1、第二章 药品质量控制与药物分析方法验证药物分析学药物分析学 总论总论目 录第一节 药典1第一节 药物分析误差控制与数据处理2第三节 药物质量标准分析方法验证3第四节 药品质量标准中的常用术语4第一节 药 典第二章第二章 药品质量控制与药物分析方法验证药品质量控制与药物分析方法验证学习要求掌握药典的性质，中国药典的结构与内容；中国药典的沿革及主要外国药典的概况1.中国药典的沿革及主要外国药典的概况2.ICH的协调内容熟悉了解第一节第一节 药药 典典药典是国家监督管理药品质量的法定技术的标准，它和其他法令一样具有法定的约束力。药典是药品的生产、营销、行政和技术监督管理部门共同遵循的法定技术依据美国
2、药典United State Pharmacopeia，USP英国药典British Pharmacopoeia，BP国际药典The International Pharmacopoeia，Ph. Int欧洲药典European Pharmacopoeia，EP日本药局方Japanese Pharmacopoeia，JPPharmacopeia药典第一节第一节 药药 典典第一节第一节 药药 典典一、一、 药典药典p 记载药品质量标准的法典记载药品质量标准的法典p 国家监督、管理药品质量法定技术标准国家监督、管理药品质量法定技术标准p 具有法律的约束力具有法律的约束力 二、药品质量标准二、药品质
3、量标准: : 国家对药品质量及检验方法所作的技术国家对药品质量及检验方法所作的技术规定规定。 药品生产、经营、使用、检验和监督管药品生产、经营、使用、检验和监督管理部门共同遵循的法定依据理部门共同遵循的法定依据。二、中国药典的进展中国药典Chinese Pharmacopoeia Ch.P1953、1963、1977、1985、1990、1995、 2000 、 2005、2010年版 共九版从1963年版起分为一部、二部从1985年版起每五年出版一次从2005年版起分为一部、二部、三部v收载品种有较大幅度增加；v现代分析技术得到进一步扩大应用；v药品的安全保障得到进一步加强；v对药品质量可控
4、性、有效性的技术保障得到进一步提升；v药品标准内容更趋科学、规范、合理；v鼓励技术创新、积极参与国际协调。20102010年版年版中国药典中国药典v中国药典配套出版了药品红外光谱集、临床用药须知、中药材显微鉴别彩色图鉴及中药材薄层色谱彩色图集。20102010年版年版中国药典中国药典中药材、中药成方制剂（一部）中药材、中药成方制剂（一部）化学和生化药品、抗生素、化学和生化药品、抗生素、放射性药品、药用辅料（二部）放射性药品、药用辅料（二部）生化药品（三部）生化药品（三部）药典内容药典内容凡凡 例例正正 文文索索 引引解释、使用药典基本原则解释、使用药典基本原则规定正文、附录共性问题规定正文、附
5、录共性问题药品质量标准药品质量标准制剂质量标准制剂质量标准中文索引中文索引英文索引英文索引生物制品质量标准生物制品质量标准附附 录录通用检测方法通用检测方法指导原则指导原则制剂通则制剂通则凡例分类项目凡例分类项目 名称名称 ：p 中国药品通用名称中国药品通用名称p 国际非专利药品国际非专利药品(International Nonproprietaryp Names for Pharmaceutical Substances，INN)p p 有机化学命名原则有机化学命名原则，母体的选定应与，母体的选定应与CA 一致。一致。p 化学结构式按世界卫生组织推荐化学结构式按世界卫生组织推荐 “药品化学结
6、构药品化学结构式式p 书写指南书写指南”书写。书写。 p 试验中供试品与试药等试验中供试品与试药等“称重称重”或或“量取量取”的量，的量，以阿拉伯数字表示以阿拉伯数字表示, 精确度根据数值的有效数位来精确度根据数值的有效数位来确定确定 。p 精密称定精密称定: 称取重量准确至所取重量千分之一称取重量准确至所取重量千分之一p 称定称定: 称取重量应准确至所取重量的百分之一称取重量应准确至所取重量的百分之一p 取用量为取用量为“约约”: 所取量不得超过规定量所取量不得超过规定量10%精精 确确 度度药典规定取样量的准确度和试验精密度正文编排和内容正文编排和内容p 正文收载药品或制剂的质量标准正文收
