1、徐新军徐新军药物分析与质量评价实验室药物分析与质量评价实验室 E-mail: TEL:39940341，13924061779第三章第三章 含羰基药物的分析含羰基药物的分析Analysis of carbonyl drugs2目的和要求（目的和要求（Objectives）n掌握酰胺类、苯磺酰胺类药物的结构、性质及掌握酰胺类、苯磺酰胺类药物的结构、性质及其与分析方法间的关系；其与分析方法间的关系；n掌握芳香第一胺类鉴别反应的原理和方法；掌握芳香第一胺类鉴别反应的原理和方法；n掌握亚硝酸钠滴定法的原理、主要测定条件、掌握亚硝酸钠滴定法的原理、主要测定条件、重点知识方法及注意事项。重点知识方法及注意
2、事项。n熟悉对乙酰氨基酚、醋氨苯砜中特殊杂质的来熟悉对乙酰氨基酚、醋氨苯砜中特殊杂质的来源及检查方法。源及检查方法。n了解苯磺酰胺类特殊杂质来源和检查方法；了了解苯磺酰胺类特殊杂质来源和检查方法；了解其他分析方法的原理和方法。解其他分析方法的原理和方法。3目目 录录酰胺类药物酰胺类药物1苯磺酰胺类药物24一、基本结构与典型药物一、基本结构与典型药物药物名称药物名称R1R2R3R4对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚（paracetamol）OHCH3HH醋氨苯砜醋氨苯砜（acedapsone）CH3HH盐酸利多卡因盐酸利多卡因（lidocaine hydrochloride）HCH3CH3盐酸布比卡因盐酸
3、布比卡因（bupivacaine hydrochloride）HCH3CH3R1NHR3R4CR2O苯胺的衍生物：苯胺的衍生物：5每片片剂扑热息痛125mg，马来酸扑尔敏1mg，盐酸维生素B1 1mg，盐酸去氧肾上腺素I2.5mg 氢溴酸右美沙芬 6山银花，连翘，荆芥，淡豆鼓，淡竹叶，牛蒡子，芦根，桔梗，甘草，马来酸氯苯那敏，对乙酰氨基酚，维生素C ;过敏休克三叉苦、金盏银盘、野菊花、岗梅、咖啡因、对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏、薄荷油 每粒含对乙酰氨基苯酚250mg、咖啡因15mg、马来酸氯苯那敏1mg、人工牛黄10 mg 每粒含对乙酰氨基酚250毫克、盐酸金刚烷胺100毫克、马来酸氯苯那敏2
4、毫克、人工牛黄10毫克、咖啡因15毫克 7注意：注意：n白加黑、新康泰克、日夜百服宁、感康、快克、泰诺、感冒灵、帕尔克常白加黑、新康泰克、日夜百服宁、感康、快克、泰诺、感冒灵、帕尔克常用感冒药等均含扑热息痛，这些药最好不要同时吃用感冒药等均含扑热息痛，这些药最好不要同时吃 。n用药前阅读药品说明书中的用药前阅读药品说明书中的“成分成分”一项。一项。n2.留意中成药。不少治疗感冒的中成药中都含有西药成分。留意中成药。不少治疗感冒的中成药中都含有西药成分。n3.感冒药只需用一种，且不应与退烧药同用。感冒药只需用一种，且不应与退烧药同用。n4.对于非缓释片，两次用药间至少要间隔对于非缓释片，两次用药
5、间至少要间隔4小时，一天最多只能服用小时，一天最多只能服用4次。次。一天内服用对乙酰氨基酚的累计剂量不应超过一天内服用对乙酰氨基酚的累计剂量不应超过2克。克。n5.对乙酰氨基酚用于解热连续使用不宜超过对乙酰氨基酚用于解热连续使用不宜超过3天，如果症状未缓解请及时天，如果症状未缓解请及时求助于医生。求助于医生。n6.为孩子选择合适的儿童剂型，并严格按说明书选择剂量。如果孩子的年为孩子选择合适的儿童剂型，并严格按说明书选择剂量。如果孩子的年龄超过了说明书中的剂量计算公式中的年龄范围，则不能按该公式计算剂龄超过了说明书中的剂量计算公式中的年龄范围，则不能按该公式计算剂量。量。n7.用药期间不要饮酒，
