1、资料仅供参考,不当之处，请联系改正。有效性有效性针对某些药效进行检查的项目 利福平的结晶度，影响生物利用度均一性均一性含量均一性 如“含量均匀度”试验安全性安全性异常毒性、热原、降压物质和无菌等纯度要求纯度要求 对杂质限量进行检查 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。1 1 药物的杂质及其来源药物的杂质及其来源杂质（impurity):u药物中存在的无治疗作用u影响药物稳定性和疗效，u对人体健康有害的物质;资料仅供参考,不当之处，请联系改正。一一. . 药物的纯度药物的纯度 药物的纯净程度； 外观性状、理化常数、杂质检测和含量测定等综合评定 控制药物纯度的重要方面杂质检查（纯度检查）资料仅供参
2、考,不当之处，请联系改正。二二. . 杂质的来源与分类杂质的来源与分类 1. 杂质的来源主要来源生产过程中引入贮藏过程中引入资料仅供参考,不当之处，请联系改正。（1）生产过程中引入原料药不纯原料反应不完全反应中间体或副产物在精制时未除净生产中所用溶剂、试剂的残留与生产器皿接触可能带入杂质化学原料精制不完全植物原料中的结构类似物分离不完全由动物脏器提取的生物药品中一些组 织分离不完全资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 如：甾体激素类药物 由甾体母核或结构类似的其他甾体激素经结构改造制备 可能带入原料、中间体、异构体、降解产物及残留溶剂 如：肾上腺素的合成 经过中间体肾上腺酮， 精制时酮不能除尽
3、。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。（2）贮存过程中引入 贮存时间过长 包装及保管不当药物温度、湿度、日光、空气、微生物外界条件影响水解、氧化、分解、聚合、异构化、晶型转化、潮解、发霉杂质)( 如：青霉素遇碱易水解为青霉噻唑酸， 受热进一步分解为青霉胺和青霉醛使青霉素失效。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。24SO2. 杂质的分类杂质的分类（1）按杂质理化性质分为l 无机杂质：Cl、S2、CN、重金属等l 有机杂质：有机药物中引入的原料、中间体、副产物、 分解物、异构体、残留溶剂等； 化学结构与活性成分类似有关物质（related substance）l 残留溶剂（residual sol
4、vents）：生产过程中使用的有机 或无机液体；具有已知毒性资料仅供参考,不当之处，请联系改正。（2）按来源分为l 一般杂质：多种药物生产或贮存过程中易引入杂质。 如：酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、重金属、砷盐、 硫化物、氰化物、铁盐、铵盐、易炭化物、干燥失重、 炽灼残渣、溶液颜色与澄清度、有机溶剂残留量等。l 特殊杂质：该药物生产或贮存过程中，据药物性质、生产方 法和工艺条件，有可能引入的杂质；随药物不同而改变 如：胰岛素中含氮量、多糖类物质中单糖等。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 按杂质毒性分为 毒性杂质：如重金属、砷盐 信号杂质：一般无毒，含量多少反映药物 的纯度资料仅供参考,不当
5、之处，请联系改正。三.药物的杂质限量 药品的杂质含量越少越好。 药物中杂质完全除去，造成生产上操作困难，降低收率，增加成本。 药物的效用、调制和贮藏考虑没必要。 不对人体有害原则下，允许药物中存在一定 量杂质，其最高量 “杂质限量”。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。1.1.杂质检查的方法杂质检查的方法l限量检查（limit test）：检查杂质是否超过限量l杂质的定量测定资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 对照法：两支纳氏比色管对照法：两支纳氏比色管平行试验l样品管：一定量供试品l对照管：限度量的待检杂质的对照品比较两管浑浊颜色 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。2. . 杂质限量杂质
6、限量 药物中所含杂质的最大允许量，即：100%供试品杂质的最大允许量杂质限量%100SVCL L：杂质限量；S：供试品量； C, V：标准溶液浓度, 体积； 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。2 药物中杂质的检查方法药物中杂质的检查方法 药物与杂质物理性质差异：挥发性、颜色、 溶解性、光学、色谱行为杂质检查原理 药物与杂质化学性质差异：酸碱性、氧化- 还原性、杂质专属反应（颜色，沉淀 或气体）资料仅供参考,不当之处，请联系改正。一一. . 化学法化学法 利用药物和杂质在化学性质上的差异来进行的。 如阿司匹林中游离水杨酸的检查 1. 检查原理 阿司匹林 + Fe3+ （无酚羟基） 水杨酸 +
