1、一、概述一、概述 ( (一一) )中草药化学成分的构成特点中草药化学成分的构成特点 ( (二二) ) 提取分离前的文献调研提取分离前的文献调研二、中草药有效成分的提取二、中草药有效成分的提取 （一）常用提取方法（一）常用提取方法 ( (二二) )溶剂提取法溶剂提取法 （三）水蒸气蒸馏法（三）水蒸气蒸馏法 （四）升华法（四）升华法第五节 提取分离方法（一）一、概 述( (一一) ) 中草药化学成分的构成特点中草药化学成分的构成特点 生物活性成分生物活性成分：人参皂苷（抗肿瘤主、抗心律失常、抗衰老和益智等）人参皂苷（抗肿瘤主、抗心律失常、抗衰老和益智等）多糖（增强机体免疫功能）多糖（增强机体免疫功
2、能）低聚肽（抗脂肪分解）等。低聚肽（抗脂肪分解）等。人参人参有效成分有效成分（人参皂苷按苷元的结构可分为（人参皂苷按苷元的结构可分为3 3类）类）齐墩果酸型主要有抗炎、抗血小板释放作用齐墩果酸型主要有抗炎、抗血小板释放作用原人参二醇型表现为中枢神经抑制、降低细胞内钙、原人参二醇型表现为中枢神经抑制、降低细胞内钙、抗氧化、清除自由基和改善心肌缺血再灌注损伤等抗氧化、清除自由基和改善心肌缺血再灌注损伤等作用，无溶血活性作用，无溶血活性原人参三醇型表现为中枢神经兴奋、促智、促进蛋原人参三醇型表现为中枢神经兴奋、促智、促进蛋白质、白质、DNADNA、RNARNA合成等作用，有溶血活性。合成等作用，有溶
3、血活性。人参皂苷人参皂苷Rb1Rb1、Rg1Rg1具有抗衰老和益智的作用，具有抗衰老和益智的作用，ReRe有有抗心律失常作用、抗心律失常作用、Rh2Rh2有抗肿瘤作用等。有抗肿瘤作用等。无效成分无效成分树脂、油脂、蜡、无机成分、植物色素等。树脂、油脂、蜡、无机成分、植物色素等。 (二二) 提取分离前的文献调研提取分离前的文献调研 1. 立题着眼点立题着眼点 1) 为什么要立题为什么要立题 2) 怎样做怎样做 2. 了解前人的研究工作了解前人的研究工作 1) 做过研究没有做过研究没有? 2) 研究的深度和广度研究的深度和广度 3. 原植物的鉴定原植物的鉴定 1) 原植物的拉丁学名原植物的拉丁学名
4、 2) 采集地点和时间采集地点和时间 3) 药用部位药用部位 4) 民间药用情况民间药用情况二、中草药有效成分的提取(一一) 常用提取方法常用提取方法溶剂法溶剂法蒸馏法蒸馏法原理：与水蒸气产生共沸点原理：与水蒸气产生共沸点范围：挥发油范围：挥发油升华法升华法原理：遇热挥发，遇冷凝固原理：遇热挥发，遇冷凝固范围：游离蒽醌范围：游离蒽醌原理：相似者相溶原理：相似者相溶范围：所有化学成分范围：所有化学成分 1. 1.溶剂提取法涉及的几个关键问题溶剂提取法涉及的几个关键问题O 目标成分目标成分溶解度溶解度O 溶剂溶剂( (二) ) 溶剂提取法沸点沸点介电常介电常数数(20 oC)水溶度水溶度g/100
5、g30-12080.71.892.02不溶0.007 80 35 61 77 1182.294.475.206.1117.80.0061.30.13.09 乙乙醇醇甲甲醇醇水水 56 78 65 100 20.7 26.0 31.2 81.0极极性性弱强亲脂性亲脂性有机溶剂有机溶剂亲水性亲水性有机溶剂有机溶剂水水表1O多糖、氨基酸多糖、氨基酸等成分极性较大，易溶于水等成分极性较大，易溶于水及含水醇中；及含水醇中；O鞣质鞣质是多羟基衍生物，列为亲水性化合物是多羟基衍生物，列为亲水性化合物；O苷类苷类的分子中结合有糖分子，羟基数目多，的分子中结合有糖分子，羟基数目多，能表现强亲水性能表现强亲水性；
6、O生物碱盐生物碱盐，能够离子化，加大了极性，就，能够离子化，加大了极性，就变成了亲水性化合物变成了亲水性化合物；（2 2）天然药物中各类成分的极性）天然药物中各类成分的极性O 萜类、甾体萜类、甾体等脂环类及芳香类化合物因为极性较小，易溶于氯仿、等脂环类及芳香类化合物因为极性较小，易溶于氯仿、乙醚等亲脂性溶剂中；乙醚等亲脂性溶剂中；O 油脂、挥发油、蜡、脂溶性色素油脂、挥发油、蜡、脂溶性色素都是强亲脂性成分，易溶于石油都是强亲脂性成分，易溶于石油醚等强亲脂性溶剂中醚等强亲脂性溶剂中。植物成分极性强弱植物成分极性强弱植物成分结构类型植物成分结构类型适于提取溶剂适于提取溶剂亲脂性强亲脂性强叶绿素、脂
