1、1溶出度试验的相关理论l一、溶出度概念与适用范围l二、溶出度试验的重要性l三、溶出曲线的测定l四、溶出度方法的建立l五、溶出度方法的验证l六、影响溶出度测定的因素2一、概念与适用范围1、概念 溶出度：药物从制剂中溶出的速率与程度（评价药品有效性） 包括溶出度与释放度。 溶出度试验是评价口服固体制剂内在质量的一种重要手段，旨在保证不同生产企业生产的同一药品的口服固体制剂具有相同的品质和疗效。2、适用范围2.1 水中难溶药物的制剂2.2 水中虽易溶，但处方与工艺造成阻溶的制剂2.3 治疗剂量与中毒剂量接近的制剂2.4 缓释制剂、控释制剂、肠溶制剂、透皮贴剂等2.5 易溶的药物，也应考察溶出度3二、
2、溶出度试验的意义l 固体制剂口服给药后，药物的吸收取决于药物由制剂中的释放、生理条件下药物的溶出度或溶解作用及药物在为胃肠道的生物膜通透性。而药物制剂中的释放、生理条件下药物的溶出度具有决定性作用，因此药物的体外溶出度有可能预测体内行为。l 1、评价制剂批间的质量的一致性；l 2、指导新制剂的开发；l 3、产品发生某些变更后，如处方、生产工艺、生产场所的变更和生产工艺的放大后，确保药品质量和疗效的一致性。4如何将原料制成（固体）制剂如何将原料制成（固体）制剂即如何科学、有效地进行即如何科学、有效地进行制剂工艺制剂工艺/处方处方/辅料的筛选辅料的筛选主要评价：溶出度试验主要评价：溶出度试验5 从
3、专业角度看：疗效的优劣，即药物在体内吸收的多寡，是与生物利用度紧密相关的。一个优质药品，在采用一定的装置与转速条件下（通常认为桨板法/50转最接近中老人人群），在pH值的宽范围内（即多种溶出介质中）可能均有一定溶出与释放，这样就可保证该药品用于人体时，可在各种体内环境下，对任何体质患者均有一定疗效！劣质药品，可能只在一种体内环境下（如青壮年、胃酸正常者）才有一定的溶出和吸收，而在其他体内环境下可能崩解、溶出就会很差，生物利用度也就很低。 如果某制剂，仅在pH 1.2条件下体外溶出较好，在pH 6.8条件下体外溶出较差，结果也许只能保证对于胃酸正常的患者吸收良好，而对胃酸缺乏的患者可能就会很差了
4、。6疗疗 效效 的的 优优 劣劣体内生物利用度的差异体内生物利用度的差异体外溶出曲线的不同体外溶出曲线的不同制制剂剂的的优优劣劣关键、核心关键、核心7生物利用度生物利用度体外多条溶出曲线体外多条溶出曲线处方处方/辅料辅料/制剂工艺制剂工艺原研药原研药 生物利用度生物利用度体外多条溶出曲线体外多条溶出曲线处方处方/辅料辅料/制剂工艺制剂工艺仿制药仿制药相同相同相同相同不同不同90%企业界的使命企业界的使命仿制药研发思路仿制药研发思路 “殊途同归殊途同归”8均能够具有相似均能够具有相似的溶出曲线的溶出曲线生物等效生物等效大多数药物大多数药物极少数药物极少数药物生物不等效生物不等效体外溶出度试验，在
5、各种溶体外溶出度试验，在各种溶出介质中，在严格的溶出度出介质中，在严格的溶出度条件下（低转速）条件下（低转速）生物等效性试验生物等效性试验 这样就大大提高了生物等效性这样就大大提高了生物等效性(BE)试验的试验的成功率！成功率！但并不能替代但并不能替代BE试验！试验！9pH 7溶出度溶出度pH 10204060801000204060.0204060801000204060Time (min)02460510152025Time (h)02460510152025胃酸正常患者胃酸正常患者预测体内血药浓度预测体内血药浓度实测体内血药浓度实测体内血药浓度胃酸缺乏患者胃酸缺乏患者A药厂产品药厂产品B
6、药厂产品药厂产品01234567010203040Time (h)01234567010203040Time (h)年年 轻轻 人人老老 年年 人人10三、溶出度曲线的测定l 日本仿制药申报要求，体外至少四条溶出曲线与原研制剂一致，方可申报。 世界卫生组织、美国与欧盟要求皆雷同日本。l 我国新药审评中心2010年9月发布了“关于仿制药通用技术文件（简称:CTD）申报资料提交要求征求意见的通知”，其中明确规定“需进行多溶出介质中的比对研究”！l 说明自研产品与对照药品在不同溶出条件下的溶出曲线比较研究结果（采用f2相似因子的比较方式）。11溶出度曲线的具体操作v 1、溶出介质选择（不少于四种）：
