1、专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践专题十五现代生物科技专题专题十五现代生物科技专题目目 录录 真真题题聚聚焦焦拓拓展展核核心心考考点点整整合合【网络构建网络构建】1 1本专题通过果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作等生产实本专题通过果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作等生产实例和大肠杆菌的分离、纯化操作等过程，考查最基本的生例和大肠杆菌的分离、纯化操作等过程，考查最基本的生物学知识。将果酒、果醋、腐乳与泡菜的制作及特定微生物学知识。将果酒、果醋、腐乳与泡菜的制作及特定微生物的分离、纯化等实践操作构建成过程模型，可以加深对物的分离、纯化等实践操作构建成过程模型，可以加深对知识的记忆与理解。知识的记忆与理解
2、。2 2应让学生弄清楚植物组织培养的操作程序。让学生联应让学生弄清楚植物组织培养的操作程序。让学生联系生长素和细胞分裂素的作用，分析二者在植物组织培养系生长素和细胞分裂素的作用，分析二者在植物组织培养中的作用。中的作用。3 3植物有效成分的提取常与生产、生活实际相联系，或植物有效成分的提取常与生产、生活实际相联系，或与实验结合进行考查，难度不大。利用图解分析法理解特与实验结合进行考查，难度不大。利用图解分析法理解特定植物成分的提取。定植物成分的提取。【考情分析考情分析】20132013年年20142014年年20152015年年传统发传统发酵技术酵技术新课标全国卷新课标全国卷T39(非选择非选
3、择)、广、广东卷东卷T29(非选择非选择)、江苏卷江苏卷T13/T14/T17(选择选择)山东卷山东卷T35(非选择非选择)、海南卷海南卷T30(非选择非选择)广东卷广东卷T29(非非选择选择)、江苏、江苏卷卷T17(选择选择)微生物微生物的的培养和培养和利用利用新课标全国卷新课标全国卷T39(非选择非选择)、安、安徽卷徽卷T6(选择选择)、四、四川卷川卷T10(非选择非选择)、山东卷山东卷T34(非选择非选择)、广东卷广东卷T6(选择选择)、江苏卷江苏卷T18(选择选择)新课标全国卷新课标全国卷T39(非选择非选择)、新课标全国、新课标全国卷卷T39(非选择非选择)、安、安徽卷徽卷T29(非
4、选择非选择)、山、山东卷东卷T35(非选择非选择)、四、四川卷川卷T10(非选择非选择)、浙、浙江卷江卷T17(非选择非选择)、江、江苏卷苏卷T24(选择选择)江苏卷江苏卷T19(选选择择)、全国卷、全国卷T39(非选非选择择)、江苏卷、江苏卷T31(非选择非选择)植物组织植物组织培养培养江苏卷江苏卷T29(T29(非非选择选择)植物有效植物有效成分的提取成分的提取山东卷山东卷T34(T34(非选非选择择)、海南卷、海南卷T30(T30(非选择非选择)山东卷山东卷T35(T35(非非选择选择)、江苏卷、江苏卷T30(T30(非选择非选择)全国卷全国卷T39(T39(非选非选择择)1.微生物的利
5、用(1)微生物的分离和培养。(2)培养基对微生物的选择作用。(3)利用微生物进行发酵来生产特定的产物。2.生物技术在食品加工及其他方面的应用(1)从生物材料中提取某些特定的成分。(2)运用发酵加工食品的基本方法。(3)植物的组织培养。3.实验：DNA的粗提取与鉴定。专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 12015全国卷全国卷 下列叙述错误的是下列叙述错误的是()已知微生物已知微生物A可以产生油脂，微生物可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：(1)显微观察时，微生物显微观察时，微生
6、物A菌体中的油脂通常可用菌体中的油脂通常可用_染色。微生物染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用产生的油脂不易挥发，可选用_(填填“萃取法萃取法”或或“水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法”)从菌体中从菌体中提取。提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以_为碳源的固体培养基进行培养。为碳源的固体培养基进行培养。真真题题聚聚焦焦拓拓展展专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践(3)(3)若要测定培养液中微生物若要测定培养液中微生物B B的
7、菌体数，可在显微镜下用的菌体数，可在显微镜下用_直接计数；若要测定其活菌数量，可选用直接计数；若要测定其活菌数量，可选用_法进行计数。法进行计数。(4)(4)为了确定微生物为了确定微生物B B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在得相同时间内，在35 35、40 40、45 45 温度下降解温度下降解10 g10 g油脂所需酶量依次为油脂所需酶量依次为4 mg4 mg、1 mg1 mg、6 mg6 mg，则上述三个温度，则上述三个温度中，中，_条件下该酶活力最小。为了进一步确定该条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕酶的最适温度，应围
