关。Thank you！