7、v 【普通制剂】v (1)酸性药物 pH值分别为1.2、5.5-6.5、6.8-7.5和水；v (2)中/碱性药物和包衣制剂v pH值分别为1.2、3.05.0、6.8和水；v (3)难溶性药物制剂 pH值分别为1.2、4.0-4.5、6.8和水；v (4)肠溶制剂 pH值分别为1.2、6.0、6.8和水；v 【缓/控释制剂】v pH值分别为1.2、3.05.0、6.87.5和水。l 与美国作法有所不同：美国统一采用1.0、4.5、6.8和水。l 无论何种制剂都不建议采用pH7.6以上的介质进行；12v v 从市场上购买来不同时间点的不同批号，分别测定，观测溶出曲线波动情况。酌情审定v v 生
8、产规模10万单位或今后最大生产规模的1/10。v 含量与参比制剂的差值应在5%以内。v 选用的样品应在重量/装量差异所规定范围的1/2内。v v 理论上个测定12个单位，现实情况测定6个单位即可，13v 2、测定时间点的确定 v 普通制剂与肠溶制剂可为5、10、15、20、30、45、60、90、120分钟，此后每隔1小时直至6小时止；缓控释制剂可为15、30、45、60、90、120分钟，3、4、5、6、8、10、12、24小时。当连续两点溶出率均达90%（缓控释制剂为85%）以上、且差值在5%以内时，试验则可提前结束。v v 在酸性介质中最长测定时间为2小时，在其他各pH值介质中普通制剂为
9、6小时，缓控释制剂为24小时。v 14l 3、累积释放度校正计算公式l 3.1 补液时 l 各时间点校正后的累积溶出量（%）l 其中Cn为各时间点取出后的样品浓度；l L为制剂标示量（单位需与Cn一致）l V1为各时间点固定取样体积l V2 为溶出介质体积153.2 不补液时：各时间点校正后的累积溶出量（%）其中Cn为各时间点取出后的样品浓度L为制剂标示量（单位需与Cn一致）V1为各时间点固定取样体积V2 为溶出介质体积16l 4、曲线比较法l 美国和日本等国家的官方机构采用相似因子的模型非依赖方法，采用“相似因子”和“差异因子”比较溶出度曲线。通过计算差异因子（f1)和相似因子（f2）比较溶
10、出行为的相似性，l 4.1 相似因子（f2)的计算l 其中Rt和Tt分别表示两制剂在第n个取样点时的平均累积溶出率17l 4.2 差异因子（f1)的计算l 其中n为时间点个数，Rt为参照批次（改变前）药品在时间t的溶出度值，Tt为试验批次（改变后）药品在时间t的溶出度值18l 5、计算时间点的确定：l 计算时所选取的时间点相隔无需相等，但两制剂所取时间点必须一致；且计算时间点应不少于3个 ，由于该计算结果有赖于比较时间点个数的特性，故溶出率在85%以上的时间点应不得多于一个。l 建议依据参比制剂溶出率的具体情况，选取溶出率间隔相近的45个时间点进行计算，除0小时外，第一选取时间点溶出结果的变异
11、系数应不得过20%，自第二时间点至最后时间点溶出结果的变异系数应不得过10%，如超过，应从仪器适用性或样品的均一性角度考虑予以解决。19l 6、溶出曲线相似性的判定l 通常，根据每一时间间隔时两条曲线的平均溶出度值，计算差异因子和相似因子，当f1值接近0，f2值接近100时，认为两曲线相似。一般情况， f1值达15（0-15）;f2高于50（50-100），则两条曲线可确认为相同性或等价性。l 后来普遍采用f2比较法，当f2数值介于50-100认为两条溶出曲线是相似的，该数值限定是基于两条比较曲线上任一比较时间点溶出量平均差异限度不大于10%的考虑，溶出度平均差异与相应f2因子临界值的关系：l
