1、1ppt课件弧菌科弧菌科弧菌属弧菌属异单胞菌属异单胞菌属发光杆菌属发光杆菌属等共等共8 8个属个属O1O1群霍乱弧菌群霍乱弧菌非非O1O1群霍乱弧菌群霍乱弧菌副溶血弧菌副溶血弧菌拟态弧菌拟态弧菌等等6666个种个种2ppt课件弧菌属弧菌属（VibrioVibrio）的共同生物学特性）的共同生物学特性: :除麦氏弧菌外，氧化酶阳性、还原硝酸盐除麦氏弧菌外，氧化酶阳性、还原硝酸盐发酵葡萄糖产酸罕见产气发酵葡萄糖产酸罕见产气对对O/129O/129敏感（近年出现抗性株）敏感（近年出现抗性株）钠离子能刺激其生长，部分菌株嗜盐钠离子能刺激其生长，部分菌株嗜盐兼性厌氧，营养要求不高兼性厌氧，营养要求不高革
2、兰阴性、弧形（短杆）菌、动力（）革兰阴性、弧形（短杆）菌、动力（）3ppt课件弧菌属的致病性：弧菌属的致病性：（含盐和海水环境中自身微生物群的一部分）（含盐和海水环境中自身微生物群的一部分） 肠道内感染（霍乱、胃肠炎）肠道内感染（霍乱、胃肠炎） 肠道外感染（伤口感染、败血症等）肠道外感染（伤口感染、败血症等） 4ppt课件致病性弧菌所引起的疾病致病性弧菌所引起的疾病种 所致疾病 临床意义 标本来源O1群霍乱弧菌 霍乱 主要致病菌 粪便O139群霍乱弧菌 霍乱 主要致病菌 粪便非O1群霍乱弧菌 胃肠炎 主要致病菌 粪便、血副溶血弧菌 胃肠炎 主要致病菌 粪便、伤口创伤弧菌创伤弧菌 败血症、伤口感
3、染败血症、伤口感染 主要致病菌主要致病菌 粪便、伤口粪便、伤口少女弧菌 伤口感染 散发感染 伤口溶藻弧菌 伤口感染 散发感染 耳、伤霍利斯弧菌 胃肠炎 散发感染 粪便拟态弧菌 胃肠炎 散发感染 粪便河弧菌 胃肠炎 罕见感染 粪便麦氏弧菌 胃肠炎 罕见感染 粪便氟尼斯弧菌 胃肠炎 罕见感染辛辛那提弧菌 菌血症、脑炎 罕见感染鲨鱼弧菌 伤口感染 罕见感染5ppt课件 霍乱弧菌是烈性肠道传染病霍乱的霍乱弧菌是烈性肠道传染病霍乱的病原菌，为我国法定传染病（甲类），病原菌，为我国法定传染病（甲类），俗称俗称2 2号病。（号病。（1 1号病为鼠疫）。号病为鼠疫）。6ppt课件 血清学分群（型）在流行病学上
4、有价值血清学分群（型）在流行病学上有价值 抗原抗原H 抗原：共同抗原，特异性低O 抗原（A、B、C)：是分群和分型的基础。 1.依据O抗原不同分155个血清群（O1群、 O139群、非O1群霍乱弧菌） 2.O1群有三个血清型 AB构成小川型（Ogawa) AC构成稻叶型（Inaba） ABC构成彦岛型(Hikojima） 3.每个血清型根据表型不同分成 古典和El-Tor两个生物型。7ppt课件生物分型：O1群霍乱弧菌噬菌体分型： 古典生物型El-Tor生物型第IV组噬菌体 古典生物型 第V组噬菌体 El-Tor生物型 8ppt课件1 1817-1923 817-1923 共共6 6次次 印度
5、恒河三角洲印度恒河三角洲 古典生物型古典生物型1961 1961 第第7 7次次 印度尼西亚印度尼西亚 EltorEltor生物型生物型1992.10 1992.10 孟加拉湾的印度、孟加拉孟加拉湾的印度、孟加拉 O O1391399ppt课件O139O139群霍乱弧菌在亚洲的流行群霍乱弧菌在亚洲的流行(1992.10-1994.11)(1992.10-1994.11)10ppt课件( (致病因素致病因素) )进入小肠，鞭毛、菌毛、分泌黏液，O139群有荚膜穿过小肠黏膜表面黏液层黏附于小肠黏膜上皮细胞刷状缘的微绒毛上大量繁殖1.1.侵袭力侵袭力11ppt课件霍乱弧菌肠毒素（霍乱弧菌肠毒素（CE
6、, cholera enterotoxinCE, cholera enterotoxin）A1:活性亚单位 21812A2:连接亚单位 5000B：结合亚单位MW：80000-90000( (致病因素致病因素) )2.2.霍乱肠毒素霍乱肠毒素12ppt课件13ppt课件霍乱弧菌在小肠黏膜部位的致病机制霍乱弧菌在小肠黏膜部位的致病机制14ppt课件15ppt课件16ppt课件17ppt课件18ppt课件19ppt课件20ppt课件霍乱弧菌的致病过程霍乱弧菌的致病过程21ppt课件霍乱弧菌的致病霍乱弧菌的致病（严重时液体丢失量达（严重时液体丢失量达5005001000ml/h1000ml/h）剧烈
