1、1/15章末综合测评章末综合测评(三三)(第第 3 章章)(时间：时间：90 分钟分钟满分：满分：100 分分)一、选择题一、选择题(14228 分，每小题只有一个选项符合题目要求分，每小题只有一个选项符合题目要求)1下列关于限制酶的说法，正确的是下列关于限制酶的说法，正确的是()A限制酶广泛存在于各种生物中，其化学本质是蛋白质限制酶广泛存在于各种生物中，其化学本质是蛋白质B一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C不同的限制酶切割不同的限制酶切割 DNA 后都会形成黏性末端后都会形成黏性末端D限制酶均特异性地识别含限制酶均特异性地识别含 6 个核苷酸的序列
2、个核苷酸的序列B限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的， A 错误错误； 限制酶具有专一限制酶具有专一性，即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，性，即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，B 正确；限制酶切割正确；限制酶切割 DNA后会形成黏性末端或平末端后会形成黏性末端或平末端， C 错误错误； 大多数限制酶的识别序列由大多数限制酶的识别序列由 6 个核苷酸组个核苷酸组成，也有少数限制酶的识别序列由成，也有少数限制酶的识别序列由 4、5 或或 8 个核苷酸组成，个核苷酸组成，D 错误。错误。2下下图是基因工程中基因表达载体的模式图图是基因工程中基因
3、表达载体的模式图，若结构若结构 X 是表达载体所必需是表达载体所必需的，则的，则 X 最可能是最可能是()A目的基因插入位点目的基因插入位点B启动子启动子C标记基因标记基因DDNA 聚合酶识别位点聚合酶识别位点B基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成。图中有基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成。图中有终止子、标记基因终止子、标记基因(抗生素抗性基因抗生素抗性基因)、目的基因、复制原点等，还缺少启动子、目的基因、复制原点等，还缺少启动子。启动子位于目的基因的首端，所以启动子位于目的基因的首端，所以 X 最可能是启动子。最可能是启动子。B 正确。正确。3下列关于基因表
4、达载体及其构建的相关叙述，错误的是下列关于基因表达载体及其构建的相关叙述，错误的是()A基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分B目的基因主要是指编码所需蛋白质的结构基因目的基因主要是指编码所需蛋白质的结构基因2/15C构建基因表达载体需用限制酶和构建基因表达载体需用限制酶和 DNA 连接酶连接酶D构建基因表达载体必须在细胞内进行构建基因表达载体必须在细胞内进行D一个基因表达载体的组成除目的基因外还必须具有启动子、终止子、一个基因表达载体的组成除目的基因外还必须具有启动子、终止子、标记基因等部分；目的基因主要是指编码蛋白质
5、的结构基因；基因表达载体的标记基因等部分；目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因；基因表达载体的构建是目的基因与载体结合构建是目的基因与载体结合，在此过程中需用同种限制酶切割目的基因与载体在此过程中需用同种限制酶切割目的基因与载体，用用 DNA 连接酶将相同的末端连接起来；基因表达载体的构建是在细胞外进行连接酶将相同的末端连接起来；基因表达载体的构建是在细胞外进行的。的。4下列关于下列关于 PCR 技术的叙述，正确的是技术的叙述，正确的是()APCR 技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上B该技术需要解旋酶和该技术需要解旋酶和耐高温的耐高温的
6、 DNA 聚合酶聚合酶C该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的D该技术的原理是该技术的原理是 DNA 双链复制原理，需要模板、原料、能量、酶等条双链复制原理，需要模板、原料、能量、酶等条件件DPCR 技术扩增的目的基因序列不一定是已知的技术扩增的目的基因序列不一定是已知的，A 项错误项错误；PCR 技术技术是通过高温来使是通过高温来使 DNA 解旋的解旋的，不需要解旋酶不需要解旋酶，B 项错误项错误；该技术需要的一对引该技术需要的一对引物，分别能与模板物，分别能与模板 DNA 的两条链的末端进行碱基配对，其序列不是互补的，的
