血袋及血液标本标识课件.ppt

1、 第第4 4部分部分 血液检测血液检测 血站技术操作规程（血站技术操作规程（20122012版）版） 苏州市中心血站苏州市中心血站 曹谊曹谊 2012-05-242012-05-24 学习内容学习内容n1.2012版技术规程血液检测部分概要n2.2012版技术规程血液检测部分内容介绍第4部分 血液检测附录B 血液检测方法的确认 附录D 血液检测室内质控方法 附录E 微板法ABO血型定型试验 学习内容1 2012版技术规程 血液检测部分 -概要血站技术操作规程（血站技术操作规程（2012版）版）目录目录1 献血者健康检查2 全血采集3 血液成分制备4 血液检测5 血液隔离与放行6 质量控制附录A

2、 献血者血红蛋白检测（硫酸铜目测法）附录B 血液检测方法的确认附录C 血液检测试剂（酶联免疫/核酸试剂）进货验收与放行记录表附录D 血液检测室内质控方法附录E 微板法ABO血型定型试验附录F 血液质量控制检查方法附录G 血袋标签确认方法附录H 血站使用的强制检定工作计量器目录 第第4部分部分 血液检测血液检测n1 可经输血传播感染的检测项目及检测方法可经输血传播感染的检测项目及检测方法n2 血液检测试剂血液检测试剂n3 仪器设备使用要求仪器设备使用要求n4 实验室信息管理系统实验室信息管理系统n5 血液检测标本血液检测标本n6 试验操作试验操作n7 试验性能监控试验性能监控n8 试验结果的判定

3、试验结果的判定n9 ELISA初次试验有反应性标本的重复试验初次试验有反应性标本的重复试验n10 核酸初次试验有反应性的进一步处理核酸初次试验有反应性的进一步处理n11 血型检测血型检测n12 血液检测最终结论的判定血液检测最终结论的判定n13 血液检测结论的报告和利用血液检测结论的报告和利用资源管理的资源管理的细化要求细化要求过程控制的过程控制的细化要求细化要求检测项目及检测项目及方法方法 血站技术操作规程（2012版） 参考标准参考标准n血站管理办法n血站质量管理规范n血站实验室质量管理规范n WHO捐献血液中输血传播传染病的筛查建 议（2009）n WHO采供血机构GMP指南（2011）

4、 中国输血技术操作规程中国输血技术操作规程 ( (血站部分血站部分) 1997) 1997版版 规程框架和内容的不适宜性规程框架和内容的不适宜性97 版第四章 化验操作规程 第一节化验操作要求第二节乙型肝炎表面抗原酶联免疫法测第三节丙型肝炎病毒抗体酶联免疫法测第四节艾滋病病毒/抗体酶联免疫法检测第五节梅毒抗体检测：USR/RPR/TRUST/TPHA第六节ALT检测：快速法、比色法、速率法第七节ABO血型鉴定（纸板法和磁板法） 12版 第4部分 血液检测 4.1 可经输血传播感染的检测项目及检测方法可经输血传播感染的检测项目及检测方法 4.2 血液检测试剂血液检测试剂 4.3 仪器设备使用要求

5、仪器设备使用要求 4.4实验室信息管理系统实验室信息管理系统 4.5 血液检测标本血液检测标本 4.6 试验操作试验操作 4.7 试验性能监控试验性能监控 4.8 试验结果的判定试验结果的判定 4.9 ELISA初次试验有反应性标本的重复试验初次试验有反应性标本的重复试验 4.10 核酸初次试验有反应性的进一步处理核酸初次试验有反应性的进一步处理 4.11 血型检测血型检测 4.12 血液检测最终结论的判定血液检测最终结论的判定 4.13 血液检测结论的报告和利用血液检测结论的报告和利用检测项目检测项目及方法及方法资源管理的资源管理的细化要求细化要求过程控制的过程控制的细化要求细化要求 中国输

6、血技术操作规程中国输血技术操作规程 ( (血站部分血站部分) 1997) 1997版版 检测方法的不滞后性检测方法的不滞后性n97版检测方法描述以手工操作为基础，没有全自动操作的质量要求；版检测方法描述以手工操作为基础，没有全自动操作的质量要求；nHBsAg 1ng的检测灵敏度已不适用；的检测灵敏度已不适用；n抗抗-HIV为第二代检测方法要求，现在是第四代方法；为第二代检测方法要求，现在是第四代方法；n梅毒抗体检测方法为非特异性检测方法，而不是目前采用的梅毒抗体检测方法为非特异性检测方法，而不是目前采用的EIA双抗原夹心双抗原夹心法；法；nALT为为快速法（酮体酚法）、比色法（赖氏法）、速率法