8、绕_设计后续实验。设计后续实验。真真题题聚聚焦焦拓拓展展专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 答案答案(1)(1)苏丹苏丹(或苏丹或苏丹)萃取法萃取法 (2)(2)油脂油脂 (3)(3)血细胞计数板稀释涂布平板血细胞计数板稀释涂布平板(4)45(4)454040解析解析(1)油脂可被苏丹油脂可被苏丹染液染成橘黄色，或被苏丹染液染成橘黄色，或被苏丹染染液染成红色。由于微生物液染成红色。由于微生物A产生的油脂不易挥发，故提取产生的油脂不易挥发，故提取时可选用萃取法，而不能用水蒸气蒸馏法。时可选用萃取法，而不能用水蒸气蒸馏法。(2)根据酶的专根据酶的专一性，为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物
9、一性，为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以油脂为碳源的固体培养基进行培养，不产生脂肪酶选用以油脂为碳源的固体培养基进行培养，不产生脂肪酶的微生物无法生存。的微生物无法生存。(3)测定培养液中微生物测定培养液中微生物B的菌体数，的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数；若要测定其活菌可在显微镜下用血细胞计数板直接计数；若要测定其活菌真真题题聚聚焦焦拓拓展展专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 数量，可选用稀释涂布平板法进行计数。数量，可选用稀释涂布平板法进行计数。(4)据
10、题可知，在据题可知，在35、40、45 温度下，温度下，45 时降解时降解10 g油脂所需酶油脂所需酶量最大，故该温度下酶活力最小。由于量最大，故该温度下酶活力最小。由于40 时酶活性相对时酶活性相对较大，因此，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕该较大，因此，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕该温度设计后续实验。温度设计后续实验。真真题题聚聚焦焦拓拓展展专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 22014海南卷海南卷 已知泡菜中亚硝酸盐含量与泡制时间有已知泡菜中亚硝酸盐含量与泡制时间有关。为了测定不同泡制天数泡菜中亚硝酸盐的含量，某同关。为了测定不同泡制天数泡菜中亚硝酸盐的含量，某同学设计
11、了一个实验，实验材料、试剂及用具包括：刻度移学设计了一个实验，实验材料、试剂及用具包括：刻度移液管、比色管、不同浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐液管、比色管、不同浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐的显色剂、不同泡制天数的泡菜滤液等。的显色剂、不同泡制天数的泡菜滤液等。回答相关问题：回答相关问题：(1)请完善下列实验步骤。请完善下列实验步骤。标准管的制备：用标准管的制备：用_和显色剂制和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管。成颜色深浅不同的系列标准管。样品管的制备：用刻度移液管分别吸取一定量的样品管的制备：用刻度移液管分别吸取一定量的_，加到不同的比色管中，然后在，加到不同的比色管中，然后在各个比色
12、管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管。各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管。真真题题聚聚焦焦拓拓展展将每个将每个_分别与系列标准管进行比较，找出与样分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅品管颜色深浅_的标准管，该管中亚硝酸钠含量即的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含代表样品管中亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量。量。(2)(2)图图T141T141表示的是泡菜中表示的是泡菜中_趋势。趋势。(3)(3)泡菜制作过程中产酸的细菌主要是泡菜制作过程中产酸的细菌主要是_(_(填填“醋酸醋酸杆菌杆菌”或或“乳酸菌乳酸菌”)”)。专
13、题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 真真题题聚聚焦焦拓拓展展图图T141真真题题聚聚焦焦拓拓展展 答案答案(1)亚硝酸钠标准溶液亚硝酸钠标准溶液 不同泡制天数的泡菜不同泡制天数的泡菜滤液滤液样品管最相近样品管最相近(其他合理答案也可其他合理答案也可)(2)亚硝酸盐含量随泡制时间的变化亚硝酸盐含量随泡制时间的变化(其他合理答案也可其他合理答案也可)(3)乳酸菌乳酸菌解析解析(1)在亚硝酸盐的含量测定中，可利用亚硝酸盐与显在亚硝酸盐的含量测定中，可利用亚硝酸盐与显色剂发生颜色反应，根据颜色的深浅可确定亚硝酸盐含量色剂发生颜色反应，根据颜色的深浅可确定亚硝酸盐含量的多少。用不同浓度的亚硝酸钠标准
