1、药物检查基本项目药物检查基本项目杂质检查杂质检查制剂检查制剂检查安全性检查安全性检查上海震旦职业学院上海震旦职业学院第四章第四章 药物的杂质检查技术药物的杂质检查技术主要内容主要内容第一节第一节 基本概念基本概念第二节第二节 一般杂质检查技术一般杂质检查技术第三节第三节 特殊杂质检查技术特殊杂质检查技术基本要求基本要求一、一、了解了解药物中杂质的来源与分类药物中杂质的来源与分类二、二、掌握掌握药物中杂质限量的计算以及常药物中杂质限量的计算以及常见的一般杂质检查的原理与方法见的一般杂质检查的原理与方法三、三、熟悉熟悉特殊杂质检查的方法特殊杂质检查的方法第一节第一节 基本概念基本概念第一节第一节
2、基本概念基本概念药物的杂质检查是指采用一定的方法对药物药物的杂质检查是指采用一定的方法对药物中的杂质进行限量控制以评价药物中的杂质进行限量控制以评价药物纯度纯度的一的一类检测方法。类检测方法。纯度纯度：药物的纯净程度。反映了药物质量的：药物的纯净程度。反映了药物质量的优劣，含有杂质是影响药物纯度的主优劣，含有杂质是影响药物纯度的主要因素。要因素。如何评价纯度：如何评价纯度： 性状、物理常数、性状、物理常数、杂质检查杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。来评价药物的纯度。杂质的概念杂质的概念杂质：杂质： 存在于药物中无治疗作用或影响药物存在于药
3、物中无治疗作用或影响药物稳定和疗效，甚至对人体有害的物质。稳定和疗效，甚至对人体有害的物质。1.1. 有毒副作用的物质；有毒副作用的物质；2.2. 本身无毒副作用，但影响药物的疗效与稳本身无毒副作用，但影响药物的疗效与稳定性；定性；一、杂质来源与分类一、杂质来源与分类了解杂质的来源与分类，可制定出检查的项了解杂质的来源与分类，可制定出检查的项目和方法。目和方法。杂质的来源：杂质的来源：一、在生产中引入；一、在生产中引入；二、在贮藏过程中产生。二、在贮藏过程中产生。一、杂质来源与分类一、杂质来源与分类一、在生产中引入一、在生产中引入(1)(1)药物合成过程中未反应的原料、中间体及药物合成过程中未
4、反应的原料、中间体及副产物；副产物；例如：药用例如：药用NaClNaCl中的中的Br-Br-、I-I-、SO42-SO42-等；阿等；阿司匹林中的水杨酸、地西泮中的去甲安定。司匹林中的水杨酸、地西泮中的去甲安定。(2)(2)生产中所用的金属器皿、装置以及不耐酸生产中所用的金属器皿、装置以及不耐酸碱的金属设备等所带来的杂质；碱的金属设备等所带来的杂质；(3)(3)试剂、溶剂、催化剂类试剂、溶剂、催化剂类一、杂质来源与分类一、杂质来源与分类二、贮藏过程中引入二、贮藏过程中引入主要指外界条件如温度、湿度、日光、空气主要指外界条件如温度、湿度、日光、空气的影响以及微生物的作用，可能发生水解、的影响以及
5、微生物的作用，可能发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化，从而产生有关杂质。解和发霉等变化，从而产生有关杂质。易发生水解的结构：酯、酰胺、卤代烃等；易发生水解的结构：酯、酰胺、卤代烃等；易发生氧化的结构：醚、酚羟基、醛、巯基等。易发生氧化的结构：醚、酚羟基、醛、巯基等。例如：异烟肼中的游离肼、阿托品中的莨菪例如：异烟肼中的游离肼、阿托品中的莨菪醇和消旋莨菪醇。醇和消旋莨菪醇。一、杂质的来源与分类一、杂质的来源与分类按按来源来源分分一般一般杂质和杂质和特殊特殊杂质；按杂质；按化学结构化学结构分为分为无机杂质无机杂质和和特殊杂质特殊杂质
6、；按；按性质性质分为分为信号信号杂质杂质和和有害杂质有害杂质。一、杂质的来源与分类一、杂质的来源与分类一般杂质是指在自然界中分布广泛，在多一般杂质是指在自然界中分布广泛，在多种药物的生产和贮藏中可能引入的杂质，种药物的生产和贮藏中可能引入的杂质，如水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属如水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等。、砷盐等。 一般杂质其检查方法收载在中国药典的一般杂质其检查方法收载在中国药典的附附录录中。中。一、杂质的来源与分类一、杂质的来源与分类特殊杂质是某一种或某一类药物的生产或特殊杂质是某一种或某一类药物的生产或贮藏中引入的杂质。贮藏中引入的杂质。 如阿司匹林中的游离水杨酸、