7、两条链的末端进行碱基配对，其序列不是互补的，C项错误项错误；PCR 技术的原理是技术的原理是 DNA 双链复制原理双链复制原理，需要模板需要模板、原料原料、酶酶、能量等能量等条件，条件，D 项正确。项正确。5下列有关基因工程的工具的叙述，正确的是下列有关基因工程的工具的叙述，正确的是()A基因工程的载体都是质粒基因工程的载体都是质粒B限制酶和其他酶一样具有专一性，只能识别特定的核苷酸序列限制酶和其他酶一样具有专一性，只能识别特定的核苷酸序列C噬菌体可以作为动物基因工程的载体噬菌体可以作为动物基因工程的载体D天然质粒均可以直接用作载体将目的基因送入受体细胞天然质粒均可以直接用作载体将目的基因送入
8、受体细胞B基因工程中最常用的载体是质粒，此外还有基因工程中最常用的载体是质粒，此外还有噬菌体的衍生物、动植物噬菌体的衍生物、动植物病毒等病毒等；噬菌体的衍生物不可作为动物基因工程的载体噬菌体的衍生物不可作为动物基因工程的载体；天然质粒往往不能直天然质粒往往不能直接作为载体，要根据不同的目的和需求进行人工改造。接作为载体，要根据不同的目的和需求进行人工改造。6基因工程是在基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，无需进行碱基互补配对的步骤是骤中，无需进行碱基互补配对的步骤是()APCR 扩增目的基因扩增目的基因B基因表达载
9、体的构建基因表达载体的构建3/15C将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞D目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定C将目的基因导入受体细胞过程中没有进行碱基互补配对。将目的基因导入受体细胞过程中没有进行碱基互补配对。7某目的基因两侧的某目的基因两侧的 DNA 序列所含限制酶的酶切位点如图所示，则在进序列所含限制酶的酶切位点如图所示，则在进行基因工程操作中最好应选用下列哪种质粒作为载体行基因工程操作中最好应选用下列哪种质粒作为载体()D目的基因只有一侧含有限制酶目的基因只有一侧含有限制酶 Nhe 的识别序列，因此不能用该酶获的识别序列，因此不能用该酶获取目的基因取目的基因，A 错误错误；
10、目的基因的两侧都含有限制酶目的基因的两侧都含有限制酶 Alu 的识别序列的识别序列，可以用可以用该酶获取目的基因，但只用此酶切割可能会导致目的基因和质粒反向连接或自该酶获取目的基因，但只用此酶切割可能会导致目的基因和质粒反向连接或自身环化身环化，B 错误错误；目的基因的一侧同时含有限制酶目的基因的一侧同时含有限制酶 Nhe 和和 Alu 的识别序列的识别序列，故用这两种酶切割可能会获得不含目的基因的片段故用这两种酶切割可能会获得不含目的基因的片段， C 错误错误； 目的基因两侧分别目的基因两侧分别含有限制酶含有限制酶 Nhe 和和 Sma 的识别序列的识别序列，用这两种酶切割能获取目的基因用这
11、两种酶切割能获取目的基因，而而且能防止目的基因和质粒的自身环化和反向连接，且能防止目的基因和质粒的自身环化和反向连接，D 正确。正确。8运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的 Bt 基因转移到优质油菜基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产蛋白质，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用。据以上信息，下列叙述正确的是量，减少农药使用。据以
12、上信息，下列叙述正确的是()ABt 基因的化学成分是蛋白质基因的化学成分是蛋白质BBt 基因中有菜青虫的遗传物质基因中有菜青虫的遗传物质C转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有 Bt 基因基因D转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物C基因是有遗传效应的基因是有遗传效应的 DNA 片段片段， 因此因此 Bt 基因的化学成分不是蛋白质基因的化学成分不是蛋白质，4/15A 错误；由题干信息错误；由题干信息“将抗菜青虫的将抗菜青虫的 Bt 基因转移到优质油菜中，培育出转基因基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种抗虫的油菜
13、品种”， 可知可知 Bt 基因不是来源于菜青虫基因不是来源于菜青虫， 不含有菜青虫的遗传物质不含有菜青虫的遗传物质，B 错误错误；转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有 Bt 基因基因，Bt 基因能控制杀基因能控制杀虫蛋白的合成虫蛋白的合成，C 正确正确；转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白属于有机物转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白属于有机物，D 错误错误。9下列有关动物基因工程的说法，错误的是下列有关动物基因工程的说法，错误的是()A动物基因工程技术可以提高动物的生长速度动物基因工程技术可以提高动物的生长速度B将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中将肠乳糖酶基因导入奶牛基因