14、溶液与显色剂可制成的多少。用不同浓度的亚硝酸钠标准溶液与显色剂可制成颜色深浅不同的系列标准管，不同颜色深浅对应的亚硝酸颜色深浅不同的系列标准管，不同颜色深浅对应的亚硝酸钠浓度是已知的；用不同泡制天数的泡菜滤液与显色剂反钠浓度是已知的；用不同泡制天数的泡菜滤液与显色剂反应，制备一系列的样品管，将样品管的颜色与标准管进行应，制备一系列的样品管，将样品管的颜色与标准管进行颜色比对，找到与样品管颜色深浅最接近的标准管，所对颜色比对，找到与样品管颜色深浅最接近的标准管，所对应的亚硝酸钠浓度即可代表样品管中的亚硝酸盐含量。应的亚硝酸钠浓度即可代表样品管中的亚硝酸盐含量。专题十四生物技术实践专题十四生物技术
15、实践 真真题题聚聚焦焦拓拓展展(2)图示曲线横轴为时间，纵轴为亚硝酸盐含量，则该曲线图示曲线横轴为时间，纵轴为亚硝酸盐含量，则该曲线表示泡菜中亚硝酸盐含量随发酵时间的变化趋势。表示泡菜中亚硝酸盐含量随发酵时间的变化趋势。(3)泡菜制作的原理是乳酸发酵，产酸的细菌主要是乳酸菌。泡菜制作的原理是乳酸发酵，产酸的细菌主要是乳酸菌。专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 真真题题聚聚焦焦拓拓展展专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 32014新课标全国卷新课标全国卷 植物秸秆中的纤维素可被某些植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：微生物分解。回答下列问题：(1)(1)分解秸秆中纤维
16、素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由由3 3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将_分解成分解成_。(2)(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)(CR)时，时，CRCR可与纤可与纤维素形成维素形成_色复合物。用含有色复合物。用含有CRCR的该种培养基培养的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的_。真真题题聚聚焦焦拓拓展展真真题题聚聚焦焦拓拓展展(3)(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的
17、单为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表成分见下表)：注：注：“”表示有，表示有，“”表示无。表示无。据表判断，培养基甲据表判断，培养基甲_(_(填填“能能”或或“不能不能”)”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_；培养基乙培养基乙_(_(填填“能能”或或“不能不能”)”)用于分离和鉴别用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是纤维素分解菌，原因是_。专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 酵母酵母膏膏无机盐无机盐淀粉淀粉纤维素纤维素粉粉琼脂琼脂CRCR溶液溶液水水培养基培养基
18、甲甲培养基培养基乙乙真真题题聚聚焦焦拓拓展展 答案答案(1)纤维二糖葡萄糖纤维二糖葡萄糖(2)红透明圈红透明圈(3)不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素，不会形成中没有纤维素，不会形成CR纤维素红色复合物，即使纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌 解析解析 (1)(1)纤维素酶是一种复合酶，该酶是由纤维素酶是一种复合酶，该酶是由C C1 1酶、酶、C CX酶酶和葡萄糖苷酶和葡萄糖苷酶3 3种组分组成，前两种酶可将纤维素分解为种组分组成，前两种酶可将纤维素分解为纤维二糖，葡萄糖苷
19、酶可将纤维二糖分解为葡萄糖。纤维二糖，葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解为葡萄糖。(2)(2)刚果红可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维刚果红可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物便无法形成，出现以纤维素分解素酶分解后，红色复合物便无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。我们可以通过是否产生透明圈来筛选菌为中心的透明圈。我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。纤维素分解菌。专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践真真题题聚聚焦焦拓拓展展(3)(3)生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用，只有生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用，只有在纤维素含量丰富的环境中纤
