1、XX年度本科生毕业论文（设计）两种土壤熏蒸剂对三七连作土杀菌效果比较分析院 系:生命科学与技术学院 专 业：农学 年 级：XX 学生姓名：XX 学 号：XX 导师及职称：XX（讲师） XX年XX月2018 Annual Graduation Thesis (Project) of the College Undergraduate The effect of two kinds of soil fumigants on the sterilization effect of Panax notoginseng were comparedDepartment: College of Life S
2、cience and TechnologyMajor: agronomyGrade: 2014Students Name: Zhu-Xi-deStudent No.: 201401130521Tutor: lecture Meng-Heng-lingApril, 2018毕业论文（设计）原创性声明本人所呈交的毕业论文（设计）是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文（设计）不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本论文（设计）的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明并表示谢意。 作者签名： 日期： 毕业论文（设计）授权使用说
3、明本论文（设计）作者完全了解XX学院有关保留、使用毕业论文（设计）的规定，学校有权保留论文（设计）并向相关部门送交论文（设计）的电子版和纸质版。有权将论文（设计）用于非赢利目的的少量复制并允许论文（设计）进入学校图书馆被查阅。学校可以公布论文（设计）的全部或部分内容。保密的论文（设计）在解密后适用本规定。 作者签名： 指导教师签名：日期： 日期： 毕业论文（设计）答辩委员会(答辩小组)成员名单姓名职称单位备注主席（组长） XX学院本科毕业论文 (设计)摘要三七Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen为五加科（Araliaceae）人参属多年生草本植物，具有止血散瘀、
4、消肿定痛、活血补血、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、美容养颜等功效，是云南最具潜力的生物药业。但三七栽培过程中存在严重的连作障碍问题，是制约三七产业发展的关键性难题，连作后的三七病虫害严重，生长状况变差，产量降低，品质下降。本研究采用氯化苦、硫酰氟两种熏蒸剂处理连作土壤，比较一年生三七出苗率、存苗率及相关生长指标，探究两种熏蒸剂对一年生三七连作障碍的处理效果。结果表明：两种熏蒸剂对克服三七连作障碍都有效果，与连作土(CK)相比，氯化苦处理出苗率提高了10.12%，存苗率提高了65.02%，根腐病发病率降低了68.77%；硫酰氟处理出苗率提高了9.74%，存苗率提高了42.24%，根腐病发病率降低了53
5、.13%；其相关指标株高、叶面积、鲜重、干重均差异不大，说明经过两种熏蒸剂处理后的三七生长没有受到影响。结论：氯化苦效果较硫酰氟好，是克服三七连作障碍的理想土壤熏蒸剂，能显著提高三七的出苗率和存苗率，在克服一年生三七的连作障碍问题上具有很好的效果。关键词：一年生三七；连作障碍；熏蒸剂；生长指标ABSTRACTNotoginseng Panax notoginseng (Burk.) F.H.C hen for five plus (Araliaceae) ginseng is a perennial herb, with styptic powder stasis, swelling pain
6、, invigorate the circulation of blood, anti-aging, anti-tumor, anti-fatigue, beauty to raise colour effect and so on, is the most potential biological pharmaceutical industry in yunnan. But the serious problem of continuous cropping obstacles exist in the process of notoginseng cultivation, is the k