14、组中，获得的转基因牛分泌的乳汁中获得的转基因牛分泌的乳汁中，乳乳糖的含量大大降低糖的含量大大降低C用转基因动物作为器官移植的供体时用转基因动物作为器官移植的供体时，导入的是调节因子导入的是调节因子，不是目的基不是目的基因，因此无法抑制抗原的合成因，因此无法抑制抗原的合成D利用基因工程技术利用基因工程技术，得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要药品的生得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要药品的生产问题产问题C转基因动物作为器官移植的供体时转基因动物作为器官移植的供体时，导入的调节因子也属于目的基因导入的调节因子也属于目的基因，可抑制抗原的合成。可抑制抗原的合成。10科学家运用转基因技术科学家运用转
15、基因技术，将苏云金杆菌的抗虫基因将苏云金杆菌的抗虫基因 DXT 转移到大白菜转移到大白菜细胞中，培育出抗虫效果很好的优质大白菜，减少了农药的使用量，减轻了农细胞中，培育出抗虫效果很好的优质大白菜，减少了农药的使用量，减轻了农药对环境的污染。下列说法正确的是药对环境的污染。下列说法正确的是()A用苏云金杆菌直接感染大白菜就可得到转基因大白菜用苏云金杆菌直接感染大白菜就可得到转基因大白菜BDXT 基因能在大白菜细胞中正常表达基因能在大白菜细胞中正常表达C转基因大白菜培育的过程中，可以用灭活的病毒作为载体转基因大白菜培育的过程中，可以用灭活的病毒作为载体D转基因大白菜能抵抗各种病虫害转基因大白菜能抵
16、抗各种病虫害B由于生物间存在生殖隔离，细菌感染时并不把遗传物质传递给受感染由于生物间存在生殖隔离，细菌感染时并不把遗传物质传递给受感染生物生物； 抗虫基因抗虫基因 DXT 转移到大白菜细胞中转移到大白菜细胞中， 培育出抗虫效果很好的优质大白菜培育出抗虫效果很好的优质大白菜，说明说明 DXT 基因在大白菜细胞中得到了正常表达基因在大白菜细胞中得到了正常表达；在转基因植物培育过程中在转基因植物培育过程中，载载体常用土壤农杆菌的体常用土壤农杆菌的 Ti 质粒；苏云金杆菌的抗虫基因编码的蛋白质具有毒杀鳞质粒；苏云金杆菌的抗虫基因编码的蛋白质具有毒杀鳞翅目、双翅目、鞘翅目等昆虫的特性，并不能抵抗各种病虫
17、害。翅目、双翅目、鞘翅目等昆虫的特性，并不能抵抗各种病虫害。11基因工程中基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛便于重组和筛选。已知限制酶选。已知限制酶的识别序列和切点是的识别序列和切点是；限制酶；限制酶的识别序列的识别序列5/15和切点是和切点是。据图判断下列操作正确的是。据图判断下列操作正确的是()A质粒用限制酶质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割，目的基因用限制酶切割切割B质粒用限制酶质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割，目的基因用限制酶 I 切割切割C目的基因和质粒均用限制酶目的基因和质粒均用限制酶 I 切割切割D目的基因
18、和质粒均用限制酶目的基因和质粒均用限制酶切割切割A由由题图题图信息可知信息可知， 限制酶限制酶 I 只能切割只能切割， 限制酶限制酶不仅能不仅能切割切割，也能切割，也能切割。据题图可知，目的基因两端都有。据题图可知，目的基因两端都有限制酶限制酶的识别序列的识别序列(切点是切点是)，可见只有用限制酶，可见只有用限制酶才能将目的基才能将目的基因切割下来因切割下来。质粒上质粒上 Gene I 和和 Gene表示两种标记基因表示两种标记基因，分别有限制酶分别有限制酶的识的识别序列和限制酶别序列和限制酶 I、的识别序列；如果用限制酶的识别序列；如果用限制酶切割，则切割，则 Gene I 和和 Gene都
19、被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶 I 切割，则破坏切割，则破坏 Gene，保，保留留Gene I，其产生的黏性末端和切割后目的基因的黏性末端相同其产生的黏性末端和切割后目的基因的黏性末端相同，可以连接形成重可以连接形成重组组 DNA。A 正确。正确。12下列围绕蛋白质工程的叙述，错误的是下列围绕蛋白质工程的叙述，错误的是()A蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类的需要蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类的需要B蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定