7、肪油、挥发油叶绿素、脂肪油、挥发油石油醚石油醚亲脂性较强亲脂性较强游离生物碱、苷元、甾类、萜类、游离生物碱、苷元、甾类、萜类、某些有机酸某些有机酸乙醚、氯仿乙醚、氯仿中等中等极性极性中偏小中偏小某些苷类某些苷类 (如强心苷等如强心苷等)氯仿氯仿-乙醚乙醚 (2:1)中中 等等某些苷类某些苷类 (如黄酮苷类如黄酮苷类)乙酸乙酯乙酸乙酯中偏大中偏大某些苷类某些苷类 (如蒽醌苷、皂苷等如蒽醌苷、皂苷等)正丁醇正丁醇亲水性较强亲水性较强极性大的苷、糖类、氨基酸等极性大的苷、糖类、氨基酸等丙酮、乙醇、甲醇丙酮、乙醇、甲醇亲水性强亲水性强蛋白质、粘液汁、糖类、氨基酸、蛋白质、粘液汁、糖类、氨基酸、无机盐、
8、苷类无机盐、苷类水水表表2 天然药物各类成分的极性与提取溶剂的关系天然药物各类成分的极性与提取溶剂的关系O 总之，天然化合物在溶剂中的溶解遵循总之，天然化合物在溶剂中的溶解遵循“相似相溶相似相溶”规律。规律。即极性化合物易溶于极性溶剂，非极性化合物易溶于非极性即极性化合物易溶于极性溶剂，非极性化合物易溶于非极性溶剂，分子量太大的化合物往往不溶于任何溶剂。溶剂，分子量太大的化合物往往不溶于任何溶剂。 O 适宜的溶剂应符合以下要求适宜的溶剂应符合以下要求： 1) 1) 对目标成分溶解度大，对杂质溶解度小对目标成分溶解度大，对杂质溶解度小。 2) 2) 不与目标成分起化学反应不与目标成分起化学反应。
9、 3) 3) 廉价、易得、浓缩方便且安全无毒廉价、易得、浓缩方便且安全无毒。2 2、提取溶剂的选择3. 3. 常见溶剂提取工艺使用范围使用范围：一般在低温下进行的，适合于提取受：一般在低温下进行的，适合于提取受热易破坏的成分或含淀粉、粘液质、果胶、树胶热易破坏的成分或含淀粉、粘液质、果胶、树胶等多糖的药材。等多糖的药材。缺点缺点：提取时间长，效率低。用水要注意防腐问：提取时间长，效率低。用水要注意防腐问题。题。1) 浸渍法浸渍法：是将原料用适当的溶：是将原料用适当的溶剂在常温或温热条件下浸泡出有剂在常温或温热条件下浸泡出有效成分的一种方法。效成分的一种方法。药酒多在药酒多在 14d 以上以上；
10、2)2) 渗渗漉漉法：法：是将药材粗粉置是将药材粗粉置渗漉简内，使溶剂自上而渗漉简内，使溶剂自上而下匀速流动，达到渗透浸下匀速流动，达到渗透浸取天然取天然药药物的一种浸出法。物的一种浸出法。渗滤渗滤装置装置操作步骤：粉碎、浸润、装筒、排气、浸泡和渗操作步骤：粉碎、浸润、装筒、排气、浸泡和渗漉。漉。使用范围：使用范围：适用于受热易破坏分解的成分的适用于受热易破坏分解的成分的提取；也适用于贵重原料和毒性原料提取。提取；也适用于贵重原料和毒性原料提取。优点：优点：提取效率高（因为药材与溶剂之间能提取效率高（因为药材与溶剂之间能够始终保持较大的浓度差）；直接收集渗漉够始终保持较大的浓度差）；直接收集渗
11、漉液，省去过滤操作。液，省去过滤操作。缺点：缺点：使用溶剂量大；时间长，不宜用水。使用溶剂量大；时间长，不宜用水。 使用范围：使用范围：不易挥发的成分、受热不易破坏不易挥发的成分、受热不易破坏成分的成分的提取。提取。 优点：优点：提取较多的有效成分，符合中医传统提取较多的有效成分，符合中医传统用药习惯。用药习惯。 缺点：缺点：提取物含杂质较多，使精制困难；煎提取物含杂质较多，使精制困难；煎煮液粘度大，不易过滤。煮液粘度大，不易过滤。3) 煎煮法：煎煮法：是将药材置于适当容器是将药材置于适当容器（避免用铁器）中，（避免用铁器）中，加水加水加热煮加热煮沸一定时间，以提取其所含成分沸一定时间，以提取
12、其所含成分的一种常用方法。的一种常用方法。4) 热回流提取法热回流提取法：是用：是用有机溶剂有机溶剂作为作为提取溶液，在回流装置中对药材进提取溶液，在回流装置中对药材进行加热回流提取。行加热回流提取。 使用范围使用范围：受热不易破坏成分的提取。受热不易破坏成分的提取。 优点：优点：溶剂能循环使用，用量少。溶剂能循环使用，用量少。 缺点：缺点：受热温度高，长时间加热；受热温度高，长时间加热； 溶剂用量大，操作麻烦。溶剂用量大，操作麻烦。回流提取装置回流提取装置5）连续回流提取法：为弥补回流提取法中所需溶剂量大，操作较繁的不足，实验室常采用索氏提取法。用较少的溶剂一次提取便可提取完全。索氏提取装置