7、Fe3+ 紫堇色（有酚羟基）COOHOCOCH3OHCOOH资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 对照 (SA)0.1g 1000ml 1ml 样品 0.1g 50ml 稀硫酸铁 铵 TS1ml 30 内 观察比较 gHAc1ml 水 乙醇 1ml 水 乙醇 1ml 水 l 30内比色，防止操作时间过长造成阿司匹林水解；l 对照液中加1mL冰醋酸: 与样品液条件一致。 3. 杂质限量2. 操作方法%1 . 0%1001 . 0110001 . 0%L资料仅供参考,不当之处，请联系改正。二二. .色谱法（色谱法（TLC） 较灵敏、简便、快速，不需特殊设备， 各国药典用于杂质限量检查 1.杂质对照
8、品法：已知杂质并能制备杂质对照品 供试品溶液; 一定浓度杂质对照品溶液; 分别点样于同一硅胶薄层板上， 展开、定位、检查； 供试品中含杂质斑点相应杂质对照斑点； 须杂质对照品，应用上受限制。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。2.供试品自身对照法:杂质结构不确定或无杂质对照品 供试品溶液按限量要求稀释至一定浓度作为对照溶液； 供试品溶液和对照品溶液分别点样于同一硅胶薄层板上，展开、定位、检查； 供试品溶液所显杂质斑点对照溶液所显主斑点颜色； 简便易行，不需制备对照品； 可配制几种限量对照品溶液，使用率很高。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。如：吡罗昔康中有关物质的检查供试液：20mg/mL对
9、照液：0.2mg/mL(供试液稀释100倍)l供试液与对照液点于同一薄层板;l判断:供试品溶液杂质斑点颜色 对照 液主斑点颜色资料仅供参考,不当之处，请联系改正。3. 对照药物法：与供试品相同药物作对照品。 供试品与其相同药物对照品 分别点样于同一薄层板上，展开显色， 供试品杂质斑点 对照药物中杂质斑点数，颜色不得更深。 对照品与供试品相同，克服 2 法中对照品与杂质斑点有时的不可比性。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。HPLC检查有关物质 20世纪90年代末期，多数化学药物用HPLC替代TLC进行有关物质检查 UV or DAD, LC-MS, LC-NMR资料仅供参考,不当之处，请联系改
10、正。有关物质检查用HPLC方法的建立 了解原料药物的合成路线或制剂工艺 仿制药：在各国药典中检索，以药典方法为模板 药典收载该药物或制剂的HPLC含量测定方法，据原料药的合成路线或制剂工艺，对该含量方法改进 药典或药品标准不收载该药物，文献中选一个较通用方法 新药或仿制药，文献中无HPLC法检查有关物质，据药物的结构选取与该药物结构类似的药物分析方法为模板 对选定的色谱条件进行系统适用性试验资料仅供参考,不当之处，请联系改正。有关物质检查用HPLC方法的系统适用性试验 指标：理论塔板数、分离度、拖尾因子和重现性 国内药品标准中多以理论塔板数为评价标准 原料药：据药物的合成工艺对主成分与起始原料
11、、各中间体、副产物间的分离度进行考察 制剂：各辅料是否干扰对杂质的检出，如有干扰，用其他无干扰的辅料替代或对色谱系统调整（流动相中水相和有机相的比例，流动相pH)资料仅供参考,不当之处，请联系改正。供试品溶液的稳定性 将样品在溶液中的降解产物错判为样品中的有关物质 样品在溶液中的稳定性影响有关物质的检查 优化流动相条件，选择稳定的分离系统 较低的柱温：溶液的稳定性与温度成正比 样品在反向色谱系统中不稳定，采用正相色谱系统分离； 优化的流动相下，采用较短的色谱柱、较高的流速以减少分析时间 临用现制多份样品溶液，每份样品进样一次资料仅供参考,不当之处，请联系改正。氧氟沙星中有关物质的检查 检查氧氟
12、沙星在生产和贮藏过程中可能引入副产物及结构不清的有关物质 Ch. P采用HPLC法 供试品溶液：1.2 mg/mL；对照溶液： 2.4g/mL。 C18；NH4Ac,NaClO4(pH2.2)乙腈(85:15) ；294 nm；10L 单个杂质峰面积 对照溶液主峰面积(0.2) ； 各杂质峰面积和 2.5倍对照溶液主峰面积 (0.5)资料仅供参考,不当之处，请联系改正。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 三三. . 光学法光学法 1. 1. UVl药物和杂质对光的选择吸收 的差异；l地蒽酚中二羟基蒽醌的检查 二羟基蒽醌：max432nm； 地蒽酚：该波长下无吸收。 432nm3A0.1mg/