7、异烟肼中的游如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼。离肼。 特殊杂质检查方法收载在中国药典特殊杂质检查方法收载在中国药典正文正文中中各药品的质量标准中。各药品的质量标准中。一、杂质的来源与分类一、杂质的来源与分类无机杂质：氯化物、硫酸盐、重金属、砷无机杂质：氯化物、硫酸盐、重金属、砷盐、硫化物等，如葡萄糖中氯化物、硫酸盐、硫化物等，如葡萄糖中氯化物、硫酸盐、重金属的检查。盐、重金属的检查。有机杂质：有机药物中引入的原料、中间有机杂质：有机药物中引入的原料、中间体、副产物、分解产物、异构体和残留溶体、副产物、分解产物、异构体和残留溶剂等。如：阿司匹林及其制剂中的杂质游剂等。如：阿司匹林及其制
8、剂中的杂质游离水杨酸，盐酸普鲁卡因注射剂中的杂质离水杨酸，盐酸普鲁卡因注射剂中的杂质对氨基苯甲酸，肾上腺素中的杂质酮体。对氨基苯甲酸，肾上腺素中的杂质酮体。一、杂质的来源与分类一、杂质的来源与分类信号杂质一般无害，但其含量的多少可反信号杂质一般无害，但其含量的多少可反映药物的纯度水平，氯化物、硫酸盐就属映药物的纯度水平，氯化物、硫酸盐就属于信号杂质；于信号杂质；有害杂质，如重金属、砷盐、氰化物等对有害杂质，如重金属、砷盐、氰化物等对人体有害，在药品标准中必须严格控制。人体有害，在药品标准中必须严格控制。二、杂质限量检查与计算二、杂质限量检查与计算在不影响疗效，不对人体产生毒性并保证药在不影响疗
9、效，不对人体产生毒性并保证药物质量的前提下，综合考虑杂质的安全性、物质量的前提下，综合考虑杂质的安全性、生产的可行性与产品的稳定性，可允许药物生产的可行性与产品的稳定性，可允许药物中存在中存在一定限量的杂质一定限量的杂质。杂质限量检查法：检查杂质的量是否超过最杂质限量检查法：检查杂质的量是否超过最大允许量，通常不要求准确测定其含量。大允许量，通常不要求准确测定其含量。二、杂质限量检查与计算二、杂质限量检查与计算杂质的量杂质的量 杂质限量杂质限量 杂质的量杂质的量药品合格药品合格药品不合格药品不合格对人体有毒的杂质控制的较严：对人体有毒的杂质控制的较严：砷砷-不得过百万分之一不得过百万分之一重金
10、属重金属-不得过百万分之五十不得过百万分之五十杂质的检查方法杂质的检查方法杂质限量检查常用方法有杂质限量检查常用方法有对照法对照法、比较法比较法、灵敏度法灵敏度法、重量法重量法4 4种。种。对照法对照法系指取一定量与供试品待检杂质相同或相当系指取一定量与供试品待检杂质相同或相当的对照品配成对照溶液，与一定量供试溶液的对照品配成对照溶液，与一定量供试溶液在相同条件下，比较反应结果，从而判断供在相同条件下，比较反应结果，从而判断供试品中所含杂质是否超出限量。试品中所含杂质是否超出限量。NaCl对照液对照液葡萄糖葡萄糖对照液浊度对照液浊度 供试液浊度供试液浊度药品合格药品合格NaCl对照液对照液葡萄
11、糖葡萄糖 稀硝酸稀硝酸10ml 硝酸银硝酸银1ml 稀硝酸稀硝酸10ml 硝酸银硝酸银1ml对照法对照法系指取一定量与供试品待检杂质相同或相当系指取一定量与供试品待检杂质相同或相当的对照品配成对照溶液，与一定量供试溶液的对照品配成对照溶液，与一定量供试溶液在相同条件下，比较反应结果，从而判断供在相同条件下，比较反应结果，从而判断供试品中所含杂质是否超出限量。试品中所含杂质是否超出限量。平行原则：加入的溶剂、条件试剂、主反应平行原则：加入的溶剂、条件试剂、主反应试剂、反应时间或反应温度等均应试剂、反应时间或反应温度等均应相同。相同。比较法比较法系指取得供试品一定量依法测定，要求待检系指取得供试品
12、一定量依法测定，要求待检杂质的某项指标测得值杂质的某项指标测得值( (如旋光度、吸光度等如旋光度、吸光度等），与中国药典规定的限量比较，不得超过），与中国药典规定的限量比较，不得超过。特点：无需对照品，直接将测得值与规定值特点：无需对照品，直接将测得值与规定值比较。比较。例：硫酸阿托品中莨菪碱的检测，维生素例：硫酸阿托品中莨菪碱的检测，维生素C C有有色杂质的检查。色杂质的检查。灵敏度法灵敏度法在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，观察有无阳性反应，以不出现阳性反应下，观察有无阳性反应，以不出现阳性反应为符合规定，即以检测条件下灵敏度来控制为符合规定，
13、即以检测条件下灵敏度来控制杂质限量。杂质限量。特点：无需对照物，以不出现阳性反应为判特点：无需对照物，以不出现阳性反应为判断依据。断依据。例：维生素例：维生素D2D2中麦角甾醇的检查：取本品中麦角甾醇的检查：取本品10mg10mg，加洋地黄皂苷，加洋地黄皂苷2mL2mL混合，放置混合，放置1818小时，小时，不得发生浑浊或沉淀。不得发生浑浊或沉淀。重量法重量法系指供试品在一定条件下减失的质量或经过系指供试品在一定条件下减失的质量或经过一定方法处理后质量的变化值，与中国药典一定方法处理后质量的变化值，与中国药典规定的限量比较，不得超过。规定的限量比较，不得超过。如干燥失重、炽灼残渣测定。如干燥失
