1、一、实验目的一、实验目的 了解显微镜的基本构造和使用方法了解显微镜的基本构造和使用方法 掌握油镜的原理和使用方法掌握油镜的原理和使用方法 了解细菌的三种基本形态了解细菌的三种基本形态二、显微镜的基本构造二、显微镜的基本构造 显微镜的构造显微镜的构造机械装置机械装置光学系统光学系统镜座镜座载物台载物台镜臂镜臂标本夹和标本移动尺标本夹和标本移动尺粗调螺旋和细调螺旋粗调螺旋和细调螺旋聚光镜升降螺旋聚光镜升降螺旋接目镜接目镜接物镜及镜头转换器接物镜及镜头转换器聚光镜聚光镜虹彩光圈虹彩光圈电光源电光源普通光学显微镜基本构造1、增加照明亮度、增加照明亮度2、增加显微镜的分辨率、增加显微镜的分辨率三、实验原
2、理三、实验原理2NA 油镜使用的原理油镜使用的原理 油镜，即油浸物镜。当光油镜，即油浸物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使了视野的进光量，从而使物象更加清晰。物象更加清晰。 显微镜的放大倍数、分辨率和显微镜的放大倍数、分辨率和数值孔径数值孔径 1.
3、 放大倍数放大倍数=物镜放大倍数物镜放大倍数目镜放大倍数目镜放大倍数 2. 分辨率分辨率 ： 是表示显微镜辨析物体（两端）两点之是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力，可用公式表示为：间距离的能力，可用公式表示为： =0.61/ N.A 式中：式中： ：物镜分辨出物体两点间的最短距离。物镜分辨出物体两点间的最短距离。 ：可见光的波长（平均：可见光的波长（平均0.550.55 m) m) N.A: 数值孔径数值孔径 3. 数值孔径数值孔径(N.A)=nsin/2 其意为玻片和物镜之间其意为玻片和物镜之间的折射率（的折射率（n）乘以光线投射到物镜上的最大夹角（）乘以光线投射到物镜上的最大夹
4、角（a）的一半的正弦。的一半的正弦。四、实验器材四、实验器材1、细菌三态装片、细菌三态装片2、显微镜、显微镜3、香柏油、香柏油4、擦镜纸等、擦镜纸等五、操作步骤五、操作步骤1. 放置好显微镜放置好显微镜2. 调节光源调节光源3. 低倍镜观察低倍镜观察4. 高倍镜观察高倍镜观察5. 油镜观察油镜观察6. 清洁和还原显微镜清洁和还原显微镜1. 放置好显微镜放置好显微镜 置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为为34cm。镜检者姿势要端正。镜检者姿势要端正。 （取、放显微镜时应一手握住镜臂，一手托住底座，（取、放显微镜时应一手握住镜臂，一手托住底座，
5、使显微镜保持直立、平稳。切忌用单手拎提；且不论使使显微镜保持直立、平稳。切忌用单手拎提；且不论使用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察，以用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察，以减少眼睛疲劳，也便于边观察边绘图或纪减少眼睛疲劳，也便于边观察边绘图或纪录。录。2. 调节好光源调节好光源 接通电源，打开光源。接通电源，打开光源。3. 低倍镜的观察低倍镜的观察。将标本片放在载物台上，用标本夹夹住，调节标本移动。将标本片放在载物台上，用标本夹夹住，调节标本移动螺旋，使观察的目的物处于物镜的正下方。螺旋，使观察的目的物处于物镜的正下方。 调节粗调螺旋，使物镜（调节粗调螺旋，使物镜（1010
6、）与标本靠近，眼睛在测）与标本靠近，眼睛在测向注视物镜，防止物镜和载玻片相碰。向注视物镜，防止物镜和载玻片相碰。 张开双眼向目镜里观察，如果见到目的物，但不十分清张开双眼向目镜里观察，如果见到目的物，但不十分清楚，可用细准焦螺旋调节，至目的物清晰为止。楚，可用细准焦螺旋调节，至目的物清晰为止。 通过玻片夹推进器慢慢移动玻片，认真观察标本各部分，通过玻片夹推进器慢慢移动玻片，认真观察标本各部分，找到合适的目的物，仔细观察并记录所观察到的结果。找到合适的目的物，仔细观察并记录所观察到的结果。4.4.高倍镜的观察高倍镜的观察 使用高倍镜前，必须先用低倍镜观察，发现目的使用高倍镜前，必须先用低倍镜观察
