糖类脂质蛋白质的鉴定实验.课件.ppt

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1、1实验原理实验原理某些化学试剂能够使生物组织中的有关有某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。机化合物产生特定的颜色反应。实验:检测生物组织中的糖类、实验:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质脂肪和蛋白质简记 “三特”:“特定的物质与特定的试剂反应产生特定的颜色”。物质物质试剂试剂颜色颜色还原糖还原糖斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀脂肪脂肪苏丹苏丹液液橘黄色橘黄色苏丹苏丹液液红色红色蛋白质蛋白质双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色淀粉淀粉碘液碘液蓝色蓝色(1)糖类糖类(2)脂肪苏丹脂肪苏丹染液染液橘黄色橘黄色脂肪苏丹脂肪苏丹染液染液红色红色(3)蛋白质双缩脲试剂蛋白质双缩脲试

2、剂紫色紫色(4)淀粉淀粉+碘液碘液蓝色蓝色 (二)目的要求 初步学会用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。 (三)实验仪器和试剂 (1)仪器:剪刀,解剖刀,双面刀片,试管,试管架,试管夹,大、小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精灯,三角架,石棉网,火柴,研钵,石英砂,纱布,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜。 (2)试剂:斐林试剂,苏丹染液,双缩脲试剂。验证性实验和探究性实验验证性实验和探究性实验(1)验证性实验:是指实验者针对已知的实验结果而进验证性实验:是指实验者针对已知的实验结果而进行的以验证实验结果、巩固和加强有关知识内容、培行的以验证实验结果、巩固和加强有关知识内容、培养实

3、验操作能力为目的的重复性实验。养实验操作能力为目的的重复性实验。(2)探究性实验:是指实验者在不知晓实验结果的前提探究性实验:是指实验者在不知晓实验结果的前提下,通过自己实验、探索、分析、研究得出结论,从下,通过自己实验、探索、分析、研究得出结论,从而形成科学概念的一种认识活动。而形成科学概念的一种认识活动。(3)验证性实验的实验结果通常是已知的,探究性实验验证性实验的实验结果通常是已知的,探究性实验的实验结果是未知的,这是两类实验的最大区别。的实验结果是未知的,这是两类实验的最大区别。(四)方法步骤 A还原性糖的鉴定 1选材:本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的

4、颜色较浅,或近于白色的,如苹果和梨的果实。经试验比较,颜色反应的明显程度,依次为苹果、梨、白萝卜。 2方法步骤: (1)制备生物组织样液先根据选材预测实验结果,然后再实验验证,因此先根据选材预测实验结果,然后再实验验证,因此本实验属验证性实验。本实验属验证性实验。 (2)实验操作的方法和观察 向试管内注入样液2 mL结论:可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生结论:可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明组织样液中有可溶性还原糖。成砖红色沉淀,说明组织样液中有可溶性还原糖。(2)脂肪的检测和观察脂肪的检测和观察方法一:花生种子匀浆方法一:花生种子匀浆3滴苏丹滴苏丹染液染液橘黄色

5、橘黄色方法二:方法二:取材:花生种子取材:花生种子(浸泡浸泡),将子叶削成薄片,将子叶削成薄片 1选材: 实验材料最好选择富含脂肪的种子,如花生种子(取其子叶)。供实验用的花生种子,必须提前浸泡34h。浸泡时间短了,不容易切成片;浸泡时间过长,则组织太软,切下的薄片不易成形。 2方法步骤: (1)制备生物组织实验材料(组织切片) (2)实验操作方法和观察 观察脂肪小颗粒:用显微镜观察薄片最薄处(最好一层细胞) (3)结论:该颗粒可被苏丹染液染成橘黄色,它是生物组织中的脂肪物质。从而鉴定花生种子(子叶)组织中有脂肪存在。 注意:花生子叶切片切得要薄(最薄处最好是一层细胞),因为切片较厚就观察不清