6、酒精会增加药物伤肝的可能。原本存在肝肾功能不用药期间不要饮酒，酒精会增加药物伤肝的可能。原本存在肝肾功能不全的患者用药也需要格外谨慎。全的患者用药也需要格外谨慎。8对乙酰氨基酚的发现历史（对乙酰氨基酚的发现历史（History）1886年退热冰1887年非那西丁1893年扑热息痛尿液1899年活性产物1955年泰诺Tylenol1956年普拿疼Panadol格兰素史克退热冰的代谢产物9安全剂量（安全剂量（Safety Dosage）n成年人每日推荐用量为每次成年人每日推荐用量为每次650 mg，每，每4-6小小時一次，每日最大用量時一次，每日最大用量 3g。n服用超过服用超过7.5 g/日或日
7、或150 mg/kg 体重可能导致体重可能导致肝中毒肝中毒。在推荐剂量内，对乙酰氨基酚对于成。在推荐剂量内，对乙酰氨基酚对于成人和人和幼儿幼儿都是安全的。都是安全的。n乙酰半胱氨酸（乙酰半胱氨酸（Mucomyst）和甲氰咪胺（）和甲氰咪胺（Tagamet）可以阻止进一步的肝脏损伤，但没）可以阻止进一步的肝脏损伤，但没有一种可以对损伤进行修复有一种可以对损伤进行修复美国食品和药品管理局（FDA）已经要求生产商停止生产每片含有超过325毫克扑热息痛的处方药。仅在美国，每年就有将近8万人因为扑热息痛中毒而被送进急诊室，其中1/3是意外服用过量。 10小故事小故事缺少代谢酶缺少代谢酶（？）11二、理化
8、性质与鉴别试验二、理化性质与鉴别试验 含有游离芳伯氨基的药物：直接鉴别试验 含有潜在芳伯氨基的药物：先水解，再试验芳香第一胺类反应HONOCH3H+HONH2HClHCl +H2O.+CH3COOHSCH3NONCH3OOOHHCH3COOH+.H2O+HCl HCl+SH2NNH2OO22R1NHR3R4CR2O醋氨苯砜112 水解产物易酯化 与三氯化铁反应323SOH233CHCOOCHCHOHCHCHCOOHCH42HONOCH3H+HONH2HClHCl +H2O.+CH3COOH遇碱性-萘酚显红色蓝紫色2313与重金属离子反应 盐酸利多卡因和盐酸丁哌卡因具有芳酰胺和脂烃胺结构，可在碳
9、酸钠中与铜离子或钴离子络合呈色414 本类药物分子结构中均有苯环，具有紫外吸收特征，可用于鉴别和含量测定紫外分光光度法 本类药物分子结构中具有苯环、酰氨基、酚羟基和羰基，在红外光谱中有特征吸收峰红外分光光度法 当高效液相色谱法用于本类药物制剂的含量测定时，可同时将其用于药物的鉴别高效液相色谱法57615三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查对乙酰氨基酚特殊杂质检查工艺路线水解还原乙酰化亚硝化还原乙酰化16对乙酰氨基酚特殊杂质检查生产工艺中用铁粉做催化剂，若残留，可使乙醇溶液浑浊，中间体生产工艺中用铁粉做催化剂，若残留，可使乙醇溶液浑浊，中间体对氨基酚的氧化产物在乙醇中显橙红色或棕色对氨基酚的氧化产物
10、在乙醇中显橙红色或棕色17对乙酰氨基酚特殊杂质检查对氨基酚及有关物质乙酰化乙酰化18对乙酰氨基酚特殊杂质检查 对照品溶液对照品溶液：对氨基酚、对乙酰氨基酚 固定相固定相：C8 流动相流动相：磷酸盐缓冲液-甲醇（90 10） 离子对试剂离子对试剂：四丁基氢氧化铵 含对氨基酚不得过0.005%；其他杂质峰面积均不得大于对照品溶液中对乙酰氨基酚的峰面积（0.1%）；杂质总量不得过0.5%对氨基酚及有关物质（HPLC法）19对乙酰氨基酚有关物质对乙酰氨基酚有关物质n对氨基酚、对硝基酚、对氯苯胺、对氯苯乙酰对氨基酚、对硝基酚、对氯苯胺、对氯苯乙酰胺、胺、O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶乙酰基对乙酰