7、上吐下泻，严重脱水、酸中毒、痉挛、尿闭、休克、死亡。22ppt课件1.前驱期 无明显前驱症状，或轻度腹鸣、腹胀和不适。23ppt课件2.吐泻期 持续23天，因剧烈吐泻造成大量水分和电解质丧失。24ppt课件3 3. .脱水虚脱期脱水虚脱期 脱水貌，洗衣工手；脱水貌，洗衣工手； 循环衰竭、代谢中毒、急性肾衰；循环衰竭、代谢中毒、急性肾衰； 水电解质平衡紊乱导致肌肉痉挛。水电解质平衡紊乱导致肌肉痉挛。4 4. .恢复期恢复期 各种症状趋于缓解，但可出现发热各种症状趋于缓解，但可出现发热25ppt课件霍乱弧菌的革兰染色结果霍乱弧菌的革兰染色结果( (纯培养革兰染色纯培养革兰染色) )描述：描述：革兰
8、阴性，革兰阴性，弯曲弧形弯曲弧形或逗点状，或逗点状，粪便标本粪便标本中可首尾中可首尾相接鱼群相接鱼群样平行排样平行排列列26ppt课件鱼群样排列27ppt课件霍乱弧菌形态（电镜）28ppt课件霍乱弧菌的扫描电镜图霍乱弧菌的扫描电镜图（金属镀膜）（金属镀膜）( (纯培养扫描电镜纯培养扫描电镜) )描述：描述：弯曲弧弯曲弧形或逗形或逗点状点状29ppt课件霍乱患者小肠黏膜上皮霍乱患者小肠黏膜上皮局部平切电镜图局部平切电镜图霍乱弧菌扫描电镜图霍乱弧菌扫描电镜图（金属镀膜）（金属镀膜）( (电镜电镜) )30ppt课件霍乱弧菌的糖原颗粒霍乱弧菌的糖原颗粒（*）超薄切片，105 000 ( (电镜电镜)
9、 )31ppt课件霍乱弧菌的运动模式图霍乱弧菌的运动模式图( (米泔水样便米泔水样便) )描述：描述：穿梭或穿梭或流星样流星样动力动力32ppt课件霍乱弧菌的鞭毛霍乱弧菌的鞭毛( (电镜电镜) )33ppt课件霍乱弧菌的鞭毛染色霍乱弧菌的鞭毛染色( (特殊染色特殊染色10,000)10,000)34ppt课件( (培养特性培养条件培养特性培养条件) )需氧或兼性厌氧，营养要求不高需氧或兼性厌氧，营养要求不高最适生长温度最适生长温度3737最适最适pH8.2pH8.29.0 Max:10.2 (9.0 Max:10.2 (耐碱怕酸耐碱怕酸) )EltorEltor生物型在血平板上可形成生物型在血
10、平板上可形成- -溶血（有变异）溶血（有变异）35ppt课件 初次分离用初次分离用pH8.5pH8.5碱性蛋白胨水，经碱性蛋白胨水，经4 46 6小时小时液体表面大量繁殖，形成菌膜。液体表面大量繁殖，形成菌膜。36ppt课件( (培养特性选择鉴别性平板培养特性选择鉴别性平板) )TCBSTCBS（硫代硫酸盐硫代硫酸盐- -枸橼酸盐枸橼酸盐- -胆盐胆盐- -蔗糖琼脂平板）蔗糖琼脂平板）霍乱弧菌在霍乱弧菌在TCBSTCBS琼脂平板上形成琼脂平板上形成发酵蔗糖的较大的黄色菌落发酵蔗糖的较大的黄色菌落37ppt课件( (培养特性选择鉴别性平板培养特性选择鉴别性平板) )含亚碲酸钾的培养基：含亚碲酸钾
11、的培养基：4 4号琼脂号琼脂 庆大霉素琼脂庆大霉素琼脂霍乱弧菌在含亚碲酸钾的琼脂平板上将碲离子还霍乱弧菌在含亚碲酸钾的琼脂平板上将碲离子还原成原子态的碲，形成有灰褐色中心的菌落原成原子态的碲，形成有灰褐色中心的菌落38ppt课件( (重要的生化反应重要的生化反应) )霍乱弧菌副溶血弧菌拟态弧菌麦氏弧菌麦氏弧菌氧化酶 硝酸盐还原 39ppt课件( (重要的生化反应重要的生化反应) )除霍乱和拟态弧菌外，其余弧菌在不含盐的培除霍乱和拟态弧菌外，其余弧菌在不含盐的培养基上不生长养基上不生长霍乱弧菌拟态弧菌副溶血弧菌耐盐试验(%NaCl)0% 6% 7% 10% 40ppt课件Y氧化酶、吲哚、枸橼酸盐
12、利用、明胶实验（）Y赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶（）、精氨酸双水解（）、动力（）Y发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖蔗糖、甘露醇，乳糖（v）生物学特性生物学特性 （重要的生化反应）41ppt课件( (生物型的区分：根据生化反应分型生物型的区分：根据生化反应分型) )42ppt课件( (血清型：根据抗原分型血清型：根据抗原分型) )是否与是否与 O1 抗血清凝集抗血清凝集O1 群非 O1 群稻叶型(Inaba)小川型(Ogawa)彦岛型(Hikojima)根据根据 O 抗原组成不同抗原组成不同ACABABC43ppt课件( (抵抗力抵抗力) )河水中：20天 蔬菜水果上：1周 冰内：4天耐碱怕酸：胃酸中存活4分钟