7、载药品或制剂的质量标准,按中文药品名称笔画顺序按中文药品名称笔画顺序编排，单方制剂排在原料药后面；生物制品集中排列。编排，单方制剂排在原料药后面；生物制品集中排列。 p 每一品种项含：每一品种项含： 品名（包括中文名，汉语拼音名与英文名）品名（包括中文名，汉语拼音名与英文名） 有机药物的结构式；分子式与分子量；有机药物的结构式；分子式与分子量； 来源或有机药物的化学名称；含量或效价规定；来源或有机药物的化学名称；含量或效价规定； 处方；制法；性状；鉴别；检查；处方；制法；性状；鉴别；检查； 含量或效价测定；类别；规格；贮藏；含量或效价测定；类别；规格；贮藏； 制剂制剂 制制 剂剂 通通 则则生
8、物制品通则生物制品通则通用检测方法通用检测方法指导原则指导原则一、美国药典第五节 主要国外药典简介美国药典（The United States Pharmacopoeia， USP ）和美国国家处方集（The National Formulary，NF）合并出版，缩写为USP-NF。自2002年起每年修订出版1次，并同时发行光盘版。 最新版为USP36-NF31版（2013年5月1日实施）。v美国国家药典委员会官方网站：http:/www.usp.orgUSP-NF中的法定内容为：v凡例（General Notices)；v正文（Individual monographs) ；v附录方法（Ge
9、neral Tests and Assays Chapters）。一、美国药典包含关于药物、剂型、原料药、辅料、医疗器械和食物补充剂的标准。 vUSP标准正文包括：（1）有效成分或制剂的药品名称及其化学结构特征；（2）成分及含量限度要求；（3）包装、贮藏和标签等要求；（4）USP标准物质；（5）质量指标和限度规定等内容。一、美国药典v美国药典配套出版物（1）色谱试剂（2）药剂师药典：提供配方相关的简明标准和法定信息；（3）美国药品通用名称和国际药品名称字典（4）美国药典产品目录一、美国药典二、英国药典v英国药典（British Pharmacopoeia ，BP ）收载英国药物原料、制剂和其他
10、医药产品的法定标准。v现行版为BP（2013）,BP2013版共6卷。v英国药典官方网站：http:/www.pharmacopoeia.org.uk/三、欧洲药典v欧洲药典（European Pharmacopoeia ，Ph.Eur.或EP ）由欧洲药品质量管理局（EDQM)起草和出版，在欧盟范围内具有法律效力的标准。v现行版为EP 第7版，已于2011年1月生效。v欧洲药典官方网站：http:/www.edqm.eu/三、欧洲药典v第1卷收载：凡例、附录方法、制剂通则、知道原则等。除人用药和兽用疫苗、免疫制剂、放射性药物、天然药物等生物制品外，EP不收载制剂标准。v第2卷收载：药品标准。
11、主要收载原料药物标准。四、日本药局方v日本药局方（Japanese Pharmacopoeia,JP）由日本药典委员会编制，日本厚生劳动省颁布实施。v现行版为第十五改正版（JP15),自2006年4月1日起实施。五、国际药典v国际药典（International Pharmacopoeia,Ph.Int.）由世界卫生组织（WHO)国家药典和药物制剂专家咨询组编撰，收载药物原料、药用辅料、药物制剂、标准物质的标准，以及它们的分析检验方法等内容，由世界卫生大会批准出版v现行版为第4版。三、药品质量控制l为了有效地实施药品质量的全面管理，许多国家都制定了科学的管理规范和条例。l全面控制药品质量的基础
12、是良好的管理规范，我国已先后制定了一系列对药品质量控制起指导作用的法令性文件。l世界医药发达国家建立了国际协调机构，即“人用药品注册技术要求国际协调会”（International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use，ICH）。1. 中国的法令性文件（5P）l药物非临床研究质量管理规范（Good Laboratory Practice，GLP）。l药物临床试验质量管理规范（Good Clinical Practice，GCP
13、）。l药品生产质量管理规范（Good Manufacture Practice，GMP）。l药品经营质量管理规范（Good Supply Practice，GSP）l中药材生产质量管理规范（Good Agriculture Practice，GAP）药品非临床研究质量管理规范（药品非临床研究质量管理规范（GLPGLP）v非临床研究指为了评价药品安全性，在实验条件下，用实验系统进行的各种毒性试验。v实验系统指用于毒性试验的动物、植物、微生物和细胞等 GLP指药品非临床安全性评价研究机构的组织管理体系、人员、实验设施、仪器设备、操作规程、研究工作的实施与管理而制定的法规性文件药品临床试验质量管理规