14、重、炽灼残渣测定。三、杂质限量的计算三、杂质限量的计算当供试品中的杂质限量是通过与一定量杂质当供试品中的杂质限量是通过与一定量杂质标准溶液比较来确定时，杂质的最大允许两标准溶液比较来确定时，杂质的最大允许两即为杂质标准溶液浓度与体积的乘积。即为杂质标准溶液浓度与体积的乘积。L = C标标 V标标ms三、杂质限量的计算三、杂质限量的计算信号杂质：信号杂质：L(%) = C标标 V标标ms 100%毒性杂质：毒性杂质：L(ppm) = C标标 V标标ms 106ppm三、杂质限量的计算三、杂质限量的计算供试品为溶液时：供试品为溶液时：L(%) = C标标 V标标C供供 V供供 100%如薄层色谱法
15、检查杂质。如薄层色谱法检查杂质。实例解析实例解析对乙酰氨基酚中氯化物的限量计算对乙酰氨基酚中氯化物的限量计算方法：取对乙酰氨基酚方法：取对乙酰氨基酚2.0g2.0g，加水，加水100mL100mL，加，加热溶解后，冷却，过滤，取滤液热溶解后，冷却，过滤，取滤液25mL25mL，依法，依法检查，所发生浑浊与标准氯化钠溶液检查，所发生浑浊与标准氯化钠溶液5.0ml(5.0ml(每每1ml1ml相当于相当于10ug10ug的的Cl-)Cl-)制成的对照液比较，制成的对照液比较，不得更浓。不得更浓。实例解析实例解析问：氯化物的限量是多少？问：氯化物的限量是多少？C C标标 = 10ug/ml; V=
16、10ug/ml; V标标 =5.0mL=5.0mL； m ms s = 2.0 = 2.0 (g)25100L(%) = C标标 V标标ms 100%=10ug/ml10ug/ml5.0mL5.0mL2.02.0 (g)25100 100%= 0.01% 注意点注意点 单位一致单位一致 稀释倍数稀释倍数 表示方表示方法（法（% %，ppmppm）三、杂质限量的计算三、杂质限量的计算例例 磷酸可待因中吗啡的检查：磷酸可待因中吗啡的检查：取本品取本品0.1g0.1g，加盐酸，加盐酸与吗啡溶液与吗啡溶液(0.02mg/ml) 5.0ml (0.02mg/ml) 5.0ml 。用同一方法制成的对。用同
17、一方法制成的对照液比较，不得更深。求吗啡限量。照液比较，不得更深。求吗啡限量。已知：已知：V = 5.0mlV = 5.0ml；C = 0.02 mg/mlC = 0.02 mg/ml；S = S = 0.1g0.1g求：求： L = L = ？解：解：L = CL = CV / S=5.0V / S=5.00.02/0.10.02/0.110001000100%100% = 0.1% = 0.1%返 回第二节第二节 一般杂质检查技术一般杂质检查技术一般杂质检查技术一般杂质检查技术一般杂质检查方法收载在一般杂质检查方法收载在中国药典中国药典二部二部的附录中，多数采用的附录中，多数采用对照法对照
18、法。本节主要讨论氯化物、硫酸盐、铁盐、重金本节主要讨论氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、溶液颜色、溶液澄清度、干燥失属、砷盐、溶液颜色、溶液澄清度、干燥失重、水分和炽灼残渣的重、水分和炽灼残渣的检查原理检查原理、方法方法和和注注意事项意事项。一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (一一) )原理：原理： 对照法对照法白色浑浊药物：AgClAgNOCl3HNO3 白色浑浊）（对照：AgClAgNO,NaCl3HNO3 Vc一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (二二) )检查方法检查方法1.1. 标准氯化钠溶液的配制标准氯化钠溶液的配制 称取称取0.165gNaCl0.165gNaCl1000mL
19、1000mL。临用前，精密量。临用前，精密量取贮备液取贮备液10mL10mL，置于，置于100mL100mL量瓶中，加水稀释量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得至刻度，摇匀，即得( (每每1ml1ml相当于相当于10gCl10gCl- -) )。一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (二二) )检查方法检查方法2. 2. 供试品溶液的配制供试品溶液的配制除另有规定外，取各品种项规定量的供试品除另有规定外，取各品种项规定量的供试品，置于，置于50mL50mL纳氏比色管中，加水溶解使成为纳氏比色管中，加水溶解使成为约约25ml(25ml(溶液如现碱性，可滴加硝酸至溶液如现碱性，可滴加硝酸至pHpH试纸