7、ey problems restricting the development of notoginseng industry, after continuous cropping of notoginseng plant diseases and insect pests, growth status, yield is reduced, quality decline. This research adopts the chloropicrin, sulfuryl fluoride two kinds of continuous cropping soil fumigants proces
8、sing, compare the annual notoginseng emergence rate, seedling rate and relevant growth indexes, two kinds of fumigants on annual notoginseng processing effect of continuous cropping obstacle. Results show that the two kinds of fumigants to overcome notoginseng continuous cropping obstacle has effect
9、, compared with the control continuous cropping soil, at the same time chloropicrin treatment germination rate increased by 10.12%, saving rate increased by 65.02%, the incidence of root rot was reduced by 68.77%; The seedling rate increased by 9.74% and the seedling rate increased by 42.24%, and th
10、e incidence of root rot was reduced by 53.13%. There was no significant difference in height, leaf area, fresh weight and dry weight of the related indicators, indicating that there was no negative effect on the growth of notginseng after the treatment of two kinds of fumigants. Conclusion: the effe
11、ct of chloropicrin sulfuryl fluoride is good, is an ideal soil fumigants to overcome notginseng continuous cropping obstacles, can significantly improve the germination rate and seedling rate, notoginseng in overcoming the annual notoginseng continuous cropping obstacles has good effect on the issue
12、.Key words: Annual panax notoginseng; Obstruction; Fumigants. Growth indicators目 录1.前言12.材料与方法32.1试验材料32.2试验小区设计与指标测定32.3数据处理43.结果与分析53.1不同处理对一年生三七出苗率的影响53.2不同处理对一年生三七存苗率的影响53.3不同处理对一年生三七根腐病发病率的影响63.4不同处理对一年生三七株高的影响73.5不同处理对一年生三七叶面积的影响83.6不同处理对一年生三七鲜重的影响93.7不同处理对一年生三七干重的影响104.讨论115.结论12参考文献13致谢15III
13、XX学院本科毕业论文 (设计)1.前言三七Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen为五加科（Araliaceae）人参属多年生草本植物，也称田七，金不换等，有相关研究表明，三七的有效成分总皂苷含量比人参和西洋参的要高许多，是名副其实的“参中之王”，是中国传统名贵中药材1。三七具有散瘀止血、消肿定痛、补血活血、降血压、降血脂等功效，其药用价值巨大。三七是一种生态幅较窄的亚热带高山药用植物，对环境条件要求比较苛刻，全球适合三七生长的区域十分有限。三七属喜阴植物，生长适宜温度18-25，我国三七产区分布在北纬23-24，主要集中于云南文山及周边少数区域种植，由于文山独特的
