1、勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.241勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2421.杂质和杂质的限量检查杂质和杂质的限量检查2.一般杂质及其检查方法一般杂质及其检查方法3.特殊杂质的检查方法特殊杂质的检查方法主要内容勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2431.杂质和杂质的限量检查杂质和杂质的限量检查一、药物的杂质和纯度的概念一、药物的杂质和纯度的概念二、药物中杂质的来源和种类二、药物中杂质的来源和种类三、杂质限量检查三、杂质限量检查勤勤奋奋
2、严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2441杂质杂质（Impurity，Related Substances，Product-Related Impurity）一、药物的杂质和纯度的概念一、药物的杂质和纯度的概念 药物中存在的药物中存在的无治疗作用无治疗作用、或、或影响影响药物的疗效和稳定性药物的疗效和稳定性、甚至、甚至对人体对人体健康有害健康有害的物质。的物质。勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2452纯度（纯度（Purity）药物的药物的纯净程度纯净程度。它是判定药品质量。它是判定药品质量优劣的一
3、个重要指标。对药物纯度优劣的一个重要指标。对药物纯度的要求是随着生产工艺的改进、变的要求是随着生产工艺的改进、变化以及分离分析技术的发展而不断化以及分离分析技术的发展而不断提高、完善的。提高、完善的。勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.246药物纯度、稳定性药物纯度、稳定性 新药质量研究的重要组成部分新药质量研究的重要组成部分可能引入杂质？可能引入杂质？影响药物变质的因素？影响药物变质的因素？分离，结构？分离，结构？变质的过程？变质的过程？毒性？毒性？分解的产物？分解的产物？控制的方法？控制的方法？选择适合的贮藏条件选择适合的贮藏条件3.药物杂
4、质（或纯度）与新药研究药物杂质（或纯度）与新药研究勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.247杂质杂质制剂制剂安全性安全性有效性有效性药理学、微生物药理学、微生物学、免疫学、生学、免疫学、生物化学等物化学等质量标准中检查项质量标准中检查项药物分析药剂学药剂学4.杂质检查和质量标准的关系杂质检查和质量标准的关系勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.248对于规定中的各种杂质检查项目，系指该药品在对于规定中的各种杂质检查项目，系指该药品在按按既定工艺进行生产既定工艺进行生产和和正常贮藏过程正常贮藏过程中
5、中可能含有可能含有或产生并需要控制的杂质或产生并需要控制的杂质（如残留溶剂、有关物（如残留溶剂、有关物质等）；质等）；改变生产工艺改变生产工艺时需另考虑增修订有关项时需另考虑增修订有关项目。目。中国药典凡例中国药典凡例药品质量标准中的杂质药品质量标准中的杂质不包括不包括变更生产工艺或变变更生产工艺或变更原辅料而产生的新的杂质，更原辅料而产生的新的杂质，也不包括也不包括参入或污参入或污染的外来物质染的外来物质勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2495药物纯度的评价药物纯度的评价药物性状药物性状理化常数理化常数含量测定等含量测定等主要主要指标指标
6、杂杂质质杂质名称杂质名称检查方法检查方法允许限量允许限量其它其它指标指标纯度评价纯度评价收载在“检查”项下勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2410二、药物中杂质的来源和分类二、药物中杂质的来源和分类1.杂质的主要来源杂质的主要来源 1）生产过程生产过程中引入中引入 原料药生产原料药生产（合成：未反应完的原料、反（合成：未反应完的原料、反应的中间体、副产物、残留溶剂；提取：药物应的中间体、副产物、残留溶剂；提取：药物结构、性质相近的物质、残留溶剂）结构、性质相近的物质、残留溶剂）制剂生产制剂生产*注意注意：生产设备也可能引入杂质：生产设备也可