14、范（药品临床试验质量管理规范（GCPGCP）v临床试验指任何在人体（病人或健康受试者）进行药物的系统研究，包括药物的作用、不良反应、药物的吸收、分布、代谢和排泄，目的是确定实验药物的疗效与安全性。 GCP是临床试验全过程的标准规定，包括方案设计、组织、实施、监查、稽查、记录、分析总结和报告 选择临床试验方法必须符合科学和伦理要求药品生产质量管理规范（药品生产质量管理规范（GMPGMP）vGMP是药品生产质量管理的基本准则。vGMP要求企业应建立药品质量管理体系，该体系包括影响药品质量的所有因素，对药品生产全过程进行实行监督管理。v重视事先控制，减少药品生产过程中的污染和交叉污染，力求消除生产不
15、合格产品的隐患。药品经营质量管理规范（药品经营质量管理规范（GSPGSP）vGSP要求药品经营企业应在药品的购进、储运和销售等环节实行质量管理，建立包括组织结构、职责制度、过程管理和设施设备等方面的质量体系，并使之有效运行。vGSP是药品经营质量管理的基本准则。中药材生产质量管理规范（试行）（中药材生产质量管理规范（试行）（GAPGAP）v是为规范中药材生产，保证中药材质量，促进中药标准化、现代化而制定的。vGAP是中药材生产和质量管理的基本准则，适用于中药材生产企业生产中药材的全过程。vGAP对中药材生产的产地生态环境、种质和繁殖材料、栽培与养殖管理、采收与初加工、包装运输与贮藏、人员和设备
16、等提出了明确的质量管理要求。质量设计质量设计Quality by Design过程控制Quality by Process终端检验Quality byTest保证用药安全保证用药安全实行药品认证制度2. 标准操作规程与质量控制l标准操作规程（SOP），在药品的研究、生产、供应等各个环节的每项具体操作均应建立相应的SOP。l质量控制（QC），在实施各项实验操作SOP的同时，实验操作过程的QC已成为实验室科学管理的重要内容，也是实验室提供准确可靠数据的重要保证。图图1-2-1 实验室内部实验室内部QC示意图示意图（二）人用药品注册技术要求国际协调会（二）人用药品注册技术要求国际协调会v由欧盟、美国
17、和日本三方的药品注册管理当局和制药企业协会在1990年发起了“人用药品注册技术要求国际协调会”（ICH)。vICH的目的是通过协调一致，使三方在药品注册技术要求上取得共识；为药品研发、审批和上市制定统一的国际性技术指导原则；更好地利用资源、避免重复、减少浪费，加快新药在世界范围内的开发使用。 3. 人用药品注册技术要求国际协调会（ICH）目的：由欧盟、美国和日本三方药品管理当局及三方制药企业管理机构发起并建立了ICH。内容：ICH专家工作组协调的专题共分四个类别：质量（Quality，包括稳定性、验证、杂质、规格等），以“Q”表示，现已制定25个文件；安全性（Safety，包括药理、毒理、药物
18、动力学等试验），以“S”表示，现已制定15个文件；有效性（Efficacy，包括临床试验中的设计、研究报告、GCP等），以“E”表示，现已制定22个文件；综合学科（Multidisciplinary，包括术语、管理、通讯等），以“M”表示，现已制定8个文件。课外阅读v阅读中国药典（2010年版）凡例v上网查阅美国药典、英国药典“双氯芬酸钠”并和中国药典该品种比较第二节 误差控制与数据处理第二章第二章 药品质量控制与药物分析方法验证药品质量控制与药物分析方法验证学习要求掌握l误差产生的原因与减免方法l有效数字的修约规则误差及偏差的表示与计算方法，不确定度的概念，可疑数据的取舍方法熟悉第二节第二节
19、 误差控制与数据处理误差控制与数据处理一、 误差与误差控制l分析误差（analytical error），简称误差：测量值（observation），与被测定药物的真实值（简称为真值）之间的的偏离（bias）。l误差是测量值与真值之差，反映分析结果与真值的接近程度，是衡量一个分析方法的准确度（accuracy）的指标。1. 误差系统误差l系统误差（systematic error）、可定误差（determinate error），有固定的方向（正或负）和大小；l系统误差是由确定的因素引起的，可通过对分析系统进行校正加以消除。l系统误差分为方法误差、试剂误差、仪器误差及操作误差。l偶然误差（ac