13、 pH10.2仍能生长对庆大霉素耐药：用于制作选择性培养基多粘菌素B(50u/ml)：Eltro biotype耐药， Classic biotype敏感，可作为分型依据对热、干燥、日光和常用消毒剂敏感， 10012min即可杀死44ppt课件患者的米泔水样便、呕吐物、尸检肠内容物或携带有病原菌的海产品和污染的水源等45ppt课件（1 1）直接镜检：直接镜检：取标本涂片取标本涂片2 2张，乙醇或甲醇张，乙醇或甲醇固定，革兰染色，油镜观察。固定，革兰染色，油镜观察。46ppt课件（2）动力和制动试验：动力和制动试验：水样便，悬滴（压滴）、高水样便，悬滴（压滴）、高倍镜、暗视野观察动力：穿梭似流星
14、状。同法制备倍镜、暗视野观察动力：穿梭似流星状。同法制备另一标本，加入另一标本，加入1滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清（效价清（效价1:64）；可见运动活泼的细菌运动停止）；可见运动活泼的细菌运动停止并发生凝集，为制动试验阳性。并发生凝集，为制动试验阳性。（3）玻片凝集：玻片凝集：O1和和O139抗体抗体（4）分离培养分离培养：常用碱性蛋白胨水、选择性平板：常用碱性蛋白胨水、选择性平板（TCBS等），菌落特征和蔗糖发酵菌落，进一步鉴等），菌落特征和蔗糖发酵菌落，进一步鉴定。定。47ppt课件l l）初步鉴定：与初步鉴定：与0101群和群和O139O139群抗血清群抗血
15、清( (多价和单多价和单 价）凝集试验，菌落和菌体形态、氧化酶试验等价）凝集试验，菌落和菌体形态、氧化酶试验等 作出初步报告。作出初步报告。2 2）最后鉴定：根据纯培养后全面生化反应、血清学）最后鉴定：根据纯培养后全面生化反应、血清学 分群及分型、生物型。分群及分型、生物型。 48ppt课件 (1)(1)霍乱红试验霍乱红试验(2)(2)O/129O/129敏感试验敏感试验(3)(3)黏丝试验黏丝试验（4 4）耐盐试验耐盐试验 49ppt课件 a.羊红细胞溶血试验羊红细胞溶血试验 b.鸡红细胞凝集试验鸡红细胞凝集试验 c. VP试验试验 d.多粘菌素多粘菌素B敏感试验敏感试验 e. 第第IV和和
16、V组霍乱弧菌噬菌体裂解试验组霍乱弧菌噬菌体裂解试验50ppt课件 Y3.鉴别试验鉴别试验 Y霍乱弧菌霍乱弧菌与与拟态弧菌拟态弧菌鉴别：蔗糖发酵鉴别：蔗糖发酵 （）（） （）（）Y霍乱弧菌霍乱弧菌和气单胞菌和邻单胞菌和气单胞菌和邻单胞菌鉴别：黏丝试验鉴别：黏丝试验 （）（） （）（）51ppt课件副溶血弧菌副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus)52ppt课件临床意义临床意义Y人食入污染的海产品发病（食物中毒、急性腹泻）、伤口感染、菌血症。Y致病因子：TDH、TRH和菌毛53ppt课件生物学特性生物学特性（形态特征）（形态特征） 革兰阴性直或微弯杆菌，极端单鞭毛，无荚膜副溶血
17、弧菌革兰染色54ppt课件生物学特性（培养特征）生物学特性（培养特征）Y需氧或兼性厌氧Y营养要求不高，嗜盐（无盐不生长嗜盐（无盐不生长,最适盐浓度最适盐浓度3.5%）Y最适最适pH7.78.0，最适温度，最适温度3037YTCBSTCBS上形成绿色菌落上形成绿色菌落副溶血弧菌在TCBS上菌落55ppt课件生物学特性（培养特征）生物学特性（培养特征）Y从腹泻患者中分离到的副溶血弧菌从腹泻患者中分离到的副溶血弧菌95%以上在我妻培养基（以上在我妻培养基（人血人血培养基）上可产生培养基）上可产生-溶血现象，称为溶血现象，称为神奈川现象神奈川现象（Kanagawa phenomenon, KP）Y在在