20、向改变分子定向改变分子的结构的结构C蛋白质工程能产生自然界中不曾存在的新型蛋白质分子蛋白质工程能产生自然界中不曾存在的新型蛋白质分子D蛋白质工程的操作起点是从预期蛋白质功能出发，设计出相应的基因蛋白质工程的操作起点是从预期蛋白质功能出发，设计出相应的基因，并借助基因工程实现的并借助基因工程实现的6/15B蛋白质工程实际上是对基因进行操作，而不是对蛋白质进行操作。蛋白质工程实际上是对基因进行操作，而不是对蛋白质进行操作。13从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽强的多肽 P1。 目前在目前在 P1 的基础上
21、研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物， 首先要首先要做的是做的是()A合成编码目的肽的合成编码目的肽的 DNA 片段片段B构建含目的肽构建含目的肽 DNA 片段的表达载体片段的表达载体C依据依据 P1 氨基酸序列设计多条模拟肽氨基酸序列设计多条模拟肽D筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽C紧扣蛋白质工程的流程紧扣蛋白质工程的流程(基本途径基本途径)进行分析。由题可知，多肽进行分析。由题可知，多肽 P1 为抗为抗菌性和溶血性均较强的多肽菌性和溶血性均较强的多肽，要设计出抗菌性强但溶血性弱的多肽要设计出抗菌性强但溶血性弱的多肽
22、，即在即在 P1 的的基础上设计出自然界原本不存在的蛋白质，用蛋白质工程技术可以实现。蛋白基础上设计出自然界原本不存在的蛋白质，用蛋白质工程技术可以实现。蛋白质工程的基本途径是：质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发从预期的蛋白质功能出发设计预期的设计预期的蛋白质结构蛋白质结构推推测应有的氨基酸序列测应有的氨基酸序列找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因的基因获得所需要获得所需要的蛋白质的蛋白质。故要想在故要想在 P1 的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物的多肽药物，首先要做的是依据首先要做的
23、是依据 P1 的氨基酸序列设计出多条模拟肽的氨基酸序列设计出多条模拟肽，然后进行然后进行改造，从而确定抗菌性强但溶血性弱的多肽的氨基酸序列。改造，从而确定抗菌性强但溶血性弱的多肽的氨基酸序列。14下下图表示蛋白质工程的操作流程，下列说法不正确的是图表示蛋白质工程的操作流程，下列说法不正确的是()A蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作B蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术Ca、b 过程分别表示转录、翻译过程分别表示转录、翻译D通过蛋白质工程可制造出一种新的蛋
24、白质通过蛋白质工程可制造出一种新的蛋白质B蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作，如蛋白质蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作，如蛋白质的空间结构、氨基酸的排列顺序等，这对于合成或改造基因至关重要，的空间结构、氨基酸的排列顺序等，这对于合成或改造基因至关重要，A 正确正确；蛋白质工程的进行离不开基因工程，因为对蛋白质的改造要通过对基因的改造蛋白质工程的进行离不开基因工程，因为对蛋白质的改造要通过对基因的改造来完成，来完成，B 错误；图中错误；图中 a、b 过程分别表示转录、翻译，过程分别表示转录、翻译，C 正确；通过蛋白质工正确；通过蛋白质工程可对现有蛋白质进行改造，
25、也可制造出一种新的蛋白质，程可对现有蛋白质进行改造，也可制造出一种新的蛋白质，D 正确。正确。二二、选择题选择题(6318 分分。每小题给出的四个选项中每小题给出的四个选项中，有的只有一个选项正有的只有一个选项正确，有的有多个选项正确，全部选对得确，有的有多个选项正确，全部选对得 3 分，选对但不全对的得分，选对但不全对的得 1 分，有选错分，有选错7/15的得的得 0 分分)15下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述中，正确的是下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述中，正确的是()A将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法B设计扩增目的基因的引物时
