1、a1MCAO model杨荣兵a2MCAO是middle cerebral artery occlusion 的缩写形式,中文意思为中脑动脉栓塞。简介a3 心脑血管疾病是危及人类健康的头号杀手。制作模型目的Leading Causes of Death for Asian or Pacific Islander(2002)a4 脑血管病包括缺血性和出血性脑血管病,其中缺血性脑血管病占80-85%。 大脑中动脉是常见的出血或梗塞发生部位。 制作模拟人脑缺血模型对脑缺血发病机制及药物筛选有重要意义。制作模型目的a5制作原理 大脑中动脉栓塞模型并不是把线栓插进大脑中动脉,而是经颈内动脉入颅并插入大脑
2、前动脉,从而阻塞来自栓塞侧的大脑前动脉的血供,以及堵塞接受后交通动脉血供的的颈内动脉颅内段. 供被线栓阻断. 大脑前动脉通过前交通动脉和对侧大脑前动脉相连通,颈内动脉通过后交通动脉和基底动脉相连接,从图中可以看出,大脑中动脉的血a6a7a8 动物:大鼠 器械:常规手术器械外,需要钓鱼线,直径0.22mm,一端用火焰灼成钝圆形,距钝圆段18mm做标记(插入深度) 麻醉:10%水合氯醛(3ml/kg)实验材料a9 常规麻醉固定大鼠,颈前皮肤消毒实验过程a10 切开颈前皮肤,钝性分离皮下组织,分离颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉a11 结扎颈总动脉、颈外动脉,颈内动脉挂线、夹闭a12 切口、插线a13
3、结扎固定插入的鱼线a14 缝合a15 评分方法有很多种,这里介绍longalonga评分法 0 0分:分:正常,无神经功能缺损;正常,无神经功能缺损;1 1分:分:左侧前爪不能完全伸展,轻度神经功能缺损;左侧前爪不能完全伸展,轻度神经功能缺损;2 2分:分:行走时,大鼠向左侧(瘫痪侧)转圈,中度神行走时,大鼠向左侧(瘫痪侧)转圈,中度神经功能缺损;经功能缺损;3 3分:分:行走时,大鼠身体向左侧(瘫痪侧)倾倒。重行走时,大鼠身体向左侧(瘫痪侧)倾倒。重度神经功能缺损;度神经功能缺损;4 4分:分:不能自发行走,有意识丧失。不能自发行走,有意识丧失。 2h时评分比较明显,24h比较稳定,1-3分
4、造模成功神经行为学评分a16 神经功能的恢复 血清总超氧化物歧化酶(SOD)活性 丙二醛(MDA)含量 梗死体积 病理组织损伤及细胞超微结构改变的影响 进行统计学分析 基质金属蛋白酶类(MMPs) 可测指标a17 检 测 腹 动 脉血 血液 流变 学 动 态 变 化 ; 测 定 脑 组 织 白细 胞 介 素 一1( I L一1 ) 和 肿 瘤 坏 死 因 子 一( T NF ) 含 量 ; 观 察 脑 细 胞 的 病 理 形 态 学 变 化 并 进 行 细 胞 计 数 ; 检 测 细胞 凋 亡情 况 可测指标a18 TTC(2,3,5氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,与正常组织中的脱氢酶
5、反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白脑组织TTC染色a19 动物麻醉,灌注(心脏左心室穿针,剪开右心耳,TTC和WB可以不灌注,若灌注,用生理盐水),取脑。 脑切片(切片前可将脑组织在负20度冻20min,方便切割):一般切成56 片,每隔2mm 切一片。a20 脑片置TTC染液中,37度避光染色30min,间或翻转脑片,使染色均匀。 拍照,软件计算梗死体积,统 计学分析不同组间的差异。a21 本次介绍只是比较通用的一些实验方法,实际实验设计中,可以根据实验需要进行综合运用,不断改进!后记a22 注重准备MCAO模型的东西,看关于这个知识的论文。 注重英语的学习。前两周总结a23 看关于心脑血管方面的论文。 注重英语学习。 将看的论文总结并整理。后两周的打算a24致谢