6、脂肪颗粒。特别提醒特别提醒实验用的花生种子需提前浸泡实验用的花生种子需提前浸泡34 h,浸泡时间,浸泡时间太短,不易切片;浸泡时间太长,则组织太软,太短,不易切片;浸泡时间太长,则组织太软,切下的薄片不易成形。切下的薄片不易成形。(3)蛋白质的检测和观察蛋白质的检测和观察选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液 1选材: 选材:实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官),植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋清或新鲜肝脏研磨液(因为里面富含酶,而酶的成份主要是蛋白质)。如用大豆,必须提前浸泡12d,这样容易研磨成浆。有条件的话,可以直接采用现成的大豆磨成的豆

7、浆,如果用稀释的鸡蛋清或研磨的新鲜肝脏液做实验材料,实验效果会更好。 2方法步骤: (1)制备生物组织样液 (2)实验操作方法和观察 向试管内注入组织样液2 mL(或蛋白稀释液2 mL) (3)结论:组织样液加入双缩脲试剂A后,颜色变化为无色,再加双缩脲试剂B后,颜色的变化是紫色。这说明组织样液中含有蛋白质。从而鉴定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的肝脏中有蛋白质。 注意:做鉴定蛋白质的实验时,在鉴定之前,要留出一些黄豆组织样液,以便用来与化学试剂发生反应后的颜色作对比,增强说服力。 若不用豆浆,用蛋白稀释液或新鲜肝脏提取液做实验材料,应稀释到一定程度,如果稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘

8、固在试管的内壁上,使反应不容易彻底,并且试管不易刷干净。斐林试剂双缩脲试剂甲液乙液A液B液成分0.1g/mL NaOH溶液0.05g/mL CuSO4溶液0.1g/mL NaOH溶液0.01g/mL CuSO4溶液鉴定物质还原糠蛋白质添加顺序甲乙两液等量混匀后立即使用先加入A液1mL,摇匀,再加入B液4滴,摇匀反应条件水浴5065加热不需加热,摇匀即可反应现象样液有砖红色沉淀产生样液变紫色 下列关于检测下列关于检测“生物组织中糖类、脂生物组织中糖类、脂肪、蛋白质肪、蛋白质”实验操作步骤的叙述中,正确实验操作步骤的叙述中,正确的是的是()A用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液,用于鉴定还原糖的斐林

9、试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定可直接用于蛋白质的鉴定B若要鉴定花生种子细胞中是否含有脂肪,若要鉴定花生种子细胞中是否含有脂肪,一定需要用显微镜观察一定需要用显微镜观察C鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂(甲液和乙液等量混合均匀再加入甲液和乙液等量混合均匀再加入)D用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,需水浴加用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,需水浴加热热2 min才能看到紫色才能看到紫色【思路点拨思路点拨】【尝试解答尝试解答】_【探规寻律探规寻律】斐林试剂和双缩脲试剂的比斐林试剂和双缩脲试剂的比较较(1)从成分方面比较,两种试剂都是由从成分方面比较,两种试剂都是由NaOH

10、溶液和溶液和CuSO4溶液组成的,但溶液组成的,但NaOH溶液浓溶液浓度相同,度相同,CuSO4溶液浓度不同;溶液浓度不同;(2)从试剂的使用方面比较,使用斐林试剂时,从试剂的使用方面比较,使用斐林试剂时,甲、乙两液等量混匀后立即使用。使用双缩甲、乙两液等量混匀后立即使用。使用双缩脲试剂时,先加入脲试剂时,先加入A液液1 mL,再加入,再加入B液液4滴,滴,摇匀;摇匀;C(3)从使用条件比较,斐林试剂与还原糖混合后从使用条件比较,斐林试剂与还原糖混合后需需50 65 水浴加热,而用双缩脲试剂鉴定水浴加热,而用双缩脲试剂鉴定蛋白质时不需要加热。蛋白质时不需要加热。跟踪训练跟踪训练检测生物组织中还

11、原糖、脂肪和检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的实验中,以下操作错误的是蛋白质的实验中,以下操作错误的是()A只有脂肪的鉴定需要使用显微镜只有脂肪的鉴定需要使用显微镜B用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热C使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用现用D可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀加热产生砖红色沉淀解析:解析:选选D。本题在于考查学生的动手能力,。本题在于考查学生的动手能力,实验操作是否正确、规范。正确回答这类题实验操作是否正确、规范。正确回答这类题目除了要亲自动手完成实验外,熟