7、能引入杂质 2）贮藏过程贮藏过程中引入：受外界条件影响（温中引入：受外界条件影响（温度、湿度、光线、空气、微生物）而发生水解、度、湿度、光线、空气、微生物）而发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解、发霉等变化发霉等变化勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24112.2.杂质的分类杂质的分类1）按杂质来源）按杂质来源：一般杂质和特殊杂质。：一般杂质和特殊杂质。一般杂质：指在多种药物的生产和贮藏一般杂质：指在多种药物的生产和贮藏 过程中容易引入的杂质。过程中容易引入的杂质。特殊杂质：指在特定药物
8、的生产和贮藏特殊杂质：指在特定药物的生产和贮藏 过程中引入的杂质。过程中引入的杂质。2）按杂质结构）按杂质结构：无机杂质和有机杂质。：无机杂质和有机杂质。3）按杂质性质）按杂质性质：信号杂质和有害杂质。：信号杂质和有害杂质。勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2412三、杂质的限量检查三、杂质的限量检查*1杂质限量的概念杂质限量的概念 在在不影响药物疗效不影响药物疗效和和不发生毒性不发生毒性的前的前提下，药物中所含提下，药物中所含杂质的最大允许量杂质的最大允许量，叫，叫做做杂质限量杂质限量。通常用百分之几（）或百。通常用百分之几（）或百万分之几
9、（万分之几（ppmppm）来表示。来表示。药物中杂质的检查，一般也不要求测药物中杂质的检查，一般也不要求测定其含量，而定其含量，而只检查只检查杂质的量杂质的量是否超出限是否超出限量量杂质杂质限量检查限量检查（Limit Test)Limit Test)勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24132.杂质限量制定杂质限量制定砷：不超过百万分之一砷：不超过百万分之一重金属：不超过百万分之五十重金属：不超过百万分之五十依据：依据：杂质性质杂质性质生产能达到水平生产能达到水平参照各国药典惯例参照各国药典惯例3.杂质限量的检查杂质限量的检查1）与杂质对照
10、品溶液进行对比）与杂质对照品溶液进行对比2）以检测条件下反应的灵敏度控制）以检测条件下反应的灵敏度控制勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24144杂质限量的计算杂质限量的计算 供试品量杂质的最大允许量杂质限量100）供试品量（）标准溶液体积（）标准溶液浓度（100SVC%100SVCL勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2415计算示例：*注意注意:单位要统一单位要统一教材P41-42示例一四勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24162 2
11、一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法氯化物检查法氯化物检查法硫酸盐检查法硫酸盐检查法铁盐检查法铁盐检查法重金属检查法重金属检查法砷盐检查法砷盐检查法酸碱度检查法酸碱度检查法溶液颜色检查法溶液颜色检查法易炭化物检查法易炭化物检查法澄清度检查法澄清度检查法炽灼残渣检查法炽灼残渣检查法干燥失重测定法干燥失重测定法残留溶剂测定法残留溶剂测定法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2417一、氯化物一、氯化物(Chloride)的检查的检查1 1原理原理*)(3白 AgClAgClHNO氯化物在氯化物在硝酸酸性硝酸酸性溶液中与溶液中与硝酸银硝酸银试液作试液
12、作用，生产用，生产氯化银白色浑浊液氯化银白色浑浊液，与，与一定量一定量标标准氯化钠溶液相同条件下生成的氯化银浑准氯化钠溶液相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，判断供试品中的氯化物是否超浊液比较，判断供试品中的氯化物是否超过了限量过了限量2.2.方法：讲义或方法：讲义或ChCh.P P勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24183 3条件控制条件控制*：1)1)标准液：标准液：NaClNaCl标准液标准液2)2)所加试剂试液作用或目的：稀硝酸所加试剂试液作用或目的：稀硝酸3)3)操作：观察前操作：观察前避光（暗处放置避光（暗处放置5 5minmin
13、）4)4)观察方法观察方法 5)5)取样原则：便于观察或测量结果取样原则：便于观察或测量结果(0.050.08mg/50ml)一、氯化物一、氯化物(Chloride)的检查的检查勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24194 4供试品处理供试品处理*目的：排除干扰目的：排除干扰方法：（方法：（1 1）供试品液混浊：过滤。）供试品液混浊：过滤。（2 2）供试品有色：内消色法或其它适）供试品有色：内消色法或其它适 当方法。当方法。（3 3）有机氯杂质：先破坏，再检查）有机氯杂质：先破坏，再检查 （注意与有机药物中的氯化物区别）（注意与有机药物中的氯
