1、实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞 一、实验目的： 1、学会如何使用显微镜观察细胞； 2、了解细胞的结构； 3、学会制作临时装片。 二、实验材料：（实验材料可换）松针、动物血液、动物神经细胞永久装片三、实验 用具：载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜（物镜 5X、 10X、40X）四、方法步骤：1、制作松针的临时切片： （1）取干净的载玻 片一个平置于试验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。 （2）将土豆切成条状（截 面约：0.5X0.5cm)取两条，将一根松针夹在两个土豆条之间，用 刀片削成尽量 薄的薄片，削时，手腕不动，靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取 较薄的
2、切 片，置于载玻片的水滴上。 （3）从一侧轻轻盖上盖玻片，不要产生气泡。用吸水纸轻轻 吸去盖玻片周围的水滴，即完 成临时切片的制作。 2、观察切片： （1）取出显微镜， 置于试验台上靠左的位置，打开光源。 （2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上，调整载物台位置，使盖玻片对准光源。 （3）使用 5X 物镜观察切片，使松针切片在视野中心，换成 10X 物镜，观察松针叶面横切 结构。 （4）换成 40X 物镜观察，注意细胞及细胞内物质结构，画图。 3、 动物血液临时装片的制作及观察（除了不用切片，其他类似） 4、 动物神经细胞永久装片的观察。 五、考点提示： 1、松针的叶面结构是什么样的？
3、2、动物细胞的结构是什么样的？与植物细胞又什么不同？ 3、显微镜的物镜倍数愈大，视野的亮度如何？物体的大小如何？ 4、如何调节焦距？ 5、如何才能使切片尽量的薄？切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。 实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理颜色反应，识记和区 分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合 物的基本方法，学会描述实验现象，掌握 NaOH 溶液和 CuSO4 溶液的使用方法。 二、实验原理： 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1、
4、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的 分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非 还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶 性非还原糖。 - 1 - 可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的 Cu2O 沉淀。如： 葡萄糖 + 2Cu2+ 4OH加热葡萄糖酸 + Cu2O（砖红色）+ H2O 即 Cu 2+被还原成 Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色棕色砖红色沉淀 淀粉遇碘变蓝色（直链）或紫（红）色（支链）。
5、 2、脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不 溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或 与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染 色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹，苏丹，苏丹黑及油红 O 等。脂 肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂 质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理，适当提高温度（37 -60）对组织切
6、片染色效果是有好处的。 脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。 脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色或橙红色（或被苏丹染液染成红色），胆脂素呈淡 红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。 3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性 NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的 Cu2+作用，产生紫色反应。） - 2 - 三、实验材料： 1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因 为组织的颜色较浅，易于观察。）经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、 白色甘蓝叶、白萝卜。 2、做脂肪的鉴定实验。应选富