12、记实验过目除了要亲自动手完成实验外,熟记实验过程的操作程序是解题的关键。脂肪的检测选程的操作程序是解题的关键。脂肪的检测选用的材料是花生子叶,切片后,染色制片用用的材料是花生子叶,切片后,染色制片用显微镜观察。可溶性还原糖和蛋白质的检测显微镜观察。可溶性还原糖和蛋白质的检测都是将生物材料制成样液,然后检测,不用都是将生物材料制成样液,然后检测,不用显微镜。需要隔水加热的是检测可溶性还原显微镜。需要隔水加热的是检测可溶性还原糖的实验;斐林试剂的甲液和乙液要先混合糖的实验;斐林试剂的甲液和乙液要先混合再使用,且要现配现用;双缩脲试剂中的再使用,且要现配现用;双缩脲试剂中的A液和液和B液不需混合,但

13、也要现配现用。实际液不需混合,但也要现配现用。实际上,该实验中有许多可对比记忆的知识点,上,该实验中有许多可对比记忆的知识点,同学们在平时学习中要善于去归纳总结。同学们在平时学习中要善于去归纳总结。 3下列各项作为鉴定生物组织中还原性糖的理想材料是() A韭菜 B鸢尾 C菠菜 D梨 解析:鉴定生物组织中还原性糖的实验,最理想的实验材料是含还原糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅或近于白色。因此韭菜、鸢尾、菠菜的叶片中叶绿素的含量较多,颜色较深,对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用,导致实验现象不明显,不是理想的实验材料。而只有梨符合条件。 答案:D 在用斐林试剂鉴定还原性糖时,溶液的颜

14、色变化过程为:_。 答案:浅蓝色棕色砖红色(沉淀) 解析:由于斐林试剂的甲液(氢氧化钠的质量浓度为0.1 g/mL的溶液)和乙液(硫酸铜的质量浓度为0.05 g/mL的溶液)两者混合后,立即生成浅蓝色的Cu(OH)2沉淀,将蓝色的甲液和乙液的混合液(刚配制的斐林试剂)注入盛有苹果组织样液的试管中,振荡试管,溶液混合均匀,此时呈现蓝色是Cu(OH)2的颜色。当将这支试管进行水浴加热时,仔细观察会看到:溶液的颜色由开始时的浅蓝色首先变成棕色,随后又逐渐变成了砖红色沉淀。开始时的浅蓝色是Cu(OH)2的颜色;中间出现棕色是蓝色Cu(OH)2和砖红色的Cu2O混合的颜色,最后出现砖红色(沉淀)是Cu2

15、O的颜色。 4某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片,当转动细准焦螺旋时,有一部分细胞看得清晰,另一部分细胞较模糊,这是由于() A反光镜未调节好 B标本切得厚薄不均 C细调节器未调节好 D显微镜物镜损坏 解析:有一部分细胞看得清楚,说明物镜完好无损,反光镜和细调节器也已调节好。而另一部分细胞模糊的原因可能是由于切片厚薄不均匀,厚的模糊而薄的则清楚。 答案:B 在脂肪的鉴定实验中,花生种子浸泡的时间是() A12 h B34 h C67 h D89 h 答案:B 解析:实验前将供实验的花生种子浸泡的目的是容易切成完整的薄片,浸泡时间短了,不容易切成片(易碎);浸泡时间过长,则组织太软,切下的薄片

16、不易成形。经实验证明适宜的浸泡时间为34 h。5(2008广东高考)双缩脲试剂可以鉴定蛋白质,是由于蛋白质有() A肽键 B氨基酸 C羧基 D氨基 解析:蛋白质分子中含有肽键,可与双缩脲试剂反应产生颜色反应,以鉴定蛋白质的存在。 答案:A 鉴定脱脂淡奶粉是否是伪劣产品,不需用的化学试剂是() A斐林试剂 B苏丹染液 C双缩脲试剂 D红墨水 答案:D 解析:本题是还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定在生活中的应用。普通奶粉中主要含有蛋白质、脂肪和糖类。题干中的脱脂淡奶粉因脱去脂,所以无脂肪;因是淡奶粉,所以无糖;主要成分只剩下蛋白质。供选答案中,斐林试剂是用来鉴定还原糖的,苏丹染液是用来鉴定脂肪的,双缩脲

