1、病原细菌的形态与结构一一.细菌的大小与形态细菌的大小与形态v观察细菌常用光学显微镜的油镜，其大小用测微观察细菌常用光学显微镜的油镜，其大小用测微尺在显微镜下进行测量，以微米尺在显微镜下进行测量，以微米(m)(m)为单位。为单位。v细菌按其外形，主要有细菌按其外形，主要有球菌球菌杆菌杆菌螺形菌螺形菌细菌的大小与形态细菌的测量单位：细菌的测量单位：微米微米(m)(m)细菌的形态细菌的形态球菌球菌杆菌杆菌螺螺菌菌弧弧菌菌螺形菌螺形菌球菌球菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌双球菌双球菌 链球菌链球菌球菌球菌 葡萄球菌葡萄球菌四联球菌四联球菌 八叠球菌八叠球菌杆菌杆菌不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。不同杆菌
2、的大小、长短、粗细很不一致。炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌 3-10 m3-10 m大大中中大肠埃希菌大肠埃希菌 2-3 m2-3 m小小布鲁菌布鲁菌 0.6-1.5 m0.6-1.5 m杆菌的形态多样杆菌的形态多样杆菌杆菌两端齐平两端齐平炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌两端尖细两端尖细白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌杆菌杆菌杆菌的形态多样杆菌的形态多样分枝杆菌分枝杆菌双歧杆菌双歧杆菌螺形菌螺形菌弧菌弧菌螺菌螺菌螺杆菌螺杆菌二二.细菌的结构细菌的结构基基本本结结构构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质细胞壁、细胞膜、细胞质、核质特特殊殊结结构构荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞细菌细胞的构造细菌细胞的构造细菌的结
3、构基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞（一）细菌基本结构（一）细菌基本结构v1.1.细胞壁：位于菌细胞的最外层，包绕在细胞膜细胞壁：位于菌细胞的最外层，包绕在细胞膜的周围。组成较复杂，的周围。组成较复杂，并随不同细菌而异。并随不同细菌而异。v用革兰染色法可将细菌分为两大类，即革兰阳性用革兰染色法可将细菌分为两大类，即革兰阳性菌和革兰阴性菌菌和革兰阴性菌1.1.细胞壁细胞壁（1 1）革兰染色与细胞壁结构的关系）革兰染色与细胞壁结构的关系革兰阳性菌革兰阳性菌革兰阴性菌革兰阴性菌革兰染色革兰染色两
4、类细菌细胞壁的共同组分为肽聚糖，但各有特殊组分。两类细菌细胞壁的共同组分为肽聚糖，但各有特殊组分。革兰染色法：革兰染色法：涂片涂片 风干风干 固定固定 结晶紫结晶紫 碘液碘液 95%95%乙醇乙醇 复红复红1min1min脱色脱色v革兰阳性菌：聚糖骨架、革兰阳性菌：聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥；四肽侧链、五肽交联桥；三维立体结构，坚固、三维立体结构，坚固、15155050层层v革兰阴性菌：聚糖骨架、革兰阴性菌：聚糖骨架、四肽侧链；二维平面结构，四肽侧链；二维平面结构，疏松、疏松、1 12 2层层（2 2）共有组分：肽聚糖）共有组分：肽聚糖1.1.肽聚糖肽聚糖革兰阳性菌肽聚糖革兰阳性菌肽聚糖聚