7、含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡 34 小时（也可用蓖麻种子）。 3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 4、淀粉的鉴定：马铃薯匀浆。 四、实验用具：双面刀片、试管（最好用刻度试管）、试管夹、试管架、大小烧杯、小量 筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜 五、实验试剂： 1斐林试剂（包括甲液：质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和乙液：质量浓度为 0.05g/ mL CuSO4 溶液） 2苏丹或苏丹染液 3双缩脲试剂（包括 A 液：质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和 B 液：质量浓度为 0.01g/ mL
8、 CuSO4溶液） 4体积分数为 50%的酒精溶液 5碘液 6蒸馏水 六、方法步骤： 一、可溶性糖的鉴定 操 作 方 法注 意 问 题解 释 1. 制备组织样液。苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高， （去皮、切块、研磨、过滤）组织液很易被氧化成褐色， 将产生的颜色掩盖。 2. 取 1 支试管，向试管内注 入 2mL 组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的应将组成斐林试剂的甲液、乙液斐林试剂很不稳定，甲、乙 斐林试剂，振荡。分别配制、储存，使用前才将甲、 液混合保存时，生成的 Cu 乙液等量混匀成斐林试剂； - 3 - ( OH )2在 70 900C 下分解 切勿将甲液、
9、乙液分别加入苹果成黑色 CuO 和水； 组织样液中进行检测。甲、乙液分别加入时可能会 与组织样液发生反应，无 Cu OH 生成。 4. 试管放在盛有 50-650C 温最好用试管夹夹住试管上部，使防止试管内的溶液冲出试 水的大烧杯中，加热约 2 分试管底部不触及烧杯底部，试管管，造成烫伤； 钟，观察到溶液颜色：浅蓝口不朝向实验者。 色 棕色 砖红色（沉也可用酒精灯对试管直接加热。 淀）缩短实验时间。 二、脂肪的鉴定 操 作 方 法注 意 问 题解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子干种子要浸泡 34 小因为浸泡时间短，不易切片； 叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴时，新花生的浸泡时浸泡时间过长，组
10、织较软，切 中，用吸水纸吸去装片中的水。间可缩短。片不易成形。切片要尽可能薄 些，便于观察。 在子叶薄片上滴23滴苏丹或苏染色时间不宜过长。 丹染液，染色 1 分钟。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用酒精用于洗去浮色，不洗去浮 50%酒精洗去浮色，吸去酒精。色，会影响对橘黄色脂肪滴的 观察。同时，酒精是脂溶性溶 剂，可将花生细胞中的脂肪颗 粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上滴上清水可防止盖盖玻片时产 12 滴蒸馏水，盖上盖玻片。生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最装片不宜久放。时间一长，油滴会溶解在乙醇 薄处，可看到细胞中有染成橘黄色中。 或红色圆形小颗粒。 三、蛋白质的鉴定 操 作
11、 方 法注 意 问 题解 释 制备组织样液。黄豆浸泡 1 至 2 天，容易研 （浸泡、去皮研磨、过滤。）磨成浆，也可购新鲜豆浆以 节约实验时间。 鉴定。加样液约 2ml 于试管A 液和 B 液也要分开配制，先加 NaOH 溶液，为 Cu2+与 蛋 中，加入双缩脲试剂 A，摇匀； 储存。鉴定时先加 A 液后加 B白质反应提供一个碱性的环 再加入双缩脲试剂 B 液 34液。境。A、B 液混装或同时加入， 滴，摇匀，溶液变紫色。会导致 Cu2+变成 Cu ( OH ) CuSO4溶液不能多加。淀，而失效。 2沉 否则 CuSO4的蓝色会遮盖反 应的真实颜色。 可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释
12、不够，在实验中蛋 清粘在试管壁，与双缩脲试 剂反应后会粘固在试管内壁 - 4 - 上，使反应不容易彻底，并 且试管也不易洗干净。 附：淀粉的检测和观察碘液不要滴太多以免影响颜色观察 用试管取 2ml 待测组织样液， 向试管内滴加 2 滴碘液，观察 颜色变化。 七、考点提示： 1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 答：葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、 蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 2、还原性糖植物组织取材条件？ 答：含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、 白色甘蓝叶、白萝卜等。 3、研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 答：加石英砂是为了使研磨更充 分。不加石英砂会