14、化物区别）一、氯化物一、氯化物(Chloride)的检查的检查勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2420示例：检查碘化钾中的氯化物时，供试品的处理为“取本品0.25g，加水100ml溶解后，加浓过氧化氢溶液与磷酸各1ml，煮沸至溶液无色，放冷，再加浓过氧化氢溶液0.5ml，煮沸”，其中，加浓加浓过氧化氢溶液和磷酸并煮沸的目的过氧化氢溶液和磷酸并煮沸的目的是A.加快反应速度B.避免可能存在的 、等离子对检查的干扰C.消除I-对检查的干扰D.煮沸以便加速供试品的溶解速度E.调节溶液的酸碱度23CO24SO勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutica
15、l Analysis-2010.923.9.2421二、硫酸盐二、硫酸盐(Sulfate)检查法检查法1.1.原理原理*)(4224白BaSOBaSOHCl硫酸盐在硫酸盐在盐酸酸性盐酸酸性溶液中与溶液中与氯化钡氯化钡试液作试液作用，生产用，生产硫酸钡白色浑浊液硫酸钡白色浑浊液，与，与一定量一定量标标准硫酸钾溶液相同条件下生成的浑浊比较，准硫酸钾溶液相同条件下生成的浑浊比较，判断供试品中的硫酸盐是否超过了限量判断供试品中的硫酸盐是否超过了限量2.2.方法：讲义或方法：讲义或ChCh.P P勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24223.3.条件控
16、制：条件控制：标准硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液、SOSO4 42-2-、酸度（酸度（pH1pH1）、）、稀盐酸的作用稀盐酸的作用。4 4供试品处理供试品处理目的：排除干扰目的：排除干扰方法：与氯化物类似方法：与氯化物类似二、硫酸盐二、硫酸盐(Sulfate)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2423三、铁盐三、铁盐(Iron)检查法检查法1 1原理原理)()(663红SCNFeSCNFeH硫氰酸盐法硫氰酸盐法*2.2.方法：讲义或方法：讲义或ChCh.P P铁盐在铁盐在盐酸酸性盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色溶液中与硫氰酸铵生成红色可
17、溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁可溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁溶液同法处理后所呈颜色比较，判断供试品溶液同法处理后所呈颜色比较，判断供试品铁盐是否超限铁盐是否超限勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24243.3.条件控制：条件控制：标准铁溶液：硫酸铁铵标准铁溶液：硫酸铁铵FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4)2 212H12H2 2O O加入试液作用：加入试液作用：盐酸：防止盐酸：防止FeFe3+3+水解水解过硫酸铵：氧化过硫酸铵：氧化 FeFe2+2+成成 FeFe3+3+防止硫氰酸铁还原或分解防止硫氰酸铁还原或分解过量硫氰
18、酸铵：增加生成配位离子稳定性过量硫氰酸铵：增加生成配位离子稳定性 提高反应灵敏度提高反应灵敏度 消除氯化物等的干扰消除氯化物等的干扰勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24254 4供试品处理供试品处理方法：方法：（1 1）FeFe2+2+:加过硫酸铵加过硫酸铵（2 2）色调不一致或颜色较浅色调不一致或颜色较浅:加正丁醇或异戊醇提加正丁醇或异戊醇提 取，分别取醇层比色。取，分别取醇层比色。（3 3）其它能与其它能与FeFe3+3+或或SCNSCN-反应的干扰成分反应的干扰成分勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-201
19、0.923.9.2426*四、重金属四、重金属(Heavy metals)检查法检查法重金属重金属系指在实验条件下能与系指在实验条件下能与S S2-2-(硫硫代乙酰胺代乙酰胺或或硫化钠硫化钠)作用显色的金属作用显色的金属杂质杂质，如，如AgAg、PbPb、HgHg、CuCu、CdCd、SnSn、SbSb、BiBi等，检查时等，检查时以铅作为代表以铅作为代表。Ch.P Ch.P 四种方法。四种方法。标准铅溶液：标准铅溶液：硝酸铅注意：配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅 勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2427第一法、硫代乙酰胺法 2.2.原理原