5、糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥青霉素作用点青霉素作用点溶菌酶作用点溶菌酶作用点N-N-乙酰葡糖胺乙酰葡糖胺N-N-乙酰胞壁酸乙酰胞壁酸五肽交联桥五肽交联桥 五个甘氨酸五个甘氨酸聚糖骨架聚糖骨架 G G：N-N-乙酰葡萄胺乙酰葡萄胺 M M：N-N-乙酰胞壁酸乙酰胞壁酸四肽侧链四肽侧链 L-L-丙、丙、D-D-谷、谷、L-L-赖、赖、D-D-丙丙主要成分：主要成分：肽聚糖肽聚糖 G+G+菌菌肽聚糖肽聚糖结构结构革兰阳性菌细胞壁的革兰阳性菌细胞壁的革兰阴性菌肽聚糖革兰阴性菌肽聚糖聚糖骨架、四肽侧链聚糖骨架、四肽侧链（2 2）肽聚糖肽聚糖聚糖骨架聚糖骨架：同G+菌四肽侧链
6、四肽侧链：L-丙、D-谷 DAP、D-丙G-G-菌肽聚糖结构菌肽聚糖结构:（3 3）G+G+菌壁特有成分菌壁特有成分壁磷壁酸壁磷壁酸膜磷壁酸膜磷壁酸（1 1）磷壁酸）磷壁酸膜磷壁酸壁磷壁酸（2 2）特殊表面蛋白特殊表面蛋白 A蛋白、蛋白、M蛋白蛋白 脂蛋白脂多糖脂质双层（4）革兰阴性菌细胞壁特殊组分）革兰阴性菌细胞壁特殊组分特殊组分：特殊组分：外外膜膜脂多糖（脂多糖（LPSLPS）（1 1）脂质）脂质A A（lipid Alipid A）v为一种糖磷脂，由为一种糖磷脂，由D-D-氨基葡萄糖双糖组成的基本氨基葡萄糖双糖组成的基本骨架，不同细菌骨架一致。骨架，不同细菌骨架一致。v内毒素毒性与生物学
7、活性成分内毒素毒性与生物学活性成分 v无种属特异性无种属特异性（2 2）核心多糖（）核心多糖（core polysaccharidecore polysaccharide）v位于脂质位于脂质A A的外层的外层v有属特异性，同一属细菌相同有属特异性，同一属细菌相同 （3 3）特异多糖（）特异多糖（specific polysaccharidespecific polysaccharide）v最外层，由数个至数十个低聚糖（最外层，由数个至数十个低聚糖（3-53-5个单糖）个单糖）重复单位所构成的多糖链。重复单位所构成的多糖链。v革兰阴性菌的菌体抗原（革兰阴性菌的菌体抗原（O O抗原），有种特异性抗
8、原），有种特异性 v缺失，细菌变为粗糙型缺失，细菌变为粗糙型肽聚糖肽聚糖聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥革兰阳性菌革兰阳性菌磷壁酸磷壁酸膜磷壁酸、壁磷壁酸膜磷壁酸、壁磷壁酸特殊表面蛋白特殊表面蛋白革兰阳性菌细胞壁的结构特点革兰阳性菌细胞壁的结构特点肽聚糖肽聚糖聚糖骨架、四肽侧链聚糖骨架、四肽侧链革兰阴性菌革兰阴性菌革兰阴性菌细胞壁的结构特点革兰阴性菌细胞壁的结构特点胞质周围间隙胞质周围间隙多种酶和蛋白质多种酶和蛋白质外膜外膜脂蛋白、脂质双层、脂多糖脂蛋白、脂质双层、脂多糖革兰阳性菌与阴性菌细胞壁结构比较革兰阳性菌与阴性菌细胞壁结构比较细胞壁细胞壁 革兰阳性菌革兰阳性
