1、1HPV亚型与疾病亚型与疾病 感染生殖系统的HPV分为低危型和高危型，均可引起上皮增生性病变。低危型HPV（如：6，11，40，42，44，53，54等）仅引起上皮细胞良性病变，如尖锐湿疣和CIN I；而高危型HPV（如：16，18，31，33，35，39，45，52，58等）可引起CIN II、CIN III、浸润性宫颈癌等恶性病变。另外，HPV还与其它恶性肿瘤有关。据WHO统计，大约85%的肛门癌是由HPV感染引起；将近50%的外阴癌、阴道癌、阴茎癌，约20%的口咽癌，10%的喉癌及呼吸、消化道癌症与HPV感染有关。2HPV与子宫颈癌与子宫颈癌 宫颈癌是全球妇女恶性肿瘤中仅次于乳腺癌的第二
2、位最常见的恶性肿瘤，在中国女性中发病率居第一位。一般宫颈原位癌为发病年龄3555岁，浸润癌为4070岁。 1995年，国际癌症研究机构 (IARC)专题讨论会通过HPV感染是宫颈癌的主要原因，即HPV感染是宫颈癌发生的必要条件，99.7%的宫颈癌患者高危型HPV阳性。 2005年，IARC/WHO推荐HPV检测应用于宫颈癌筛查。 宫颈癌已成为目前人类所有癌症中唯一病因明确的癌症，而且是目前唯一可以做到早期发现的妇科肿瘤。目前预防子宫颈癌的关键在于定期进行子宫颈癌的普查。子宫颈癌的治疗效果取决于治疗的早晚。早期发现、早期诊断、早期治疗完全可以阻断宫颈癌的发生并治愈，提高存活率。如治疗较晚，特别是
3、已经发生广泛转移，治疗效果很差。3导致宫颈癌的导致宫颈癌的HPV亚型亚型 宫颈癌在全球妇女恶性肿瘤中排行第二，仅次于乳腺癌。全球每年约有50万宫颈癌新发病例。我国每年新发病例约13.15万人，占世界宫颈癌新发病例总数的28.8%。我国每年大约2万人死于宫颈癌。导致宫颈癌的常见HPV亚型为：HPV-16，HPV-18，HPV-45，HPV-31，HPV-33（来源WHO1999）。4导致宫颈癌的导致宫颈癌的HPV亚型亚型 宫颈癌在全球妇女恶性肿瘤中排行第二，仅次于乳腺癌。全球每年约有50万宫颈癌新发病例。我国每年新发病例约13.15万人，占世界宫颈癌新发病例总数的28.8%。我国每年大约2万人死
4、于宫颈癌。导致宫颈癌的常见HPV亚型为：HPV-16，HPV-18，HPV-45，HPV-31，HPV-33（来源WHO1999）。5HPV分型检测的必要性分型检测的必要性 1、HPV的感染在治疗前后，有可能存在型别的差异，这可以作为医生治疗效果的评估指标。 2、连续两次HPV分型检测显示单一型别的高危亚型的感染，显示宫颈癌发生的可能性增大，应引起极大重视。 3、HPV的感染在不同的地区，占主要地位的型别有所不同，分型检测有利对于各地研究、使用疫苗进行HPV感染的预防控制。6HPV是性传播疾病，我怎么会得性是性传播疾病，我怎么会得性病？病？ HPV在妇女中的感染率很高，除了性传播途径外，HPV
5、还可以通过多种其他接触途径传播，感染了HPV并不一定意味着您或您的配偶存在不道德的性行为。7哪些人需要做哪些人需要做HPV分型检测？分型检测？ 低危型HPV感染通常不会导致癌症，若是高危型HPV持续感染，就必须接受进一步的检查和治疗。高危人群筛查： 宫颈细胞学检测异常或可疑的患者 宫颈炎、宫颈糜烂患者 尖锐湿疣患者 有不洁性生活史的患者人群普查： 有三年以上性行为或21岁以上有性行为的妇女8HPV分型检测阴性，是否一定不会患宫颈癌？ 通常情况下，大多数妇女自身的免疫系统可以抑制或清除感染的HPV。只有高危型HPV持续感染才会导致癌症。医学已经证实，没有HPV感染就一定不会患宫颈癌。HPV分型检