20、维素分解菌才会发挥作用。在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌才会发挥作用。纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基。纤维素分解菌纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基。纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基，要分离和鉴别纤维素分解菌，鉴别培养基属于固体培养基，要分离和鉴别纤维素分解菌，都需要以纤维素为主要碳源的培养基，培养基乙不具有选都需要以纤维素为主要碳源的培养基，培养基乙不具有选择的作用。择的作用。专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践真真题题聚聚焦焦拓拓展展【备考指津备考指津】1本专题在高考中主要考查的内容有传统发酵技术、微生物的培养与应用以及生物技术在其他方面的应用。2本专题的题目往往以微生
21、物的培养与应用为核心，综合传统发酵技术和其他方面的应用进行考查。3备考时要将各种生物技术进行对比理解并牢记，要用生物学术语进行答题。专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践真真题题聚聚焦焦拓拓展展考点一果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比较考点一果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比较考例探究考例探究果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比较果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比较 专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 项目项目内容内容果酒和果果酒和果醋的制作醋的制作腐乳的制作腐乳的制作制作泡菜并测定制作泡菜并测定亚硝酸盐含量亚硝酸盐含量作用作用菌种菌种果酒：酵母菌果酒：酵母菌果醋：醋酸菌果醋：醋酸菌以毛霉为主以毛霉为主
22、乳酸菌乳酸菌原理原理酵母菌在无酵母菌在无氧条件下将葡萄氧条件下将葡萄糖氧化成乙醇糖氧化成乙醇醋酸菌在有醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧条件下将乙醇氧化为醋酸氧化为醋酸毛霉等微生毛霉等微生物产生的蛋白物产生的蛋白酶和脂肪酶分酶和脂肪酶分别将蛋白质、别将蛋白质、脂肪分解成小脂肪分解成小分子有机物分子有机物制作泡菜：乳酸菌将制作泡菜：乳酸菌将糖转化为乳酸和醇类糖转化为乳酸和醇类测定亚硝酸盐含量：测定亚硝酸盐含量：在盐酸酸化条件下，亚硝在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与重氮化反应后，与N1萘萘基乙二胺盐酸盐结合形成基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料玫瑰红色染料
23、核核心心考考点点整整合合 专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 原料选择原料选择新鲜葡萄新鲜葡萄(或苹或苹果果)豆腐豆腐大白菜、花椰菜等大白菜、花椰菜等新鲜干净的蔬菜新鲜干净的蔬菜实验流程实验流程挑选葡萄挑选葡萄 冲洗冲洗 榨汁榨汁 酒精酒精 醋酸醋酸 发酵发酵 发酵发酵 果酒果酒 果醋果醋 让豆腐上长出让豆腐上长出毛霉毛霉加盐腌制加盐腌制加卤汤装瓶加卤汤装瓶密封腌制密封腌制 制作泡菜：制作泡菜：选材选材 配制盐水配制盐水 加入加入调味料，装坛调味料，装坛发酵发酵成品成品测定亚硝酸盐含测定亚硝酸盐含量：配制溶液量：配制溶液制备制备标准显色液标准显色液制备样制备样品处理液品处理液比色比色核核
24、心心考考点点整整合合 专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 操作注操作注意事项意事项材料的选择材料的选择与处理与处理防止发酵液防止发酵液被污染，控制好被污染，控制好发酵条件发酵条件材料用量材料用量防止杂菌污防止杂菌污染染控制温度及控制温度及酒精含量酒精含量泡菜坛的选择泡菜坛的选择腌制条件腌制条件(无氧无氧)测定亚硝酸盐含测定亚硝酸盐含量的操作量的操作共同点共同点都是天然的发酵过程，利用了微生物新陈代谢过程中代都是天然的发酵过程，利用了微生物新陈代谢过程中代谢产物的作用或直接获取代谢产物谢产物的作用或直接获取代谢产物核核心心考考点点整整合合核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四