9、菌革兰阴性菌革兰阴性菌强度强度较坚韧较坚韧较疏松较疏松厚度厚度20-80nm20-80nm10-15nm10-15nm肽聚糖层数肽聚糖层数可多达可多达5050层层1-21-2层层肽聚糖含量肽聚糖含量占细胞壁干重占细胞壁干重50%-80%50%-80%占细胞壁干重占细胞壁干重5%-20%5%-20%磷壁酸磷壁酸+外膜外膜+脂蛋白脂蛋白+脂多糖脂多糖+项目项目革兰阳性菌革兰阳性菌革兰阴性菌革兰阴性菌 细胞壁的关系细胞壁的关系染色性染色性紫色紫色红色红色细胞壁对酒精的通透性细胞壁对酒精的通透性抗原性抗原性主要为主要为磷壁酸磷壁酸主要为主要为外膜外膜细胞壁的化学组成不同细胞壁的化学组成不同毒性毒性无内
10、毒素无内毒素有内毒素有内毒素内毒素为阴性菌细胞壁成分内毒素为阴性菌细胞壁成分 脂多糖脂多糖对青霉素对青霉素的作用的作用有效有效无效无效青霉素作用部位为肽聚糖青霉素作用部位为肽聚糖 五肽交联桥五肽交联桥对溶菌酶对溶菌酶的作用的作用有效有效无效无效溶菌酶作用部位为肽聚糖溶菌酶作用部位为肽聚糖 聚糖骨架聚糖骨架细细 胞胞 壁壁(5)(5)细胞壁的功能细胞壁的功能v1)1)维持细菌的固有形态、维持细菌的固有形态、v2)2)保护细菌抵抗低滲环境保护细菌抵抗低滲环境v3)3)参与菌体内外的物质交换参与菌体内外的物质交换v4)4)决定细菌的免疫原性决定细菌的免疫原性v5)5)维持菌体内离子平衡维持菌体内离子
11、平衡v6)6)某些成分与致病有关某些成分与致病有关v金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌A A蛋白：抗吞噬等作用蛋白：抗吞噬等作用vA A群链球菌膜磷壁酸：抗吞噬作用群链球菌膜磷壁酸：抗吞噬作用v革兰阴性菌脂多糖：多种生物学效应革兰阴性菌脂多糖：多种生物学效应v概念：细胞壁受损后仍能生长和分裂的细菌。在一般环境中不能耐受菌概念：细胞壁受损后仍能生长和分裂的细菌。在一般环境中不能耐受菌体内的高渗透压而将会涨破死亡。在高渗环境下，仍可存活。体内的高渗透压而将会涨破死亡。在高渗环境下，仍可存活。v形成条件形成条件:细胞壁中肽聚糖结构受理化或生物因素的直接破坏或合成抑细胞壁中肽聚糖结构受理化或生物因素的直接破
12、坏或合成抑制而形成。如溶菌酶、青霉素、胆汁、溶葡萄球菌素、抗体、补体等制而形成。如溶菌酶、青霉素、胆汁、溶葡萄球菌素、抗体、补体等v生物学特性生物学特性:多形性、革兰阴性、高渗培养、生长缓慢、荷包蛋样菌落、多形性、革兰阴性、高渗培养、生长缓慢、荷包蛋样菌落、可回复。可回复。v与医学关系与医学关系:仍有一定致病性，常引起慢性感染及反复发作的感染。常仍有一定致病性，常引起慢性感染及反复发作的感染。常发生在使用作用细胞壁的抗菌素治疗过程中，临床上遇有症状明显而常发生在使用作用细胞壁的抗菌素治疗过程中，临床上遇有症状明显而常规细菌培养阴性者规细菌培养阴性者,用抗生素治疗效果不佳。应考虑此菌感染。用抗生
13、素治疗效果不佳。应考虑此菌感染。(6)(6)细菌细胞壁缺陷型（细菌细菌细胞壁缺陷型（细菌L L型）型）临床分离葡萄球菌临床分离葡萄球菌L L型型葡萄球菌葡萄球菌L L型回复后型回复后细菌细菌L型型菌落类型菌落类型电镜照片电镜照片v细菌细胞膜的结构与真核细胞者基本相同，由细菌细胞膜的结构与真核细胞者基本相同，由磷脂和多种蛋白质组成，但不含胆固醇。磷脂和多种蛋白质组成，但不含胆固醇。v细菌细胞膜的功能与真核细胞者类似，主要有细菌细胞膜的功能与真核细胞者类似，主要有物质转运、生物合成、分泌、呼吸和形成中介物质转运、生物合成、分泌、呼吸和形成中介体等作用。体等作用。2.2.细胞膜细胞膜细胞膜细胞膜位于
