抗体Ab课件.ppt

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资源描述

1、 抗体(Ab) 内 容 一、基本概念 二、免疫球蛋白的分子结构 三、免疫球蛋白的特点与功能 四、抗体的生物学活性 五、免疫球蛋白的免疫原性 六、人工制备的抗体 抗体(antibody,Ab)是B细胞识别抗原后增殖分化为桨细胞所产生的一种蛋白质,主要存在于血清等体液中,能与相应抗原特异性地结合,具有免疫功能。 免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白一、基本概念: 抗体和免疫球蛋白的关系: 抗体都是免疫球蛋白,并非所有免疫球蛋白都具有抗体活性。 分泌型Ig(sIg)和膜型Ig(mIg) 四肽链结构 ,链间二硫键连接 两条重链(H)和两条轻链(L

2、) 氨基端和羧基端。 (1)根据重链分类: 根据重链靠近羧基末端氨基酸组成及排列顺序不同,将重链分为种:、 根据重链组成不同,将Ig分为五类:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE(2)根据轻链分型:、型 天然Ig分子中,重链同类,轻链同型 1.重链与轻链 根据氨基酸排列顺序的不同分为: 可变区(V)和恒定区(C) 可变区(V区):氨基酸组成、排列顺序变化较大 恒定区(C区):氨基酸数量、种类、排列顺序及 含糖量都比较稳定 2.可变区与恒定区超变区( HVR)轻链:24-34、50-56、89-97重链:31-35、50-65、95-102框架区(FR) 超变区 决定簇互补区(CDR) Ig的

3、抗原结合部位, 该部位也称为CDR Ig的独特型决定簇 位于CH1与CH2之间,含有丰富的脯氨酸,因此易伸展弯曲,而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。3. 铰链区4.J链和分泌片 J链是一条多肽链,富含半胱氨酸,由浆细胞合成,以二硫键的形式共价结合到Ig的重链上。 分泌片:由黏膜上皮细胞合成和分泌,以非共价形式结合到二聚体上,保护IgA,使之不受环境中酶的破坏,并介导IgA的转运 木瓜蛋白酶(papain)水解IgG:得到两个相同的Fab段和一个Fc段。 胃蛋白酶(pepsin)裂解IgG:得到一个具有双价活性的F(ab)2段和若干个小分子多肽碎片(pFc)(三)免疫球蛋白的功能区 Ig的H链

4、、L链每隔110个氨基酸即由链内二硫键连接形成一个能行使特定功能的球性单位,称为Ig的结构域或功能区(domain)。 VH和VL:识别和结合抗原 CH和CL:同种异型的遗传标志 CH2:补体C1q结合位点, IgG可通过胎盘 CH3/CH4:与多种细胞表面的FcR结合(免疫调理,I型超敏反应)各功能区的作用三、五类免疫球蛋白的特性与功能 IgG多为单体,是唯一能通过胎盘的抗体 据重链(链)免疫原性,IgG分4个亚型(一)IgG IgG1、IgG2和IgG3能通过经典途径激活补体 血清含量最高(75%85%),也是丙种球蛋白的主要成分 半衰期较长(1624d) 主要的抗感染抗体(具有抗菌、抗病

5、毒、中和毒素和免疫调理作用) 参与II、III型超敏反应IgG的特点 为五聚体,是分子量最大的Ig,称巨球蛋白。 IgM激活补体、结合抗原、免疫调理作用比IgG强 天然血型抗体是IgM(二)IgM IgM是个体发育中最早产生的抗体,胚胎晚期已能合成,新生儿脐带血中若IgM水平升高,提示胎儿曾有宫内感染 IgM是抗原刺激后出现最早的抗体,半衰期短,故检测IgM水平可用于传染病的早期诊断。 mIgM是B细胞抗原受体(BCR)的主要成分 也可参与II、III型超敏反应IgM的特点 分为血清型和分泌型两种。 血清型IgA主要由肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生,为单体。而分泌型IgA(sIgA)是由呼吸道、

6、消化道、泌尿生殖道等处的固有层中浆细胞产生,为双体、三体或多体。 sIgA主要存在于唾液、泪液、以及呼吸道、消化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。(三)IgAIgA的特点 参与皮肤粘膜的局部抗感染作用 初乳中含有高浓度的sIgA-母乳喂养 通过替代途径激活补体 参与型超敏反应sIgA的合成和主要作用部位在黏膜 IgD是B细胞的重要表面标志 B细胞的分化过程中首先出现mIgM,mIgD的出现标志着B细胞成熟 对防止免疫耐受有一定作用(四)IgD 血清中含量最低 可与肥大细胞、嗜碱性粒细胞上的高亲和力Fc受体(FcR)结合,引起型超敏反应 FcR分布于巨噬细胞、B细胞、嗜酸粒细胞(五)IgE四、免

7、疫球蛋白的生物学活性 V区的功能: 识别和结合特异性抗原 C区的功能: 激活补体:IgM,IgG1-3;IgG4,IgA,IgE 结合细胞表面的Fc受体发挥调理作用、ADCC作用、介导I型超敏反应 穿过胎盘和黏膜选择性传递五、免疫球蛋白的免疫原性免疫球蛋白的不同结构区其免疫原性不同: 同种型(isotype):种属特异性标志 同种异型(allotype):个体特异性标志 独特型(idiotope):免疫调节网络同种型(isotype):同一物种内所有个体共同具有的Ig抗原特异性结构 同种型Ig的抗原决定簇存在于CH、CL 据CH的不同,Ig分类、亚类 据CL的不同,Ig分型、亚型同种异型(al

8、lotype):同一物种内不同个体间的Ig免疫原性的差别独特型(idotype):同一个体内不同B细胞克隆产生的Ig其超变区各自具备独特的抗原决定簇结构 多克隆抗体:多个抗原决定基机体多种抗体的混合物 单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb):由一个B细胞克隆产生的、针对某一特定抗原决定簇的高度特异性抗体 基因工程抗体六、人工制备的抗体 单克隆和多克隆抗体的比较和用途特异性敏感性均一性McAbPcAb低差无高强有1、用于免疫学检测,辅助临床诊断2、McAb用于亲和层析,分离微量可溶性抗原3、标记的McAb用于基础研究,了解细胞分化等4、制备生物导弹用于肿瘤、移植等的临床治疗。 应用:临床检测、抑制器官移植排斥、治疗自身免疫疾病、生物导弹等基因工程抗体种类人源抗体的生产过程 小 结 概念 基本结构 水解片段 功能区 生物学活性 免疫原性 人工制备的抗体

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