25、生物技术实践 例例1 某同学利用图某同学利用图1所示装置制作苹果酒和苹果醋，请分所示装置制作苹果酒和苹果醋，请分析回答有关问题：析回答有关问题：图图T142(1)(1)(2)(2)核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 (1)可分别利用酵母菌和可分别利用酵母菌和_菌制作果酒和果醋，这菌制作果酒和果醋，这两种微生物的区别是后者为两种微生物的区别是后者为_(填填“厌氧厌氧”“好氧好氧”或或“兼性厌氧兼性厌氧”)微生物。微生物。(2)加入苹果汁时，瓶内要留出大约加入苹果汁时，瓶内要留出大约1/3的空间，目的是的空间，目的是_。(3)酵母菌利用苹果汁进行酒精发酵的反应式为酵母
26、菌利用苹果汁进行酒精发酵的反应式为_，密封充气口后可用，密封充气口后可用_检检测是否有酒精生成。测是否有酒精生成。(4)要利用苹果酒继续发酵生产苹果醋，接种发酵所用菌要利用苹果酒继续发酵生产苹果醋，接种发酵所用菌种后，需要将发酵温度变为种后，需要将发酵温度变为_，并，并_。(5)图图(2)中能表示装置内液体发酵过程中中能表示装置内液体发酵过程中pH变化的曲线是变化的曲线是_。核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 答案答案(1)醋酸好氧醋酸好氧(2)有利于酵母菌进行繁殖，防止发酵旺盛时发酵液溢出有利于酵母菌进行繁殖，防止发酵旺盛时发酵液溢出(3)C6H12O62C2H
27、5OH2CO2(酸性酸性)重铬酸钾重铬酸钾(4)3035 适时通过充气口充气适时通过充气口充气(5)解析解析(1)制作果醋所用的微生物是醋酸菌。酵母菌是兼性制作果醋所用的微生物是醋酸菌。酵母菌是兼性厌氧微生物，而醋酸菌是好氧微生物。厌氧微生物，而醋酸菌是好氧微生物。(2)加入苹果汁时，加入苹果汁时，瓶内要留出大约瓶内要留出大约1/3的空间，有利于酵母菌进行繁殖，同的空间，有利于酵母菌进行繁殖，同时防止发酵旺盛时发酵液溢出。时防止发酵旺盛时发酵液溢出。(3)在酸性条件下，重铬在酸性条件下，重铬酸钾可与酒精反应呈现灰绿色。酸钾可与酒精反应呈现灰绿色。(4)制作果酒时所需的制作果酒时所需的条件是厌氧
28、、条件是厌氧、1825，而制作果醋时所需的条件是有，而制作果醋时所需的条件是有核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 氧、氧、3035。(5)酵母菌进行酒精发酵时，产生的酵母菌进行酒精发酵时，产生的CO2使溶液使溶液pH略微下降，醋酸菌进行果醋发酵时，产生了大略微下降，醋酸菌进行果醋发酵时，产生了大量的醋酸，使溶液量的醋酸，使溶液pH快速下降，所以图快速下降，所以图(2)中符合条件的中符合条件的曲线是。曲线是。核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 对点训练对点训练酸菜，古称菹，酸菜，古称菹，周礼周礼中就有其大名。制作酸菜的初衷中就有其大名。
29、制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答：是为了延长蔬菜保存期限。请回答：(1)酸菜制作过程中，起主要作用的微生物是酸菜制作过程中，起主要作用的微生物是_。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是的表面长白膜的微生物是_。(2)实验室可采用实验室可采用_法进行法进行菌种纯化，在对该菌种进行培养时，与常规培养基相比，菌种纯化，在对该菌种进行培养时，与常规培养基相比，还需要额外在培养基中添加还需要额外在培养基中添加_。核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践(3)为了保持所获得的菌种纯净，
30、需要进行菌种的保藏。为了保持所获得的菌种纯净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，需将菌种接种在若采用临时保藏，需将菌种接种在_上，上，放入放入4 冰箱中可保藏冰箱中可保藏36个月；若要长期保存，可将菌个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的液与灭菌的_混匀，放在混匀，放在20 的冰箱中保存一的冰箱中保存一年。年。(4)在市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态在市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了下发生了“胀袋胀袋”现象，现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁
31、的观点并说出理由。支持并说出理由。支持_的观点，理由是的观点，理由是_。核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践答案答案(1)乳酸菌酵母菌乳酸菌酵母菌(或产膜酵母或产膜酵母)(2)平板划线法或稀释涂布平板维生素平板划线法或稀释涂布平板维生素(3)固体斜面培养基甘油固体斜面培养基甘油(4)A同学乳酸菌代谢过程中不产生气体同学乳酸菌代谢过程中不产生气体(或乳酸菌呼吸或乳酸菌呼吸作用不产生二氧化碳作用不产生二氧化碳)解析解析(1)酸菜制作过程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，酸菜制作过程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型，能发酵产生乳酸。在发酵初期，其代谢类