14、细胞壁内紧包细胞质，结构与真核细胞基本相同。位于细胞壁内紧包细胞质，结构与真核细胞基本相同。功功能能细胞膜电镜照片细胞膜电镜照片分泌呼吸分泌呼吸载体蛋白载体蛋白脂质双层脂质双层细胞膜细胞膜模式结构图模式结构图物质转运物质转运生物合成生物合成 白喉杆菌白喉杆菌细胞膜与中介体细胞膜与中介体中介体中介体部分细胞膜折叠形成的向内陷入细胞质中的囊状物部分细胞膜折叠形成的向内陷入细胞质中的囊状物功功能能 类似真核细胞类似真核细胞线粒体，为细菌提线粒体，为细菌提供大量能量。供大量能量。v核糖体：细菌合成蛋白质的场所，游离存在于蛋白质中。核糖体：细菌合成蛋白质的场所，游离存在于蛋白质中。v质粒：染色体外的遗传
15、物质，存在于细胞质中。为闭合环质粒：染色体外的遗传物质，存在于细胞质中。为闭合环状的双链状的双链DNADNA，控制细菌某些特定的遗传特性。，控制细菌某些特定的遗传特性。v异染颗粒：细菌细胞质中含有多种颗粒，大多为贮藏的营异染颗粒：细菌细胞质中含有多种颗粒，大多为贮藏的营养物质。其中有一种主要成分是养物质。其中有一种主要成分是RNARNA和多偏磷酸盐的颗粒，和多偏磷酸盐的颗粒，其嗜碱性强，用亚甲蓝染色时着色较深呈紫色，称为异染其嗜碱性强，用亚甲蓝染色时着色较深呈紫色，称为异染颗粒。常见于白喉棒状杆菌，位于菌体两端，故又称极体，颗粒。常见于白喉棒状杆菌，位于菌体两端，故又称极体，有助于鉴定。有助于
16、鉴定。3.3.细胞质细胞质细胞质细胞质 细胞膜包裹的溶胶状物质细胞膜包裹的溶胶状物质 有水、蛋白质、脂类、核酸及少量糖和无机盐组成有水、蛋白质、脂类、核酸及少量糖和无机盐组成细胞质内含有许多重要结构细胞质内含有许多重要结构,常见有常见有核糖体核糖体质粒质粒胞质颗粒胞质颗粒与真核细胞不同，抗菌素作用部位与真核细胞不同，抗菌素作用部位染色体外遗传物质，与遗传变异有关染色体外遗传物质，与遗传变异有关异染颗粒等，可鉴别细菌异染颗粒等，可鉴别细菌异染颗粒异染颗粒质粒质粒细菌核蛋白体细菌核蛋白体电镜照片4.4.核质核质细菌是原核细胞，不具有成形的核。细菌是原核细胞，不具有成形的核。细菌的遗传物质称为核质或
17、拟核，无核膜、核细菌的遗传物质称为核质或拟核，无核膜、核仁和有丝分裂器。仁和有丝分裂器。功能与真核细胞的染色体相似。功能与真核细胞的染色体相似。核质由单一密闭环状核质由单一密闭环状DNADNA分子反复回旋卷曲盘绕分子反复回旋卷曲盘绕组成松散网状结构。组成松散网状结构。1.1.荚膜荚膜v概念：某些细菌在其细胞壁外包绕一层黏液性物质，概念：某些细菌在其细胞壁外包绕一层黏液性物质，为疏水性多糖或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后为疏水性多糖或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后并不影响细胞的生命活动。并不影响细胞的生命活动。v分类：分类：0.2m0.2m荚膜，荚膜，0.2m 0.2m 微荚膜微荚膜v形成条
18、件：营养丰富形成条件：营养丰富 v染色：不易着色，负染（墨汁）染色：不易着色，负染（墨汁）（二二）细菌细菌特殊结构特殊结构肺炎链球菌荚膜肺炎链球菌荚膜1.1.荚荚 膜膜化学组成：化学组成：功能：功能：产气荚膜杆菌产气荚膜杆菌肺炎链球菌肺炎链球菌多糖或多肽多糖或多肽抗吞噬作用抗吞噬作用粘附作用粘附作用抗干燥作用抗干燥作用抗有害物质损伤作用抗有害物质损伤作用肺肺炎炎链链球球菌菌v1)1)抗吞噬作用：荚膜具有抵抗宿主吞噬细胞的作用，抗吞噬作用：荚膜具有抵抗宿主吞噬细胞的作用，因而荚膜是病原菌的重要毒力因子。因而荚膜是病原菌的重要毒力因子。v2)2)粘附作用：荚膜多糖可使细菌彼此之间粘连，也可粘附作用