20、试纸先中性先中性) )，再加稀硝酸，再加稀硝酸10mL10mL，如溶液不澄清，如溶液不澄清，应滤过；再加水成约应滤过；再加水成约40ml40ml，摇匀即得。，摇匀即得。一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (二二) )检查方法检查方法3. 3. 对照溶液的配制对照溶液的配制取该品种项下规定量的标准氯化钠溶液，置取该品种项下规定量的标准氯化钠溶液，置另一另一50ml50ml纳氏比色管中，加稀硝酸纳氏比色管中，加稀硝酸10ml10ml，加，加水使约成水使约成40ml40ml，摇匀，即得。，摇匀，即得。一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (二二) )检查方法检查方法4. 4. 结果观察结果观察于供试品
21、溶液与对照品溶液中，分别加入硝于供试品溶液与对照品溶液中，分别加入硝酸银试液酸银试液1.0mL1.0mL，用水稀释使成，用水稀释使成50ml50ml，摇匀，摇匀，在暗处放置在暗处放置5min5min，同置黑色背景上，从比色，同置黑色背景上，从比色管上方项下观察，比较所产生的浑浊。管上方项下观察，比较所产生的浑浊。5. 5. 结果判定结果判定 供试品溶液管所显浑浊浅于对供试品溶液管所显浑浊浅于对照溶液管的浑浊，判为符合规定；否则，判照溶液管的浑浊，判为符合规定；否则，判为不符合规定。为不符合规定。一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (二二) )检查方法检查方法介质：介质：反应试剂：反应试剂：对照
22、溶液：对照溶液：硝酸酸性硝酸酸性( (稀硝酸稀硝酸 10ml)10ml)硝酸银试液硝酸银试液1.0mL1.0mLNaCl NaCl 溶液溶液课堂活动课堂活动标准标准NaClNaCl溶液溶液5.0ml5.0ml 稀硝酸稀硝酸10ml10ml 硝酸银硝酸银1.0ml1.0ml 供试品供试品2.0g2.0g，加，加水水100ml100ml，过滤，过滤，取滤液取滤液25ml25ml 稀硝酸稀硝酸10ml10ml 硝酸银硝酸银1.0ml1.0ml 对乙酰氨基酚中氯化物的检查对乙酰氨基酚中氯化物的检查课堂活动课堂活动对乙酰氨基酚中氯化物的检查对乙酰氨基酚中氯化物的检查供试品供试品对照液对照液对照对照结论：
23、符合规定结论：符合规定课堂活动课堂活动对乙酰氨基酚中氯化物的检查对乙酰氨基酚中氯化物的检查杂质氯化物的限量为多少？杂质氯化物的限量为多少？L(%) = C标标 V标标ms 100%=10ug/ml10ug/ml5.0mL5.0mL2.02.0 (g)25100 100%= 0.01%一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (三三) ) 注意事项注意事项1.1.应选择配对的纳氏比色管进行试验。注意应选择配对的纳氏比色管进行试验。注意操作顺序，供试溶液与对照溶液均先制成操作顺序，供试溶液与对照溶液均先制成40ml40ml的水溶液，再加硝酸银试液的水溶液，再加硝酸银试液1.0ml1.0ml，充分，充分摇
24、匀摇匀目的：目的：以免局部浓度过高产生沉淀。以免局部浓度过高产生沉淀。一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (三三) ) 注意事项注意事项2. 2. 本法适宜的比浊浓度范围在本法适宜的比浊浓度范围在50ml50ml溶液中含溶液中含5080ug5080ug的的Cl-Cl-。在设计检查方法使应考虑供。在设计检查方法使应考虑供试品取样量，使氯化物的浓度在此适宜范围试品取样量，使氯化物的浓度在此适宜范围。一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (三三) ) 注意事项注意事项3. 3. 需加入稀硝酸，原因：需加入稀硝酸，原因：a a 加速加速AgClAgCl浑浊的浑浊的生成；生成；b b产生较好的乳浊；产生较
25、好的乳浊；c c 避免避免SOSO3 32-2-、 COCO3 32-2-、POPO4 43-3- 、C C2 2O O4 42-2-、BOBO2 2- -的干扰，避免氧化的干扰，避免氧化银的生成。银的生成。一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (三三) ) 注意事项注意事项4. 4. 溶于水的有机药物，按规定直接检查。不溶于水的有机药物，按规定直接检查。不溶于水的有机药物，多数加水振摇，使所含溶于水的有机药物，多数加水振摇，使所含的氯化物溶解或加热溶解供试品，过滤，取的氯化物溶解或加热溶解供试品，过滤，取滤液检查。滤液检查。一、氯化物检查法一、氯化物检查法( (三三) ) 注意事项注意事项5.