26、，不必考虑表达载体的序列设计扩增目的基因的引物时，不必考虑表达载体的序列C蛋白质工程是通过基因蛋白质工程是通过基因改造改造或基因合成或基因合成，对现有蛋白质进行改造对现有蛋白质进行改造，或制或制造一种新蛋白质的技术造一种新蛋白质的技术D蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质ACD将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法，将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法，A 项正确；项正确；设计引物时应当考虑表达载体的序列，以保证扩增后，目的基因能与切割后的设计引物时应当考虑表达载体的序列，以保证扩增后，目的基因能与切割后的表达载体相连接，表达载体相连接
27、，B 项不正确；蛋白质工程是指以分子生物学相关理论为基础项不正确；蛋白质工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过通过改造或合成改造或合成基因基因来改造来改造现有的蛋白质，或制造一种新的蛋白质的技术，现有的蛋白质，或制造一种新的蛋白质的技术，C项正确；通过蛋白质工程可合成自然界不存在的蛋白质，项正确；通过蛋白质工程可合成自然界不存在的蛋白质，D 项正确。项正确。16番茄营养丰富，是人们喜爱的蔬菜。普通番茄细胞中含有多聚半乳糖番茄营养丰富，是人们喜爱的蔬菜。普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶的控制基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使醛酸酶的控制基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶
28、，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。科学家通过基因工程将一种抗多聚半乳糖醛酸酶的基因番茄软化，不耐贮藏。科学家通过基因工程将一种抗多聚半乳糖醛酸酶的基因导入番茄细胞，获得了抗软化番茄。下列关于培育抗软化番茄的叙述，正确的导入番茄细胞，获得了抗软化番茄。下列关于培育抗软化番茄的叙述，正确的是是()A运载工具可以是质粒运载工具可以是质粒B受体细胞是番茄细胞受体细胞是番茄细胞C目的基因为多聚半乳糖醛酸酶基因目的基因为多聚半乳糖醛酸酶基因D目的基因的表达延缓了番茄的软化目的基因的表达延缓了番茄的软化ABD根据题干信息可知根据题干信息可知，运载工具可以是运载工具可以是 Ti 质粒质粒，则此时抗软化
29、番茄的则此时抗软化番茄的培育过程如下培育过程如下：以质粒作为载体以质粒作为载体，将目的基因将目的基因(抗多聚半乳糖醛酸酶基因抗多聚半乳糖醛酸酶基因)与质粒与质粒结合形成重组结合形成重组 DNA，利用含重组，利用含重组 DNA 的农杆菌去感染普通番茄，使目的基因的农杆菌去感染普通番茄，使目的基因进入普通番茄细胞中的染色体进入普通番茄细胞中的染色体 DNA 上上，目的基因的表达可抑制多聚半乳糖醛酸目的基因的表达可抑制多聚半乳糖醛酸酶的作用。酶的作用。17利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，试图培育出耐寒能利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，试图培育出耐寒能力强的番茄。下列相关说法正
30、确的是力强的番茄。下列相关说法正确的是()A可用可用 PCR 技术获得抗冻蛋白基因技术获得抗冻蛋白基因8/15B将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体C利用显微注射法将基因表达载体导入受体细胞利用显微注射法将基因表达载体导入受体细胞D检测到番茄细胞中具有抗冻蛋白基因检测到番茄细胞中具有抗冻蛋白基因，则培育出的番茄一定具有抗寒能则培育出的番茄一定具有抗寒能力力AB基因工程中获取目的基因的方法包括：采用基因工程中获取目的基因的方法包括：采用 PCR 技术体外扩增、人技术体外扩增、人工化学合成工化学合成(如如反反转录法转录法)，A 正确正确；在培育耐