20、理 SHCONHCHOHCSNHCH223223 HPbSPbSH5.322pH1.1.适用范围适用范围在实验条件下，供试液在实验条件下，供试液澄清澄清、无色无色，对检查，对检查无干扰或经处理后对检查无干扰的药物。无干扰或经处理后对检查无干扰的药物。3.3.条件控制：条件控制：标准铅溶液、标准铅溶液、pH3.0pH3.03.53.5 *四、重金属四、重金属(Heavy metals)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24284.4.供试品处理供试品处理(1)(1)供试品有色：外消色法消除（加稀焦糖）。供试品有色：外消色法消除（加稀
21、焦糖）。(2)(2)供试品有微量供试品有微量FeFe3+3+，加加VcVc或盐酸羟胺使或盐酸羟胺使FeFe3+3+还原成还原成FeFe2+2+离子再检查离子再检查。(3)(3)供试品为铁盐，在相对密度供试品为铁盐，在相对密度1.1031.1031.1051.105的的 盐酸中使大部分盐酸中使大部分FeFe3+3+生成生成 再加氨试液再加氨试液 使溶液成碱性，用氰化钾掩蔽残留的微量铁使溶液成碱性，用氰化钾掩蔽残留的微量铁 盐后，加硫化钠试液检查铅盐盐后，加硫化钠试液检查铅盐(4)(4)供试品本身也能生成不溶性硫化物，根据具供试品本身也能生成不溶性硫化物，根据具 体情况特殊处理体情况特殊处理-26
22、HFeCl*四、重金属四、重金属(Heavy metals)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2429第二法、第二法、炽灼破坏法炽灼破坏法 2.2.原理原理 1.1.适用范围适用范围在水、乙醇中难溶，或能与重金属离子形在水、乙醇中难溶，或能与重金属离子形成配位化合物的有机药物。成配位化合物的有机药物。将供试品破坏后（如将供试品破坏后（如炽灼残渣项下遗留的炽灼残渣项下遗留的残渣）残渣），加硝酸加热处理，使有机物分解、，加硝酸加热处理，使有机物分解、破坏完全后，再按第一法进行检查破坏完全后，再按第一法进行检查*四、重金属四、重金属(H
23、eavy metals)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24303.注意事项1）炽灼温度：5006002）加入试剂的干扰：硝酸、盐酸3）特殊药物对容器的腐蚀*四、重金属四、重金属(Heavy metals)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2431第三法、第三法、硫化钠法硫化钠法 2.2.原理原理 1.1.适用范围适用范围难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液的药物难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液的药物在碱性介质中，以硫化钠为显色剂，使在碱性介质中，以硫化钠为显色剂，使PbP
24、b2+2+生成生成PbSPbS微粒的混悬液，与一定量的标微粒的混悬液，与一定量的标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较进行准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较进行检查检查3.3.注意事项注意事项硫化钠试液应临用新制硫化钠试液应临用新制*四、重金属四、重金属(Heavy metals)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2432第四法、第四法、微孔滤膜法微孔滤膜法 使重金属生成的硫化物富集于微孔滤使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上，比较供试品和一定量的标准铅膜上，比较供试品和一定量的标准铅溶液经同法处理后所产生的溶液经同法处理后所产生的色斑
25、色斑深浅，深浅，确定重金属是否超限。确定重金属是否超限。1.1.适用范围适用范围适用于2 5 g重金属杂质检查，提高灵敏度。2.2.原理原理 *四、重金属四、重金属(Heavy metals)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24333.3.注意事项注意事项供试溶液有颜色或浑浊，应用滤膜供试溶液有颜色或浑浊，应用滤膜进行预滤进行预滤 ；滤膜污染，；滤膜污染，换滤膜换滤膜 A A：滤器上盖部分：滤器上盖部分B B：连接头；：连接头；C C：垫圈：垫圈D D：孔径：孔径3.03.0mm的滤膜的滤膜E E：尼龙垫网：尼龙垫网(孔径不限孔