6、测阴性或仅是低危阳性，患宫颈癌的风险极低，3年内可不用接受宫颈癌筛查。 9HPV筛查显著降低宫颈癌死亡率筛查显著降低宫颈癌死亡率 IARC、WHO和印度科学家组织的大规模临床研究表明：HPV筛查可以显著降低晚期宫颈癌发病率和宫颈癌死亡率，与不接受任何筛查手段的对照组相比，宫颈死亡率和晚期宫颈癌发生率均降低50%以上（数据见下表）。在随访的8年中，24380例HPV阴性的妇女中8例发生了宫颈癌，23762例pap smear 阴性的妇女中22例发生了宫颈癌，23032例VIA阴性的妇女中有25例发生了宫颈癌，因此，与pap smear和VIA相比，HPV test是更有效的宫颈癌筛查手段。10H
7、PV感染转为宫颈癌的几率只有感染转为宫颈癌的几率只有1% HPV首次检查后建议阴性:今后可以三年检查一次。阳性:建议结合妇科检查，如果宫颈光滑，没有发现糜烂或其他病变，可以不用治疗，一年后复查。同时，由于是性传播疾病，女性查出HPV阳性的话，她的伴侣可能也感染HPV，感染也可能是来自伴侣，但HPV对男性不致病，也没有症状，“国内权威专家认为，如果女方HPV感染，男方没必要检查。”HPV二次复查后建议阴性:转阴后可改为三年检查一次。阳性:建议同时做妇科检查和TCT液基细胞学检查，如果有宫颈糜烂，要针对病变本身进行治疗；如果没有发现病灶，可以用12个疗程的干扰素来抗病毒，或者用一些栓剂。同时密切观
8、察，把HPV和TCT检查的频率改为至少一年一次，半年做一次最好。11 11月20日，美国妇产科医师学会（ACOG）在线发布了第109号实践公告，对宫颈癌筛查指南进行了更新，推荐女性在21岁接受首次宫颈癌筛查，并可酌情降低筛查频率。相关论文参见妇产科学Obstet Gynecol 2009, 114(6): 1409。 最新研究结果表明，降低宫颈癌筛查频率并不影响预防效果。考虑到经济、患者心理和未来生育需求等因素，ACOG新指南建议，宫颈癌筛查的起始时间应为21岁；2130岁人群每2年筛查一次；30岁人群，若连续3次筛查结果为阴性，则可每3年筛查一次；6570岁人群，若连续3次筛查结果为阴性，且
9、近10年未获异常结果，则可停止筛查。需要增加筛查频率的人群，其危险因素包括HIV感染、免疫低下或抑制、子宫己烯雌酚暴露史、因2或3级宫颈上皮内瘤样病变（CIN）或宫颈癌接受治疗史。 12 基于A级证据的指南推荐宫颈癌筛查应在女性年满21岁时进行，应避免对小于21岁人群进行筛查，因其为宫颈癌低危人群，过早筛查会造成不必要的或有害的评估或治疗。对于2129岁女性，宫颈细胞学筛查每2年一次。对于30岁的女性，若其宫颈细胞学筛查结果连续3次为阴性、既往无CIN 2级或3级病史、无HIV感染、无免疫功能低下、无己烯雌酚治疗史，则可将筛查频率改为每3年一次。液基细胞学检测和传统细胞学检测法皆可使用。对于因
10、良性疾病接受子宫全切术的女性，若既往无高级别CIN病史，则可中止常规筛查。对于30岁女性，宜行细胞学和HPV DNA联合检测，两项测试结果均为阴性的人群为低危人群，其随后的筛查间期不应短于3年。 13 基于B级证据的指南推荐对于性行为活跃的女性青少年（例如21岁者），应检查其是否感染性传播疾病，应对其进行性传播疾病、安全性行为和避孕教育，不推荐行宫颈细胞学检测，无症状者不应行内窥镜检查。对于6570岁女性，若细胞学检测结果连续3次或3次以上为阴性，且在过去10年中均无异常结果，则可中止筛查。对于因诊为CIN 2、3级或癌症接受治疗的患者，在其完成治疗或初始监测后，至少20年内都有疾病持续或复发
11、风险，应予每年1次筛查，至少20年。对于子宫切除术中宫颈切除者、CIN 2或3级或从未达到阴性结果者，即使已结束治疗后监测，仍须接受筛查，但可延长筛查间期。对此类患者，尚无支持或反对中止筛查的数据。 基于C级证据的指南推荐在不考虑筛查频率的情况下，患者每年接受一次妇科检查为宜。对于已接种抗HPV-16、18型疫苗的女性，筛查方案同未接种疫苗者。14HPV检测的方法检测的方法 现在好多医院都在做关于HPV的检测,好多患者一经检出HPV阳性就特别恐慌.HPV检测对尖锐湿疣到底具有多大的诊断价值,相信这是好多患者都急切想知道的.下面,我们先介绍一下HPV的检测方法.15一、HPV抗原的检测 HPV感