13、使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。 4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 答：混合后使用；产 生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。 5、还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为？ 答：浅蓝色 棕色 砖红色。 6、花生种子切片为何要薄？ 答：只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。 7、转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是 什么？ 答：切片的厚薄不均匀。 8、脂肪鉴定中乙醇作用？ 答：洗去浮色。 9、双缩脲试剂 A、B 两液是否混合后用？先加 A 液的目的怎样通过对比看颜色变化？ 答： 不能混合；先加 A
14、液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。 实验三：观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布 一、实验原理： 1、真核细胞的 DNA 主要分布在细胞核内，RNA 主要分布在细胞质中。 2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同，甲基绿对 DNA 亲和力强，使 DNA 显现出绿色，而吡罗红对 RNA 的亲和力强，使 RNA 呈现出红色。用甲基绿、吡罗红 的混合染色剂将细胞染色，可同时显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布。 3、盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输； 盐酸使染色体中的 DNA 与蛋白质分离，便于 DNA 与染色剂的结合 二
15、、实验材料：人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞 三、实验用具：大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、 石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜 四、方法步骤： 1、取材 滴：在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液； 刮：用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下； 涂：将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中； 烘：将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。 2、水解 解：将烘干的载玻片放入装有 30ml 质量分数为 8%的盐酸的小烧杯中，进行材料的水解； - 5 - 保：将小烧杯放入装有 30温水的大烧杯中保温 5 分钟。 3、冲洗涂片 冲：用缓缓的蒸馏
16、水冲洗载玻片 10 秒钟； 吸：用吸水纸吸去载玻片上的水分。 4、染色 染：用 2 滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色 5 分钟； 吸：吸去多余染色剂； 盖：盖上盖玻片。 5、观察 低：在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰； 高：转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。 五、考点提示： 1、取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质； 2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞； 3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗； 4、用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移
17、动，使载 玻片均匀受热，以免破裂； 5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却 1 分钟。 实验四：体验制备细胞膜的方法 一、实验原理：细胞膜的流动性和半透性 二、实验材料：猪（或牛、羊、人）的新鲜的红细胞稀释液（血液加适量的生理盐水） 三、实验用具：蒸馏水、试管、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜 四、方法步骤：1、用试管吸取少量红细胞稀释液，滴一小滴在载玻片上，盖上盖玻 片，制成临时装片 2、在高倍镜下观察，待观察清晰时，在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水， 同时在另一侧用吸水 纸小心吸引，注意不要把细胞吸跑。上述操作均在载物台上进行，并 持续观察细胞的变化。 可以看到近水的部分