26、径不限)F F：滤器下部：滤器下部*四、重金属四、重金属(Heavy metals)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2434*五、砷盐五、砷盐(Arsenic)检查法检查法标准砷溶液：标准砷溶液：三氧化二砷方法：第一法方法：第一法(古蔡氏法古蔡氏法)第二法第二法(二乙基二硫代氨基甲酸银法二乙基二硫代氨基甲酸银法 Ag-DDC法)所加试剂的作用：所加试剂的作用：碘化钾、氯化亚锡、醋酸铅棉的作用碘化钾、氯化亚锡、醋酸铅棉的作用仪器装置仪器装置勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.243
27、5古蔡氏法Ag-DDC法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2436 1.古蔡氏法(Gutzeit)(1)原理 AsH Zn3 3HZn3As323 AsHO3H Zn3 9HZn3AsO322-33(As(HgBr)HBr 3 HgBr3AsH 323黄色）(As(HgBr)3 As(HgBr)2AsH 2 33棕色）HgAsHBr 3 As(HgBr)AsH3 2 33（棕黑色）*五、砷盐五、砷盐(Arsenic)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2437古蔡法古蔡法（Gutz
28、eit）：ABCDE醋酸铅棉花：吸收HsS砷斑 3,33AsHAsOHZnHgBr2AsH(HgBr)3+As(HgBr)2+As2Hg3橙黄色砷斑黄色棕色棕黑色加 IK 和 SnCl2目的：还原 As5+；抑制SbH3生成；形成锌锡齐，使氢气的生成连续均匀。Zn粒、HCl勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2438（3）供试品处理）供试品处理 供试品为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐供试品为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等，先加硝酸处理。等，先加硝酸处理。铁盐，先加酸性氯化亚锡还原为低铁离子铁盐，先加酸性氯化亚锡还原为低铁离子 干扰砷检查的有机药物
29、，先进行有机破坏干扰砷检查的有机药物，先进行有机破坏 含锑药物，可改用含锑药物，可改用Betterdorff法法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2439 2.白田道夫白田道夫法法（Bettendorff）：）：含锑药物如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠，用古蔡法检砷含锑药物如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠，用古蔡法检砷时，锑盐也可被还原为锑化氢，与溴化汞试纸灰色锑斑，干时，锑盐也可被还原为锑化氢，与溴化汞试纸灰色锑斑，干扰砷斑的检查。扰砷斑的检查。SbH3+HgBr2 SbH2(HgBr)+HBr原理：原理：SnCl2 在盐酸中能将砷盐还原成在盐酸中能将
30、砷盐还原成棕褐色棕褐色的胶态的胶态 砷，与一定量标准砷溶液按同法处理后进行砷，与一定量标准砷溶液按同法处理后进行 比较，即可判断供试品中含砷限量。比较，即可判断供试品中含砷限量。2As3+3SnCl2+6HCl 2As+3SnCl4+6H+(注意！不加注意！不加 Zn 粒和粒和 KI)勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24403.3.Ag-DDCAg-DDC（二乙基二硫代氨基甲酸银）二乙基二硫代氨基甲酸银）法法(1)(1)原理：是利用原理：是利用砷化氢砷化氢与与Ag-DDCAg-DDC吡啶吡啶溶液作用，使溶液作用，使Ag-DDCAg-DDC中
31、的银还原为红色中的银还原为红色胶态银，用胶态银，用目视比色法目视比色法或以或以Ag-DDCAg-DDC溶液溶液为空白，于为空白，于510510nmnm的波长处，测定吸收的波长处，测定吸收度，再与一定量标准砷溶液用同法处理度，再与一定量标准砷溶液用同法处理后得到的有色溶液进行比较。后得到的有色溶液进行比较。(2)(2)试剂的作用：同古蔡法。试剂的作用：同古蔡法。勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2441CNSSAgC2H5C2H5Ag-DDC法法：AsH3Ag-DDC吡啶Ag（红色胶态）ABC醋酸铅棉花Zn、HCl、KI、SnCl2Ag-DDC