12、染人体表皮细胞后，在细胞内增殖合成衣壳蛋白而成为HPV抗原成分.免疫酶染色可检测感染组织细胞内的HPV抗原成分，以了解有无HPV感染。HPV抗原阳性对诊断HPV感染或尖锐湿疣具有重要意义。但由于HPV抗原免疫组化方法只能确认细胞核的衣壳蛋白，而此衣壳蛋白仅出现在HPV生活周期中的一个阶段(在后期病毒颗粒中产生)，病变程度不同抗原量表达也不同，同时，这种方法需要大量病毒颗粒才出现阳性反应，此外，在制片过程中的处理也会使一些抗原丧失，故此法检出率较低，目前已很少应用。16二、HPV抗体的检测 有学者研究发现，在HPV感染的早期，由于感染时间短，HPV还未诱导出抗HPV抗体的产生，故在血清中可能检测
13、不到抗HPV抗体。随着HPV感染时间的延长，HPV诱导产生了抗HPV抗体，故可检测到血清中抗HPV抗体。这表明抗体的出现发生在尖锐湿疣病期的晚些时候，同时抗体阳性也反映曾感染过这种病毒。到目前为此，尚不能用血清学方法对HPV感染进行确诊,因此血清中HPV抗体阳性的临床意义有待正确评价17三、HPV-DNA检测 HPV的检查还可以取病变组织和或局部组织粘液、分泌物进行HPV DNA检测。PCR技术具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时，对待检原始材料质量要求低等特点。该项技术已在医学领域以及在皮肤病检查中广泛应用。目前认为PCR技术是检测HPV DNA及分型的最好方法,是当今用于尖锐湿疣以及HP
14、V感染诊断最常用的181 HPV1 HPV分型及病理学作用分型及病理学作用人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)是一种无包膜的小DNA病毒，具有将正常细胞永生化能力及强烈的嗜上皮性，高度组织和宿主特异性，可致人类皮肤和黏膜异常增生。目前已知的HPV有110多种，其中30余种可以从受感染的生殖道组织中分离出来。根据病毒致癌性的大小分为两大类：(1)低危型HPV(非癌性相关型，LRHPV)：包括HPV 6、11、42、43和一些新型HPV，HPV-DNA常为二倍体和多倍体，可致宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)
15、和部分CIN，此种病变多能自行消退，几乎未见到感染LRHPV者发展为CIN或宫颈癌。(2)高危型HPV(癌相关型，HRHPV)包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等型，HPV-DNA常为非整倍体，多不能自行消退，极少逆转，与CIN和浸润性宫颈癌有关1。还有资料显示，HPV70仅在一些浸润性宫颈癌中可检测到192 HPV2 HPV感染与宫颈癌及癌前病变的关系感染与宫颈癌及癌前病变的关系大量流行病学和分子生物学研究资料表明：HPV与宫颈癌及癌前病变密切相关。在细胞学检查正常的妇女中HPV的感染率为10.2%40.0%；低级别鳞状上皮内病变(low
16、grade squamous intraepithelial lesion,LGSIL)中 HPV感染率为64.4%90.9%；高级别鳞状上皮内病变(high grade squamous intraepithelial lesion,HGSIL)中HRHPV感染率为733%100%；宫颈癌患者中，HRHPV感染率为884%99.7%。HPV感染持续存在12年可引起轻微病变；LGSIL在24年中约有15%20%转化为HGSIL；HGSIL发展到癌前病变约需910年；癌前病变发展到浸润癌约需45年。即从HRHPV感染开始至发展为宫颈癌的时间间隔为15年。宫颈HPV感染率及HPV相关疾病的发病率也