7、，无干化学法快速法（酮体酚法）、比色法（赖氏法）、速率法，无干化学法nABO血型检测方法定义为玻片法，没有涵盖适用于全自动血型分析的微板法。血型检测方法定义为玻片法，没有涵盖适用于全自动血型分析的微板法。 n不包括不包括NAT要求要求中国输血技术操作规程中国输血技术操作规程 ( (血站部分血站部分) 1997) 1997版版 新版新版GBGB的不协调性的不协调性不适宜性不适宜性n97版规程与新版规程与新GB18467不能相互补充不能相互补充GB18467 2011献血者健康检查要求献血者健康检查要求是针对献血者献血前的业务行为是针对献血者献血前的业务行为要求。要求。n8 献血前血液检测献血前血

8、液检测n8.1血型检测：血型检测：ABO血型（正定型）。血型（正定型）。n8.2血红蛋白（血红蛋白（Hb）测定：男）测定：男120g/L；女；女115g/L。如采用硫酸铜法：。如采用硫酸铜法：男男1.0520，女，女1.0510。n8.3单采血小板献血者：除满足单采血小板献血者：除满足8.2外，还应同时满足：外，还应同时满足：na)红细胞比容（红细胞比容（HCT）：）：0.36nb)采前血小板计数（采前血小板计数（PLT）：）：150109/L且且450109/Lnc)预测采后血小板数（预测采后血小板数（PLT）：）：100109/L。 以上不包含血液检测程序以上不包含血液检测程序中国输血技术

9、操作规程中国输血技术操作规程 ( (血站部分血站部分) 1997) 1997版版 新版新版GBGB的不协调性的不协调性不适宜性不适宜性n97版规程与新版规程与新GB18469的要求不相适应的要求不相适应GB18469 2011全血成分血质量要求全血成分血质量要求血液安全性检测要求血液安全性检测要求n血型检测血型检测ABO血型定型试验结果正确。血型定型试验结果正确。RhD血型定型试验结果正确。血型定型试验结果正确。n人免疫缺陷病毒（人免疫缺陷病毒（HIV-1和和HIV-2）标志物筛查试验结果阴性：）标志物筛查试验结果阴性：HIVAb(1+2)HIVAg/AbHIV RNA中国输血技术操作规程中国

10、输血技术操作规程 ( (血站部分血站部分) 1997) 1997版版 新版新版GBGB的不协调性的不协调性不适宜性不适宜性GB18469 2011全血成分血质量要求全血成分血质量要求血液安全性检测要求血液安全性检测要求n乙型肝炎病毒（HBV）标志物筛查试验结果阴性HBsAgHBV DNAn丙型肝炎(HCV)病毒标志物筛查试验结果阴性HCV AbHCV RNAn丙氨酸氨基转移酶检测合格，采用1种试剂（速率法）进行1次检测，检测结果合格。（无酮体酚法）n梅毒螺旋体标志物筛查试验结果阴性，具体标志物及其检测方法为采用2个不同生产厂家的ELISA试剂检测梅毒特异性抗体。（无非特异方法） 血站技术操作规

11、程（2012版） 血液检测部分突出变化血液检测部分突出变化n血液检测部分与献血前献血者快速检测部分分开。血液检测部分仅针对采集后的全血和成分血检测过程提出管理和技术要求。n血液检测部分包含了检测前、中、后的过程控制要求。明确了标本采集、保存、运输、交接等环节的控制要求；明确了输血相关感染检测的方法和程序；增加HIV抗原检测选择；增加HCV抗原检测选择；增加NAT检测程序；增加血型自动化检测方法选择要求删除TP非特异性试验方法；删除ALT快速法n将资源管理，如设备、试剂、LIS的部分管理要求细化，纳入规程。 学习内容2 2012版技术规程 血液检测部分 -内容介绍4.1可经输血传播感染的检测项目

12、及检测方法n4.1.1人类免疫缺陷病毒（HIV）感染标志物及其检测方法有2种选择，可任选其中1种 ：a.血清学+血清学（3+3，3+4，4+4） b.血清学+NATHIVAb(1+2)+HIVAg/Ab； HIVAb(1+2)1+HIVAb(1+2)2； HIVAg/Ab1+HIVAg/Ab2HIVAb(1+2)或HIVAg/AbHIV RNAn4.1.2 乙型肝炎病毒（HBV）感染标志物及其检测方法有2种选择，可任选其中1种 ：a.血清学+血清学 b.血清学+NATHBsAg1 HBsAg2HBsAgHBV DNA4.1可经输血传播感染的检测项目及检测方法n4.1.3 丙型肝炎病毒（HCV）