19、：荚膜多糖可使细菌彼此之间粘连，也可粘附于组织细胞或无生命物体表面，形成生物膜，是粘附于组织细胞或无生命物体表面，形成生物膜，是引起感染的重要因素引起感染的重要因素 (导管，医院内感染导管，医院内感染)。v3)3)抗干燥作用抗干燥作用v4)4)抗有害物质的损伤作用：荚膜处于细胞的最外层，抗有害物质的损伤作用：荚膜处于细胞的最外层，有保护菌体避免和减少受有害物质的损伤作用。有保护菌体避免和减少受有害物质的损伤作用。荚膜的功能荚膜的功能荚膜的临床意义荚膜的临床意义v与致病有关与致病有关v鉴定分类细菌鉴定分类细菌2.2.鞭毛鞭毛l概念：许多细菌在菌体上附有细长并呈波状弯曲的丝状物，概念：许多细菌在菌
20、体上附有细长并呈波状弯曲的丝状物，称为鞭毛，是细菌的运动器官。称为鞭毛，是细菌的运动器官。l观察：需用电子显微镜观察，或经特殊染色法使鞭毛增粗观察：需用电子显微镜观察，或经特殊染色法使鞭毛增粗后才能在光镜下看到后才能在光镜下看到l类型：类型：单毛菌单毛菌 双毛菌双毛菌 丛毛菌丛毛菌 周毛菌周毛菌2.2.鞭鞭 毛毛化学组成：化学组成：功能：功能：鞭毛蛋白鞭毛蛋白 运动器官运动器官临床意义临床意义 与致病有关与致病有关 鉴定分类细菌鉴定分类细菌鞭毛的鞭毛的功能功能v细菌的运动器官细菌的运动器官v有些细菌的鞭毛与致病性有关有些细菌的鞭毛与致病性有关 v根据鞭毛菌的动力和鞭毛的抗原性（根据鞭毛菌的动力
21、和鞭毛的抗原性（H H抗原），抗原），可用以鉴定细菌和进行细菌分类可用以鉴定细菌和进行细菌分类 v概念：概念：许多革兰阴性菌和少数革兰阳性菌菌体表面存许多革兰阴性菌和少数革兰阳性菌菌体表面存在着一种比鞭毛更细、更短而直硬的丝状物。在着一种比鞭毛更细、更短而直硬的丝状物。v菌毛蛋白具有免疫原性。菌毛蛋白具有免疫原性。v在普通光学显微镜下看不到，必须用电子显微镜观察。在普通光学显微镜下看不到，必须用电子显微镜观察。3.3.菌毛菌毛菌毛的菌毛的种类及特点种类及特点v普通菌毛：多，短而细普通菌毛：多，短而细 粘附，致病粘附，致病v性菌毛（性菌毛（F F菌毛）菌毛）:由由F F质粒编码，少、粗、长、质粒
22、编码，少、粗、长、中空；中空；遗传物质传递遗传物质传递v普通菌毛遍布菌细胞表面，每菌可达数百根。普通菌毛遍布菌细胞表面，每菌可达数百根。v这类菌毛是细菌的粘附结构，能与宿主细胞表面的特这类菌毛是细菌的粘附结构，能与宿主细胞表面的特异性受体结合，是细菌感染的第一步。因此，菌毛和异性受体结合，是细菌感染的第一步。因此，菌毛和细菌的致病性密切相关。细菌的致病性密切相关。v菌毛的受体常为糖蛋白或糖脂，与菌毛结合的特异性菌毛的受体常为糖蛋白或糖脂，与菌毛结合的特异性决定宿主的易感部位。决定宿主的易感部位。（1 1）普通菌毛）普通菌毛v仅见于少数革兰阴性菌。仅见于少数革兰阴性菌。v数量少，数量少，1-41