14、自然环境和优厚的历史基础，其栽培面积和产量均占全国90%以上2，使得文山三七盛名远播，三七也成为了云南省最具潜力的生物药业。三七栽培过程中存在严重的连作障碍问题，种植三七后的土壤10-20年不能再种植3。在连作地上播种三七种子或是移栽种苗，出苗后的三七发病率高，植株存活率低，病虫害发生严重，一年以后几乎没有健康植株存活，这是三七连作障碍的主要表现特征2。由于连作，三七地土传病害严重，导致七农大量使用化学农药进行防治，不但防治效果较差，增加种植成本，而且造成三七产品的农残和重金属含量超标，导致三七的品质下降，因此寻找克服三七连作障碍的有效方法具有非常重要的研究价值和意义。目前对三七连作障碍的成因
15、、克服连作障碍的方法已有不少学者做过相关方面的研究和报道，如孙萌等4从以下三个方面概述了三七连作障碍的成因，分别是土壤理化性状劣变、生物学环境变化和三七化感自毒作用。陈士林研究团队5采用高通量测序、QPCR等技术解析土壤微生物群落变化，确定了三七根腐病致病菌的类型，直接证明了土传病害的增加是导致三七连作障碍的主要因素之一。因此对三七连作土壤进行消毒处理是克服三七连作障碍的有效途径，前人的研究中用到了98%大扫灭粉剂、溴甲烷、42%威百亩水剂等6-9土壤熏蒸剂处理三七连作土壤有一定效果，但大扫灭用来土壤消毒的例子甚少，溴甲烷是一种强烈的神经毒剂，可对人的皮肤、肺、肾脏和肝脏造成直接的损伤，威百亩
16、对水生生物有极高毒性，可能对水体环境产生长期不良影响。古今等10，徐玉龙等3的研究采用了火烧和高温蒸汽处理土壤的方法来防治病虫害，增加土壤肥力，也有一定的效果，但高温蒸汽处理对于大面积的大田三七种植实施困难。据报道，氯化苦熏蒸种植烟草的土壤，不但能有效防治烟草黑胫病、根结线虫病，而且能改善烟株生物学性状表现11，在草莓缓苗期和幼果期，氯化苦对土壤细菌和真菌数量、脲酶活性及土壤肥力有抑制作用12，氯化苦用于人参连作地消毒，2年试验结果对人参锈腐病防治效果达54.78%-70.07%13，防治效果较好。氯化苦熏蒸土壤可杀灭土壤微生物，对细菌、放线菌、真菌的杀灭率均在85%以上，有效地减少了土传病害
17、的病原菌数量，从而降低土传病害的侵染率14-15。目前，在三七上使用氯化苦消毒连作土的，公开报道的只有牟苗等16使用过氯化苦熏蒸，结果显示氯化苦熏蒸对三七的存活率有明显的作用效果。而硫酰氟在三七上的应用尚未见报道，但是有研究表明硫酰氟用于基质消毒，能有效控制茄子青枯病、番茄晚疫病等土传病害的发生，可以减少化学防治次数，降低农药使用量17，此外，硫酰氟作为一种广谱熏蒸剂，具有扩散渗透性强，毒性残留低，使用温度范围广，不燃不爆，无腐蚀等特点18，研究发现其对土壤线虫、土传病原菌有很好的防治效果19-21。因此，本研究采用氯化苦和硫酰氟两种土壤熏蒸剂对种过三七的连作土壤进行熏蒸处理，将三七种子播种到
18、经过熏蒸处理和未经过熏蒸处理的土壤中，通过对三七种苗的出苗、存苗状况以及一些相关生长指标的比较分析，主要目的是比较这两种熏蒸剂的杀菌效果，判断其对处理三七连作障碍是否有效果，旨在为克服三七连作障碍探索新方法，为田间试验及应用打下基础。9XX学院本科毕业论文 (设计)2.材料与方法2.1 试验材料99.5%氯化苦原液（大连绿峰化学股份有限公司），99%硫酰氟（杭州市茂宇电子化学有限公司生产），手动土壤注射器，防护设备，经包衣处理的三七种子，电子天平，直尺等。2.1.1 试验地处理试验场地位于云南省文山州砚山县盘龙彝族乡苗乡三七科技示范园8号种植大棚园内，海拔高度1514 m。将试验用土铺放到种植
19、箱内，种过三七(连作)的土3箱，未种过三七的新土1箱，土层厚度25 cm左右，共4个种植箱，每个箱长45 m左右，宽1.5 m。（1）氯化苦熏蒸：将99.5%氯化苦原液注入土壤中，原液注入土壤的深度为15 cm，相邻的两个注射点之间的间距为15 cm，注入量为1.5 mL，注射结束后压实注入穴孔，然后在土壤上方盖上塑料膜，并使土壤与膜贴合，且将边缘压实；熏蒸后处理是盖膜熏蒸20天后揭去熏蒸膜，放气10天，待气体挥发后，对熏蒸后的土壤进行翻松22。（2）硫酰氟熏蒸：将土壤覆膜，并使土壤与膜贴合，且将边缘用湿土压实，按50 g/m的剂量通入硫酰氟气体，熏蒸后处理是盖膜熏蒸20天后揭去熏蒸膜，放气1
20、0天，待气体挥发后，对熏蒸后的土壤进行翻松。（3）连作土（CK）；（4）新土(CK)。2.1.1.1 播种处理播种采用专用模具，规格5 cm5 cm，即株行距5 cm5 cm，模具265共130个孔，分别播种上经过包衣处理的三七种子。试验设4个处理，每个小区播种量26140=3640粒。2.2 试验小区设计与指标测定试验4个处理，每个处理3次重复，4个处理共12个小区，小区面积1.5 m6 m=9 m，用工程线将每个小区围起来，每个处理小区与小区之间相距6 m，种植箱两端空开不设小区。待种子出苗后，进行正常的、相同的田间管理，2017年4月待三七出苗整齐后逐个统计每个小区的出苗数，计算出苗率；