13、感染标志物及其检测方法有2种选择，可任选其中1种 ：a.血清学+血清学（3+3，3+4，4+4） b.血清学+NATHCVAb+HCVAg/Ab； HCVAb1+HCVAb2； HCVAg/Ab1+HCVAg/Ab2HCVAb或HCVAg/AbHCV RNAn4.1.4 ALT采用2种方法（干化学法和速率法）进行2次检测，分别在采血前和采血后进行 。n4.1.5 梅毒螺旋体感染标志物及其检测方法：采用2个不同生产厂家的ELISA试剂检测梅毒特异性抗体 。 血清学+血清学ALT检测检测n12版： 1.9 献血前检测方法 ALT采用干化学法/ 速率法 4.1.4 ALT采用2种方 法（干化学法和速

14、 率法）进行2次检 测，分别在采血前 和采血后进行 。 97版初筛： 酮体粉法：阴性血液检测： 赖式法：25单位0510152025306065days103106103106103106viral loadgeq/ml354070day 38day 651 geq/20 mlday 3day 21eclipse phase隐隐蔽期蔽期day 15day 24day 6HBV-DNAHCV-RNARNAHIV-AgAnti-HIVAnti-HCVHBsAg通过通过NATNAT检测得到的完整的感染窗口期检测得到的完整的感染窗口期 day 8Infectious 易传染的below infecti

15、vity threshold?在易传染域值以下HIV RNA (plasma)HIV Antibody110102030405060708090100HIV p24 Ag1622Ramp-up viremiaDT = 21.5 hrs上升期病毒血症上升期病毒血症检检出出时间时间 1st gen2nd gen3rd genp24 Ag EIA -HIV MP-NAT -HIV ID-NAT -Peak viremia: 106-108 gEq/mL 峰峰值值病毒血症病毒血症“blip” viremia暂时暂时性病毒血症性病毒血症Viral set-point: 102 -105 gEq/mL病毒

16、病毒调调定点定点感染初期出现的感染初期出现的HCVHCV病毒标志物病毒标志物HCV RNAAnti-HCV EIAs1st gen 150 d 2nd gen 80 d 3rd gen 70 d0102030405060708090100Ramp-up phase上升期上升期 DT 检检出出时间时间 = 17 .7 hrsPlateau phase viremia: 105-108 gEq/mL平台期病毒血症平台期病毒血症Pre-ramp-up上升前期上升前期blip viremia 暂时暂时的病毒血病的病毒血病- HCV Ag EIA- HCV MP-NAT- HCV ID-NATALTVi

17、ral set-point: 102-107 gEq/mL病毒病毒调调定点定点 Hollinger 2008Hollinger, 2008NATNAT检测技术特点检测技术特点n灵敏度高。用于WP标本检出。n标本质量控制要求高，否则产生假阴性结果。采血管：无RNAase标本保存温度标本运输温度n容易产生污染：尤其是手工操作来自阳性标本来自扩增产物来自试剂污染n对实验室设施和环境要求严格实验室温、湿度控制实验室布局和气流走向n试剂价格昂贵WHO血液筛查建议（血液筛查建议（2009)2009)n政策建议应对所有血液做感染及其标志物的强制性筛查：nHIV-1和HIV-2：联合检测HIV抗原和抗体，或检

18、测抗-HIV；n乙型肝炎：检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)；n丙型肝炎：联合检测HCV抗原和抗体，或检测抗-HCV；n梅毒(苍白密螺旋体)：检测密螺旋体特异性抗体。在考虑将核酸检测列入筛查策略之前，应首先保证已经有效建立具有质量保证的血清学筛查技术，并对所有血液实施筛查。血液筛查方法的选择血液筛查方法的选择 n在各种类型的血液筛查试验中，以检测病原体抗体、抗原或者核酸的试验最为常用。然而每种试验都有其局限性，没有任何一种试验适用于所有情形。n血液筛查试验的主要类型有：酶免疫试验(enzyme immunoassays，EIAS)、化学发光免疫试验(chemiluminescent imm

19、unoassays，CLIAs)、血凝试验（haemagglutination，HA）颗粒凝集试验(particle agglutinatior，PA)快速简便一次性试验核酸扩增(nucleic acid amplification techniques，NAT)试验。 WHO血液筛查建议血液筛查建议试验选择试验选择 n应考虑每种筛查系统的优点及其局限性，包括：1) 窗口期；2) 生物学假阳性率；3)复杂性。在大多数情形，专门为血液筛查研发的EIAs 、CLIAs和颗粒凝集试验是首选的试验，适用从较少量到大批量标本的筛查；一般不建议将快速/简便试验用于血液筛查，因为其设计是用于少量标本即刻快速