11、氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯等。氮苯等。n含对氨基酚不得过含对氨基酚不得过0.005%，其他杂质峰面积，其他杂质峰面积均不得过均不得过0.1%，杂质总量不得过，杂质总量不得过0.5%。n对氨基酚毒性较大，并易被氧化产生颜色。对氨基酚毒性较大，并易被氧化产生颜色。n基因毒性杂质基因毒性杂质20基因毒性杂质基因毒性杂质n基因毒性杂质（或遗传毒性杂质，基因毒性杂质（或遗传毒性杂质，Genotoxic Impurity ，GTI）是指化合物本身直接或间接损伤细）是指化合物本身直接或间接损伤细胞胞DNA，产生基因突变或体内诱变，具有致癌可能或，产生基因突变或体内诱变，具有致癌可能或者倾向。者倾向。n潜在基
12、因毒性的杂质（潜在基因毒性的杂质（Potential Genotoxic Impurity ，PGI）从结构上看类似基因毒性杂质，有）从结构上看类似基因毒性杂质，有警示性，但未经实验证明的黄曲霉素类、亚硝胺化合警示性，但未经实验证明的黄曲霉素类、亚硝胺化合物、甲基磺酸酯等化合物均为常见的基因毒性杂质，物、甲基磺酸酯等化合物均为常见的基因毒性杂质，许多化疗药物也具有一定的基因毒性，它们的不良反许多化疗药物也具有一定的基因毒性，它们的不良反应是由化疗药物对正常细胞的基因毒性所致，如顺铂应是由化疗药物对正常细胞的基因毒性所致，如顺铂、卡铂、氟尿嘧啶等。、卡铂、氟尿嘧啶等。 21毒性物质限量毒性物质限
13、量TTCn在在EMA（欧洲药物评审组织）推出（欧洲药物评审组织）推出遗传毒性杂质遗传毒性杂质限度指导原则限度指导原则, 引入了可接受风险的摄入量，即毒引入了可接受风险的摄入量，即毒性物质限量，或称毒理学关注门槛（性物质限量，或称毒理学关注门槛（TTC，Threshold of Toxicological Concern）这个概念。）这个概念。设置了限度值设置了限度值 TTC(1.5 g/day)，即相当于每天摄入，即相当于每天摄入1.5 g的基因毒性杂质，被认为对于大多数药品来说的基因毒性杂质，被认为对于大多数药品来说是可以接受的风险（一生中致癌的风险小于十万分之是可以接受的风险（一生中致癌的
14、风险小于十万分之一）。按照这个阈值，可以根据预期的每日摄入量计一）。按照这个阈值，可以根据预期的每日摄入量计算出活性药物中可接受的杂质水平。需要指出的是算出活性药物中可接受的杂质水平。需要指出的是TTC是一个风险管理工具，它采用的是概率的方法。是一个风险管理工具，它采用的是概率的方法。 22n 瑞戈非尼（Regorafenib） ，治疗结直肠癌，拜耳美非他尼，广州南新制药厂sorafenib 23TCC: 1.5g/day 1.5g/800mg=1.875g/g, 0.0002% 1.875ng/mg24四、含量测定四、含量测定 对乙酰氨基酚滴剂对乙酰氨基酚滴剂等制剂 固定相：C18 流动相：
15、醋酸铵溶液-甲醇（85 : 15） 检测波长：257 nm 内标：茶碱紫外分光光度法高效液相色谱法吸收系数法吸收系数法参考文献：参考文献：1、徐新军，谭奥，徐明辉。内标法在液相色谱应用中的局限性。中国药事，、徐新军，谭奥，徐明辉。内标法在液相色谱应用中的局限性。中国药事， 1998，(6)25亚硝酸钠滴定法醋氨苯砜、醋氨苯砜注射液非水溶液滴定法盐酸布比卡因：弱碱性非水碱量法：冰醋酸中，碱性增强醋酐：解离生成的醋酐合乙酰氧离子，酸性更强盐酸丁哌卡因26目目 录录酰胺类药物1苯磺酰胺类药物苯磺酰胺类药物227一、基本结构与分类一、基本结构与分类磺胺类磺酰胺类磺酰脲类RHNSOONH2对氨基苯磺酰胺
16、母核未取代的苯磺酰胺和大多取代的芳伯胺基苯磺酰胺基被脲基取代28磺胺类药物小故事磺胺类药物小故事阴性结果1932年百浪多息Prontosil百浪多息Prontosil感染了链球菌在试管试验中没有抗菌作用的桔红色化合物灌给已感染的小白鼠 用了“百浪多息”，使本来束手无策的链球菌败血症死亡率降低到15（降幅达85%）！美国总统的儿子由于病菌感染而奄奄一息，“百浪多息”挽救了他的生命！ 29百浪多息百浪多息n关于关于“百浪多息百浪多息”的作用机理，巴斯德研究所的特雷的作用机理，巴斯德研究所的特雷夫埃夫妇及其同事的研究结果是：夫埃夫妇及其同事的研究结果是：“百浪多息百浪多息”在体在体内能分解出对氨苯磺