26、 5. 对带色供试品溶液中氯化物的检查，通常对带色供试品溶液中氯化物的检查，通常采用采用内消色法内消色法处理。处理。供供试试品品一、氯化物检查法一、氯化物检查法供供试试品品+AgNO3过滤过滤澄清澄清带色带色滤液滤液+标准标准NaCl+水水对对照照溶溶液液+AgNO3供供试试品品溶溶液液对对照照二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法药物：药物：SOSO4 42-2- + BaCl + BaCl2 2 BaSOBaSO4 4 白色浑浊白色浑浊对照：对照：K K2 2SOSO4 4 + BaCl + BaCl2 2 BaSOBaSO4 4 白色浑浊白色浑浊( (一一) )原理原理二、硫酸盐检查法二、硫酸
27、盐检查法( (二二) )检查方法检查方法1.1. 标准硫酸钾溶液的配制标准硫酸钾溶液的配制 硫酸钾硫酸钾0.181g0.181g 1000ml1000ml二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法( (二二) )检查方法检查方法2. 2. 供试品溶液的配制供试品溶液的配制除另有规定外，取各品种项下规定量的，除另有规定外，取各品种项下规定量的，置于置于50ml50ml纳氏比色管中，加水约为纳氏比色管中，加水约为40ml40ml；溶液如显碱性，可滴加盐酸至遇溶液如显碱性，可滴加盐酸至遇pHpH试纸显试纸显中性，如溶液不澄清，应滤过。中性，如溶液不澄清，应滤过。加稀盐酸加稀盐酸2ml2ml。二、硫酸盐检查法二
28、、硫酸盐检查法( (二二) )检查方法检查方法3. 3. 对照溶液的配制对照溶液的配制取该品种项下规定量的标准硫酸钾溶液，取该品种项下规定量的标准硫酸钾溶液，置另一置另一50ml50ml纳氏比色管中，加水使约成纳氏比色管中，加水使约成40ml40ml，加稀盐酸，加稀盐酸2ml2ml，摇匀即得。，摇匀即得。二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法( (二二) )检查方法检查方法4. 4. 结果观察结果观察于供试品溶液与对照溶液中，分别加入于供试品溶液与对照溶液中，分别加入25%25%氯化钡氯化钡5ml5ml，用水稀释使成，用水稀释使成50ml50ml，充分摇匀，充分摇匀，同置于同置于黑色黑色背景上，从比
29、色管上方向下观背景上，从比色管上方向下观察，比较所产生的沉淀。察，比较所产生的沉淀。二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法( (二二) )检查方法检查方法5. 5. 结果判定结果判定供试品溶液管所显浑浊供试品溶液管所显浑浊浅于浅于对照溶液管，对照溶液管，判为判为符合规定符合规定；否则，判为不符合规定。；否则，判为不符合规定。二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法( (二二) )检查方法检查方法介质：介质：反应试剂：反应试剂：对照溶液：对照溶液：稀盐酸稀盐酸(2ml)(2ml)BaClBaCl2 2 5 ml5 mlK K2 2SOSO4 4(0.1mg/ml)(0.1mg/ml)二、硫酸盐检查法二、硫酸盐
30、检查法( (三三) )注意事项注意事项1. 1. 本法适宜的比浊范围为本法适宜的比浊范围为50ml50ml溶液中含溶液中含0.10.10.5mg0.5mg的的SOSO4 42-2-2. 2. 稀盐酸可防止稀盐酸可防止COCO3 32-2-、POPO4 43-3-等于等于BaBa2-2-生成沉生成沉淀。淀。如供试品溶液加入盐酸后不澄清，应过滤。如供试品溶液加入盐酸后不澄清，应过滤。当温度低于当温度低于1010时，应将比色管置于时，应将比色管置于25253030 水浴放置水浴放置1010分钟后再比浊。分钟后再比浊。二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法( (三三) )注意事项注意事项3. 3. 加入氯化
31、钡后，应充分摇匀。加入氯化钡后，应充分摇匀。4.4.若供试品带有颜色，采用内消色法。若供试品带有颜色，采用内消色法。三、铁盐检查法三、铁盐检查法 ( (一一) ) 原理原理 对照法对照法 硫氰酸盐法硫氰酸盐法药物：药物：FeFe2+2+ OOFeFe3+3+ FeFe3+3+ +6SCN+6SCN- - Fe(SCNFe(SCN- -) )6 6 3-3- HClHCl红色红色对照：对照： FeFe3+3+ (c(c、V)V)+6SCN+6SCN- - Fe(SCNFe(SCN- -) )6 6 3-3- HClHCl红色红色三、铁盐检查法三、铁盐检查法( (二二) ) 检查方法检查方法1.1