18、红细胞发生变化；凹陷消失，细胞体积增大，很 快细胞破裂，内容物流 出。五、考点提示：1、选择动物细胞进行实验的原因：动物细 胞无细胞壁。 2、选择哺乳动物成熟红细胞进行实验的原因：人和其他哺乳动物成熟红细 胞无细胞核和众 多的细胞器（膜），可以得到较纯净的细胞膜。 3、细胞破裂后，用什么 方法获得较纯的细胞膜：将涨破的细胞溶液，经过离心分离得到细 胞膜。 4、如何获得植 物细胞膜：先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁水解得到原生质体；再将原 生质体放入清 水中，水自由扩散进入，原生质体涨破；最后经过离心分离得到植物细胞膜。 5、稀释及 稀释的时候用生理盐水的原因：稀释后，可以减少血液中的血浆蛋白等
19、杂物。用 生理盐水 是为了保持渗透压，防止在稀释的时候就发生细胞破裂。 实验五：用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 一、实验原理： - 6 - 1、叶肉细胞中的叶绿体，呈绿色、扁平的椭球形或球形，散布于细胞质中，可以在高倍显 微镜下观察它的形态。 2、线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中，健那绿染液能使活细胞中的线粒体呈现蓝绿 色。通过染色，可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、 线形、哑铃形等。 二、实验材料：新鲜的藓类的叶、人的口腔上皮细胞、新配制的质量分数为 1%的健那 绿染液（将 0.5g 健那绿溶解于 50mL 生理盐水中,加温到 30-40 摄氏度,使其充
20、分溶 解） 三、实验用具：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签 四、方法步骤： 1、观察叶绿体 低倍镜下找到叶片细胞低倍镜下找到叶片细胞高倍镜下观察。 2、观察线粒体 染色制片低倍镜下找到口腔上皮细胞高倍镜下观察。 五、考点提示： 1、观察叶绿体时选择藓类叶的原因：藓类属于低等植物，叶片是绿色的单层细胞，不需加 工即可进行观察。 2、临时装片中的材料要随时保持有水状态的原因：保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞 质基质中，否则，细胞失水收缩，将影响细胞器形态的观察。 实验六：植物细胞的吸水和失水 一、实验目的： 1、学会使用显微镜观察植物细胞质壁分离和复原。（与前面的知识：显微镜的使用联
21、系） 2、观察不同浓度的溶液对细胞吸水失水的影响，掌握此种方法的具体应用。 3、通过观察植物细胞的吸水和失水，明确渗透系统的组成以及具体应用。 二、实验原理： 1、成熟的植物细胞放到一定浓度的溶液中构成一个渗透系统。当细胞大量失水时原生质层 与细胞壁的伸缩程度不同，导致原生质层和细胞壁分离。 2、当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，根据扩散作用原理，水分会由细胞液中渗出到外界 溶液中，通过渗透作用失水；由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞壁伸缩性较小，而 原生质层性较大，从而使二者分开；反之，外界溶液浓度大于细胞液浓度，则细胞通过渗透 作用吸水，分离后的质和壁又复原。 三、实验材料：紫色特别深的
22、洋葱外表皮、质量浓度为 0.3g/ml 的蔗糖溶液、清 水 四、实验用具：显微镜、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、滴管、吸水纸 五、方法步骤：1、用刀片在洋葱鳞片叶的外表面划一个小方块，用镊子撕取这一小块 洋葱表皮，在洋葱的 外表皮上，用刀片划一些方块，用镊子轻轻撕取一小块（撕取的仅仅是 外表皮，不要撕得太 厚，仍然作为一个问题留给学生）。在取标本时，可以将洋葱的内表皮 朝外，外表皮朝里进 行对折，不要太用力，然后取其外表皮作为材料，将它平展地放在载 玻片中央的清水滴中， 并盖上盖玻片。 2、用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡 大小，以及原生质层的位置。 3、从盖玻片的一侧滴入 0.3g/m
23、l 的蔗糖溶液，在盖 玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几 次，洋葱表皮细胞就侵润在蔗糖溶液中。注意重复 3-4 次。 4、再用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小，以及原生质层的位 置。 - 7 - 5、从盖玻片的一侧滴入清水，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引，这样重复几次，洋葱表皮 细胞就侵润在清水中。 6、还用低倍镜观察洋葱表皮细胞中紫色的中央液泡大小，以及原生质层的位置。 六、实验结论： 当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，水分会由细胞液中渗出到外界溶液中，通过渗透作用失 水；由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞壁伸缩性较小，而原生质层性较大，从而使 二者分开；反之，当外界溶液浓度低于