13、索氏提取装置 该提取器有上中下三部分组成，该提取器有上中下三部分组成，均为磨口接头。上部均为磨口接头。上部A A是冷凝器、是冷凝器、中部中部B B是带有虹吸管的提取器、是带有虹吸管的提取器、下部下部C C是烧瓶。是烧瓶。 1.1.冷凝管冷凝管 2.2.溶剂蒸汽上升管溶剂蒸汽上升管 3.3.虹吸管虹吸管 4.4.装有药粉的滤纸袋装有药粉的滤纸袋 5.5.溶剂溶剂 6.6.水浴水浴 优点优点：溶剂用量少，提取率高。：溶剂用量少，提取率高。 缺点缺点：提取时间长；原料少，容：提取时间长；原料少，容器小；受热易分解不宜用。器小；受热易分解不宜用。 6）超声波提取法）超声波提取法 超声波提取法超声波提取
14、法是应用超声波强化提取植是应用超声波强化提取植物的有效成分，是一种物理破碎过程。物的有效成分，是一种物理破碎过程。 超声波提取仪超声波提取仪 由于大能量的超声波作用在液体里，产生空化现由于大能量的超声波作用在液体里，产生空化现象。这种空化现象可击碎药材，加速药材中的成象。这种空化现象可击碎药材，加速药材中的成分溶入溶剂，使其进一步提取，从而增加了提取分溶入溶剂，使其进一步提取，从而增加了提取效率。因此，超声提取法的提取效率优于前述各效率。因此，超声提取法的提取效率优于前述各提取法。提取法。优点：优点：本法操作简便，适用于各种溶剂的提取；本法操作简便，适用于各种溶剂的提取；提取时间短，一般只需数
15、十分钟即可完成；不需提取时间短，一般只需数十分钟即可完成；不需加热即可达到提取目的，故也适用于对热不稳定加热即可达到提取目的，故也适用于对热不稳定成分的提取。成分的提取。缺点缺点：4.影响提取效率的因素影响提取效率的因素1.原料的采集及粉碎度原料的采集及粉碎度原料基源、产地、采收季节、贮藏、原料基源、产地、采收季节、贮藏、原料粉碎原料粉碎度（度（2060目）目）2.2.提取温度：提取温度：一般热提效率高，但要考虑有些成一般热提效率高，但要考虑有些成分温度高易破坏，应选择适宜温度。分温度高易破坏，应选择适宜温度。 3.3.提取时间提取时间: :一般提取时间长提出量大。但被提成一般提取时间长提出量
16、大。但被提成分在细胞内外溶解一旦平衡，时间长即无意义。分在细胞内外溶解一旦平衡，时间长即无意义。一般热水提以一般热水提以2 23h3h为宜，乙醇提为宜，乙醇提1-2h1-2h为宜。为宜。 4. 4. 溶剂用量溶剂用量和浓度差和浓度差：溶剂用量需根据被提取溶剂用量需根据被提取原材料的干燥程度、质地、成分在动、植物存在原材料的干燥程度、质地、成分在动、植物存在形式及体积而定，一般用量为形式及体积而定，一般用量为原料的原料的610610倍倍。溶剂用量多，浓缩费时；溶剂用量少，提取率低溶剂用量多，浓缩费时；溶剂用量少，提取率低或提取次数多。或提取次数多。浓度差是浓度差是原料组织内的浓度与外原料组织内的
17、浓度与外周溶液的浓度差。浓度差越大，越有利于周溶液的浓度差。浓度差越大，越有利于提高提提高提取效率。取效率。（三）水蒸气蒸馏法O 只适用于具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏，与水不发只适用于具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏，与水不发生反应，且难溶或不溶于水的成分的提取。生反应，且难溶或不溶于水的成分的提取。O 天然药物中的挥发油、某些小分子生物碱如麻黄碱、烟碱、槟天然药物中的挥发油、某些小分子生物碱如麻黄碱、烟碱、槟榔碱以及某些小分子的酚性物质如牡丹酚等的提取可采用水蒸榔碱以及某些小分子的酚性物质如牡丹酚等的提取可采用水蒸气蒸馏法气蒸馏法。（四）升华法O某些固体物质如某些固体物质如水杨酸
