1、 酿酒和做面包都要用到酵母菌，这些酵母菌可以用液体酿酒和做面包都要用到酵母菌，这些酵母菌可以用液体培养基（培养液）来培养。培养基（培养液）来培养。 那么如何估算酵母菌种群数量的变化？那么如何估算酵母菌种群数量的变化？培养液中酵母菌种群数量的变化1.1.单细胞真核生物单细胞真核生物2.2.兼性厌氧菌兼性厌氧菌3.3.出芽生殖出芽生殖探究实践：1. 1. 提出问题：提出问题：2. 2. 作出假设：作出假设：3. 3. 设计并设计并进行实进行实验：验：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？连续培养连续培养7 7天，每天用天，每天用和和计数出酵母菌种群
2、密度。（显微计数法）计数出酵母菌种群密度。（显微计数法）酵母菌在开始一段时间呈酵母菌在开始一段时间呈“J”J”型增长，但随着时间的推移，型增长，但随着时间的推移，由于资源和空间有限，将呈由于资源和空间有限，将呈“S”S”型增长，并最终将全部死亡。型增长，并最终将全部死亡。 实验步骤 将将10mL10mL无菌无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中； 将酵母菌接种入试管中的培养液中将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀混合均匀； 将试管在将试管在2828条件下连续培养条件下连续培养7d7d； 每天取样计数酵母菌数量每天取样计数酵母菌数量； 分析结果，得出结论分析
3、结果，得出结论。逐个计数很困难，采取逐个计数很困难，采取抽样检测抽样检测的方法。的方法。每天同一时间计数每天同一时间计数血球计数板使用血球计数板使用1、血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格。一、血球计数板的原理和构造2、方格网上刻有9个大方格。只有中间的一个大方格为计数室。这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，即1mm1mm0.1mm其容积为0.1mm3。计数室计数室计数室分为计数室分为25中格中格（
4、双线边双线边）每一中格又分为每一中格又分为16小格小格 计数室是由计数室是由_个小格组成个小格组成2516=4003、计数室规格：细胞个数1mL80个小方格细胞总数/ 80 40010000稀释倍数 一般计数四个角和中央的五个中方格（80个小方格）的细胞数 二、血球计数板的使用方法步骤 1镜检计数室。在加样前先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行加样；2加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入（防止产生气泡）；充入细胞悬液的量不能太多，多余培养液需用滤纸吸去，盖玻片上的培养液也需用滤纸吸
5、取。3计数。稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。每一天要在同一时间计数。1、若计数室内有水，则会导致计算出的浓度比实际偏小。、若计数室内有水，则会导致计算出的浓度比实际偏小。2、加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，这些做法的目的都是防止气泡产生，气泡的存在会导致计算出的浓度比实际偏小。3、充入细胞悬液的量过多，会将盖玻片顶起，使得计算出的浓度比实际偏大。4、如果先加酵母菌悬浮液，再盖盖玻片，会使加入的酵母、如果先加酵母菌悬浮液，再盖
6、盖玻片，会使加入的酵母菌溶液超过计数室体积，导致菌溶液超过计数室体积，导致计算出的浓度比实际偏大。5、如果盖玻片上的酵母菌溶液没有用滤纸吸去，会导致、如果盖玻片上的酵母菌溶液没有用滤纸吸去，会导致计算出的浓度比实际偏大。6、吸取培养液前要轻轻振荡培养瓶几次，目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差。 若未震荡，而从底部吸取酵母菌溶液，会导致计算出的浓度比实际偏大；若未震荡，而从上部吸取酵母菌溶液，会导致计算出的浓度比实际偏小。 7 7、若一个小格中的酵母菌过多，难以数清，要将吸取的培养液进行稀释后，、若一个小格中的酵母菌过多，难以数清，要将吸取的培养液进行稀释后，再计数（
7、一般以一个小格中再计数（一般以一个小格中4-54-5个酵母菌为宜）个酵母菌为宜） 8 8、计数：相邻两边及其夹角上的个体。、计数：相邻两边及其夹角上的个体。若四边四角均计入，会导致若四边四角均计入，会导致计算出的浓度比实际偏大。 9 9、待酵母菌沉降到底部再进行计数。对、待酵母菌沉降到底部再进行计数。对焦不准：会导致看清酵母菌，看不清格线，焦不准：会导致看清酵母菌，看不清格线，或者看清格线，看不清酵母菌，造成计数的或者看清格线，看不清酵母菌，造成计数的误差。误差。1010、活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时，活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时，即可作为两个菌体计数，若芽
8、体小于母细胞一半时为即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1 1个酵个酵母细胞。母细胞。11、一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算，对每个样品计数三次，再取其平均值。 N1=(n1-1+n1-2)/2 N2=(n2-1+n2-2)/2 N=(N1+N2+N3) /3 N3=(n3-1+n3-2)/2N1=(n1-1+n1-2)/2 计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算。n1-1n1-2N1=(n1-1+n1-2)/2N2=(n2-1+n2-2)/2 计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算。n2-1n2-2N2=(n2-1+n2-2)/2N3=(n3-1+n