20、cidental error）、不可定误差（indeterminate error）、随机误差（random error），l由分析条件或环境条件的改变等偶然的因素引起的。l偶然误差的产生具有偶然性，其方向或大小均不固定。l偶然误差符合统计学规律：正负误差出现的概率大致相等，往往能部分甚至完全抵消；l该类误差不能通过校正的方法加以消除，但可通过多次平行测定，以平均值作为分析结果来减小该类误差；l也可根据统计学规律估算其大小，并在结果中予以正确表述。偶然误差1. 误差绝对误差l绝对误差（absolute error），即误差，是指测量值与真值之差。因为测量值与真值的单位相同，所以绝对误差的单位与
21、测量值和真值的相同；绝对误差具有方向性，可以是正值，也可以是负值l = x - l相对误差（relative error）是指绝对误差与真值的比值，即误差率。因为绝对误差的单位与真值的单位相同，所以相对误差没有单位。相对误差x真值绝对误差2. 偏差l偏差（deviation，d）是指一组测量值中各测量值与该组测量值的平均值之差。它反映一组测量值之间彼此符合的程度（或离散程度），是衡量分析方法的精密度（precision）的指标。偏差越大，精密度越低。xxdi平均偏差（mean deviation） nxxdnii1相对平均偏差（relative mean deviation） %100%100
22、%10011xnxxxnxxxdRDniinii标准偏差（standard deviation） 112nxxsnii相对标准偏差（relative standard deviation，RSD） %1001100%12xnxxxsRSDnii3. 误差的控制的方法1选用合适的分析方法2. 减少测量过程的误差3. 验证并消除系统误差（回收试验、校准仪器、对照试验）4.平行试验二、不确定度l测量不确定度（measurement uncertainty）、不确定度（uncertainty），是表征合理地赋予被测量值的分散性，与测量结果相联系的参数。如标准测量不确定度的标准偏差，或是说明了包含概率的
23、区间半宽度。l测量不确定度一般包括很多分量。l一些分量是由测量序列结果的统计学分布得出的，可表示为标准偏差。l另一些分量是由根据经验和其他信息确定的概率分布得出的，也可以用标准偏差表示。l国际：1993年，国际标准化组织（International Organization for Standardization，ISO）发布了“测量不确定度表述指南”（Guide to the Expression of Uncertainty in Measurement），即GUM，l中国：JJF l059-1999测量不确定度评定与表示，并于2011年发布了修订版本JJF 1059.1-2011不确定度
24、与误差不确定度l不确定度是以一个区间的形式表示，l如果是为一个分析过程和所规定样品类型做评估时，可适用于其所描述的所有测量值。l一般不能用不确定度数值来修正测量结果。l误差是被测量的单个结果和真值之差，是一个单个数值。l原则上已知误差的数值可以用来修正结果，但实际上误差是一个理想的概念，不可能被确切地知道。误差不确定度确定的步骤第一步：分析不确定度来源和建立测量模型；第二步：评定标准不确定度分量；第三步：计算合成标准不确定度；第四步：确定扩展不确定度。三、测量数据的统计处理(一) 平均值的标准偏差：样本均值的标准偏差（ ）与测量次数的平方根成反比，n次测量所获得的平均值的标准偏差是每一次测量值
25、的标准偏差（ ）的 。 在实际分析工作中，一般平行测定23次即可；而在进行方法学验证时，要求测定56次。nsSxxxSxsn1三、测量数据的统计处理(二) 平均值的置信区间：三、测量数据的统计处理(三) 可疑数据的取舍：l在一组测量值中有时会出现个别过高或过低的测量值，称为可疑数据，在统计学上称为逸出值（outliers，也称异常值或离群值）。 l对于可疑数据可采用以下做法： 重复相应部分的实验操作，以求得替代的数据； 用统计学方法评估可疑数据的来源，并决定取舍； 舍弃可疑值，或在舍弃可疑值后以相邻数据替代。四、有效数字的修约(一) 有效数字：用于表示测量值的一组数字（其前面无其他数字的0除外