32、. 标准铁溶液的制备标准铁溶液的制备称取称取FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4) )2 212H12H2 2O0.863g+2.5mlO0.863g+2.5ml硫酸硫酸1000ml1000ml。每每1ml1ml溶液相当于溶液相当于10 10 gg的的FeFe。三、铁盐检查法三、铁盐检查法( (二二) ) 检查方法检查方法2. 2. 供试品溶液的制备供试品溶液的制备除另有规定外，取各品种项下规定的供试品除另有规定外，取各品种项下规定的供试品，置于，置于50ml50ml纳氏比色管中，加水溶解使成为纳氏比色管中，加水溶解使成为25ml25ml，即得。，即得。三、铁盐检查法三、铁盐检查法( (二
33、二) ) 检查方法检查方法3. 3. 对照溶液的制备对照溶液的制备取该品种项下规定量的标准铁溶液，置于另一取该品种项下规定量的标准铁溶液，置于另一纳氏比色管中，加水使成纳氏比色管中，加水使成25ml25ml，即得。，即得。4. 4. 结果观察结果观察于供试品溶液与对照品溶液中，分别加入稀盐于供试品溶液与对照品溶液中，分别加入稀盐酸酸4.0ml4.0ml，过硫酸铵，过硫酸铵5mg5mg，用水稀释成，用水稀释成35ml35ml，加，加30%30%硫氰酸胺溶液硫氰酸胺溶液3ml3ml，再加水至，再加水至50ml50ml，摇匀，摇匀，在白色背景下，观察比较产生的颜色。在白色背景下，观察比较产生的颜色。
34、三、铁盐检查法三、铁盐检查法( (二二) ) 检查方法检查方法5. 5. 结果判定结果判定供试溶液管所显颜色浅于对照溶液管，判为符供试溶液管所显颜色浅于对照溶液管，判为符合规定；否则，判为不符合规定。合规定；否则，判为不符合规定。对照溶液对照溶液供试溶液供试溶液三、铁盐检查法三、铁盐检查法( (二二) ) 检查方法检查方法介质：介质：显色剂：显色剂：对照溶液：对照溶液：氧化剂：氧化剂：HClHCl硫氰酸铵硫氰酸铵 硫酸铁铵硫酸铁铵(Fe(Fe3+ 3+ /10ug ml/10ug ml-1-1) )过硫酸铵过硫酸铵(NH(NH4 4) )2 2S S2 2O O8 8 三、铁盐检查法三、铁盐检
35、查法巯基醋酸法：使用巯基醋酸法：使用巯基醋酸巯基醋酸将三价铁离子将三价铁离子还还原原成二价铁离子，在氨碱性溶液中生成红色成二价铁离子，在氨碱性溶液中生成红色配离子，在与一定量标准铁溶液经过同法处配离子，在与一定量标准铁溶液经过同法处理产生的颜色比较，以判断供试品中的铁盐理产生的颜色比较，以判断供试品中的铁盐是否超过限量。是否超过限量。三、铁盐检查法三、铁盐检查法( (三三) )注意事项注意事项1.1. 本法适宜的比色浓度范围为本法适宜的比色浓度范围为50mg50mg溶液中含溶液中含1010 50ug50ug的的FeFe3+3+。2.2. 光线能促进硫氰酸铁还原或分解褪色，温光线能促进硫氰酸铁还
36、原或分解褪色，温度越高褪色越快，故测定时应特别注意实度越高褪色越快，故测定时应特别注意实验条件一致。验条件一致。3.3. 如供试品溶液管与对照溶液管色调不一致如供试品溶液管与对照溶液管色调不一致，可使用正丁醇提取并稀释。，可使用正丁醇提取并稀释。三、铁盐检查法三、铁盐检查法( (三三) )注意事项注意事项4. 4. 在盐酸酸性条件下反应，可防止在盐酸酸性条件下反应，可防止FeFe3+3+水解水解。某些酸根阴离子，如某些酸根阴离子，如ClCl- -、POPO4 43+3+、SOSO4 42-2-、枸橼、枸橼酸根离子与酸根离子与FeFe3+3+形成有色配位化合物而干扰检形成有色配位化合物而干扰检查
37、，可以通过适当增加酸度或增加硫氰酸铵的查，可以通过适当增加酸度或增加硫氰酸铵的加入量，然后用正丁醇提取后比色排除干扰。加入量，然后用正丁醇提取后比色排除干扰。三、铁盐检查法三、铁盐检查法( (三三) )注意事项注意事项5. 5. 葡萄糖、糊精和硫酸镁等再检查过程中需葡萄糖、糊精和硫酸镁等再检查过程中需加硝酸处理，则不再加入过硫酸铵，但必须加加硝酸处理，则不再加入过硫酸铵，但必须加热煮沸除去氧化氮。热煮沸除去氧化氮。三、铁盐检查法三、铁盐检查法( (三三) )注意事项注意事项6. 6. 有机药物需经炽热破坏，使铁盐转变为三有机药物需经炽热破坏，使铁盐转变为三氧化铁残留于残渣中，再依法检查；氧化铁