24、细胞液浓度时，则细胞通过渗透作用吸水，分离后的 质和细胞壁又复原。 实验七：比较过氧化氢在不同条件下的分解 一、实验目的：通过比较过氧化氢在不同条件下分解的快慢，了解过氧 化氢酶的作用和意义 二、实验原理：新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶，根据酶的专一性，可知其可以催化过氧 化氢分解成水和氧。 三、实验材料： 质量分数为 20%的猪肝研磨液，新配制的体积分数为 3%的过氧化氢溶液，质量分数为 3.5% 的 FeCl3溶液 四、实验用具： 量筒，试管，滴管，试管夹，试管架，卫生香，火柴，酒精灯，大烧杯，石棉网，温度计 五、方法步骤： 1、取 4 支洁净试管，分别编号 1，2，3，4，向试管内分别加入
25、2ml 过氧化氢溶液。 2、将 2 号试管放在 90左右的水浴中加热，观察气泡情况，并与 1 号试管作比较。 3、向 3 号试管内滴入 2 滴 FeCl3溶液，向 4 号试管内滴入 2 滴肝脏研磨液，观察哪支试管产 生的气泡多。 4、2 至 3min 后，将点燃的卫生香分别放在 3、4 号试管内液面的上方，观察哪支试管中的 卫生香燃烧更猛烈。 六、实验结论： 1、加热能促进 H2O2的分解,提高反应速率； 2、酶有催化作用，与无机催化剂相比，酶具有高效性。 实验八：影响酶活性的条件 一、实验目的：1、初步学会探索影响酶活性条件的方法。 2、探索过氧化氢酶在不同温度和 PH 下催化过氧化氢水解的
26、 情况。 二、实验原理：淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。麦芽糖和葡萄糖遇碘后，不形成紫 蓝色的复合物，但能 与斐林试剂发生氧化还原反应，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。 三、实验材料： 质量分数为 2%的新配置的淀粉酶溶液，新鲜的质量分数为 20%的猪肝研磨液， 质量分数为 3%的可溶性淀粉溶液，新配制的体积分数为 3%的过氧化氢溶液， 质量分数为 5%的盐酸，质量分数为 5%的氢氧化钠溶液，蒸馏水，冰水，热水， 碘液，斐林试剂 - 8 - 四、实验用具：量筒，试管，滴管，试管夹，三脚架，火柴，酒精灯，小烧杯，大烧杯， 石棉网，温度计， 五、方法步骤：一、 温度对酶活性的影响 1、取三支洁净的试管，
27、编上号 1，2，3，并分别注入 2ml 可溶性淀粉液。 2、分别向 1，2，3 号三支试管中各注入 1ml 新鲜的淀粉酶溶液，摇匀，依次放入沸水， 37左右的热水，冰水中，维持各自的温度 5 分钟。 3、分别向 1，2，3 号三支试管中各滴入一滴碘液，然后摇匀。观察并记录这三只试管中， 溶液颜色的变化情况。 二、pH 对酶活性的影响 1、取三支洁净的试管，编上号 1，2，3，并分别注入 1ml 的新鲜的淀粉酶溶液。 2、依次向 1 号，2 号，3 号试管中注入蒸馏水，氢氧化钠溶液，稀盐酸各 1ml 并摇匀。 3、分别向 1 号，2 号，3 号试管中各注入 2ml 可溶性淀粉溶液，震荡摇匀。 4
28、、将三支试管的下半部浸到 37左右的温水中，保温 5 分钟。 5、向三支试管中各加入 2ml 斐林试剂，震荡 摇匀。六、实验现象： 一、温度对酶活性的影响 1 号试管中的液体未变蓝，2 号和 3 号试管中的液体变蓝，且 2 号试管蓝色比 3 号试管深。 二、pH 对酶活性的影响 2 号和 3 号试管中的液体未变蓝，1 号试管中的液体变蓝。 七、实验结论： 1、在最适宜的温度和最适宜的 ph 条件下，酶的活性最高。 2、温度和 ph 偏高或偏低，酶的活性明显下降。 实验九：叶绿体中色素的提取和分离 一、实验目的： 1、初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。 2、探索叶绿体中有几种色素。 二、实验
29、原理： 1、叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙 酮可提取叶绿体中色素。 2、色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶 解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。 三、实验材料： 新鲜的绿叶（如菠菜的绿叶），无水乙醇，层析液（由 20 份在 6090下分馏出来的石油 醚、2 份乙醇和 1 份苯混合而成。93 号汽油也可代用），二氧化硅和碳酸钙。 四、实验用具： 干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架，研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺， 量筒（10ml），天平。 五、方法步骤：
30、 （1）称取 5g 绿色叶片并剪碎 提取色素研钵研磨漏斗过滤 （2）加入少量 SiO2、CaCO3和 5ml 丙酮收集到试管内并塞紧管口 （1）将干燥的滤纸剪成 6cm 长，1cm 宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时 - 9 - 到达滤液细线） 制滤纸条 （2）在距剪角一端 1cm 处用铅笔画线 （1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线 滤液划线 （2）干燥后重复划 2-3 次 （1）向烧杯中倒入 3ml 层析液（以层析液不没及滤液细线为准） 纸上层析（2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中 （3）用培养皿盖盖上烧杯 观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不