12、 由于曲线形式多样，根据曲线的不同形态，分别拟定了限度值比较时间点溶出量平均差异2%5%10%15%20%F2因子临界值836550413620l 6.1 普通与肠溶制剂l 【用于仿制药时）l （1）参比制剂在15分钟内平均溶出率达85%以上，仿制制剂在15分钟内平均溶出率也达85%以上；或15分钟时，仿制制剂与参比制剂平均溶出率的差在15以内。l （2）参比制剂在1530分钟平均溶出率达85%以上时，f2因子大于42.l (3)参比制剂在30分钟内平均溶出率未达85%，但只要满足一下任何一个条件仍可判定为相似。l a.参比制剂平均溶出率在结束时间内达85%以上时，f2因子大于42.l B.参
13、比制剂平均溶出率在结束时间内达50%以上但未达85%时，f2因子大于46.l C.参比制剂平均溶出率在结束时间内未达50%时，f2因子大于53.21【用于其他各事项时】：（1）原制剂在15分钟内平均溶出率达85%以上，变更后制剂在15分钟以内平均溶出率也达85%以上；或15分钟时两者的平均溶出率差在10%以内。（2）原制剂在1530分钟平均溶出率达85%以上时，f2因子大于50.（3）原制剂在30分钟内平均溶出率未达85%，但只要满足一下任何一个条件仍可判定为相似。 原制剂平均溶出率在结束时间内达85%以上时，f2因子大于50 原制剂平均溶出率在结束时间内达50%以上但未达85%时，f2因子大
14、于55 原制剂平均溶出率在结束时间内未达50%，f2因子大于61。226.2 调释制剂： 中国药典所定义的缓释制剂、控释制剂以及迟释制剂均属于调释制剂的范畴。l 【用于仿制药研发时】l （1）参比制剂在结束时间内平均溶出率达80%以上，f2因子大于50l （2）参比制剂在结束时间内平均溶出率达50%以上但未达80%时，f2因子大于55l （3）参比制剂在结束时间内平均溶出率达未50%，f2因子大于6123 对于仿制药、对于仿制药、为提高生物等效性为提高生物等效性试验成功率、试验成功率、如何确定体外溶出度如何确定体外溶出度试验条件与参数？试验条件与参数？至关重要至关重要24四、溶出度方法的建立l
15、 1 中、美、英、日四国药典收录情况l 中 国 转篮法、桨法、小杯法（2010版）l 美 国 转篮法、桨法、流池法、往复筒法、圆筒法、l 桨碟法、往复架法l 英国 转篮法、桨法、桨碟法、流池法l 日 本 转篮法、桨法、流池法25l 2、使用范围l 2.1 转篮法l 适用于：胶囊、丸剂、片剂、漂浮的制剂l 不适用于：崩解型片崩解后颗粒下沉的片剂，或粘性易堵塞筛网的制剂l 2.2 浆法l 片剂、胶囊、丸剂崩解型片崩解后颗粒下沉的片剂，底部易形成“锥形堆积”应使用桨法l 2.3 小杯法l 小剂量的片剂、胶囊、丸剂l 一般仅供UVVIS测定l 如用HPLC测定，一般应采用篮法或桨法26l 3.ChP2
16、010溶出度的变化l 3.1.扩大了篮、轴和桨的材料范围l 不锈钢 不锈钢或其他惰性材料l 3.2.溶出杯：高：1688mm 18525mml 3.3.篮的尺寸l 篮网丝径： 0.25mm 0.280.03mml 网孔： 0.4mm 0.40.04mml 篮内径：20.2mm 20.21mm 靠拢l 通气孔：2.0mm 2.00.5mml 2.4.篮法：先开启转动，再降入杯中 先降入杯中，再开启转动l 2.5.桨法：先开启转动，再投药 先投药，再开启转动l 2.6 取样点：篮(桨)上部至液面中间距杯壁10mm处 不小于10mm处27l 4. 溶出度方法选择的一般原则：l 4.1 对于非崩解型药
17、物，宜采用转篮法l 4.2 对于崩解型药物，在进行转篮法的整个试验过程中，确保转篮的通透性尤为重要，对于处方中主药或辅料（如胶性物质），影响转篮通透性的固体制剂，一般用浆法l 4.3 制剂中含有难以溶解，扩散的成分，一般应用浆法l 4.4 对于漂浮的制剂，一般应用转篮法，如辅料堵塞网孔，则应选用浆法，将供试品放入沉降篮中，并在正文中加以规定，采用小杯法时不能用沉降篮。l 4.5 小杯法主要用浆法条件下，溶出液的浓度过稀，即使采用灵敏度低的方法也难以进行定量测定的品种 28l 5、转数的选择：l 在研究基础上，尽量选择低转速。转篮法以100转/分为主;桨法以50转/分为主。小杯法适用于小剂量片剂