38、残留于残渣中，再依法检查；7. 7. 标准铁贮备液应存放在阴凉处，如出现浑标准铁贮备液应存放在阴凉处，如出现浑浊或其他异常情况，应禁止使用。浊或其他异常情况，应禁止使用。三、铁盐检查法三、铁盐检查法巯基醋酸法：使用巯基醋酸法：使用巯基醋酸巯基醋酸将三价铁离子将三价铁离子还还原原成二价铁离子，在氨碱性溶液中生成成二价铁离子，在氨碱性溶液中生成红色红色配离子配离子，在与一定量标准铁溶液经过同法处，在与一定量标准铁溶液经过同法处理产生的颜色比较，以判断供试品中的铁盐理产生的颜色比较，以判断供试品中的铁盐是否超过限量。是否超过限量。复复 习习盐酸溶液盐酸溶液氯化钡氯化钡硫酸钾硫酸钾硝酸溶液硝酸溶液硝酸
39、银硝酸银氯化钠氯化钠盐酸溶液盐酸溶液硫氰酸铵硫氰酸铵硫酸铁铵硫酸铁铵过硫酸铵过硫酸铵氯化物氯化物硫酸盐硫酸盐铁盐铁盐介质：介质：显色剂：显色剂：对照溶液：对照溶液：氧化剂：氧化剂：重金属指的是密度大于重金属指的是密度大于4.5g/cm3的金属，有金、银、铜、铁、的金属，有金、银、铜、铁、铅、铬、镉等；铅、铬、镉等；重金属不能被生物降解，相反却能在食物链的生物放大作用重金属不能被生物降解，相反却能在食物链的生物放大作用下，成千百倍地富集，最后进入人体。重金属在人体内能和下，成千百倍地富集，最后进入人体。重金属在人体内能和蛋白质及酶等发生强烈的相互作用，使它们失去活性，也可蛋白质及酶等发生强烈的相
40、互作用，使它们失去活性，也可能在人体的某些器官中累积，造成慢性中毒。能在人体的某些器官中累积，造成慢性中毒。如何检查药物中重金如何检查药物中重金属的含量呢？属的含量呢？四、重金属检查法四、重金属检查法重金属是指在实验室条件下与重金属是指在实验室条件下与硫代乙酰胺硫代乙酰胺试试液或液或硫化钠硫化钠S S2-2-作用显色的金属杂质，如银、作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表，易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表，以铅以铅的限量表示
41、重金属的限量的限量表示重金属的限量。四、重金属检查法四、重金属检查法中国药典中国药典(2010(2010版版) )一共收载了三种方法。一共收载了三种方法。第一法第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法第二法第二法 炽灼破坏后硫代乙酰胺法炽灼破坏后硫代乙酰胺法第三法第三法 硫化钠法硫化钠法四、重金属检查法四、重金属检查法中国药典中国药典(2010(2010版版) )一共收载了三种方法。一共收载了三种方法。第一法第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法第二法第二法 炽灼破坏后硫代乙酰胺法炽灼破坏后硫代乙酰胺法第三法第三法 硫化钠法硫化钠法对象：溶于水、稀酸和乙醇的药物对象：溶于水、稀酸和乙醇的药物对象：在水中、稀
42、酸和乙醇中难溶，或其他因对象：在水中、稀酸和乙醇中难溶，或其他因素不适宜采用第一法素不适宜采用第一法对象：溶于碱而不溶于酸或在稀酸中产生沉淀。对象：溶于碱而不溶于酸或在稀酸中产生沉淀。第一法第一法 (最常用最常用)1.1.检查原理检查原理 对照法对照法 + H + H2 2O CHO CH3 3CONHCONH2 2 + H + H2 2S S pH3.5药物药物: Pb: Pb2+2+ + H + H2 2S PbS S PbS 黄色黄色 棕黑色棕黑色对照对照:Pb(NO:Pb(NO3 3) )2 2(C ,V)+ H(C ,V)+ H2 2S PbSS PbS 黄色黄色 棕黑色棕黑色CHC
43、H3 3CSNHCSNH2 2硫代乙酰胺硫代乙酰胺第一法第一法 (最常用最常用)本法适用对象：溶于水、稀酸和乙醇的药物本法适用对象：溶于水、稀酸和乙醇的药物1.1.检查原理检查原理 对照法对照法介质：介质：显色剂：显色剂：杂质对照：杂质对照：醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液(pH=3.5)(pH=3.5)硫代乙酰胺硫代乙酰胺硝酸铅硝酸铅(Pb(Pb2+ 2+ /10ug ml/10ug ml-1-1) )第一法第一法2. 2. 检查方法检查方法(1(1）标准铅溶液的制备：称取硝酸铅）标准铅溶液的制备：称取硝酸铅0.1599g+0.1599g+硝酸硝酸5ml+5ml+水水50ml50ml1000ml10
44、00ml。 临用前，精密量取贮备液临用前，精密量取贮备液10ml10ml 100ml100ml，摇匀即得摇匀即得( (每每1ml1ml溶液相当于溶液相当于10g10g的的PbPb2+2+) )。第一法第一法2. 2. 检查方法检查方法(2(2）取）取25ml25ml纳氏比色管纳氏比色管3 3支支( (甲、乙、丙甲、乙、丙) )。 在甲管中加一定量的标准铅溶液与醋酸盐缓在甲管中加一定量的标准铅溶液与醋酸盐缓冲液冲液(pH3.5)2ml(pH3.5)2ml，加水或各品种项下规定的溶，加水或各品种项下规定的溶剂稀释至剂稀释至25ml25ml；乙管中加按该品种项下规定的方法制成的供乙管中加按该品种项下