17、胺，它在化学结构上和细菌生长内能分解出对氨苯磺胺，它在化学结构上和细菌生长繁殖所必需的对氨基苯甲酸十分相似，被细菌吸收，繁殖所必需的对氨基苯甲酸十分相似，被细菌吸收，却起不到应有的作用，从而抑制细菌繁殖。却起不到应有的作用，从而抑制细菌繁殖。n1939年，多马克与赫格勒合写了专著年，多马克与赫格勒合写了专著细菌感染的细菌感染的化学治疗化学治疗。同年，他获得了诺贝尔生理学和医学奖。同年，他获得了诺贝尔生理学和医学奖。但希特勒禁止德国人接受诺贝尔奖，直到第二次世。但希特勒禁止德国人接受诺贝尔奖，直到第二次世界大战之后，多马克才于界大战之后，多马克才于1947年赴斯德哥尔摩补领年赴斯德哥尔摩补领奖章
18、和奖状。奖章和奖状。30一、理化性质与鉴别试验一、理化性质与鉴别试验两性 NH2 芳伯氨基的反应 芳香第一胺类反应 与芳醛缩合反应希夫碱希夫碱31与金属离子反应绿色沉淀绿色沉淀32与金属离子反应药品名称药品名称溶剂溶剂与硫酸铜反应的结果与硫酸铜反应的结果磺胺甲噁唑磺胺甲噁唑水和0.4%氢氧化钠溶液（1 : 1）草绿色磺胺多辛磺胺多辛水和0.1 mol/L氢氧化钠溶液（1 : 1）黄绿色，放置后变为淡蓝色磺胺异噁唑磺胺异噁唑水和0.1 mol/L氢氧化钠溶液（1 : 1）淡棕色，放置后析出暗绿色絮状磺胺嘧啶磺胺嘧啶水和0.4%氢氧化钠溶液（1 : 1）黄绿色，放置后变为紫色磺胺嘧啶软膏磺胺嘧啶软
19、膏水和0.4%氢氧化钠溶液（1 : 1）青绿色，放置后变为紫灰色磺胺嘧啶锌磺胺嘧啶锌水和0.4%氢氧化钠溶液（1 : 1）黄绿色，放置后变为紫色磺胺醋酰钠磺胺醋酰钠水蓝绿色磺胺醋酰钠钠滴眼液磺胺醋酰钠钠滴眼液水蓝绿色，放置后颜色不变复方磺胺嘧啶片复方磺胺嘧啶片水和0.4%氢氧化钠溶液（1 : 1）青绿色，放置后变为紫灰色呋塞米呋塞米水和氢氧化钠试液绿色33测定熔点分解反应硫、氟和氯的鉴别甲苯磺丁脲甲苯磺丁脲磺酰脲磺酰脲34紫外分光光度法光谱法药品名称药品名称溶剂溶剂max / nmmin / nm苄氟噻嗪苄氟噻嗪0.01 mol/L氢氧化钠溶液274、329 呋塞米呋塞米0.4%氢氧化钠溶液2
20、28、271、333 氢氯噻嗪氢氯噻嗪0.01 mol/L氢氧化钠溶液273、323 氯噻酮氯噻酮乙醇275、284 甲苯磺丁脲甲苯磺丁脲甲醇229 475500格列本脲格列本脲乙醇274、300272、278 格列吡嗪格列吡嗪甲醇226、274 氯磺丙脲氯磺丙脲0.01 mol/L盐酸溶液232 35红外分光光度法光谱法36三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查酸度碱性溶液的澄清度与颜色芳香第一胺精制过程中引入醋酸精制过程中引入醋酸芳伯氨基被氧化生成偶氮苯，碱芳伯氨基被氧化生成偶氮苯，碱性溶液中呈色性溶液中呈色微量铁离子、钙离子影响澄清度微量铁离子、钙离子影响澄清度37四、含量测定四、含量测定亚硝
21、酸钠滴定法酸碱滴定法紫外分光光度法高效液相色谱法磺酰氨基上氮原子呈酸性二甲基甲酰胺，甲醇钠38酸碱滴定法直接酸碱滴定法溶于乙醇等介电常数较小的溶剂中以氢氧化钠滴定液直接滴定非水溶液滴定法苄氟噻嗪的酸性较弱磺胺异噁唑不与亚硝酸钠按定量关系反应采用非水酸量法39思考题思考题1、磺胺类药物为何逐渐淡出用药？、磺胺类药物为何逐渐淡出用药？2、含羰基类药物为何不能与含氮类药物合并？、含羰基类药物为何不能与含氮类药物合并？40重点部分重点部分1、酰、酰胺类、苯磺酰胺类药物的结构、性质及其胺类、苯磺酰胺类药物的结构、性质及其与分析方法间的关系；与分析方法间的关系；2、芳、芳香第一胺类鉴别反应的原理和方法；香第一胺类鉴别反应的原理和方法；3、亚、亚硝酸钠滴定法的原理、主要测定条件、重硝酸钠滴定法的原理、主要测定条件、重点知识方法及注意事项。点知识方法及注意事项。