26、）称为有效数字，它是由数位准确数字和最后一位欠准数字构成。四、有效数字的修约(一) 数字的修约规则：1四舍六入五留双（或尾留双）2不允许连续修约3中间数字可多保留一位有效数字4表示不确定度的数字修约结果应使不确定度增加第三节 药物质量标准分析方法验证第二章第二章 药品质量控制与药物分析方法验证药品质量控制与药物分析方法验证学习要求掌握分析方法验证生物样品定量分析方法验证的内容与要求熟悉第三节第三节 药物质量标准分析方法验证药物质量标准分析方法验证(一) 分析方案验证的目的：为了保证分析结果的准确、可靠，必须采用特征参数（characteristics）对分析方法的科学性、准确性和可行性进行验证
27、（validation）。证明采用的方法适合于相应检测要求(二) 验证的指导原则：EMEA、FDA、CFDA。(三）验证的分析项目l鉴别试验、l杂质定量检查或限度检查、l原料药或制剂中有效成分含量测定，l制剂中其他成分(如防腐剂等，中药中如残留物、添加剂等）的测定。l药品溶出度、释放度等检査中，其溶出量等的测试方法等第三节第三节 药物质量标准分析方法验证药物质量标准分析方法验证(四) 验证指标：准确度精密度专属性检测限定量限线性范围耐用性。第三节第三节 药物质量标准分析方法验证药物质量标准分析方法验证表表1-2-3 1-2-3 分析方法的典型验证参数分析方法的典型验证参数Tab.1-2-3 T
28、ypical validation characteristics for Tab.1-2-3 Typical validation characteristics for analytical proceduresanalytical procedures 项目内容鉴别杂质测定含量测定及溶出量测定校正因子定量限度准确度-+-+精密度重复性-+-+中间精密度-+-+专属性+检测限-+-定量限-+-+线性-+-+范围-+-+耐用性+注：已有重现性验证，不需验证中间精密度；如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充；视具体情况予以验证。一、一、 药品质量标准中分析方法验证参数药品质量标准中分析方
29、法验证参数1.1.专属性（专属性（specificityspecificity）定义：定义：在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的方法能正确测定出被测物的可能存在下，采用的方法能正确测定出被测物的特性特性意义：意义：分析复杂样品混合物时衡量其是否分析复杂样品混合物时衡量其是否受到受到干扰程度干扰程度的一种方法。的一种方法。鉴别反应、杂质检査和含量测定方法。鉴别反应、杂质检査和含量测定方法。1.1.专属性（专属性（specificityspecificity）鉴别反应应能与可能共存的物质或结构相似化合物区分。1. 1. 专属性（专属性（sp
30、ecificityspecificity）含量测定和杂质测定1、杂质可获得的情况：含量测定：试样中可加入杂质或辅料，考察测定结果是否收到干扰，并可与未加杂质和辅料的试样比较测定结果。杂质测定：试样中加入一定量的杂质，考察杂质之间能否得到分离。1. 1. 专属性（专属性（specificityspecificity）含量测定和杂质测定1、杂质不可获得的情况：可将含有杂质或降解产物的试样进行测定，与另一个经验证了的方法或药典方法比较结果；用强光照射、高温、高湿、酸（碱）水解或氧化的方法进行加速破坏，以研究可能的降解产物及其降解途径。2. 2. 准确度准确度定义：指用该方法测定的结果与真实值（tru
31、e value）或参考值（reference value）接近的程度（closeness of agreement），一般用回收率（recovery，%）表示。可用已知纯度的对照品或供试品进行测定，或可用已知纯度的对照品或供试品进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定的结果进行比较定的结果进行比较R = 测得量测得量加入量加入量100%原料药的含量测定原料药的含量测定2. 2. 准确度准确度可在处方量辅料存在下，用含已知量被测物的可在处方量辅料存在下，用含已知量被测物的各组分混合物进行测定。如不能得到制剂辅料各组分混合物进行测定。如不能得到