18、、苯甲酸、樟脑水杨酸、苯甲酸、樟脑等受热等受热在低于其熔点的温度下，不经过熔化就可直接在低于其熔点的温度下，不经过熔化就可直接转化为蒸气，蒸气遇冷后又凝结成固体称为升转化为蒸气，蒸气遇冷后又凝结成固体称为升华。天然药物中有一些成分具有升华性质，能华。天然药物中有一些成分具有升华性质，能利用升华法直接中药材中提取出来。但天然药利用升华法直接中药材中提取出来。但天然药物成分一般可升华的很少。物成分一般可升华的很少。 O果蔬脱水新技术实质上升华脱水法。果蔬脱水新技术实质上升华脱水法。（五）超临界二氧化碳流体萃取法（了解）超临界萃取仪超临界萃取仪超临界流体的定义O流体流体是液体和气体的总称是液体和气体
19、的总称, ,因两者都富有流动性因两者都富有流动性, ,又又有相似的运动规律有相似的运动规律, ,故合称流体。故合称流体。临界状态临界状态是物质是物质的气、液两态能平衡共存的一个边缘状态的气、液两态能平衡共存的一个边缘状态, ,在这状在这状态下态下, ,液体和它的饱和蒸汽密度相同液体和它的饱和蒸汽密度相同, ,因而它们的分因而它们的分界面消失界面消失, ,这状态只能在一定温度和压强下实现这状态只能在一定温度和压强下实现, ,此此时的温度和压强分别称为时的温度和压强分别称为“临界温度临界温度”和和“临界压临界压强强”。超临界流体超临界流体是指物质处于其临界温度和临界是指物质处于其临界温度和临界压强
20、以上而形成的一种特殊状态的流体压强以上而形成的一种特殊状态的流体 。 超临界流体萃取的基本原理O超临界流体萃取分离过程超临界流体萃取分离过程是利用超临界流体的溶解是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。当气体处于超临界流体溶解能力的影响而进行的。当气体处于超临界状态时状态时, ,成为性质介于液体和气体之间的单一相态成为性质介于液体和气体之间的单一相态, , 具有和液体相近的密度具有和液体相近的密度, , 粘度虽高于气体但明显低粘度虽高于气体但明显低于液体于液体, ,扩散系数为液体的扩散系数为液体的
21、1010100100倍倍; ; 因此对物料因此对物料有较好的有较好的渗透性和较强的溶解能力渗透性和较强的溶解能力, , 能够将物料中能够将物料中某些成分提取出来。某些成分提取出来。超临界流体萃取具有的优点 O(1)(1)萃取时间短萃取时间短: :由于超临界流体强穿透力和高由于超临界流体强穿透力和高溶解度溶解度, ,它能快速地将提取物从载体中萃出它能快速地将提取物从载体中萃出, ,既既节省溶剂节省溶剂, ,又减少了能源和人力的费用。又减少了能源和人力的费用。O(2)(2)萃取彻底萃取彻底: :萃取结果更接近实际情况萃取结果更接近实际情况, ,从而从而提高了后续分析过程的准确性和可靠性。提高了后续
22、分析过程的准确性和可靠性。O(3)(3)有利环境保护有利环境保护: :利用二氧化碳作为流体利用二氧化碳作为流体, ,解解决了有机溶剂对环境的污染决了有机溶剂对环境的污染, ,也有利于保护实也有利于保护实验室工作人员的健康。验室工作人员的健康。O(4)(4)低温萃取低温萃取: :在较低温度下萃取在较低温度下萃取, ,解决了对热解决了对热敏感样品的萃取难题。敏感样品的萃取难题。O(4)(4)萃取溶剂的极性可以改变，一定温度下，萃取溶剂的极性可以改变，一定温度下，只要改变压力或加入适宜的夹带剂即可提取不只要改变压力或加入适宜的夹带剂即可提取不同极性的物质。同极性的物质。为什么选用二氧化碳？O 温和的
23、临界条件温和的临界条件O 无毒无毒O 阻燃阻燃O 价廉易得价廉易得O 超临界超临界CO2溶解能力强溶解能力强 O 适用于化工、医药、食品等工业适用于化工、医药、食品等工业课后作业课后作业一、名词解释一、名词解释1.1.天然药物化学天然药物化学2.2.有效成分、有效部位、无效成分有效成分、有效部位、无效成分3.3.一次代谢、二次代谢一次代谢、二次代谢4.4.溶剂提取法、系统溶剂提取法溶剂提取法、系统溶剂提取法二、简答题二、简答题1.1.在天然药物中常用提取方法的原理及使用范围是在天然药物中常用提取方法的原理及使用范围是什么？什么？2.2.溶剂提取法常用的提取工艺及使用范围？溶剂提取法常用的提取工