21、5月初统计每个小区的存苗量，以后及时拔除坏死的苗，每隔7天拔一次死苗并统计每次拔苗数（统计时间为2个月），计算存苗率。2.2.1 采样并测量生长指标2017年5月10日进行第一次数据采集，以后每隔20天进行一次数据采集和测量，共采4次样，每次每个小区随机采取30株样品，样品测量指标有株高、中叶长、中叶宽（叶面积转化系数为0.634823），每次所取样品测完相应指标后，用清水冲洗干净根部泥土，晾干表面水分，逐一称量每株鲜重，同时统计样品中出现根腐病的发病种类和数量，称量完成后，放入纸袋并做好标记，放置在通风处自然风干，待干燥后称量样品干重。2.3 数据处理试验数据用Excel 2013、SPSS
22、 17.0进行数据处理和差异显著性检验。XX学院本科毕业论文 (设计)3.结果与分析3.1 不同处理对一年生三七出苗率的影响图1结果表明，两种熏蒸剂处理后的出苗率都显著高于连作土（CK）的出苗率，其中氯化苦处理与硫酰氟处理出苗率差异不大。氯化苦处理的三七出苗率为95.07%，较连作土提高了10.12%，较新土降低了4.49%；硫酰氟处理的三七出苗率为94.74%，较连作土提高了9.74%，较新土降低了4.82%，新土对照的出苗率最高，为99.54%。两种熏蒸剂处理的连作土出苗率都高于连作土（CK），且差异显著；三种处理的连作土出苗率都低于新土（CK），且差异显著。说明连作对三七出苗率影响很大，
23、而采用土壤熏蒸能提高连作三七出苗率。注：不同字母表示该组数据之间存在显著差异（P=0.05)，柱形图上的线条表示标准误图1 不同处理对三七出苗率的影响3.2 不同处理对一年生三七存苗率的影响图2结果表明，两种熏蒸剂处理的连作土存苗率都显著高于未处理的连作土（CK），且氯化苦处理比硫酰氟处理的存苗率高。从2017年5月10日到7月10日两个月内，新土的存苗率为99.00%，连作土的为58.40%。氯化苦处理的为96.37%，与新土(CK)差异不显著，与连作土(CK)差异显著；硫酰氟处理的存苗率为83.07%，与氯化苦处理差异显著，与新土(CK)差异显著；其中氯化苦处理比连作土存苗率提高了37.9
24、7%，硫酰氟处理比连作土存苗率提高了24.67%。说明连作后的三七存苗率很低，而使用氯化苦和硫酰氟熏蒸土壤能大幅提高连作三七存苗率，且两种熏蒸剂相比较，氯化苦的消毒效果明显优于硫酰氟。注：不同字母表示该组数据之间存在显著差异（P=0.05)，柱形图上的线条表示标准误图2 不同处理对一年生三七存苗率的影响3.3 不同处理对一年生三七根腐病发病率的影响由图3可知，在相同时间内，两种熏蒸剂处理的根腐病发病率都比未处理的连作土(CK)发病率低，且防治效果明显。连作土(CK)的发病率为26.67%，新土(CK)的发病率为6.67%；氯化苦处理的发病率为8.33%，较连作土(CK)的发病率降低了68.77
25、%，硫酰氟处理的发病率为12.50%，较连作土(CK)的发病率降低了53.13%；其中氯化苦处理与新土(CK)差异不显著，与硫酰氟处理差异不显著，两种熏蒸处理的发病率与连作土(CK)差异均显著。可见，两种熏蒸剂对三七根腐病都有明显的防治效果。注：不同字母表示该组数据之间存在显著差异（P=0.05)，柱形图上的线条表示标准误图3 不同处理对一年生三七发病率的影响3.4 不同处理对一年生三七株高的影响由图4分析可见，2017年5月10日采集的样品间，氯化苦处理、硫酰氟处理与新土(CK)之间均有显著差异，硫酰氟与连作土(CK)差异显著，；2017年5月30日的样品间，氯化苦处理、硫酰氟处理、连作土(
26、CK)之间差异均不显著，与新土(CK)之间差异均显著；2017年6月20日的样品间，连作土(CK)与其它三个处理之间差异均显著；2017年7月10日的样品方差分析结果显示Sig=0.343P=0.05，四个处理之间没有显著差异。说明熏蒸剂氯化苦和硫酰氟对三七的生长没有明显影响。（注：四次样品均是单独做方差分析，下同）注：不同字母表示该组数据之间存在显著差异（P=0.05)，柱形图上的线条表示标准误图4 不同处理对一年生三七株高的影响3.5 不同处理对一年生三七叶面积的影响2017年5月10日的样品，方差分析结果Sig=0.255P=0.05，即四个处理之间差异不显著；2017年5月30日的样品