32、型是异养厌氧型，能发酵产生乳酸。在发酵初期，酵母菌酵母菌(或产膜酵母或产膜酵母)会导致泡菜水的表面长白膜。会导致泡菜水的表面长白膜。(2)在实在实验室纯化菌种常用平板划线法或稀释涂布平板法；维生素验室纯化菌种常用平板划线法或稀释涂布平板法；维生素是乳酸菌生长繁殖所必需的，在自身体内又不能合成，因是乳酸菌生长繁殖所必需的，在自身体内又不能合成，因此要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素。此要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素。核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践(3)进行菌种保藏时，若采用临时保藏，需将菌种接种在进行菌种保藏时，若采用临时保藏，需将菌种接种在固体斜面培养基上
33、，放入固体斜面培养基上，放入4 冰箱中可保藏冰箱中可保藏36个月；若个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的甘油混匀，放在要长期保存，可将菌液与灭菌的甘油混匀，放在20 的冰箱中保存一年。的冰箱中保存一年。(4)乳酸菌是厌氧型微生物，只能进乳酸菌是厌氧型微生物，只能进行无氧呼吸，且无氧呼吸的产物只有乳酸，不产生气体，行无氧呼吸，且无氧呼吸的产物只有乳酸，不产生气体，因此支持因此支持A同学的观点。同学的观点。核核心心考考点点整整合合考点二蛋白质和核酸考点二蛋白质和核酸考例探究考例探究考向考向1微生物培养的三大基本技术微生物培养的三大基本技术1无菌技术消毒和灭菌的区别 专题十四生物技术实践专题十四生物
34、技术实践 项目项目概念概念常用方法常用方法应用范围应用范围消毒消毒 使用较使用较为温和的物为温和的物理或化学方理或化学方法杀死物体法杀死物体表面或内部表面或内部的部分微生的部分微生物物(不包括不包括芽孢和孢子芽孢和孢子)煮沸消毒法：煮沸消毒法：100 煮煮沸沸56 min 一般物品一般物品巴氏消毒法：巴氏消毒法：7075 煮煮30 min或在或在80 煮煮15 min 一些不耐高一些不耐高温的液体，如温的液体，如牛奶牛奶 化学药剂消毒法化学药剂消毒法 如用酒精擦如用酒精擦拭双手拭双手紫外线消毒法：紫外线消毒法：30 W紫紫外灯照射外灯照射30 min 接种室接种室核核心心考考点点整整合合 专题
35、十四生物技术实践专题十四生物技术实践 项目项目概念概念常用方法常用方法应用范围应用范围灭菌灭菌 使用强使用强烈的理化因烈的理化因素杀死物体素杀死物体内外所有的内外所有的微生物微生物(包包括芽孢和孢括芽孢和孢子子)灼烧灭菌：通过酒精灯灼烧灭菌：通过酒精灯火焰灼烧火焰灼烧接种工具的接种工具的灭菌灭菌 干热灭菌：在干热灭菌：在160170 加热加热12 h玻璃器皿、玻璃器皿、金属工具的灭金属工具的灭菌菌高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌：121 条件下维持条件下维持1530 min培养基的灭培养基的灭菌菌核核心心考考点点整整合合2培养基的制备技术培养基的制备技术(1)培养基的种类培养基的种类 核核心心考考点
36、点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 划分标准划分标准培养基种类培养基种类特点特点应用应用物理性质物理性质液体培养基液体培养基 不加凝固剂不加凝固剂 工业生产工业生产半固体半固体培养基培养基 加凝固剂加凝固剂(如琼脂如琼脂)观察微生物的运观察微生物的运动、分类鉴定动、分类鉴定固体培养基固体培养基微生物的分离、微生物的分离、鉴定，活菌计数，鉴定，活菌计数，菌种保藏菌种保藏核核心心考考点点整整合合 专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 用途用途选择培养基选择培养基 培养基中加入某培养基中加入某种化学物质，以抑种化学物质，以抑制不需要的微生物制不需要的微生物的生长，促进所需的生长，
37、促进所需要的微生物的生长要的微生物的生长 培养、分离出培养、分离出特定微生物特定微生物(如以如以尿素为唯一氮源的尿素为唯一氮源的培养基用于分离能培养基用于分离能分解尿素的细菌分解尿素的细菌)鉴别培养基鉴别培养基 根据微生物的代根据微生物的代谢特点，在培养基谢特点，在培养基中加入某种指示剂中加入某种指示剂或化学药品或化学药品 鉴别不同种类鉴别不同种类的微生物的微生物(如可用如可用伊红伊红美蓝培养美蓝培养基鉴别饮用水或乳基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠制品中是否有大肠杆菌杆菌)核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践(2)培养基的制备培养基的制备过程：计算过程：计算称量称量
38、溶化溶化灭菌灭菌倒平板。倒平板。原则：原则：a目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等，选择目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等，选择原料配制培养基，如培养自养型的微生物就不用加入有原料配制培养基，如培养自养型的微生物就不用加入有机营养物质。机营养物质。b营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。cpH要适宜：各种微生物适宜生长的要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。范围不同。核核心心考考点点整整合合3微生物的纯化培养技术微生物的纯化培养技术平板划线法与稀释涂布平板平板划线法与稀释涂布平板法法 专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 方法方法