32、吡啶溶液勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2442原理：原理：盐酸溶液中，次磷酸将砷化合物还原成盐酸溶液中，次磷酸将砷化合物还原成棕色棕色的游离砷，的游离砷，再与标准砷溶液按同法处理所显颜色比较得之。再与标准砷溶液按同法处理所显颜色比较得之。NaH2PO2+HCl H3PO2+NaCl3H3PO2+As2O3 3H3PO3+2As 本法适用于硫化物、亚硫酸盐以及含锑本法适用于硫化物、亚硫酸盐以及含锑药物等的砷盐检查，但灵敏度较差，为药物等的砷盐检查，但灵敏度较差，为10g As2O3/10ml。4.次磷酸法次磷酸法契列氏契列氏法法勤勤奋奋严严
33、谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2443六、溶液颜色检查法六、溶液颜色检查法目的：控制药物中有色杂质含量方法：中国药典（2005年版）第一法：第一法：目视比色法:标准比色液进行比较的方法第二法：第二法：分光光度法:规定波长处吸收度值第三法：第三法：色差计法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2444第一法：第一法：目视比色法黄绿色黄绿色黄色黄色橙黄色橙黄色橙红色橙红色棕红色棕红色比色用重比色用重铬酸钾液铬酸钾液比色用比色用硫酸铜液硫酸铜液比色用比色用氯化钴液氯化钴液水水勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceu
34、tical Analysis-2010.923.9.2445色差值标准液供试液水第三法：第三法：色差计法:原理：原理：勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2446七、澄清度（七、澄清度（Clarity）检查法检查法目的目的:检查药物中的微量不溶性杂质。检查药物中的微量不溶性杂质。方法方法:与浊度标准液比浊的进行检查与浊度标准液比浊的进行检查参见参见Ch.PCh.P勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2447检查方法检查方法(Ch.P)室温室温 供试品溶液供试品溶液 等量等量 分别置于配对的比浊用
35、玻璃管中分别置于配对的比浊用玻璃管中 浊度标准液浊度标准液 暗室内垂直同置于伞棚灯下暗室内垂直同置于伞棚灯下 照度照度1000 lx 水平方向观察、比较水平方向观察、比较 检查检查 勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2448浊度浊度标准液标准液硫酸肼硫酸肼 乌洛托品乌洛托品 水水*甲醛腙甲醛腙浊度标准液：贮备液、原液、比浊用液浊度标准液：贮备液、原液、比浊用液勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2449八、易炭化物检查法八、易炭化物检查法目的目的:检查药物中遇检查药物中遇硫酸易炭化硫酸易炭化或
36、或易氧化易氧化而呈色的微量而呈色的微量有机有机杂质。杂质。方法方法:与规定的对照液进行比色，与规定的对照液进行比色，参见参见Ch.PCh.P，讲义讲义对照液对照液溶液颜色检查项的对照液溶液颜色检查项的对照液比色用硫酸铜、重铬酸钾、氯比色用硫酸铜、重铬酸钾、氯化钴按规定方法配制的对照液化钴按规定方法配制的对照液KMnO4液液勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2450 如为固体，应先研成细粉。如为固体，应先研成细粉。如不溶，可加热。加热溶解后，如不溶，可加热。加热溶解后，放冷放冷 至室温至室温，再移置比色管中。，再移置比色管中。供试品预处理供试品
37、预处理：勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2451九、炽灼残渣（九、炽灼残渣（Residue on ignition）检查法检查法目的目的:控制有机药物和挥发性无机药物控制有机药物和挥发性无机药物中存在的中存在的非挥发性无机杂质非挥发性无机杂质。Residue on ignitionResidue on ignition :有机药物经炭化有机药物经炭化或或挥发性无机药物加热分解挥发性无机药物加热分解后后,高温炽灼高温炽灼,所产生的所产生的非挥发性无机杂质非挥发性无机杂质的硫酸盐的硫酸盐.方法方法:称重量法称重量法%100%供试品重空坩锅重残渣