24、艺及使用范围？3.3.常用的溶剂有哪些？极性强弱顺序如何？常用的溶剂有哪些？极性强弱顺序如何？4.4.溶剂提取法适宜的溶剂选择应符合哪些要求溶剂提取法适宜的溶剂选择应符合哪些要求 ？第三节 提取分离方法（二） 中草药有效成分的分离与精制中草药有效成分的分离与精制( (一一) )根据物质溶解度差别进行分离根据物质溶解度差别进行分离( (二二) )根据物质分配系数差异进行分离根据物质分配系数差异进行分离三、中草药有效成分的分离与精制( (一) ) 根据物质溶解度不同进行分离 1. 1. 原理原理: : 相似相溶相似相溶 2. 2. 方法方法: : （1 1）结晶法）结晶法 （2 2）试试剂剂沉淀沉
25、淀法法 （3 3）酸碱沉淀酸碱沉淀法法 （4 4）铅盐铅盐沉淀法沉淀法 （5 5）盐析法）盐析法O结晶法：结晶法：利用温度利用温度改变引起改变引起溶解度的溶解度的改变以改变以分分 离离物质物质。 理想的结晶溶剂理想的结晶溶剂必须具备下列条件：必须具备下列条件： 不与被提纯物质起化学反应。不与被提纯物质起化学反应。 选择性好，即热时溶解，冷时则析出。选择性好，即热时溶解，冷时则析出。 杂质在该溶剂中不溶或难溶。杂质在该溶剂中不溶或难溶。 溶剂易于回收。溶剂易于回收。 能给出较好的结晶。能给出较好的结晶。 无毒或毒性小。无毒或毒性小。（1 1） 结晶法O-细辛醚重结晶时，可先溶于乙醇，再滴加适细辛
26、醚重结晶时，可先溶于乙醇，再滴加适量水，即可析出很好的结晶。量水，即可析出很好的结晶。少量易溶样品溶剂少量易溶样品溶剂样品溶液样品溶液 滴加难溶样品溶剂滴加难溶样品溶剂放置放置结晶结晶 样品样品 溶液浑浊溶液浑浊O制备结晶溶液，除用单一溶剂外，也常采用混合制备结晶溶液，除用单一溶剂外，也常采用混合溶剂。溶剂。加热加热溶液澄清溶液澄清O常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。沸点低沸点低沸点高沸点高O 原理：原理：由相似相溶的溶解性规律，某些化合物在不同溶剂中的由相似相溶的溶解性规律，某些化合物在不同溶剂中的溶解度不同，通过向样品溶液中加入某种试剂或溶剂，
27、使一些溶解度不同，通过向样品溶液中加入某种试剂或溶剂，使一些物质的溶解度显著降低而沉淀析出。物质的溶解度显著降低而沉淀析出。（2 2）试剂沉淀法O对于水溶性的多糖、鞣质、蛋白质等，向其水对于水溶性的多糖、鞣质、蛋白质等，向其水溶液中加入适量乙醇（溶液中加入适量乙醇（80%）、丙酮等有机溶）、丙酮等有机溶剂就可以使它们沉淀析出。（剂就可以使它们沉淀析出。（水溶醇沉法水溶醇沉法）O例如：果胶例如：果胶生产中所用的生产中所用的“水溶醇沉水溶醇沉”工艺工艺 是用乙醇作沉淀剂把果胶从水溶液中沉淀出来。是用乙醇作沉淀剂把果胶从水溶液中沉淀出来。O丹参注射液丹参注射液生产中所用的生产中所用的“水溶醇沉水溶醇
28、沉”工艺工艺 是用乙醇作沉淀剂把多糖、鞣质、蛋白质等杂是用乙醇作沉淀剂把多糖、鞣质、蛋白质等杂质从水溶液中沉淀出来。质从水溶液中沉淀出来。O当用醇水提取叶类植物有效成分时，往往有大当用醇水提取叶类植物有效成分时，往往有大量的叶绿素被提取出来，一种除去叶绿素的方量的叶绿素被提取出来，一种除去叶绿素的方法是利用叶绿素不溶于水的特点，把浸提液浓法是利用叶绿素不溶于水的特点，把浸提液浓缩，回收乙醇后的水溶液放置在冰箱中静置使缩，回收乙醇后的水溶液放置在冰箱中静置使叶绿素沉淀析出。叶绿素沉淀析出。（醇溶水沉法）（醇溶水沉法）3 3、酸碱沉淀法 原理原理：利用某些成分在酸（碱）中溶解，继而又利用某些成分在