39、平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法注意注意事项事项 (1)接种环的灼烧接种环的灼烧第一次划线前：杀死接第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染种环上的微生物，避免污染培养物培养物之后每次划线前：杀死之后每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端种来自上次划线末端划线结束后：杀死残留划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染菌种，避免污染环境和感染操作者操作者 (1)稀释操作：每支试管及稀释操作：每支试管及其中的其中的9 mL水、移液管等均水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离酒精灯火焰移液管应在离酒
40、精灯火焰12 cm处处核核心心考考点点整整合合 专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 注意注意事项事项 (2)灼烧接种环之后，要灼烧接种环之后，要待接种环冷却后再进行取种，待接种环冷却后再进行取种，以免温度太高杀死菌种以免温度太高杀死菌种(3)划线时最后一区域不要划线时最后一区域不要与第一区域相连与第一区域相连(4)划线时用力大小要适当，划线时用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破防止用力过大将培养基划破 (2)涂布平板涂布平板涂布器用体积分数为涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器后将沾有
41、少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃在酒精灯火焰上引燃不要将过热的涂布器放不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精引燃其中的酒精目的目的 在固体培养基上形成由单个细菌繁殖而来的子细胞群在固体培养基上形成由单个细菌繁殖而来的子细胞群体体菌落菌落培养培养平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的水分更好地挥发，平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 例例2 微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要微生物的分离和培养是现代
42、生物工程应用中的重要环节。图甲和图乙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作环节。图甲和图乙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图和实验结果示意图，请据图T143回答有关问题：回答有关问题：图图T143核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践(1)(1)图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，该过程被称为图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，该过程被称为_。若用该培养基培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑。若用该培养基培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。和渗透压等条件。(2)(2)培养大肠杆菌时，在接种前需要
43、检测培养基是否被污染。对于固体培养培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是基应采用的检测方法是_。(3)(3)图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是AB_(AB_(用字母和箭头表示用字母和箭头表示)；找出图乙中两处错误的操；找出图乙中两处错误的操作：作：_、_(_(用字母表示用字母表示)。(4)(4)某同学将用平板划线法接种后的培养基培养某同学将用平板划线法接种后的培养基培养12 h12 h后，如果培养基上后，如果培养基上_，则说明无菌操作基本符合要求。，则说明无菌操作基本符合要求。核核心心考考