32、制剂辅料的全部组分，可向实际制剂中加入已知量的被的全部组分，可向实际制剂中加入已知量的被测物进行测定，或用本法所得结果与已知准确测物进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定结果进行比较。度的另一个方法测定结果进行比较。R = 测得量测得量加入量加入量100%制剂的含量测定制剂的含量测定2. 2. 准确度准确度（1）回收试验法 空白B+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M。R = 测得量测得量加入量加入量100%考察辅料对回收率是否有影响。制剂的含量测定制剂的含量测定2. 2. 准确度准确度（2）加样回收试验 已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定
33、，测定值为M。R = 测得量测得量-本底量本底量加入量加入量100%MPR100%A2. 2. 准确度准确度3、数据要求 规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液，进行测定。一般要求分别配制浓度为80%、100%和120%的供试品溶液各3份。RSD2%（1）原料药、制剂）原料药、制剂 UVUV、 HPLCHPLC：R= 98 102% 容量法：容量法：R = 99.7100.3% （2）中药及其制剂）中药及其制剂95105%90110%RSD5%RSD3%定义：指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。精密度
34、一般用偏差d、标准偏差s或相对标准偏差RSD表示。3. 精密度精密度表示方法表示方法： 偏差（偏差（d d）：）： 标准偏差标准偏差(SD):(SD): 相对标准偏差相对标准偏差(RSD):(RSD):idxx2ixxSn1SRSD100%x验证内容验证内容（1）重复性：在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性（repeatability）；3. 精密度精密度（1）重复性：测定法：在规定范围内，分别取同一供试品（相当于100%浓度水平），依法操作，用至少测定6次的结果进行评价；或设计3个不同浓度（相当于80、100、120%浓度水平），每个浓度分别制备3份供试品溶液进行测定
35、，用9个测定结果进行评价。3. 精密度精密度（2） 中间精密度在同一个实验室， 不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果之间的精密度，称为中间精密度（intermediate precision）3. 精密度精密度为考察随机变动因素对精密度的影响，应进行中间精密度试验。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备。（3）重现性在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的精密度，称为重现性（reproducibility）。法定标准采用的分析方法，应进行重现性试验。例如，建立药典分析方法时，通过协同检验得出重现性结果。应注意重现性试验用的样品本身的质量均匀性和贮存运输中的环境影响因素，以免影响重现性结
36、果。3. 精密度精密度4. 4. 检测限检测限定义：定义：检测限（检测限（limit of detectionlimit of detection，LODLOD或或detection limitdetection limit，DLDL）系指在实际样品基质）系指在实际样品基质中，试样中被测物能被检测出的最低量。中，试样中被测物能被检测出的最低量。意义：意义：LOD 是一种限度检验的效能指标是一种限度检验的效能指标,它反映它反映方法与仪器的灵敏度和噪音大小，也表明样品方法与仪器的灵敏度和噪音大小，也表明样品经处理后空白值的高低，即是否具备足够的灵经处理后空白值的高低，即是否具备足够的灵敏度。敏度。
37、4. 4. 检测限检测限方法：方法：1. 直观法在实际样品基质中，用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。2. 信噪比法用于能显示基线噪声的分析方法，即在实际样品基质中，将已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，获得能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比为3:1或2:1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。3. 基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法DL=3.3/S （：响应值的偏差；S：标准曲线的斜率） 可以通过一系列方法测得，如：（1）测定空白值的标准偏差；（2）标准曲线的剩余标准偏差或是截距的标准偏差来代替5. 5. 定量限定量限（1imit of qua