31、寒转基因番茄的过程中在培育耐寒转基因番茄的过程中，需要将抗需要将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体，再导入受体细胞再导入受体细胞，B 正确正确；将目将目的基因导入植物受体细胞最常用的方法是农杆菌转化法的基因导入植物受体细胞最常用的方法是农杆菌转化法， C 错误错误； 番茄细胞中具番茄细胞中具有抗冻蛋白基因，但该基因在受体细胞中不一定表达，因而培育出的番茄不一有抗冻蛋白基因，但该基因在受体细胞中不一定表达，因而培育出的番茄不一定具有定具有抗抗寒能力，寒能力，D 错误。错误。18下图表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径，据图判断下列说法正下图表示利用
32、基因工程生产胰岛素的三种途径，据图判断下列说法正确的是确的是()A过程过程需要限制酶和需要限制酶和 DNA 连接酶连接酶B受体细胞受体细胞 A 一般选用乳腺细胞一般选用乳腺细胞C受体细胞受体细胞 B 通常为莴苣的体细胞通常为莴苣的体细胞D三种方法得到的胰岛素结构不完全相同三种方法得到的胰岛素结构不完全相同ACD过程过程为形成重组质粒的过程，需要限制酶和为形成重组质粒的过程，需要限制酶和 DNA 连接酶，连接酶，A 正正确；将目的基因导入动物细胞得到转基因动物时，受体细胞应选择动物的受精确；将目的基因导入动物细胞得到转基因动物时，受体细胞应选择动物的受精卵，卵，B 错误；受体细胞错误；受体细胞
33、B 通常是莴苣的体细胞，目的基因导入该细胞后，需对通常是莴苣的体细胞，目的基因导入该细胞后，需对9/15该细胞进行组织培养该细胞进行组织培养，形成转基因植株形成转基因植株，C 正确正确；大肠杆菌因无内质网大肠杆菌因无内质网、高尔基高尔基体等细胞器，无法对核糖体合成的多肽链进行相关加工，形成的胰岛素结构与体等细胞器，无法对核糖体合成的多肽链进行相关加工，形成的胰岛素结构与另外两种方法得到的不同，另外两种方法得到的不同，D 正确。正确。19下图是将人的生长激素基因导入细菌下图是将人的生长激素基因导入细菌 B 细胞内制造细胞内制造“工程菌工程菌”的示意的示意图。已知细菌图。已知细菌 B 细胞内不含质
34、粒细胞内不含质粒 A，也不含质粒，也不含质粒 A 上的基因。判断下列说法正上的基因。判断下列说法正确的是确的是()A将重组质粒导入细菌将重组质粒导入细菌 B 常用的方法是用常用的方法是用 Ca2处理细菌处理细菌B将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的能生长的只是导入了重组质粒的细菌只是导入了重组质粒的细菌C将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是能生长的就是导入了质粒导入了质粒 A 的细菌的细菌D 目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的
35、培养基上生目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长长AC将基因表达载体导入细菌将基因表达载体导入细菌 B 之前，一般要先用之前，一般要先用 Ca2处理细菌，使之处理细菌，使之处于感受态，从而能够吸收重组质粒，显微注射法是将目的基因导入动物细胞处于感受态，从而能够吸收重组质粒，显微注射法是将目的基因导入动物细胞常用的方法，常用的方法，A 正确；质粒正确；质粒 A 中含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，而重中含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，而重组质粒中抗四环素基因被破坏，只含抗氨苄青霉素基因，则在含有氨苄青霉素组质粒中抗四环素基因被破坏，只含抗氨苄青霉素基因，则在含有氨
36、苄青霉素的培养基上能生长的是导入质粒的培养基上能生长的是导入质粒 A 或重组质粒的细菌，能在含有四环素的培养或重组质粒的细菌，能在含有四环素的培养基上生长的是导入了质粒基上生长的是导入了质粒 A 的细菌，的细菌，B 错误，错误，C 正确；根据题干信息分析，目正确；根据题干信息分析，目的基因的基因(人的生长激素基因人的生长激素基因)成功表达的标志是受体细胞能产生人的生长激素，成功表达的标志是受体细胞能产生人的生长激素，D错误。错误。20图甲、乙中的箭头表示三种限制性内切核酸酶的酶切位点，图甲、乙中的箭头表示三种限制性内切核酸酶的酶切位点，表示表示10/15氨苄青霉素抗性基因，氨苄青霉素抗性基因，
37、neo 表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是()A图甲中的质粒用图甲中的质粒用 BamH I 切割后，含有切割后，含有 4 个游离的磷酸基团个游离的磷酸基团B在构建重组质粒时，可用在构建重组质粒时，可用 Pst I 和和 BamH I 切割质粒和外源切割质粒和外源 DNAC导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长D用用 Pst I 和和 Hind 酶切，可以保证重组酶切，可以保证重组 DNA 序列的唯一性序列的唯一性D图甲中的质粒用图甲中的质粒用 BamH I 切割后切割后，会打开一个切口会打开