7、，发现目的物后将它移至视野正中处。物后将它移至视野正中处。 旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片立旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片立即停止旋动，这说明原来低倍镜并没有调准，目即停止旋动，这说明原来低倍镜并没有调准，目的物并没有真正找到，必须用低倍镜重新调节。的物并没有真正找到，必须用低倍镜重新调节。如果高倍镜下观察目的物有点模糊，调节细准焦如果高倍镜下观察目的物有点模糊，调节细准焦螺旋，直到视野清晰。调节细准焦螺旋时要注意螺旋，直到视野清晰。调节细准焦螺旋时要注意旋转方向与载物台上升或下降的关系，防止镜头旋转方向与载物台上升或下降的关系，防止镜头与载玻片强力接触，损坏镜头或载玻片。
8、与载玻片强力接触，损坏镜头或载玻片。5.5.油镜的油镜的观察观察 如果用高倍镜目的物未能看清，可用油镜。先用低如果用高倍镜目的物未能看清，可用油镜。先用低倍镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野正中。倍镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野正中。 下降载物台，在载玻片上滴一滴香柏油，将油镜移下降载物台，在载玻片上滴一滴香柏油，将油镜移至正中，缓慢调节粗调螺旋使油镜头浸没在油中，至正中，缓慢调节粗调螺旋使油镜头浸没在油中，刚好贴近载玻片。然后再用细准焦螺旋微微向上调刚好贴近载玻片。然后再用细准焦螺旋微微向上调（切忌用粗准焦螺旋）即可。（切忌用粗准焦螺旋）即可。（应特别注意不要在升降载物台时用力过
9、猛，或者调（应特别注意不要在升降载物台时用力过猛，或者调焦时误将粗调节螺旋向反方向转动而损坏镜头及载焦时误将粗调节螺旋向反方向转动而损坏镜头及载玻片）玻片）6. 清洁显微镜和还原显微镜清洁显微镜和还原显微镜. 观察结束后，调节光源到最小再关掉电源观察结束后，调节光源到最小再关掉电源开关。调节粗调螺旋，使载物台下降到最开关。调节粗调螺旋，使载物台下降到最低，取下玻片。低，取下玻片。. 把油镜转离光轴，擦镜纸擦把油镜转离光轴，擦镜纸擦12次，去油，次，去油，用二甲苯滴湿的擦镜纸擦用二甲苯滴湿的擦镜纸擦2次，再用擦镜纸次，再用擦镜纸擦擦 12次，顺镜头直径方向擦，不要圆周次，顺镜头直径方向擦，不要圆
10、周擦和来回擦。擦和来回擦。擦干净镜体，罩上防尘罩，擦干净镜体，罩上防尘罩，然后放回原处。然后放回原处。. 用用擦油镜头的方法擦玻片。擦油镜头的方法擦玻片。 六、显微结构图的绘制 严格按光学显微镜的操作方法，依低倍、高倍及严格按光学显微镜的操作方法，依低倍、高倍及油镜的次序观察细菌示范片，并绘出其形态图。油镜的次序观察细菌示范片，并绘出其形态图。 生物绘图中绘出的图要清楚，并正确的表示出形生物绘图中绘出的图要清楚，并正确的表示出形态构造的特点，绘图注意事项如下：态构造的特点，绘图注意事项如下： (1) 绘图要用黑色硬铅笔，不要用软铅笔或有色铅绘图要用黑色硬铅笔，不要用软铅笔或有色铅笔，一般用笔，
11、一般用 2H 铅笔为宜。铅笔为宜。 (2) 图的大小及在纸上分布的位置要适当。一般画图的大小及在纸上分布的位置要适当。一般画在靠近中央稍偏左方，并向右方引出注明各部名在靠近中央稍偏左方，并向右方引出注明各部名称的线条。各引出线条要整齐平列，各部名称写称的线条。各引出线条要整齐平列，各部名称写在线条右边在线条右边 (3) 画图时先用轻淡小点或轻线条画出轮廓，再依画图时先用轻淡小点或轻线条画出轮廓，再依照轮廓一笔画出与物象相符的线条。线条要清晰，照轮廓一笔画出与物象相符的线条。线条要清晰，比例要准确。较长的线条要向顺手的方向运笔，比例要准确。较长的线条要向顺手的方向运笔，或把纸转动再画。同一线条粗
12、细相同，中间不要或把纸转动再画。同一线条粗细相同，中间不要有断线或开叉痕迹，线条也不要涂抹。有断线或开叉痕迹，线条也不要涂抹。 (4) 绘出的图要正确，观察时要把混杂物、破损、绘出的图要正确，观察时要把混杂物、破损、重叠等现象区别清楚，不要把这些现象绘上。重叠等现象区别清楚，不要把这些现象绘上。 (5) 图的明暗及浓淡，应用细点表示，不要采用涂图的明暗及浓淡，应用细点表示，不要采用涂抹方法。点细点时，要点成圆点，不要点成小撇。抹方法。点细点时，要点成圆点，不要点成小撇。 (6) 整个图要美观、整洁，还要特别注意准确性。整个图要美观、整洁，还要特别注意准确性。七、思考题1、使用油镜时，为什么要先用低倍镜观察？、使用油镜时，为什么要先用低倍镜观察？2、绘出细菌三态图。、绘出细菌三态图。八、实验报告格式一、实验项目名称一、实验项目名称二、实验目的二、实验目的三、实验基本原理三、实验基本原理四、主要仪器设备及耗材四、主要仪器设备及耗材五、实验步骤五、实验步骤六、实验数据及处理结果六、实验数据及处理结果七、思考讨论题或体会或对改进实验的建议七、思考讨论题或体会或对改进实验的建议