9、3-2)/2 计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算。n3-1n3-2N3=(n3-1+n3-2)/21212、本实验本实验不需要对照不需要对照, ,实验前后互为对照。实验前后互为对照。1313、需要平行重复实验、需要平行重复实验, ,以提高实验数据的准确以提高实验数据的准确性性; ;对每个样品可计数三次，再取平均值。对每个样品可计数三次，再取平均值。1414、可使用两种方法分辨死细胞和活细胞：、可使用两种方法分辨死细胞和活细胞：死细胞多集死细胞多集结成团；可以借助结成团；可以借助台盼蓝台盼蓝染色（死细胞呈染色（死细胞呈蓝色，因为死蓝色，因为死细胞细胞膜失去选择透过性，台盼蓝可以进入
10、细胞细胞细胞膜失去选择透过性，台盼蓝可以进入细胞）1515、血球计数板使用后，用自来水浸泡和冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，也可用95%的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。例题 例1：用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若计数室为1mm1mm0.1mm方格，由400个小方格组成，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。 稀释 2108 解析 ：根据公式：540010000102108 例2：检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；
11、将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成，容纳液体的总体积为01 mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 个mL 解析 ：酵母细胞个数1mL80个小方格细胞总数/ 80 40010000稀释倍数n/ 8040010000105n105 例3（2008江苏高考31）（4）在整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中取培养原液计数的做法是错误的，正确的方法是 _和 。（5）实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错误的，正确的方法是 。摇匀培养
12、液后再取样 培养后期的样液稀释后再计数 浸泡和冲洗 例4：（2009福建高考1 ） 下列对有关实验的叙述，正确的是 ( )A.在观察洋葱细胞有丝分裂实验中，将已经解离、漂洗、染色的根尖置于载玻片上，轻轻盖上盖玻片后即可镜检B.对酵母菌计数时，用吸管吸取培养液滴满血球计数板的计数室及其四周边缘，轻轻盖上盖玻片后即可镜检C.在叶绿体色素提取实验中，研磨绿叶时应加一些有机溶剂，如无水乙醇等D.检测试管中的梨汁是否有葡萄糖，可加入适量斐林试剂后，摇匀并观察颜色变化C1（7分）酵母菌是探究细胞呼吸方式、种群数量变化的理想实验材料。血球计数板是酵母菌计数的常用工具。结合所学知识，回答下列问题：（1）酵母菌
13、与大肠杆菌相比，在结构上的主要区别是酵母菌具有 。（2）酵母菌常被用来探究细胞呼吸的方式，是因为它 。以核膜为界限的细胞核 在有氧和无氧条件下都能生存（属于兼性厌氧菌） （3）血球计数板的计数室长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其中2516型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格位于计数室的 。下图1表示的是其中一个中方格的情况，对该中方格中的酵母菌进行计数的结果是 个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数为20个，则1mL培养液中酵母菌的总数为 个。四个角和中央的五个中方格 245106 （4）某同学为探究温度对酵母菌种群数量变化的影
14、响，得到上图2所示结果，由此并不能得出酵母菌的最适培养温度为25。为了确定培养酵母菌的最适温度，需要进一步实验，写出实验设计思路： 。在25左右再设计以上的温度梯度 2.在生态学中，通常要从种群、群落、生态系统等三个层次开展研究。 在“探究培养液中酵母菌数量的动态变化”实验中，用血球计数板进行抽样检测。下图是血球计数板放大图，第一次抽样检测结果是4个中方格中共有40个酵母菌，则每毫升菌液中含有酵母菌 个。所计算出的酵母菌是 （从以下选项中选择）。 A.活的菌数 B.死的菌数 C.总菌数 D.新增殖的菌1.6106C“离离原上草，一岁一枯荣。野火烧不尽，春风吹又生。远芳侵古道，晴翠接荒城。”诗中可体现出群落的 现象。研究群落通常要研究其丰富度，探究土壤中小动物优势种的种类及丰富度，随机取样时常用的方法是 取样法。人工设计并制作生态缸，目的是观察这一人工微生态系统的稳定性。在构建时，是依据生态系统原理，在有限的空间内把生态系统具有的 进行组织。为了使其正常运转，在设计时一定要考虑 。次生演替取样器取样基本成分 不同营养级生物之间的合适比例1625型的计数板 计数室含16中格，每个中方格含有25个小方格。一般取四角的四个中方格（100个小方格）计数 。细胞个数1mL100个小方格细胞总数/ 100 40010000稀释倍数 补充：16x25型计数板