27、，连作土CK与其它三个处理之间差异均显著；2017年6月20日的样品，方差分析结果Sig=0.171P=0.05，即四个处理之间差异均不显著；2017年7月10日的样品方差分析结果Sig=0.703P=0.05，即四个处理之间差异均不显著（见图5）。四种处理叶面积差异不大，说明三七连作对三七叶面积影响不大，并且熏蒸剂氯化苦和硫酰氟对三七叶面积没有明显影响。注：不同字母表示该组数据之间存在显著差异（P=0.05)，柱形图上的线条表示标准误图5 不同处理对一年生三七叶面积的影响3.6 不同处理对一年生三七鲜重的影响如图6所示，四次样品的新土(CK)与其它三个处理之间差异均显著。2017年6月20日
28、的样品方差分析结果显示连作土(CK)与氯化苦处理、硫酰氟处理差异均显著；其余三次样品氯化苦处理、硫酰氟处理与连作土(CK)之间差异不显著。这说明连作对一年生三七鲜重有影响，即三七连作后对三七产量有影响，会导致三七减产。注：不同字母表示该组数据之间存在显著差异（P=0.05)，柱形图上的线条表示标准误图6 不同处理对一年生三七鲜重的影响3.7 不同处理对一年生三七干重的影响由图7可知，四次样品，每次氯化苦、硫酰氟和连作土(CK)三个处理之间都没有显著差异，但三个处理与新土(CK)之间差异均显著。说明连作对一年生三七干重有影响，即三七连作后对其产量会产生影响，会导致三七减产。注：不同字母表示该组数
29、据之间存在显著差异（P=0.05)，柱形图上的线条表示标准误图7 不同处理对一年生三七干重的影响XX学院本科毕业论文 (设计)4.讨论本研究通过氯化苦、硫酰氟两种土壤熏蒸剂处理三七连作土壤，发现两种熏蒸剂处理对三七根腐病防治都有一定效果，并且能显著提高连作三七的出苗率和存苗率，两种熏蒸剂相比较，氯化苦杀菌效果较硫酰氟杀菌效果好，可在生产做进一步示范推广。氯化苦对难以防治的土传病害具有非常独到的防治效果且相对稳定24，它是一种环境友好型农药，不会对地下水造成污染。此外有报道称氯化苦不仅消毒作用明显，可以让植物生长健壮，而且消毒后土壤中的微生物残体又可以作为一种肥源增加土壤中有机质含量，提高土壤肥
30、力，可为作物提供天然的养分，因此科学使用氯化苦有助于减少农药和化肥的使用量，实现化肥和农药使用量零增长25，这就使得氯化苦在大田生产中大面积施用于土壤成为可能。连作三七不论是种子直播的一年七还是籽条移栽的二年七，在连作地里出苗后也很难存活，本试验仅对氯化苦、硫酰氟两种熏蒸剂的杀菌效果做比较，这是不足的，今后还需探索与其相配套的防治技术，试验中氯化苦处理的三七存苗率与新土CK存苗率没有显著差异，但是鲜重上还存在差异，可能是在土壤消毒过程中一些有益微生物菌群也被杀死15，影响了三七根系对土壤中养分的吸收利用。在今后的研究中可以先将土壤消毒处理，然后在土壤中加入一些有益的微生物菌种，改良土壤环境；在
31、施肥过程中注意养分的合理搭配，培肥地力，供给其充足的养分，以此来达到稳产、增产的目的。5.结论综合上述研究和试验结果，可以初步确定氯化苦熏蒸处理对克服三七连作障碍具有明显效果。本试验只是针对一年生三七做探究，至于对籽条移栽的二年七效果如何，还有待进一步研究，但个人认为可以从氯化苦熏蒸处理入手，配合其他措施，如肥料配比，施用微生物菌肥，增加土壤中有益微生物种群数量等，改良土壤环境，做进一步研究。11XX学院本科毕业论文 (设计)参考文献1 陈中坚, 刘莉, 王勇, 等. 三七栽培研究进展J. 文山学院学报, 2013, 25(6): 1-12.2 孙雪婷, 李磊, 龙光强, 等. 三七连作障碍研
32、究进展J. 生态学杂志, 2015, 34(3): 885-893.3 徐玉龙, 戴蕾, 赵丹, 等. 几种土壤处理方法影响三七幼苗生长及根腐病发生的研究J. 云南农业大学学报(自然科学), 2016, 31(6): 1006-1011.4 孙萌, 叶丽琴, 张子龙. 三七连作障碍成因及其控制研究进展J. 山地农业生物学报, 2015, 34(3): 063-067.5 栗征. 三七连作障碍机制研究获国际认可N. 中国中医药报, 2016-10-12(002).6 陈昱君, 王勇, 刘云芝, 等. 三七根腐病防治技术研究复配剂拌种(苗)与土壤熏蒸配套技术应用研究J. 中国中药杂志,2008,3
33、3(11): 1329-1331.7 王勇, 马承铸, 陈昱君, 等. 土壤处理对三七根腐病控制作用研究J. 中国中药杂志, 2008, 33(10): 1213-1214.8 冯光泉, 李忠义, 王朝梁, 等. 溴甲烷处理老三七地防治根腐病和杂草J.云南农业科技, 2001(2): 20-21.9 杨建忠, 崔秀明, 陈昱君, 等. 连作地土壤处理对三七根腐病的控制效果J.特产研究, 2010(2): 37-39.10 古今, 吴梅, 李文春, 等. 火烧三七重茬土壤应用于三七种植的初步分J.中国农学通报, 2016, 32(22): 158-163.11 王海涛, 陈玉国, 王省伟, 等.
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