38、一个切口，故有故有 2 个游离的磷个游离的磷酸基团酸基团， A 错误错误； 在构建重组质粒时在构建重组质粒时， 不能用不能用 BamH I 切割外源切割外源 DNA， 因为因为 BamHI 会破坏目的基因会破坏目的基因，B 错误错误；操作中获取目的基因时会用到操作中获取目的基因时会用到 Pst I，但甲中该酶会但甲中该酶会破坏氨苄青霉素抗性基因，因此导入目的基因的大肠杆菌不能在含氨苄青霉素破坏氨苄青霉素抗性基因，因此导入目的基因的大肠杆菌不能在含氨苄青霉素的培养基中生长的培养基中生长，C 错误错误；用用 Pst I 和和 Hind酶切酶切，可以避免自身环化可以避免自身环化，保证重保证重组组 D
39、NA 序列的唯一性，序列的唯一性，D 正确。正确。三、非选择题三、非选择题(本题包括本题包括 5 小题，共小题，共 54 分分)21(11 分分)科学家利用植物生产药用蛋白科学家利用植物生产药用蛋白，研究出了用转基因马铃薯生产人研究出了用转基因马铃薯生产人的血清白蛋白的方法的血清白蛋白的方法。下下图表示图表示 EcoR 、BamH 两种限制酶在质粒上的切割两种限制酶在质粒上的切割位点，两种酶识别和切割位点见表。回答相关问题：位点，两种酶识别和切割位点见表。回答相关问题：限制酶限制酶识别序列和切割位点识别序列和切割位点EcoR GAATTCBamH GGATCC(1)该工程中适宜用来切割质粒的限
40、制酶是该工程中适宜用来切割质粒的限制酶是_，原因是，原因是_。(2)利用利用 PCR 技术扩增血清白蛋白基因，设计引物序列的主要依据是技术扩增血清白蛋白基因，设计引物序列的主要依据是11/15_， 还需要在引物的一端加上还需要在引物的一端加上_序列序列， 以便于后以便于后续的剪切和连接。续的剪切和连接。(3)将目的基因和质粒进行连接后，需先用将目的基因和质粒进行连接后，需先用_处理农杆菌以便将基因处理农杆菌以便将基因表达载体导入马铃薯细胞，筛选含有目的基因的细胞需在培养基中添加表达载体导入马铃薯细胞，筛选含有目的基因的细胞需在培养基中添加_。(4)从含有血清白蛋白基因的马铃薯细胞中提取血清白蛋
41、白，需通过从含有血清白蛋白基因的马铃薯细胞中提取血清白蛋白，需通过_过程培养到愈伤组织，从其中提取有效成分。过程培养到愈伤组织，从其中提取有效成分。解析解析(1)限制酶切割质粒时必须保证至少一个标记基因的完整性，若限制酶切割质粒时必须保证至少一个标记基因的完整性，若用用EcoR 切割会将质粒上的两个抗性基因都破坏，故不能选择切割会将质粒上的两个抗性基因都破坏，故不能选择 EcoR 切割，只切割，只能选择能选择 BamH 切割目的基因和载体。切割目的基因和载体。(2) PCR 扩增的原理是扩增的原理是 DNA 双链复制，需要根据目的双链复制，需要根据目的(血清白蛋白血清白蛋白)基因两基因两端的部
42、分核苷酸序列合成端的部分核苷酸序列合成 2 种引物，还需要在引物一端加上种引物，还需要在引物一端加上 BamH 的识别序的识别序列列 GGATCC，以便于后续的剪切和连接。，以便于后续的剪切和连接。(3)构建基因表达载体后，首先要把基因表达载体导入农杆菌细胞中，导入构建基因表达载体后，首先要把基因表达载体导入农杆菌细胞中，导入之前需要用之前需要用 Ca2处理农杆菌细胞，使其处于感受态，然后再让含目的基因的农处理农杆菌细胞，使其处于感受态，然后再让含目的基因的农杆菌去感染马铃薯细胞，进而把目的基因转入马铃薯细胞中，因为基因表达载杆菌去感染马铃薯细胞，进而把目的基因转入马铃薯细胞中，因为基因表达载
43、体中含有抗氨苄青霉素基因，故可以在培养基中加入氨苄青霉素进行筛选。体中含有抗氨苄青霉素基因，故可以在培养基中加入氨苄青霉素进行筛选。(4)马铃薯细胞需要经过脱分化培养至愈伤组织阶段，即可提取细胞产物血马铃薯细胞需要经过脱分化培养至愈伤组织阶段，即可提取细胞产物血清白蛋白。清白蛋白。答案答案(1)BamH 用用 EcoR 切割会将质粒上的两个抗性基因都破坏切割会将质粒上的两个抗性基因都破坏(2)目的目的(血清白蛋白血清白蛋白)基因两端的部分核苷酸序列基因两端的部分核苷酸序列GGATCC(3)Ca2氨苄青霉素氨苄青霉素(4)脱分化脱分化22(10 分分)为生产具有特定性能的为生产具有特定性能的淀粉
44、酶淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克研究人员从某种海洋细菌中克隆了隆了淀粉酶基因淀粉酶基因(1656 个碱基对个碱基对)，利用基因工程大量制备利用基因工程大量制备淀粉酶淀粉酶，实验流程实验流程见下图。请回答下列问题：见下图。请回答下列问题：12/15(1)利利用用 PCR 技术扩增技术扩增淀粉酶基因前淀粉酶基因前， 需先获得细菌的需先获得细菌的_。(2)为了便于扩增的为了便于扩增的 DNA 片段与表达载体连接片段与表达载体连接， 需在引物的需在引物的_端加端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主主要目