45、规定的方法制成的供试品溶液试品溶液25ml25ml；第一法第一法2. 2. 检查方法检查方法(2(2）取）取25ml25ml纳氏比色管纳氏比色管3 3支支( (甲、乙、丙甲、乙、丙) )。丙管中加与乙管相同量的供试品，按该品种丙管中加与乙管相同量的供试品，按该品种项下规定的方法制成溶液，加与甲管相同量的项下规定的方法制成溶液，加与甲管相同量的标准铅溶液与醋酸盐缓冲液标准铅溶液与醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml,(pH3.5)2ml,然后然后加水稀释使成加水稀释使成25ml25ml。第一法第一法2. 2. 检查方法检查方法丙丙乙乙甲甲标准铅溶液标准铅溶液 醋酸盐溶液醋酸盐溶液2ml 稀释至稀释至
46、25ml25ml供试品溶供试品溶液液25ml 供试品溶液供试品溶液25ml 标准铅溶液标准铅溶液 醋酸盐溶液醋酸盐溶液2ml 稀释至稀释至25ml第一法第一法2. 2. 检查方法检查方法(3(3）在甲乙丙）在甲乙丙3 3管中分别加管中分别加硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液各各2ml2ml，摇匀，放置，摇匀，放置2min2min，同置白纸上，自上而，同置白纸上，自上而下透视。下透视。第一法第一法2. 2. 检查方法检查方法丙丙乙乙甲甲标准铅溶液标准铅溶液 硫代乙酰胺硫代乙酰胺供试品供试品硫代乙酰胺硫代乙酰胺供试品供试品标准铅溶液标准铅溶液 硫代乙酰胺硫代乙酰胺第一法第一法2. 2. 检查方法检查方法
47、(4(4）结果判定）结果判定当丙管中显出颜色不浅于甲管时，当丙管中显出颜色不浅于甲管时，如丙管中显出的颜色浅于甲管，实验无效，如丙管中显出的颜色浅于甲管，实验无效，按第二法重新检查；按第二法重新检查； 乙管中显出颜色浅于甲管，判为乙管中显出颜色浅于甲管，判为符合规定符合规定； 乙管中显出颜色深于甲管，判为乙管中显出颜色深于甲管，判为不不符合规定符合规定第一法第一法2. 2. 检查方法检查方法重金属检查法第一法增加了丙管目的在于：重金属检查法第一法增加了丙管目的在于：丙管可起到阳性对照的作用，目的是防止药物本身丙管可起到阳性对照的作用，目的是防止药物本身干扰重金属的检查，有些药物可与重金属形成配
48、合干扰重金属的检查，有些药物可与重金属形成配合物；物；第一法第一法判定：判定：丙丙乙乙甲甲标准铅溶液标准铅溶液 硫代乙酰胺硫代乙酰胺供试品供试品硫代乙酰胺硫代乙酰胺供试品供试品标准铅溶液标准铅溶液 硫代乙酰胺硫代乙酰胺第一法第一法判定：判定：丙丙乙乙甲甲标准铅溶液标准铅溶液 硫代乙酰胺硫代乙酰胺供试品供试品硫代乙酰胺硫代乙酰胺供试品供试品标准铅溶液标准铅溶液 硫代乙酰胺硫代乙酰胺第一法第一法判定：判定：丙丙乙乙甲甲标准铅溶液标准铅溶液 硫代乙酰胺硫代乙酰胺供试品供试品硫代乙酰胺硫代乙酰胺供试品供试品标准铅溶液标准铅溶液 硫代乙酰胺硫代乙酰胺第一法第一法3. 3. 注意事项注意事项(1)(1)本
49、法适宜的比色浓度范围为本法适宜的比色浓度范围为27ml27ml溶液中含溶液中含1020g1020g的的PbPb2+2+。(2)(2)如供试品有色，加如供试品有色，加稀焦糖溶液稀焦糖溶液或其他无干或其他无干扰的有色溶液，使其色泽与乙管、丙管一致。扰的有色溶液，使其色泽与乙管、丙管一致。如仍不一致，使用第二法。如仍不一致，使用第二法。(3)(3)醋酸盐缓冲溶液应为醋酸盐缓冲溶液应为pH3.5pH3.5(4)(4)若含高铁盐，易氧化硫化氢析出硫，影响若含高铁盐，易氧化硫化氢析出硫，影响检查，可加检查，可加维生素维生素C C还原高铁离子。还原高铁离子。第二法第二法炽灼破坏后硫代乙酰胺法炽灼破坏后硫代乙
50、酰胺法1.1.原理原理重金属可能与芳环或杂环形成较牢固的加减，重金属可能与芳环或杂环形成较牢固的加减，需先将供试品在需先将供试品在500600500600炽灼破坏得残渣，炽灼破坏得残渣，经处理后依一法检查。经处理后依一法检查。适应对象：水中、稀酸及乙醇中难溶，或受适应对象：水中、稀酸及乙醇中难溶，或受某些因素某些因素( (如自身有颜色、重金属不呈游离如自身有颜色、重金属不呈游离状态、重金属与药物形成配合物等状态、重金属与药物形成配合物等) )干扰而干扰而不适宜采用第一法。不适宜采用第一法。第二法第二法2. 2. 检查方法检查方法 置于坩埚中置于坩埚中 残渣残渣炽灼炽灼 加硫酸加硫酸硝酸硝酸 炽