17、具有明显的年龄分布特点：随年龄增长HPV感染率逐渐降低。Sellors等报道，在2024岁年龄段的妇女，HPV感染率最高，为24%，4549岁年龄段妇女感染率降至3.4%，推测由于青年女性性生活频繁、免疫系统未被致敏，易受HPV感染，而持续HRHPV感染者很可能发生细胞学形态异常。HPV传播途径主要为性接触传播，细胞学形态正常但可检出HPV-DNA的隐匿感染者是主要的传染源203 3 宫颈癌常规筛查方法分析宫颈癌常规筛查方法分析宫颈癌早期症状不明显，筛查对早期发现宫颈癌、降低死亡率极为重要，目前的筛查方法有宫颈巴氏涂片及组织学荧光分光镜检查法等多种。宫颈巴氏涂片是群体筛查的常规手段，但受取材、
18、涂片制作质量、阅片技术影响，准确性低，假阳性率高，重复性差，敏感性也有限，漏诊率可达30%。薄片制备、薄层涂片和TBS系统大大改进了细胞学检查的准确性，逐渐取代传统的巴氏5级分类法。新型无创伤的宫颈荧光分光镜及可观察宫颈上皮血管微小变化的阴道镜检查虽敏感、准确，但会引起不适、操作不便、费用高，不易为广大患者接受。宫颈组织活检有创，不利于人群普查。HPV检测简理易行，标本可由医生采集或患者自取，是对细胞学检测方法的重要补充。Mandelblatt等研究显示，每23年单独检测HPV用于宫颈癌筛查，与传统的单独巴氏涂片细胞学检查有同样的特异性，且更敏感、更经济。214HPV-DNA检测方法检测方法
19、4.1 通用型引物聚合酶链反应(PCR)系统(MY09/11和GP5+/6+pairs两大系统) 聚合酶链反应有较高的敏感度，可对HPV感染者进行准确的早期诊断，并可对HPV进行快速分型检测，从而有利于患者的早期发现和治疗。缺点是对实验室环境要求较高，容易发生样本间的交叉感染，从而导致假阳性率增高。 224.2 核酸杂交检测 有较好的特异性和敏感度，还可以进行HPV-DNA的分型，各种核酸杂交检测方法有一定的优缺点。234.2.1 核酸印迹原位杂交 适用于HPV分型和HPV-DNA分子量鉴定，灵敏度高，但操作复杂，需新鲜组织标本，不便于临床推广。244.2.2 斑点印迹 其敏感度和特异性均低于
20、核酸印迹原位杂交法，经济实用，但实验过程中存在有放射性污染，是环保所不能轻视的问题。254.2.3 原位杂交 通过非放射性探针对石蜡组织进行检测，且能做定位检测，假阳性率低，但灵敏度不高，大大降低了临床使用价值。264.2.4 杂交捕获法(主要为HC-系统) 杂交捕获试验是利用分子杂交化学发光，使信号放大的原理，无需基因扩增，使复杂的核酸检测变得像免疫分析般简单。首先使DNA双链释放并分解成为可以杂交的核苷酸单链，DNA单链与RNA组合探针结合为RNA-DNA杂合体，特异性抗体将RNA-DNA杂合体捕获，偶联有碱性磷酸酶的第二抗体与RNA-DNA杂合体的结合，碱性磷酸酶使酶底物发光，根据光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量，从而确定RNA-DNA杂合体的含量，其检测低限为HPV-DNA 0.21.0ng/L。HC-检测系统采用专利的全长8000bp的RNA探针及专利的特异性第一抗体，目前能一次性精确地检测出18种HPV，其中有13种高危型HPV病毒亚型，包括HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型，而这13种病毒亚型就是引起宫颈癌的直接原因。HC-检测系统是目前唯一获得美国FDA许可的HPV检测方法。此技术配有专用的标本采集保存器，常温下标本可保存2周，无需特殊实验条件，操作简单，易培训。 27