17、试剂是用来鉴定蛋白质的,红墨水是用来观察水分的运输作用的。 1保证生物体正常生活所必需的微量元素是() AK、Fe、Mn、Zn、Cu、B BFe、Mn、Zn、Cu、B、Mo CCa、Fe、Mn、Zn、Cu、No DMg、Fe、Mn、Zn、B、Mo 答案:B 解析:A项中的K属于大量元素,C项中的Ca属于大量元素,D项中的Mg属于大量元素。 2生长在沙漠中的仙人掌,在其肉质茎的细胞中,含量最多的化合物是() A蛋白质 B脂质 C糖类 D水 答案:D 解析:题目中的“生长在沙漠中的仙人掌”是一干扰因素,不能被其迷惑。正常生活的细胞中,含量最多的化合物是水。 3在鉴定还原糖的实验中,加入斐林试剂时必

18、须要() A先加入斐林试剂甲液,后加入乙液 B先加入斐林试剂乙液,后加入甲液 C将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加 D以上A、B、C三项操作方法都正确 答案:C 解析:斐林试剂的甲液是氢氧化钠的质量浓度为0.1 g/mL的溶液;乙液是硫酸铜的质量浓度为0.05 g/mL的溶液。只有将甲液和 乙 液 混 合 后 , 才 能 生 成 浅 蓝 色 的Cu(OH)2沉淀。而还原性糖就是与Cu(OH)2在加热条件下,才能生成砖红色的Cu2O沉淀,起到鉴定还原性糖的作用,因此应选C。 4在鉴定还原性糖和蛋白质的实验中,制备生物组织样液时,都要加入石英砂进行研磨,加入石英砂的目的是() A研磨充分 B防止

19、有机物受到破坏 C提取有机物 D有利于研磨液的过滤 答案:A 解析:在制备生物组织样液时加入石英砂研磨的目的就是为了充分破坏组织细胞,使细胞中的还原性糖或蛋白质出来进入研磨液中,以便得到含还原性糖或蛋白质较高的组织样液,而与B、C、D三项没有关系。 5下列是几种元素在地壳中和原生质中含量的比较表,请分析后回答:元素地壳中含量原生质中含量O48.6%65%C0.09%18%Fe4.75%0.01%H0.76%10%N0.03%3% (1)由上表可以看出,组成原生质的元素在地壳中都含有,说明_。 (2)但原生质中元素的含量有的远高于地壳中的含量,有的远低于地壳中的含量,说明了 _ _。 答案:(1

20、)生物界与非生物界具有差异性(2)生物界与非生物界具有统一性。 某厂商宣传其生产的“炸薯条”是富含蛋白质和多种维生素的营养食品,特别适合青少年和儿童食用,对青少年和儿童身体的生长发育具有很高的营养价值。请你判定这则广告的真假。 相关资料:薯条在油炸之前含量最多的有机物是淀粉;在油炸之后,含量最多的有机物是脂肪。高温会对维生系等营养成分造成破坏。请回答下列问题: (1)鉴定油炸之前的薯条中含量最多的有机物时,常用的试剂是:_;若在晾干的未加工的薯条上滴加这种试剂,薯条会呈_色。 (2)鉴定“炸薯条”中含量最多的有机物时,使用的试剂是:_。 (3)鉴定“炸薯条”、薯条、豆类食品中是否 富 含 蛋