18、、胶囊，推荐35转/分， 一般使用3550转/分。 。l 流体力学效应认为：l 转篮法100转/分 桨法50转/分 小杯法35转/分l 注：机械参数的选择一定要具有区分力。如设定得宽松（如桨板法/100转、加高浓度表面活性剂、甚至有机溶剂），则于体内的评价可能就会失去意义，建立不起体内外相关性，也无法评价生物等效性了29 溶出度试验中的溶出度试验中的“转速转速”与生物利用度的相关性与生物利用度的相关性桨板法桨板法 100转转桨板法桨板法 50转转0500100015000246810Time (h)Conc (ng/ml)020406080100024681012Time (h)% disso
19、lvedA药厂产品药厂产品B药厂产品药厂产品020406080100024681012Time (h)% dissolved身体机能良好者体内身体机能良好者体内02004006008000246810Time (h)Conc. (ng/ml)身体机能虚弱者体内身体机能虚弱者体内相相 关关不相关不相关相相 关关30l 6、介质体积选择：l 溶出介质的体积一般应符合漏槽条件，漏槽条件是指药物在溶出或释放介质中的浓度远小于其饱和浓度，一般溶出（释放）的介质体积为药物饱和溶液所需介质体积的310倍。一般一个剂量单位以溶剂900ml或1000ml为最普遍，规格较小时也可使用常用体积的 1/23/4。后来
20、增加了小杯法（即溶出度测定法第三法），小杯法常用体积为100250ml。l 每个溶出杯中只允许放一片（粒）制剂31l 7、溶出介质选择l 应根据制剂的特性选择用水、0.010.1mol/L的盐酸溶液或适宜的缓冲液（pH一般不超过7.6）。应临用新配经脱气处理，对于极难溶出的品种，可适量加入表面活性剂（如0.5%以下的十二烷基硫酸钠），如确需使用有机溶剂，可适量加入，如异丙醇、乙醇等（浓度通常5%以下），但应有依据并尽可能选用低浓度。必要时应做生物利用度考察。l 通过测定药物在不同介质中的溶出曲线（通常应测定至 药物全部溶出）来选择适宜的溶出介质。l 7.1 原则：所选介质应能灵敏地反映制剂生产
21、工艺的变化，不推荐严格模拟体内胃肠道环境l 7.2 介质种类l 7.2.1 水最常用，良好脱气水的pH值为5.07.0适用于溶解度对pH值不敏感的药物l 水的表面张力大，对某些药物可能不适用32l 7.2.2 酸溶液模拟酸性胃液的介质l 适用于酸中稳定的药物l 浓度一般为0.10.01mol/L，pH值一般为1.02.2l 7.2.3 醋酸盐缓冲液模拟中等酸性胃液的介质l 浓度一般为0.05mol/L，pH值一般为3.46.0l 醋酸易挥发，导致pH值变化，溶出速率变化l 测定时间长的药物不宜采用醋酸盐缓冲液作介质l 7.2.4 磷酸盐缓冲液(PBS)模拟中等酸性至弱碱性胃液或肠液的介质l 浓
22、度一般为0.05mol/L，pH值一般为4.57.633l 7.3 介质的pH值l 溶解度对pH值不敏感的药物，一般首选水l 溶解度对pH值敏感的药物l 适合胃内溶出的药物,应考虑不同人群胃酸分泌量的差异，确保各类人群用药有效，一般应选择溶解度较小的pH值介质l 对于弱酸性药物，一般选择酸性介质l 对于弱碱性药物，一般选择近中性或弱碱性介质l 考虑药物的稳定性，选择药物较稳定的pH值介质l 介质pH值应准确至规定值的0.05，介质的pH值一般不超过7.6。如需使用更高pH值的介质，则应有充分的理由并进行验证l 肠溶制剂：建议先用酸性介质，然后添加适宜温度的缓冲溶液，再用酸或碱调节至所需的pH值
23、34l 8、介质的温度：l 口服制剂：37 0.5l 直肠用制剂：38 0.5 l 经皮给药制剂：32 0.5 35l 9、取样时间及限度的确定l 应考虑临床用药需求及制剂的特点，考察溶出曲线，确定取样时间,一般取样品时间为45分钟。l 复方制剂在溶出度测定时重点针对难溶性或治疗窗窄的成分进行。l 限度限度:对于普通制剂，建议以第一次出现溶出量均在85%以上的两时间点，且该两时间点溶出量差值在5%以内时，取前一时间点作为质量标准中的取样时间点，并将该点得溶出量减去15%作为溶出限度，如第一时间点为20，由于其不为刻钟的整数倍，一般同法顺延至30分钟。l 对于调释制剂，溶出度应至少设定三个取样时