13、mLCHCl测的溶液样品资料仅供参考,不当之处，请联系改正。二羟基蒽醌的556E%1cm1%1 . 2 100%10010000.115560.12 100%L供试品量杂质量l 规定：A432 0.12；l 杂质限量2.0%。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。2. IR 药物中无效或低效晶形的检查 晶形结构不同，键长、键角发生不同程度变化 某些特征峰的频率、峰形和强度差异。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。四药物中杂质检查示例（无机杂质和残留溶剂）四药物中杂质检查示例（无机杂质和残留溶剂） （一）氯化物检查法 1. 原理 （白色浑浊） 与一定量标准NaCl溶液同条件下产生的AgCl比较浑浊
14、程度; 标准氯化钠溶液浓度：10gCl/mLCl-+ AgNO3AgClHNO3资料仅供参考,不当之处，请联系改正。OH、10mLHNO dilO、H样品2 32（一定量）同上标准液（一定量）2.操作方法样品管对照管 比较混浊程度TSAgNO40mL3资料仅供参考,不当之处，请联系改正。3. 注意事项及讨论(1)平行试验(2)反应最佳条件 硝酸酸性 氯化物检测范围: 50mL供试液中含Cl 0.05 0.08mg（相当标准NaCl溶液5.08.0mL）(3)观察比较 衬于黑色背景自上而下观察； 暗处放置。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。二二. .重金属检查法重金属检查法1.重金属的概念l
15、实验条件下, 与硫代乙酰胺或硫化钠作用呈色的金属。如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn实验条件：溶液pH。l 硫代乙酰胺为显色剂：溶于水、稀酸、乙醇的药物，pH3.0 3.5；l 硫化钠为显色剂：溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中产生沉淀 的药物；l 检查重金属时以Pb为代表。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。2.检查原理 Ch.P规定四种重金属检查方法。 第一种适用溶于水、稀酸、乙醇的药物，最常用方法。 原理： （黄色到棕黑色） 与一定量标准铅溶液同法处理所呈颜色比较SHCONHCH5 . 3pHOHCSNHCH223223 H2PbSHSHPb22资料仅供
16、参考,不当之处，请联系改正。)buff(pH3.5水、醋酸 盐样品（一定量） 同上标准液（一定量）比色2TS硫代乙酰25mL水放置胺3.操作方法样品管对照管资料仅供参考,不当之处，请联系改正。4.讨论（1）标准铅溶液：Pb(NO3)2l 配制贮备液；l 加硝酸防铅盐水解；l 临用前稀释成10gPb/mL。（2）硫代乙酰胺试液l 实验条件下硫代乙酰胺水解产生H2S（3）溶液pHl pH3.03.5，呈色较完全；（4）观察比较：白色背景由上向下观察。 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。OH3Zn3AsHH9Zn3AsO22333黄色（量少）223)HgBr(AsHHBr2HgBr2AsH棕色（量
17、大）323As(HgBr)3HBr3HgBrAsH 三三. .砷盐检查法（古蔡氏法）砷盐检查法（古蔡氏法） 1.原理 金属锌与酸作用产生新生态氢，与药物中微量砷盐反应生成挥发性砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑， 与同条件下一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较。 反应式如下：资料仅供参考,不当之处，请联系改正。2.操作：砷盐检查在检砷瓶中进行。 HgBr2试纸PbAc2棉花样品(or标准砷溶液), KI TS、酸性SnCl2 TS、HCl、Zn粒样品 对照资料仅供参考,不当之处，请联系改正。3. 讨论 (1)标准砷溶液 As2O3配制贮备液，临用前稀释成1gAs/mL (2)试剂的作用 KI
18、作用：还原剂，As5+As3+ 酸性SnCl2作用 a. As5+As3+OHSnAsOH2SnAsO2433234资料仅供参考,不当之处，请联系改正。422SnI2SnI b.KII2I 2424ZnIZnIZn2+不断被消耗使生成AsH3的反应向右进行。OHAsOIHAsOI23323422资料仅供参考,不当之处，请联系改正。（黑色，干扰）HgSHgBrSHH2S222果留在棉花上，不干扰结 2HAcPbSSHPbAc22PbAc2棉花作用：排除硫化物干扰。l样品或Zn粒中含硫化物时，酸性溶液中产生H2S气体能与HgBr2试纸作用产生色斑。lH2S与PbAc2反应生成PbS沉淀留在棉花上，不与HgBr2反应。资料仅供参考,不当之处，请联系改正。(3) 反应最佳条件 Zn粒l 大小：通过1号筛（8502000 m）；l 用量：2 g；l 不含砷； 溶液酸度：2 mol/L HCl； 反应时间及温度：2540C，反应45min。