21、白 质 时 , 使 用 的 试 剂 是 :_。 (4)根据生活经验和所学的生物知识,你判定该厂商的这则广告是 _。 答案:(1)碘液蓝(2)苏丹染液(或苏丹染液)(3)双缩脲试剂(4)虚假的实战演练实战演练(2011年深圳中学高一检测年深圳中学高一检测)洋葱在欧美被誉为洋葱在欧美被誉为“蔬菜皇后蔬菜皇后”,其肥大的鳞茎中含糖类,其肥大的鳞茎中含糖类8.5%,每每100克含维生素克含维生素A 5毫克、维生素毫克、维生素C 9.3毫克、毫克、钙钙(Ca)45毫克、磷毫克、磷(P)50毫克、毫克、铁铁(Fe)8毫克,以及毫克,以及18种氨基酸,种氨基酸,是不可多得的保健食品。那么洋是不可多得的保健食

22、品。那么洋葱肥大的鳞茎中所含有的糖类是淀粉还是可葱肥大的鳞茎中所含有的糖类是淀粉还是可溶性还原糖?生物学兴趣小组的同学以此作溶性还原糖?生物学兴趣小组的同学以此作为研究课题。请你帮助他们完成下面的实验为研究课题。请你帮助他们完成下面的实验研究报告。研究报告。(1)实验目的:探究洋葱肥大的鳞茎中所含的糖实验目的:探究洋葱肥大的鳞茎中所含的糖是淀粉还是可溶性还原糖。是淀粉还是可溶性还原糖。(2)实验原理:淀粉可用实验原理:淀粉可用_来检测,可溶来检测,可溶性还原糖可用性还原糖可用_试剂来检测。试剂来检测。(3)实验器材:洋葱、所需试剂和仪器等实验器材:洋葱、所需试剂和仪器等(略略)。(4)实验步骤

23、:实验步骤:.鉴定可溶性还原糖:鉴定可溶性还原糖:制备洋葱组织样液,取样液制备洋葱组织样液,取样液2 mL注入试管;注入试管;_;观察颜色变化。观察颜色变化。.鉴定淀粉:鉴定淀粉:制备洋葱组织样液,取样液制备洋葱组织样液,取样液2 mL注入试管;注入试管;_;观察颜色变化。观察颜色变化。(5)预期实验结果与结论:预期实验结果与结论:现象现象结论结论若步骤若步骤出现出现_步骤步骤出现出现_说明洋葱鳞茎中所含说明洋葱鳞茎中所含的糖类既有还原糖又的糖类既有还原糖又有淀粉有淀粉若步骤若步骤_步骤步骤_说明洋葱鳞茎中所含说明洋葱鳞茎中所含的糖类只有还原糖而的糖类只有还原糖而没有淀粉没有淀粉若若_说明洋葱

24、鳞茎中所含说明洋葱鳞茎中所含糖类糖类_解析:解析:本实验是探究性实验,目的是探究洋本实验是探究性实验,目的是探究洋葱鳞茎中所含的糖类是淀粉还是可溶性还原葱鳞茎中所含的糖类是淀粉还是可溶性还原糖。向洋葱组织样液中加入碘液,若出现蓝糖。向洋葱组织样液中加入碘液,若出现蓝色,说明含有淀粉;加入斐林试剂,水浴加色,说明含有淀粉;加入斐林试剂,水浴加热热2 min后,若出现砖红色沉淀,说明含有后,若出现砖红色沉淀,说明含有可溶性还原糖。预期实验结果与结论时,注可溶性还原糖。预期实验结果与结论时,注意有三种不同情况:同时含有可溶性还原意有三种不同情况:同时含有可溶性还原糖和淀粉;只含有可溶性还原糖;只含糖和淀粉;只含有可溶性还原糖;只含有淀粉。有淀粉。答案:答案:(2)碘液斐林碘液斐林(4).加入新制的斐林加入新制的斐林试剂试剂1 mL,混匀,将试管置于,混匀,将试管置于50 65 的水的水浴锅中加热浴锅中加热2 min.加入加入2滴碘液滴碘液(5)砖红砖红色沉淀蓝色出现砖红色沉淀不出现蓝色色沉淀蓝色出现砖红色沉淀不出现蓝色步骤步骤不出现砖红色沉淀,步骤不出现砖红色沉淀,步骤出现蓝色出现蓝色没有还原糖只有淀粉没有还原糖只有淀粉

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