38、ntitation1imit of quantitation，LOQLOQ） 定义：定量限（limit of quantitation，LOQ或quantitation limit，QL）系指在实际样品基质中，试样中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。LOQ体现分析方法是否具备灵敏的定量检测能力。杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定LOQ。 5. 5. 定量限定量限（1imit of quantitation1imit of quantitation，LOQLOQ） 方法：1. 直观法在实际样品基质中，用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。2
39、. 信噪比法用于能显示基线噪声的分析方法，即在实际样品基质中，将已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，获得能被可靠地定量的最低浓度或量。一般以信噪比为10:1时相应浓度或注入仪器的量确定定量限。3. 基于响应值标准偏差和标准曲线斜率法QL=10/S （：响应值的偏差；S：标准曲线的斜率） 可以通过一系列方法测得，如：（1）测定空白值的标准偏差；（2）标准曲线的剩余标准偏差或是截距的标准偏差来代替。 6. 6. 线性与范围线性与范围线性（linearity）系指在实验范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈比例关系的程度。范围（range）系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试
40、方法适用的高低限浓度或量的区间。范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求确定。定义：定义：指测定条件稍有变动时，结果不受 影响的承受程度。7. 7. 耐用性耐用性意义：为常规检验提供依据，是衡量实验 室和工作人员之间在正常情况下实 验结果重现性的尺度。v典型的变动因素有：被测溶液的稳定性，样品提取次数、时间等。vHPLC法中典型的变动因素有：流动相的组成和pH，不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱，柱温，流速等。vGC法变动因素有：色谱柱、固定相，不同类型的担体，柱温，进样口和检测器温度等。7. 7. 耐用性耐用性二、二、 生物样品中药物定量分析方法验证生物样品中药物定量分析方
41、法验证1完全验证完全验证 完全验证（Full Validation）适用于首次建立和付诸实施的生物样品分析方法。如果需要采用现有方法对代谢产物进行定量分析，那么对改进后的测定方法进行完全验证也是非常重要的。（一）分析方法的验证类型（一）分析方法的验证类型2部分验证部分验证部分验证（Partial Validation）是对已通过验证的生物样品分析方法的修改部分进行验证，其验证的范围应根据修改的内容确定。典型的分析方法的修改包括但不仅限于以下范围：(1) 同一个生物样品分析方法在实验室之间和分析人员之间的转移；(2) 获取生物样本时抗凝剂的改变；(3) 同种属内生物样品种类的改变（如：人血浆与人
42、尿液）；(4) 生物样品处理方法的改变；(5) 相同生物样品但种属的改变（如：大鼠血浆与小鼠血浆）；(6) 有关浓度范围的改变；(7) 仪器系统和/或软件系统的改变；(8) 在特定的代谢产物存在下待测物选择性的证明。（一）分析方法的验证类型（一）分析方法的验证类型3交叉验证交叉验证交叉验证（Cross-Validation) 是指采用两种或两种以上方法用于相同研究或不同研究的测定数据时，对验证参数进行的比较验证。例如：将一种已通过验证的原始分析方法作为参考，对修改后的分析方法进行比较验证。（一）分析方法的验证类型（一）分析方法的验证类型对照标准物质的制备；生物样品分析方法的研究和测定方法的建立