29、酸（碱）中溶解，继而又在碱（酸）中生成沉淀的性质达到分离的方法。在碱（酸）中生成沉淀的性质达到分离的方法。这种沉淀反应是可逆的。这种沉淀反应是可逆的。 使用范围使用范围：分离提纯酸性、碱性或两性有机化合：分离提纯酸性、碱性或两性有机化合物，如黄酮、蒽醌类酚酸性成分、一些生物碱、物，如黄酮、蒽醌类酚酸性成分、一些生物碱、蛋白质等。蛋白质等。有机溶剂有机溶剂H+/H2O含生物碱含生物碱混合物混合物生物碱盐生物碱盐的混合液的混合液OH- 游离生物碱游离生物碱酸酸碱法碱法总生物碱总生物碱乙乙醚醚有机酸有机酸水层液水层液4 4、铅盐沉淀法 原理原理：利用中性醋酸铅和碱式醋酸铅在水或稀醇溶液溶液中能与许：
30、利用中性醋酸铅和碱式醋酸铅在水或稀醇溶液溶液中能与许多天然药物化学成分生成难溶性的铅盐或铅铬络合物沉淀的性质，多天然药物化学成分生成难溶性的铅盐或铅铬络合物沉淀的性质，使有效成分与杂质分离。使有效成分与杂质分离。5、盐析法、盐析法在天然药物的水提液中，加入无机盐，使其达到一在天然药物的水提液中，加入无机盐，使其达到一定浓度或饱和，促使有效成分在水中的溶解度降低定浓度或饱和，促使有效成分在水中的溶解度降低而沉淀析出，与其它水溶性较大的杂质分离。而沉淀析出，与其它水溶性较大的杂质分离。常作盐析的无机盐：常作盐析的无机盐：NaClNaCl、NaNa2 2SO4 、MgSO4等。等。MgSO4三七三七
31、皂苷乙皂苷乙三七三七水提液水提液饱和饱和K = CU / CLK值与萃取次数成反比，即值与萃取次数成反比，即K值越值越大，萃取次数越少，反之越多。大，萃取次数越少，反之越多。1) 分配系数（分配系数（K值）与萃取次数的关系值）与萃取次数的关系原理原理: 利用物质在两种互不相溶的利用物质在两种互不相溶的溶剂中的分配系数的不溶剂中的分配系数的不 同达到分离同达到分离 。 分配系数分配系数K值值:一种溶质在两相溶剂中的分配比。一种溶质在两相溶剂中的分配比。K值在一定的温度和压力下为一常数。值在一定的温度和压力下为一常数。1、 液液-液萃取液萃取O主要分离方法主要分离方法1.1.简单的液简单的液- -
32、液萃取法液萃取法2.2.逆流分溶法（逆流分溶法（CCDCCD）3.3.液滴逆流色谱法（液滴逆流色谱法（DCCCDCCC）4.4.高速逆流色谱法（高速逆流色谱法（HSCCCHSCCC）5.5.纸色谱法（纸色谱法（PCPC）6.6.气气- -液分配柱色谱法（液分配柱色谱法（GLCGLC）7.7.液液- -液分配柱色谱法（液分配柱色谱法（LLCLLC） 纸色谱法纸色谱法 PCPC （paper chromatographypaper chromatography）含义含义: :以滤纸纤维为惰性载体的平面色谱。以滤纸纤维为惰性载体的平面色谱。支持剂：纤维素（滤纸）支持剂：纤维素（滤纸）固定相：纤维素上
33、吸附的水固定相：纤维素上吸附的水(20-25%)(20-25%)展开剂：与水不相混溶的有机溶剂展开剂：与水不相混溶的有机溶剂 或水饱和的有机溶剂或水饱和的有机溶剂RfRf值：物质极性大，值：物质极性大， R Rf f值小；值小； 物质极性小，物质极性小， R Rf f值大。值大。应用：适合于分离亲水性较强的物应用：适合于分离亲水性较强的物质。质。ba前沿前沿被测被测物质物质原点原点Rf=ba展展开开室室O液液- -液分配柱色谱法液分配柱色谱法柱色谱柱色谱：将吸附固定液的载体装入色谱管中：将吸附固定液的载体装入色谱管中进行分离和检测混合物成分的色谱法。进行分离和检测混合物成分的色谱法。按是否加压
34、分按是否加压分：常压柱色谱、加压柱色谱：常压柱色谱、加压柱色谱按相极性分按相极性分：正相色谱、反相色谱：正相色谱、反相色谱载体载体：硅胶（含水：硅胶（含水17%17%以上）、硅藻土及纤以上）、硅藻土及纤维素等维素等O 1.定义：吸附色谱法定义：吸附色谱法（adsorption chromatography）:是利用同一是利用同一吸附剂吸附剂对混合物中各成分吸附能力的不同而达到分离的色谱方法。对混合物中各成分吸附能力的不同而达到分离的色谱方法。2.2.吸附类型：吸附类型：1 1）物理吸附）物理吸附（溶液分子溶液分子与吸附剂表面分子的分子间作用力）：硅胶、氧化铝与吸附剂表面分子的分子间作用力）：硅