31、同的彩带（如下图） 最宽：叶绿素 a； 最窄：叶绿素 b； 相邻色素带最近：叶绿素 a 和叶绿素 b； 相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。 六、考点提示： 1、二氧化硅：为了使研磨充分；碳酸钙：保护色素免受破坏；丙酮：色素的溶剂。 2、扩散最快的是胡萝卜素（橙黄色），扩散最慢的是叶绿素 b（黄绿色）。 3、滤纸上有四条色素带说明了绿叶中的色素有四种，它们在层析液中的溶解度不同，随层 析液在滤纸上扩散的快慢也不一样。 4、裁取定性滤纸时，注意双手尽量不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。 5、制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角,这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀,便于观 察实验结果。
32、 6、根据烧杯的高度制备滤纸条，让滤纸条长度高出烧杯 1cm ，高出的部分做直角弯折。 7、滤纸上的滤液细线如果触到层析液，细线上的色素就会溶解到层析液中，就不会在滤纸 上扩散开来，实验就会失败。 8、画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中 9、研磨要迅速、充分。a.因为丙酮容易挥发; b.为了使叶绿体完全破裂.从而能提取较多的色 素;c.叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。 实验十：细胞大小与物质运输的关系 一、实验目的：通过探究细胞大小，即细胞的表面积与体积之比（即细胞的相对表面 积），与物质运输效率 之间的关系，探讨细胞不能无限长大的原因 二、实验原理：NaOH 和酚酞相遇
33、，呈紫红色。 三、实验材料：3cm3cm6cm 的含酚酞的琼脂块，质量分数为 0.1%的 NaOH 溶 液。 四、实验用具：塑料餐刀，防护手套，毫米尺，塑料勺，纸巾，烧杯。 - 10 - 五、方法步骤： 1、用塑料餐刀将琼脂块切成三块边长分别为 3cm、2cm、1cm 的正方体 2、将三块琼脂块放在烧杯内，加入 NaOH 溶液，将琼脂块淹没，浸泡 10min。用塑料勺不 时翻动琼脂块。注意：不要用勺子将琼脂块切开或挖动其表面 3、戴上手套，用塑料勺将琼脂块从 NaOH 溶液中取出，用纸巾把它们擦干，用塑料刀把琼 脂块切成两半。观察切面，测量每一块上 NaOH 扩散的深度。纪录测量结果。注意：每
34、两次 操作之间必须把刀擦干 4、根据测量结果进行计算，并填写下表 琼脂块的边体积 表面积/cm2相对表面积 长/cm/cm3 比值（NaOH 扩 散的体 积/整个琼脂块的 体 积） NaOH 扩散的 深度 3 2 1 六、实验结论： 琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减小； NaOH 扩散的体积与整个琼脂块体 积之比随着琼脂块的增大而减小 七、考点提示： 1、你认为细胞生长到一定程度时,采取什么办法可保证细胞代谢需要呢？答：细胞生长到一 定程度,将停止生长,转而进行细胞的分裂,这就摆脱了细胞生长带来相对表面积减小带来的 困境,也是细胞增殖的原因之一。 2、除此以外,限制细胞长大的因素还
35、有？答：有核质比(细胞核与细胞质的体积比),外界的温 度和营养物质的供应等条件 3、细胞为什么要分裂?或细胞为什么这么小?答：(1)增大细胞膜表面积与体积比，有利于物 质的运输(营养吸收与废物排出)以保证细胞正常生命代谢需要。(2)保证适宜的核质关系，使 细胞质能在细胞核的控制范围内。 4、卵细胞是一种特殊的细胞，因为它含有许多供胚胎发育的营养物质卵黄，而使细胞 体积增大了许多倍。但卵细胞一般与外界交换物质少，故表面积与体积的比例特殊。 实验十一：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 一、实验目的： 1、制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。 2、观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞
36、周期不同时期的时 间长短。 3、绘制植物细胞有丝分裂简图。二、实验原理：1、高等植物的分生组织有丝分裂 较旺盛。 2、有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同，可用高倍显微镜根 据各个时期 内染色体的变化情况，识别该细胞处于那个时期。 3、细胞核内的染色体易 被碱性染料（如龙胆紫）染成深色。 - 11 - 三、实验材料：洋葱（可用葱.蒜代替），质量分数为 15%的盐酸，体积分数为 95%的酒精， 质量浓度为 0.01g/ml 或 0.02g/ml 的龙胆紫溶液（将龙胆紫溶解在质量分数 2%的醋酸溶 液中 配制而成）或醋酸洋红液，洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。四、实验用 具：显微镜，载玻