44、点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践答案答案(1)倒平板温度倒平板温度(氧气氧气)pH(无菌无菌)(2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生观察培养基上是否有菌落产生(3)GFECDHCD(4)生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点杆菌菌落的特点解析解析(1)图甲所示的实验操作为倒平板。若用该培养基培图甲所示的实验操作为倒平板。若用该培养基培养大肠杆菌，还要考虑温度、氧气、养大肠杆菌，还要考虑温度、氧气、pH和无菌操作等一和无菌操
45、作等一系列相关条件。系列相关条件。(2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染，因此要设置对照实验。对于固体培养培养基是否被污染，因此要设置对照实验。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生，若有，放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生，若有，核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践则说明培养基已被污染，应重新配制培养基进行实验。则说明培养基已被污染，应重新配制培养基进行实验。(3)图乙是平板划线法接种操作示意图
46、，正确的操作顺序是图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是ABGFECDH；图乙中两处错误的操作是；图乙中两处错误的操作是C未在酒精灯火焰旁进行操作，未在酒精灯火焰旁进行操作，D将第将第5区域内的划线与第区域内的划线与第1区域内的划线相连。区域内的划线相连。(4)将接种后的培养基培养将接种后的培养基培养12 h后，后，如果培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并如果培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明没有被杂菌污染，无菌符合大肠杆菌菌落的特点，则说明没有被杂菌污染，无菌操作基本符合要求。操作基本符合要求。核核心心考考点点整整合合考向考向2
47、微生物的分离与计数微生物的分离与计数1微生物的分离微生物的分离(1)筛选原则：人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时筛选原则：人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。抑制或阻止其他微生物的生长。(2)从土壤中分离尿素分解菌和纤维素分解菌的比较从土壤中分离尿素分解菌和纤维素分解菌的比较 专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 分解尿素的细菌分解尿素的细菌分解纤维素的微生物分解纤维素的微生物 选择培养基的成分：以尿素选择培养基的成分：以尿素作为唯一氮源作为唯一氮源鉴定方法：在培养基中加入鉴定方法：在培养基中加入酚红指示剂，若酚红指示剂，若pH升高，指示剂升高，指示剂变红
48、，则说明细菌能分解尿素变红，则说明细菌能分解尿素选择培养基的成分：以纤维选择培养基的成分：以纤维素作为唯一碳源素作为唯一碳源鉴定方法：刚果红染色法，鉴定方法：刚果红染色法，即刚果红与纤维素形成红色复合即刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，培养基物，当纤维素被分解后，培养基出现以纤维素分解菌为中心的透出现以纤维素分解菌为中心的透明圈明圈核核心心考考点点整整合合2统计菌落数目的方法统计菌落数目的方法(1)显微镜直接计数法显微镜直接计数法原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。下计算一定容积的样品
49、中微生物的数量。方法：用计数板计数。方法：用计数板计数。缺点：不能区分死菌与活菌缺点：不能区分死菌与活菌。专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 核核心心考考点点整整合合(2)间接计数法间接计数法(活菌计数法活菌计数法)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。计算公式：每克样品中的菌株数计算公式：每克样品中的菌株数(C/V)M，其中，其中，C代表某
50、一稀释度下平板上生长的平均菌落数，代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布代表涂布平板时所用的稀释液的体积平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。代表稀释倍数。操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在为了保证结果准确，一般选择菌落数在30300之间的平之间的平板进行计数。板进行计数。专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 核核心心考考点点整整合合专题十四生物技术实践专题十四生物技术实践 例例3 某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机