38、及坩锅重炽灼残渣勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2452条件控制条件控制 取样量：根据限量 坩埚应先炽灼至恒重 700800炽灼至恒重（如需将残渣留作重金属检查，则炽灼温度必须控制在500600）含氟药品铂坩锅勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2453十、干燥失重（十、干燥失重（Loss on drying)检查法检查法目的目的:主要检查药物中的水分及其他挥发性的物质。方法方法:1.常压恒温干燥法 2.干燥剂干燥法 3.减压干燥法 4.热分析法概念概念:药品在规定条件下,经干燥后所减失的量
39、,以百分率表示.勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24541.常压恒温干燥法常压恒温干燥法 干燥温度干燥温度：105C（一般）一般）器皿：器皿：扁形称量瓶，样品厚度扁形称量瓶，样品厚度5mm，疏松物质，不超过疏松物质，不超过10mm；大颗粒结晶，研细，大颗粒结晶，研细，2mm。受热较稳定的药物适于受热易分解或挥发的药物适于受热易分解或挥发的药物干燥剂：干燥剂：无水氯化钙、无水氯化钙、硅胶、硫酸、五氧化二磷硅胶、硫酸、五氧化二磷2.干燥剂干燥法干燥剂干燥法十、干燥失重（十、干燥失重（Loss on drying)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Ph
40、armaceutical Analysis-2010.923.9.2455适于熔点低、受热不稳定、水分难赶除的药物适于熔点低、受热不稳定、水分难赶除的药物 减压干燥剂干燥减压干燥剂干燥 减压加热干燥减压加热干燥（常用干燥剂：（常用干燥剂：O2P5）例：布洛芬：例：布洛芬：m.p 74.5 77.5C 规定规定P2O5干燥器中减压干燥至恒重干燥器中减压干燥至恒重 肾上腺素：肾上腺素：P2O5干燥器中减压干燥干燥器中减压干燥 18 小时小时 地高辛：地高辛：105 C减压干燥减压干燥 1 小时小时恒温减压干燥恒温减压干燥 箱箱减压压力：减压压力：2.67 Kpa(20mmHg)以下以下一般情况下一
41、般情况下3.减压干燥法减压干燥法十、干燥失重（十、干燥失重（Loss on drying)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24564.热分析法（热分析法（thermal analysis system）（1 1）概念）概念热分析法是在热分析法是在程序控制温度程序控制温度下，精确记录待下，精确记录待测物质测物质理化性质与温度理化性质与温度的关系，研究其受热的关系，研究其受热过程所发生的晶型转变、熔融、升华、吸附过程所发生的晶型转变、熔融、升华、吸附等物理变化和脱水、热分解、氧化、还原等等物理变化和脱水、热分解、氧化、还原等化学变化
42、，用以对该物质进行化学变化，用以对该物质进行物理常数物理常数、熔熔点点和和沸点沸点的确定以及作为的确定以及作为鉴别鉴别和和纯度检查纯度检查的的方法。方法。十、干燥失重（十、干燥失重（Loss on drying)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2457（2 2）常用的热分析方法）常用的热分析方法1)Thermogravimetric Analysis，TGA2)Differential Thermal Analysis，DTA3)Differential Scanning Calorimetry，DSC十、干燥失重（十、干燥失重
43、（Loss on drying)检查法检查法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24581）热重法热重法（TGA）概念概念：TGA法是在法是在程序控制温度程序控制温度下，测量下，测量物质物质质量质量与温度关系与温度关系的热分析技术的热分析技术。热重曲线热重曲线：记录质量变化对温度（或时间）的关：记录质量变化对温度（或时间）的关 系曲线系曲线 勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2459ABCDWT或t起始温度终止温度平台热重曲线热重曲线勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysi
44、s-2010.923.9.2460206.65C88.11C223.17C359.89C103.32C85.56%176.47C85.45%-10123Deriv.Weight(%/C)020406080100120Weight(%)02004006008001000Temperature(C)Size:20.6020 mgMethod:mashihongTGAFile:C:TADataTGAMSHHuaYaq.zdsOperator:Ma ShihongRun Date:9-Sep-04 11:14Instrument:2950 TGA HR V5.4AUniversal V3.4C TA
45、Instruments勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24612）DTA法法概念概念:差热分析法是在程序控制温度下，测差热分析法是在程序控制温度下，测量待测物质（量待测物质（供试品）供试品）和参比物之间的和参比物之间的温温度差度差与与温度温度(或时间或时间)关系的热分析技术。关系的热分析技术。差热分析曲线差热分析曲线：记录样品与参比物的温度：记录样品与参比物的温度差差(T)T)变化对温度（或时间）的关系曲线变化对温度（或时间）的关系曲线 参比物参比物：应具有惰性，与待测物有相似：应具有惰性，与待测物有相似的热容的热容勤勤奋奋严严谨谨Phar
46、maceutical Analysis-2010.923.9.2462应用原理应用原理：待测物的：待测物的相变相变(包括熔融、升华包括熔融、升华和晶型转变等和晶型转变等)和和化学反应化学反应(包括脱水、分包括脱水、分解和氧化还原等解和氧化还原等)可产生可产生特征吸热和特征放特征吸热和特征放热峰热峰。复杂的化合物常具有比较复杂的差。复杂的化合物常具有比较复杂的差热分析曲线，各种吸热和放热峰的个数、热分析曲线，各种吸热和放热峰的个数、形状和位置与相应的温度可用来定性地鉴形状和位置与相应的温度可用来定性地鉴别待测物质或其多晶型；与其对照品或标别待测物质或其多晶型；与其对照品或标准品差热分析曲线之间的
47、差异，亦可检查准品差热分析曲线之间的差异，亦可检查待测物质的纯度。待测物质的纯度。勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24630+ABBCDDEFGTT or tDTA曲线峰宽峰宽勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2464DSC法是在程序控制温度下，测量维持样品与参法是在程序控制温度下，测量维持样品与参比物质的温度相同比物质的温度相同,系统所需输给待测物和参比系统所需输给待测物和参比物的物的能量差能量差随温度随温度(或时间或时间)变化变化3）DSC法法基本类型样品与参比物的样品与参比物的热流量
48、差热流量差（功率差（功率差(dQ/dt)）纵坐标纵坐标功率补停型功率补停型热流型热流型样品与参比物的样品与参比物的温度差温度差(T)成正比成正比温度温度T或时间或时间t横坐标横坐标DSC曲曲线线勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.24653）DSC法曲线法曲线勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2466(3)热分析法的应用 贵重药物的干燥失重测定贵重药物的干燥失重测定 空气中不稳定药物的测定空气中不稳定药物的测定 区分结晶水和吸附水区分结晶水和吸附水 测定结晶水含量测定结晶水含量1)TGA法法
49、药物的熔点测定药物的熔点测定 晶型鉴别晶型鉴别 纯度测定纯度测定 杂质限量杂质限量2)DTA和和DSC法法勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2467甲苯法Karl Fischer法十一、水分测定法十一、水分测定法(water content)勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2468十二、十二、(有机有机)残留溶剂测定法残留溶剂测定法(Resdual solvents)目的目的：主要检查药物在主要检查药物在生产过程中生产过程中引入的引入的有害的有害的有机溶剂有机溶剂。包括苯、氯仿、包括苯、氯
50、仿、1 1，4-4-二氧六环、二二氧六环、二氯甲烷、吡啶、甲苯、环氧乙烷等；氯甲烷、吡啶、甲苯、环氧乙烷等；如生产过程如生产过程中涉及中涉及其他需要检查的有害有机溶剂其他需要检查的有害有机溶剂，则应在各，则应在各品种项下另作规定。品种项下另作规定。勤勤奋奋严严谨谨Pharmaceutical Analysis-2010.923.9.2469方法方法：（GC法）法）固定相：固定相：GDX（二乙烯苯二乙烯苯乙基乙烯苯型高分子乙基乙烯苯型高分子 多孔小球）多孔小球）载气：氮气载气：氮气 检测器：检测器：FID 柱温：柱温：80170C色谱条件色谱条件 Chromatographic Conditio