37、片，盖玻片，玻璃皿，剪子，镊子，滴管。 五、方法步骤： 1、洋葱根尖的培养在上实验课之前的 3-4 天，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水， 让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方培养。待根长约 5cm，取生长 健壮的根尖制成临时装片观察。 2、装片的制作 制作流程为：解离漂洗染色制片 过程方法时目的 间 上午 10 时至下午 2 时，剪去洋葱根尖 2-3mm， 3-5min用药液使组织中的细 胞 解离立即放入盛入有盐酸和酒精混合液（1：1）的相互分离开来 玻璃皿中，在温室下解离。 漂洗待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛入清水的约洗去药液，防止解离过度 玻璃皿中漂洗。10mi
38、n 染色把根尖放进盛有质量浓度为 0.01g/ml 或 0.02g/ml3-5min染料能使染色 体着色。 的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中染 色。 用镊子将这段根尖取出来，放在载玻片上，加使细胞分散开来，有利于 制片一滴清水，并用镊子尖把根尖能碎，盖上盖玻观察 片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇 指轻轻的按压载玻片。 3、观察 a 低倍镜观察：找到分生区细胞，其特点是细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂 b 高倍镜观察：在低倍镜观察的基础上换高倍镜，直到看清细胞的物象为止 c 仔细观察：先到中期，再找其余各期，注意染色体的特点 d 移动观察：慢慢移动装片，完整地观察各个时期（
39、如果自制装片效果不太理想，可以观察 洋葱根尖固定装片） 4、绘图 5、记录 六、实验结论： 前期：出现染色体核膜核仁消失纺锤丝出现 中期：着丝粒位于赤道面纺锤体明显 后期：染色体分裂成两组子染色体向相反两极运动 末期：纺锤体出现核膜核仁出现 实验十二：性状分离的模拟 一、实验目的： 1、理解等位基因在形成配子时发生分离、受精时雌、雄配子随机结合的过程。 2、认识和理解基因的分离和随机结合与生物性状之间的数量关系。 二、实验原理： - 12 - 进行有性生殖的生物，等位基因在减数分裂形成配子时会彼此分离，形成两种比例相等的配 子。受精作用时，比例相等的两种雌配子与比例相等的两种雄配子随机结合，机
40、会均等。随 机结合的结果是后代的基因型有三种；其比为 1：2：1，表现型有两种，其比为 3：1。由于 此实验直接用研究对象进行不可能，就用模型代替研究对象进行实验，模拟研究对象的实际 情况，获得对研究对象的认识（此实验方法称模拟实验）。3实验材料小塑料桶 2 个，2 种 色彩的小球各 20 个（球的大小要一致，质地要统一，手感要相同，并要有一定重量）。 三、实验用具：小桶 2 个，分别标记甲、乙；两种不同颜色的彩球各 20 个，一种彩球标 记 D，另一种彩球标记 d；记录用的笔和纸。 四、方法步骤： 1、分装、标记小球取甲、乙两个小桶，每个小桶内放有两种色彩的小球各 10 个，并在不同 色彩的
41、球上分别标有字母 D 和 d。甲桶上标记雌配子，乙桶上标记雄配子，甲桶中的 D 小 球与 d 小球，就分别代表含基因 D 和含基因 d 的雌配子；乙桶中的 D 小球与 d 小球，就分 别代表含基因 D 和含基因 d 的雄配子。 2、混合小球分别摇动甲、乙小桶，使桶内小球充分混合。 3、随机取球找三个学生：一个记录，两个分别从两个小桶内随机抓取一个小球，组合在一 起，记录下两个小球的字母组合，这表示雌配子与雄配子随机结合成合子的过程。 4、重复实验将抓取的小球放回原来的小桶，摇动小桶中的彩球，使小球充分混合后，再按 上述方法重复做 50100 次（重复次数越多，模拟效果越好）。记录时，可将三种基
42、因型写 好，以后每抓一次，在不同基因型后以“正”字形式记录（如下表）：基因型 次数 总计 百 分比 DD Dd dd 5、统计小球组合统计小球组合为 DD、Dd 和 dd 的数量分别是多少，并记录下来。（6）计算 小球组合计算小球组合为 DD、Dd 和 dd 之间的数量比值是多少，计算小球组合为 DD 和组 合为 dd 的数量比值是多少，并记录下来。（7）实验结论分析实验结果，在实验误差允 许的 范围内，得出合理的结论（可将全班每一小组结果综合统计，进行对比）。 五、考点提示： 1、选择小球大小要一致、质地要统一、抓摸时手感要相同，以避免人为误差。 2、选择盛放小球的容器最好采用小桶或圆柱形容
43、器，而不要采用方形容器，以便摇动小球 时能充分混匀。 3、桶内小球的数量必须相等，D、d 基因的小球必须 1：1，且每次抓出的两个小球必须统 计后各自放回各自的小桶，以保证机率的准确。 4、不要看着桶内的小球抓，要随机去摸，且顺便搅拌一下，以增大其随机性，用双手同时 去两个桶内各抓一个。 5、记录时，可先将 DD、Dd、dd 三种基因型按竖排先写好，然后每抓一次在不同基因型后 以“正”字形式记录。 6、每做完一次模拟实验，小球放回后要摇匀小球，然后再做下次模拟 实验十三：观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片 一、实验目的： 通过观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同阶段的染色体的形态、