24、间点；第一点是为避免“突释”故应设定为试验12小时后或溶出量相当于标示量20%30%时间点；第二点是为考察药品溶出度特性，该限度应设定在溶出量约50%时间点；最后一点是为确保药物（几乎）定量释放，通常为药物溶出量超过70%时间点，任何一点的拟定范围建议勿超过标示含量的20%，且各点溶出限度交叉范围的建议勿超过20%。36五、溶出度方法的验证l 溶出度方法验证与含量测定基本相同：l 包括：专属性、线性、耐用性、精密度、回收率、溶液稳定性等l 值得注意的是：l 1、含量测定回收率一般选用测试浓度的80120，高、中、低浓度规定为80%、100%、120%；对于溶出度范围则规定为限度的20%，高、中
25、、低三浓度设为：50%、限度规定、100%。l 2、干扰试验：测定干扰性试验在2%以下可忽略不计，2-5%之间可适当将限度提高，超过5%则测定方法不可取，如果是空胶囊产生的应进行胶囊的消除试验（不大于标示量2%可忽略不计，大于标示量25%，试验无效）。空胶囊仅对UV测定有吸收干扰，如用UV方法测定溶出度，每次均应进行空白胶囊试验，因为胶囊壳的批次、来源不同，则UV吸收不同，会给结果带来误差，当空胶囊干扰较大时，建议采用HPLC测定37六、影响溶出度测定的因素l 1. 仪器的影响l 1.1. 仪器的工作环境l 应置无强光照射、气流稳定的位置、远离振动源、底脚加减振海绵或橡胶（仪器振动位移为0.0
26、25毫米时，溶出增加510）l 1. 2 仪器本身因素l 仪器的水平度、转杆的垂直度l 杯边高1mm，溶出量增加约3%l 转杆倾斜 25，溶出量增大225%l 转杆与杯板垂直度l 转杆与溶出杯中心度l 中心偏离1mm，溶出量约增加3%l 偏离2mm，约增加8%38l 2.介质的影响l 2.1 介质的pH值l 影响药物的溶出度、影响药物的吸收系数、影响药物的稳定性 、水的pH值不确定性l 泼尼松校正片(FDA 10mg片)以pH为6.0、6.6和7.4的水作介质，溶出结果有210%的变化l 2.2 介质的温度l 影响药物的溶出度，温度高溶出快l 一般温度变化1，溶出速率变化约5l 规定0.5 3
27、9l 2.3 介质的体积l 介质体积：指2025室温下的体积。规定介质体积应准确至1%;量筒应标定，倒入杯时应控停15秒l 多次取样介质体积变化的影响l 多次取样，累计取样量超过介质体积1%时，会引起结果的系统性偏差l 处理方法l 补液：取样前介质体积不变，修正取样体积中的药物量l 不补液：取样前介质体积递减，修正介质体积+取样体积中的药物量l 2.4介质蒸发的影响 l 缓释、控释制剂试验时间长，介质蒸发引起系统性偏差l 3237的环境中，不加杯盖3小时，900ml介质蒸发达1025ml，造成溶出度13%的误差l 处理方法：溶出试验一定要加杯盖40l 2.5 介质的影响v 溶出度试验规定溶出介
28、质试验前应进行脱气处理，因为介质中的气体会通过各种方式对样品的崩解、扩散和溶出产生影响。脱气与否对转篮法的影响有时会比较显著。v 泼尼松校正片在脱气的水中，溶出比未脱气的高约30%l 2.6. 流体力学的影响 l 不同溶出杯，因内径偏差、半球底深度不一、内柱面不l 圆、内壁不光滑等因素造成流体力学效应不同，结果RSD偏大，所以应使用成套溶出杯41l 3.取样与过滤的影响l 取样点高度l 不同高度取样有明显差异l 处理方法：使用取样针管定位装置l 取样至过滤时间超过30秒钟，使溶出结果偏高，颗粒中药物取样后继续溶出l 滤膜吸附l 滤膜选择不当，会引起高达50%的吸附偏差l 处理方法：进行验证，确定所用滤膜对样品是否有吸附；42l 4. 样品的影响l 胶囊壳l 胶囊壳质量差，会引起530% 的结果偏差l 囊壳干扰 空白读数标示量25%，方法无效空白读数标示量2%，无须校正囊壳干扰大于2%，但小于25%时，应进行校正l5. 测定方法测定方法l 测定方法的准确性、重复性等43谢 谢！ 2012.02