18、SS平板上形成扁平，无色半透明，蜡滴状的菌落，不易刮下，平板上形成扁平，无色半透明，蜡滴状的菌落，不易刮下，有辛辣味。有辛辣味。56ppt课件生物学特性（生化特征）生物学特性（生化特征）Y氧化酶氧化酶 +Y蔗糖发酵蔗糖发酵 -Y葡萄糖发酵葡萄糖发酵 + NaCl生长试验生长试验Y0%NaCl -Y3%NaCl +Y7%NaCl +Y10%NaCl -Y脲酶脲酶 + / -(临床分离菌株常阳性）57ppt课件标本3.5%NaCl碱性蛋白胨水培养基TCBS分离培养可疑菌落（绿色）纯培养菌种鉴定毒素测定微生物学检验程序58ppt课件鉴定特征Y革兰阴性弧菌或杆菌，动力（）Y氧化酶（），临床分离株脲酶常
19、（）YTCBS上绿色菌落、氯化钠生长试验Y神奈川现象(+)Y各种生化试验YTDH和TRH的检测：毒素和基因检测59ppt课件气单胞菌属和邻单胞菌属气单胞菌属和邻单胞菌属Aeromonas and Plesiomonas60ppt课件分类根据分子遗传学研究：Y气单胞菌属独立成气单胞菌科Y邻单胞菌属（仅一个种：类志贺邻单胞菌）并入肠杆菌科61ppt课件临床意义（气单胞菌：肠道致病菌）62ppt课件临床意义（邻单胞菌属）Y所致疾病： 肠道内感染：胃肠炎（水样泻或痢疾样腹泻） 肠道外感染：菌血症等（免疫力低下人群发生） Y病史：进食生水或海产品63ppt课件气单胞菌属的描述气单胞菌属的描述Y革兰阴性直
20、或球杆菌，大多为极端单鞭毛；Y生长温度范围广（045）；Y氧化酶（）、触酶（）、硝酸盐还原（）、发酵葡萄糖产酸、有的产气、产生多种胞外酶；Y对O129耐药；Y主要存在于水生系统（更易生活于盐水和淡水交界处，海洋环境中偶见）。64ppt课件邻单胞菌属的描述邻单胞菌属的描述Y革兰阴性杆菌，极端25根鞭毛（侧鞭毛）；Y生长温度范围广（845）；Y氧化酶（）、触酶（）、硝酸盐还原（）、发酵葡萄糖产酸不产气；Y可耐受的NaCl浓度为05；Y大多数菌株对O129敏感；Y主要存在于水生系统（淡水和蒸汽水中比海水环境更易存在）。65ppt课件对人致病的弧菌、气单胞菌和邻单胞菌的特征 特征 霍乱和拟态弧菌 其他
21、弧菌 气单胞菌 邻单胞菌生长 0NaCl + - + + 6%NaCl + + - -对O/129敏感性 10ug + +/- - +/- 150ug + + - +氨苄青霉素 +/- + - -（10ug)敏感性葡萄糖产气 - - +/- -黏丝试验 + + - -66ppt课件KEY POINTSYThe genus Vibrio is calssified in the family Vibrionaceae, and it is the type genus for the family. YVibrio cholera is the pathogen of cholera and i
22、t is the most important species in the genus Vibrio. It is now divided into three major subgroups: V. cholera O1, V. cholera O139,and V. cholera non-O1. Vibrio parahaemolyticus causes gastroenteritis in human following ingestion of contaminated seafood.67ppt课件KEY POINTSYPresumptive identification of
23、 Vibrio species based on colonial and microscopic morphology ,definite identification relies on former biochemical tests and serological reaction. YAeromonas is the only family within Aeromonaceae and is pathogenic for humans. Aeromonas spps need to be identified from other oxidase-possitive fermenters, such as Vibrio and Plesiomonas spps.68ppt课件69ppt课件