23、-4根。比普通菌毛长而粗，中空呈管状。根。比普通菌毛长而粗，中空呈管状。v性菌毛由致育因子（性菌毛由致育因子（F F）编码，故又称）编码，故又称F F菌毛。菌毛。v带有性菌毛的带有性菌毛的F F+菌与无性菌毛的菌与无性菌毛的F F-菌相遇时，性菌毛与菌相遇时，性菌毛与其相应受体结合，其相应受体结合，F F+菌内的质粒或菌内的质粒或DNADNA可通过性菌毛可通过性菌毛 进入进入F F-菌体内，此过程菌体内，此过程接合。接合。v是遗传物质转移的通道。是遗传物质转移的通道。（2 2）性菌毛）性菌毛3.3.菌菌 毛毛种类与功能：种类与功能：菌毛菌毛鞭毛鞭毛化学组成：化学组成：菌毛蛋白菌毛蛋白普通菌毛普
24、通菌毛与致病有关与致病有关性菌毛性菌毛与遗传变异有关与遗传变异有关v概念：某些细菌在一定的环境条件下，能在菌体内部形成概念：某些细菌在一定的环境条件下，能在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体。是细菌的休眠形式，无新陈代谢。一个圆形或卵圆形小体。是细菌的休眠形式，无新陈代谢。芽胞形成后细菌即失去繁殖能力。芽胞形成后细菌即失去繁殖能力。v产生芽胞的都是革兰阳性菌产生芽胞的都是革兰阳性菌:芽胞杆菌属、梭菌属芽胞杆菌属、梭菌属 v形成条件：营养缺乏形成条件：营养缺乏v保存生命必需物质：核酸、酶、合成菌体成分的结构。保存生命必需物质：核酸、酶、合成菌体成分的结构。v可发芽：可发芽：1 1个细菌个细菌1 1
25、个芽胞个芽胞1 1个细菌个细菌 细菌细菌繁殖体繁殖体 芽胞芽胞休眠体休眠体4.4.芽胞芽胞每种细菌形成一种类型每种细菌形成一种类型其其大小、形状、位置等随菌种而异，有鉴别意义。大小、形状、位置等随菌种而异，有鉴别意义。炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌肉毒梭菌肉毒梭菌破伤风梭菌破伤风梭菌芽胞的结构芽胞的结构芽胞的芽胞的功能及功能及临床意义临床意义v抵抗力强抵抗力强:耐干燥、热、辐射、化学消毒剂、耐干燥、热、辐射、化学消毒剂、100100数小数小时。是灭菌是否彻底的标准。杀灭芽胞最可靠的方法为时。是灭菌是否彻底的标准。杀灭芽胞最可靠的方法为高压蒸气灭菌法。高压蒸气灭菌法。v致病性致病性:不直接引起疾病，发
26、芽后形成繁殖体后致病不直接引起疾病，发芽后形成繁殖体后致病v鉴别意义鉴别意义:根据芽胞位置、大小等根据芽胞位置、大小等芽胞抵抗力强的原因芽胞抵抗力强的原因v(1)(1)芽胞含水量少，蛋白质受热后不易变性。芽胞含水量少，蛋白质受热后不易变性。v(2)(2)芽胞具有多层致密的厚膜，理化因素不易透入。芽胞具有多层致密的厚膜，理化因素不易透入。v(3)(3)含有的含有的DAPDAP与钙结合的盐能提高芽胞中各种酶的稳定性。与钙结合的盐能提高芽胞中各种酶的稳定性。v显微镜放大法显微镜放大法细菌形体微小，肉眼不能直接看到，细菌形体微小，肉眼不能直接看到，必须借助显微镜（普通光学显微镜、电子显微镜）放必须借助显微镜（普通光学显微镜、电子显微镜）放大后才能观察。大后才能观察。v染色法染色法细菌体小半透明，经染色后才能观察较清细菌体小半透明，经染色后才能观察较清楚。楚。三三.细菌形态与结构检查法细菌形态与结构检查法v革兰染色法：革兰染色法：结晶紫结晶紫 碘液碘液 95%乙醇乙醇 复红复红v抗酸染色：抗酸染色：石炭酸复红石炭酸复红 3%盐酸酒精盐酸酒精 美兰美兰v其它特殊染色其它特殊染色（一）染色法（一）染色法1min1min1min脱色5min脱色革兰阳性革兰阳性 革兰阴性革兰阴性 抗酸染色抗酸染色