43、；将已通过验证的分析方法应用于常规生物样品的分析。（二）分析方法的研究与验证过程（二）分析方法的研究与验证过程专属性或选择性；基质效应；精密度、准确度和提取回收率；标准曲线和灵敏度；生物样品中待测组分的稳定性考察。其中，方法的灵敏度指标分为定性检测指标，即检测下限（lower limit of detection, LLOD）和定量测定指标，即定量下限（lower limit of quantitation, LLOQ）。同时引入分析方法线性范围的最高浓度作为定量上限（upper limit of quantitation, ULOQ）（二）分析方法的验证内容（二）分析方法的验证内容效能指标的
44、选择效能指标的选择精密度精密度 准确度准确度 检测限检测限 定量限定量限 专属性专属性 线性线性 范围范围 耐用性耐用性 鉴别试验：鉴别试验： 杂质含量测定：杂质含量测定： 溶出度和药物释放度：溶出度和药物释放度： 生物样品含量测定：生物样品含量测定： 杂质限度检查：杂质限度检查： 原料药主要成分含量测定：原料药主要成分含量测定： 制剂中主要成分含量测定：制剂中主要成分含量测定： 非定量分析定量分析微定量分析第四节 药品质量标准中的常用术语第二章第二章 药品质量控制与药物分析方法验证药品质量控制与药物分析方法验证学习要求掌握药品质量标准采用的计量单位、符号与专业术语。第四节第四节 药品质量标准
45、中的常用术语药品质量标准中的常用术语v 标准中规定的各种纯度和限度数值以及制剂的重（装）量差异，系包括上限和下限两个数值本身及中间数值。规定的这些数值不论是百分数还是绝对数字，其最后一位都是有效位。v 原料药的含量（%），除另有注明者外，均按重量计。如规定上限为100%以上时，系指用本药典规定的分析方法测定时可能达到的数值，它为药典规定的限度或允许偏差，并非真实含有量；如未规定上限时，系指不超过101.0%。 （一）含量限度的规定（一）含量限度的规定溶解度l溶解度是药品的一种物理性质，系指药品在各品种项下选用的部分溶剂及其在该溶剂中的溶解性能。除另有规定外，称取研成细粉的供试品或量取液体供试品
46、，置于252一定容量的溶剂中，每隔5min强力振摇30s；观察30min内的溶解情况，如无目视可见的溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解。物理常数l物理常数包括相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、吸收系数、碘值、皂化值和酸值等；其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也可反映药品的纯度，是评价药品质量的主要指标之一。 （二）性状项下的规定（二）性状项下的规定l制剂的规格系指制剂的标示量（labeled amount），即每一支、片或其他每一个单位制剂中含有主药的重量（或效价）或含量（%）或装量。如：l片剂（或胶囊剂）项下的“10 mg” 系指每片（或粒）中主药的标示量为10 mg；l注射液
47、项下的“1 ml : 10 mg” 系指每支注射液的装量为1ml，标示量为10 mg；l软膏剂项下的“10 g : 0.1 g” 系指每支软膏的装量为10 g，标示量为0.1 g。（三）制剂的规格（三）制剂的规格l “遮光”系指用不透光的容器包装，如棕色容器或黑纸包裹的无色透明、半透明容器；“密闭”系指将容器密闭，以防止尘土及异物进入；“密封”系指将容器密封以防止风化、吸潮、挥发或异物进入；“熔封”或“严封”系指将容器熔封或用适宜的材料严封，以防止空气与水分的侵入并防止污染。l “阴凉处”系指不超过20；“凉暗处”系指避光并不超过20；“冷处”系指为210；“常温”系指1030。（四）贮藏项下的规定（四）贮藏项下的规定药物分析参考书药物分析安登魁主编实用药物分析毕开顺主编现代药物分析选论安登魁主编药物分析及应用马广慈主编生物药物分析曾经泽主编体内药物分析姚彤炜主编中药制剂分析魏璐雪主编中药分析学王强主编课外泛读课外泛读v专业期刊1、药物分析杂志2、药学学报3、中国药学杂志4、中国药品标准v药品质量管理规范（GLP、GCP、GMP、GSP)课外泛读相关的网络资源.doc v请提问题