35、胶、氧化铝及活性炭为吸附剂的吸附。及活性炭为吸附剂的吸附。2 2）化学吸附：）化学吸附：如黄酮等酚酸性物质被碱性氧化铝吸附，生物碱被酸性硅胶吸如黄酮等酚酸性物质被碱性氧化铝吸附，生物碱被酸性硅胶吸附等。附等。3 3）半化学吸附：）半化学吸附：如聚酰胺与黄酮类、蒽醌类等化合物之间的氢键吸附。介于如聚酰胺与黄酮类、蒽醌类等化合物之间的氢键吸附。介于物理吸附与化学吸附之间物理吸附与化学吸附之间。O吸附剂的种类及特点吸附剂的种类及特点1.1.极性吸附剂极性吸附剂（氧化铝、硅胶）特点：（氧化铝、硅胶）特点： a.a.对极性强的物质吸附能力强。对极性强的物质吸附能力强。 b.b.溶剂极性减弱，则吸附剂对溶
36、质的吸附能溶剂极性减弱，则吸附剂对溶质的吸附能力增强；反之，则减弱。力增强；反之，则减弱。 c. .溶质即使被硅胶、氧化铝吸附，一旦加入溶质即使被硅胶、氧化铝吸附，一旦加入极性较强的溶剂时，又可被置换洗脱下来。极性较强的溶剂时，又可被置换洗脱下来。OHOHHO硅胶柱硅胶柱OH 硅胶硅胶薄层板薄层板洗脱剂洗脱剂BA吸附剂吸附剂O吸附柱色谱用于物质的分离，吸附柱色谱用于物质的分离，注意以下几点：注意以下几点： （1）层析柱的选择：层析柱一般层析柱的选择：层析柱一般使用下瑞带有活塞的破璃管，使用下瑞带有活塞的破璃管，柱的直径与高度比为柱的直径与高度比为1 1：10101 1：4040，柱的大小视分离
37、样品的量，柱的大小视分离样品的量而定，一而定，一般般能装样品的能装样品的30305050倍量的吸附剂即可。倍量的吸附剂即可。（）（）装柱装柱选用选用极性小的溶剂极性小的溶剂装柱和溶解样品，以利于在吸附柱上形成装柱和溶解样品，以利于在吸附柱上形成狭窄狭窄的原始谱带。或用极性稍大的溶剂溶解样品后，以少量吸附剂拌的原始谱带。或用极性稍大的溶剂溶解样品后，以少量吸附剂拌匀挥干，上柱。匀挥干，上柱。（3）洗脱剂的选择洗脱剂的选择：在进行柱层析时，用于冲洗：在进行柱层析时，用于冲洗加有样品柱子的溶剂，习惯上称加有样品柱子的溶剂，习惯上称洗脱剂洗脱剂（用于薄层与纸层析展开的溶剂称（用于薄层与纸层析展开的溶剂
38、称展开剂展开剂）。）。洗脱剂的选择须根据洗脱剂的选择须根据被分离物质与所用的吸附剂被分离物质与所用的吸附剂性质这两者结合起来加以考虑。性质这两者结合起来加以考虑。 O当用氧化铝、硅胶等极性吸附剂进行分离时，若当用氧化铝、硅胶等极性吸附剂进行分离时，若被分离物质为被分离物质为弱极性物质弱极性物质，一般选用，一般选用弱极性溶剂弱极性溶剂为洗脱剂；若被分离物质为为洗脱剂；若被分离物质为强极性成分强极性成分，则需选，则需选用用强极性溶剂强极性溶剂为洗脱剂。溶剂极性越大，洗脱能为洗脱剂。溶剂极性越大，洗脱能力越强。力越强。O常用的洗脱剂按洗脱能力由小到大排列如下：石常用的洗脱剂按洗脱能力由小到大排列如下
39、：石油醚、己烷、苯、甲苯、乙醚、氯仿、醋酸乙酯、油醚、己烷、苯、甲苯、乙醚、氯仿、醋酸乙酯、醋酸甲酯、丙酮、乙醇、甲醇。醋酸甲酯、丙酮、乙醇、甲醇。（）溶剂系统可用（）溶剂系统可用TLCTLC进行筛选。以进行筛选。以TLCTLC展开时使组分展开时使组分R Rf f值达到值达到0.20.20.30.3的溶剂系统作为最佳溶剂系统进行洗脱。的溶剂系统作为最佳溶剂系统进行洗脱。（）为避免化学吸附，酸性物质宜用硅胶、碱性物质宜用氧化铝作）为避免化学吸附，酸性物质宜用硅胶、碱性物质宜用氧化铝作为吸附剂进行分离。通常在分离酸性（或碱性）物质时，洗脱溶剂为吸附剂进行分离。通常在分离酸性（或碱性）物质时，洗脱溶
40、剂中常加入适量的中常加入适量的醋酸（或氨、吡啶、二乙胺醋酸（或氨、吡啶、二乙胺），以防止拖尾，改善），以防止拖尾，改善分离效果。分离效果。 O聚酰胺吸附色谱法：聚酰胺吸附色谱法：属于氢键吸附属于氢键吸附（1 1）聚酰胺的吸附原理：）聚酰胺的吸附原理： 通过分子中的酰胺通过分子中的酰胺羰基羰基与酚类、黄酮类化与酚类、黄酮类化合物的合物的酚羟基酚羟基，或酰胺键上的游离，或酰胺键上的游离胺基胺基与与醌类、脂肪酸上的醌类、脂肪酸上的羰基羰基形成形成氢键氢键缔合而产缔合而产生吸附。生吸附。CH2CCH2CH2CH2CH2CH2COCH2NOHCH2NHCH2CCH2CH2CH2CH2NCOCH2OHNH