45、的是要目的是_。(3)进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中_的设定与引物有关的设定与引物有关，_的设定与扩增片段的长度有关的设定与扩增片段的长度有关。(填序号填序号)变性温度变性温度退火温度退火温度延伸温度延伸温度变性时间变性时间退火时退火时间间延伸时间延伸时间解析解析(1)淀粉酶基因来自海洋细菌，因此为了利用淀粉酶基因来自海洋细菌，因此为了利用 PCR 技术扩增技术扩增淀淀粉酶基因，必须先获得细菌的基因组粉酶基因，必须先获得细菌的基因组 DNA。(2)目的基因与载体结合前需要用限制酶对两者进行切割，延伸是
46、在引物目的基因与载体结合前需要用限制酶对两者进行切割，延伸是在引物的的3端延伸，为了保证目的基因的完整性，因此需在引物的端延伸，为了保证目的基因的完整性，因此需在引物的 5端加上限制性酶端加上限制性酶切位点切位点，且为了使且为了使 DNA 片段能定向插入表达载体片段能定向插入表达载体，减少自连减少自连，常在两条引物上常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点。设计加入不同的限制性酶切位点。(3)进行扩增时，退火温度的设定与引物有关，延伸时间的设定与扩增片段进行扩增时，退火温度的设定与引物有关，延伸时间的设定与扩增片段的长度有关。的长度有关。答案答案(1)基因组基因组 DNA(2)5使使 DNA
47、 片段能定向插入表达载体片段能定向插入表达载体，减少减少自连自连(3)23(10 分分)某研究小组进行了甲型某研究小组进行了甲型 H1N1 流感病毒的疫苗研制工作流感病毒的疫苗研制工作，下下图为图为13/15他们前期研究工作的简要操作流程图，回答下列问题：他们前期研究工作的简要操作流程图，回答下列问题：(1)实验步骤实验步骤所代表的反应过程是所代表的反应过程是_；在步骤；在步骤之前扩增之前扩增 H 基基因常采用的方法是因常采用的方法是_。(2)步骤步骤构建基因表达载体构建基因表达载体 A 和基因表达载体和基因表达载体 B 必须使用的酶是必须使用的酶是_。(3)构建基因表达载体时，一般需要将构建
48、基因表达载体时，一般需要将 H 基因与载体结合，常用作基因工程基因与载体结合，常用作基因工程载体的是载体的是_；在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助；在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上载体上_的表达。的表达。解析解析(1)实验步骤实验步骤RNADNA 所代表的反应过程是逆转录；在步骤所代表的反应过程是逆转录；在步骤之前扩增之前扩增 H 基因常采用的方法是基因常采用的方法是 PCR 技术技术(或多聚酶链式反应技术或多聚酶链式反应技术)。(2)构建基因表达载体时构建基因表达载体时， 首先需要限制酶来切割含目的基因的首先需要限制酶来切割含目的基因的 DNA 片段以
49、片段以获取目的基因，同时需要用相同的限制酶切割载体以获取与目的基因相同的黏获取目的基因，同时需要用相同的限制酶切割载体以获取与目的基因相同的黏性末端性末端，再通过再通过 DNA 连接酶连接目的基因和载体连接酶连接目的基因和载体，故步骤故步骤构建基因表达载构建基因表达载体体A 和基因表达载体和基因表达载体 B 必须使用的酶是限制酶和必须使用的酶是限制酶和 DNA 连接酶。连接酶。(3)构建基因表达载体时，一般需要将构建基因表达载体时，一般需要将 H 基因与载体结合，常用作基因工程基因与载体结合，常用作基因工程载体的是质粒；在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体载体的是质粒；在检测
50、受体细胞中是否已经导入目的基因时，常常要借助载体上标记基因的表达。上标记基因的表达。答案答案(1)逆转录逆转录PCR(或多聚酶链式反应或多聚酶链式反应)技术技术(2)限制酶和限制酶和 DNA 连接连接酶酶(3)质粒质粒标记基因标记基因24(11 分分)人的人的 T 细胞可以产生某种具有临床价值的蛋白质细胞可以产生某种具有临床价值的蛋白质(Y)，该蛋白质，该蛋白质由一条多肽链组成。目前可以利用现代生物技术生产由一条多肽链组成。目前可以利用现代生物技术生产 Y。回答下列问题。回答下列问题。(1)若要获得若要获得 Y 的基因，可从人的的基因，可从人的 T 细胞中提取细胞中提取_作为模板，在作为模板，