44、位置和 数目，加深对减数分裂过程的理解。 二、实验用具： 蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，显微镜。 - 13 - 三、方法步骤： 1、在低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别初级精母细胞、次级精母细胞和 精细胞。 2、先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞， 再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。 3、根据观察结果，尽可能多地绘制减数分裂不同时期的细胞简图 实验十四：低温诱导植物染色体数目的变化 一、实验目的： 1、学习低温诱导植物染色体数目变化的方法 2、理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制 二、实验原理： 1、进行正常有丝分裂的植
45、物分生组织细胞，在有丝分裂后期，染色体的着丝点分裂，子染 色体在纺缍丝的作用下分别移向两极，最终被平均分配到两个子细胞中去。 2、用低温处理植物组织细胞，使纺缍体的形成受到抑制，以致影响染色体被拉向两极，细 胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。 三、实验材料： 洋葱或大葱、蒜、卡诺氏固定液，盐酸酒精解离液，质量浓度为 10mgmL 的龙胆紫溶液。 四、实验用具： 冰箱、显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、剪刀、镊子、吸水纸、滴管、小烧杯。 五、方法步骤： 1、把洋葱放在盛满水的广口瓶上，让它的底部接触瓶内的水面。待洋葱根长到 lcm 时，放 入冰箱内 4低温下培养，诱导培养
46、 36 小时 2、剪取根尖约 0.51cm，放人卡诺氏固定液中固定 30min，然后用体积分数 95酒精洗 两 次，用体积分数 70酒精保存于低温处，贴好标签。 3、取固定好的根尖，进行解离、漂洗、染色和制片 4 个步骤，具体操作方法与实验“观察 植物细胞的有丝分裂”相同。 4、先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相，再换上高倍镜并调节细准焦螺旋和反光镜， 使物像清晰，仔细观察，辨认哪些细胞发生染色体数目变化，找出处于细胞分裂中期的细 胞，进行染色体计数。 实验十五：生物体维持 PH 稳定的机制 一、目的要求： 通过比较自来水、缓冲液（如 Na2HPO4、NaH2PO4 等的溶液，在加入 酸或碱
47、后，能使 PH 的变化减弱）和生物材料在加入酸或碱后 PH 的变化，推测生物体是如何维持 PH 稳定的。二、实验原理： - 14 - 细胞代谢会产生许多酸性物质，如碳酸等，人和动物吃的食物消化吸收后经代谢会产生一些 酸性或碱性物质，这些酸性或碱性物质进入内环境，常使 PH 发生偏移。但一般情况下，机 体能通过缓冲物质使 PH 稳定在一定范围内。 三、实验材料：生物材料（肝匀浆、马铃薯匀浆、用水 5：1 稀释的鸡蛋清、黄瓜匀 浆）， PH=7 的磷酸缓冲液，0.1mol/LHCl（盛于滴瓶中）、0.1mol/L NaOH（盛于滴瓶中）。 四、实验用具：4 副防护手套、50ml 烧杯 1 个、50
48、ml 量筒 1 个，彩色铅 笔、PH 计或万 能 PH 试纸、镊子、自来水。五、方法步骤： 1、将 2.5ml 自来水倒入 50ml 烧杯中 2、用 PH 计成 PH 试纸测试起始 pH，并作记录 3、一次加一滴 0.1mol/L HCl，然后轻轻摇动，加入 5 滴后再测 PH，重复这一步骤直到 加 入了 30 滴为止。将 PH 测定结果记入表中。 4、充分冲烧杯，并向其中倒入 25ml 自来水。测定并记录起始 PH，再如步骤 3，一滴一滴 地加入 0.1mol/L 的 NaOH，测定并记录 PH。 5、充分冲洗烧杯，用缓冲液代替自来水，重复步骤 1 至步骤 4，记录结果 6、充分冲洗烧杯，选
49、两种生物材料分别代替自来水，重复步骤 1 至 4 记录结果。 六、实验结论: PH 加酸 10.5水加碱 7缓冲液或生物材料 缓冲液或生物材料 3.5水 051015202530加入酸碱滴数 自来水中加入酸碱物质后，PH 逐渐偏小或偏大，而缓冲液和生物材料中加入酸碱后 PH 几 乎不变或变化不大。 七、考点提示： 1、实验过程中，出现了很多次的“充分冲洗烧杯”请你分析目的是什么？答：第一次“充 分冲洗烧杯”是为了避免酸性物质 HCl 与碱性物质 NaOH 发生中和发应，使实 验现象不明 显，减少误差。第二次和第三次“充分冲洗烧杯”是为了防止不同的生物材料混 合，影响实 验效果。 2、实验过程中
50、腐蚀性物质使用注意事项及解决措施。答：HCl 和 NaOH 都有腐蚀性，应避 免它与皮肤和眼睛接触，也不要入口。若有洒落或溅出，要立即用水冲洗 15min。 实验十六：探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度 一、目的要求： 1、进一步学会探究性实验的一般方法和步骤，培养科学探究能力，提高创新思维能力。 - 15 - 2、学会用探究的实验方法来研究生长素类似物促进插条生根的最适浓度。 3、理解适宜浓度的生长素可以促进生根，体会科学理论在应用到生产实践的过程中，往往 也有许多要探索的问题。 二、实验原理： 适宜的浓度的 NAA 溶液促进迎春条插条生根，浓度过高或过低都不利于插条生根。 三、实验材料