41、OOOH移动相固定相聚酰胺吸附层析原理聚酰胺吸附层析原理（1 1）大孔吸附树脂的吸附大孔吸附树脂的吸附原理原理由于由于吸附性和分子筛原理吸附性和分子筛原理，有机化合物吸附力的不同及分子量的不同，在大，有机化合物吸附力的不同及分子量的不同，在大孔吸附脂上经一定的溶剂洗脱而分开。孔吸附脂上经一定的溶剂洗脱而分开。 吸附性吸附性 范德华引力或产生氢键的结果。范德华引力或产生氢键的结果。分子筛分子筛 本身多孔性结构所决定。本身多孔性结构所决定。O大孔吸附树脂大孔吸附树脂：分为极性和非极性 （2 2）应用）应用O苷苷与与糖类糖类的分离的分离、生物碱、生物碱精制精制。最最常用方法：常用方法：凝胶滤过法凝胶
42、滤过法又叫又叫凝胶色谱法、凝胶色谱法、 排阻色谱排阻色谱等。等。 主要用于主要用于水溶性大分子化合物水溶性大分子化合物的分离和精制，的分离和精制， 如多糖、蛋白质、多肽类化合物分离。如多糖、蛋白质、多肽类化合物分离。O 凝胶色谱法凝胶色谱法：将含有大小不同分子的混合物样品液，通过多孔性：将含有大小不同分子的混合物样品液，通过多孔性凝胶（固定相），用洗脱剂将分子量由大到小的化合物先后洗脱凝胶（固定相），用洗脱剂将分子量由大到小的化合物先后洗脱的一种分离方法。的一种分离方法。1.1.凝胶滤过法分离原理凝胶滤过法分离原理：O凝胶色谱相当于凝胶色谱相当于分子筛分子筛的作用。的作用。凝胶颗粒中有许多网眼
43、，色谱凝胶颗粒中有许多网眼，色谱过程中，小分子化合物可进入过程中，小分子化合物可进入网眼；大分子化合物被阻滞在网眼；大分子化合物被阻滞在颗粒外，不能进入网孔，所受颗粒外，不能进入网孔，所受阻力小，移动速度快，随洗脱阻力小，移动速度快，随洗脱液先流出柱外；小分子进入凝液先流出柱外；小分子进入凝胶颗粒内部，受阻力大，移动胶颗粒内部，受阻力大，移动速度慢速度慢 ，后流出。，后流出。大分大分子子小分小分子子 天然有机化合物中，具有酸性、碱性及两性基团的分子，在水中天然有机化合物中，具有酸性、碱性及两性基团的分子，在水中多呈多呈离解离解状态，据此可用离子交换法或电泳技术进行分离。以下状态，据此可用离子交
44、换法或电泳技术进行分离。以下仅简单介绍仅简单介绍离子交换法。离子交换法。 1.1.原理：原理：是以是以离子交换树脂离子交换树脂作为固定相，用水或含水溶剂作为固定相，用水或含水溶剂为为流动流动相。当流动相流过交换柱时，溶液中的中性分子及不与离子交换树相。当流动相流过交换柱时，溶液中的中性分子及不与离子交换树脂交换基团发生交换的化合物将通过柱子从柱底流出，而具有可交脂交换基团发生交换的化合物将通过柱子从柱底流出，而具有可交换的离子则与树脂上的交换基团进行离子交换并被吸附到柱上，随换的离子则与树脂上的交换基团进行离子交换并被吸附到柱上，随后改变条件，并用适当溶剂从柱上洗脱下来，即可实现物质分离。后改
45、变条件，并用适当溶剂从柱上洗脱下来，即可实现物质分离。C HSO3HC H2C HC H2C HS O3HC H2SO3HC HSO3HC H2C HC H2C HS O3H 图图 强酸性阳离子交换树脂的结构强酸性阳离子交换树脂的结构2.结构及性质结构及性质离子交换树脂外观离子交换树脂外观均为球形颗粒，不均为球形颗粒，不溶于水，但可在水溶于水，但可在水中膨胀中膨胀。b.b.阴离子交换树脂阴离子交换树脂 强碱性强碱性NN+ +（CHCH3 3) )3 3ClCl- - 弱碱性（弱碱性（NHNH2 2、NHNH、 N N）C HSO3HC H2C HC H2C HS O3HC H2SO3HC HSO3HC H2C HC H2C HS O3H3.3.分类：分类：a.a.阳离子交换树脂阳离子交换树脂 强酸性（强酸性（SOSO3 3- -H H+ +） 弱酸性（弱酸性（COOCOO- -H H+ +）阳离子交换树脂阳离子交换树脂阴离子交换树脂阴离子交换树脂6.应用应用主要用于能产生离子型的成分如主要用于能产生离子型的成分如氨基酸、氨基酸、肽类、生物碱、有机酸、酚类肽类、生物碱、有机酸、酚类等。等。结束