20、检测，主要用于诊断目的。WHO血液筛查建议血液筛查建议n引入NAT检测在感染发生率很低的国家，其效益增加很有限。在感染发生率高的国家，可被NAT检出的窗口期血液数量可能较多。因此采用NAT可降低输注窗口期血液的风险基于成本效益，需考综合考虑n实施NAT 的复杂性和高成本，以及需要的基础设施。n献血者人群感染发生率和感染率n献血者选择过程的效果n当前实施的血清学筛查试验的敏感性，以及通过应用敏感性更高的血清学试验(如联合抗原和抗体试验)来进-步提高敏感性的可能性等。n只有在抗体或抗原检测计划已经得到有效实施，并且具有开展NAT 能够增加效益的确凿证据的情况下，才应考虑引入NAT。 4.2 血液检

21、测试剂血液检测试剂n4.2.1 试剂选择n4.2.2 证照要求n4.2.3 进货检查验收n4.2.4 隔离存放n4.2.5 质量抽检n4.2.6 审核批准n4.2.7 试剂保存和质量监控4.2.1 4.2.1 试剂选择试剂选择n应建立血液检测试剂的评价、选择和确认程序n血液筛查试验的敏感性和特异性应尽可能高WHO：最好99.5% n有条件的实验室可自行开展试剂评价（见附录B）。不具备条件的实验室可充分利用国家专业机构的评价数据。自己研究官方数据n临检中心n国家CDCn权威机构：WHO/CAP/NRL4.2.2 4.2.2 证照要求证照要求n药品类检测试剂1）药品生产许可证或者药品经营许可证和营

22、业执照复印件；2）药品生产质量管理规范或者药品经营质量管理规范认证证书复印件；3）药品的批准证明文件复印件；4）供货单位药品销售委托书；5）销售人员有效身份证明复印件；6）血源筛查试剂的批签发文件；7）出厂质量检验报告。4.2.2 4.2.2 证照要求证照要求n医疗器械类检测试剂1）医疗器械生产企业许可证或者医疗器械经营企业许可证和营业执照复印件，对生产、经营属于医疗器械分类目录中第一类医疗器械的企业，只需索取营业执照复印件；2）医疗器械注册证书和医疗器械注册登记表复印件；3）供货单位医疗器械销售委托书；4）销售人员有效身份证明复印件；5）出厂质量检验报告。 国家药品监督管理局关于体外国家药品

23、监督管理局关于体外诊断试剂实施分类管理的公告诊断试剂实施分类管理的公告n 一、对体外诊断试剂实行分类管理，将体外生物诊断试剂按药品进行管理，体外化学及生化诊断 n 试剂等其他类别的诊断试剂均按医疗器械进行管理。体内诊断试剂一律按药品管理。n 二、体外诊断试剂的分类：n （一）按药品进行管理的体外生物诊断试剂包括：n 1血型、组织配型类试剂；n 2微生物抗原、抗体及核酸检测类试剂；n 3肿瘤标志物类试剂；n 4免疫组化与人体组织细胞类试剂；n 5人类基因检测类试剂；n 6生物芯片类；n 7变态反应诊断类试剂。n （二）按医疗器械管理的体外试剂包括：n 1临床基础检验类试剂；n 2临床化学类试剂；

24、n 3血气、电解质测定类试剂；n 4维生素测定类试剂；n 5细胞组织化学染色剂类；n 6自身免疫诊断类试剂；n 7微生物学检验类试剂。4.2.3 4.2.3 进货检查验收进货检查验收n1）验明药品合格证明和其他标识；n2）外观检查（运输包装箱完整无损，运输冷链符合要 求，试剂包装盒完整无损，无液体泄漏）；n3）到货数量和销售凭证(购货单位、试剂、供货商等 名称，规格、批号、数量、价格） （6.3.9检验试剂的质量检查相关联）4.2.4 4.2.4 隔离存放隔离存放n隔离存放 应将通过进货检查验收后的试剂进行隔离存放，防止误用。4.2.5 4.2.5 质量抽检质量抽检n应建立并执行抽检制度，对每

25、次购进（同批或不同批）的试剂进行质量抽检。n应将试剂说明书列入文件控制范围。应对试剂说明书版本和内容进行检查。其操作要求如已变更，实验室的试验操作在试剂启用时应同时变更，严格控制未按试剂说明书进行试验操作的情形发生。n试剂盒组成、组分性状与说明书一致，无泄漏，足量，标识正确。4.2.5 4.2.5 质量抽检质量抽检n质量抽检的样本有：1）试剂盒对照；2）室内质控品；3）实验室自制或商品化的血清盘。前2种为必须，后1种为可选。n质量抽检结果要求：1）试剂盒对照品检测结果符合试剂说明书要求，2）室内质控品检测结果符合既定要求；3）如果适用，实验室自制或商品化的血清盘符合既定要求。 4.2.6 4.

26、2.6 审核批准审核批准n应由授权人对采购验收和质量抽检的过程和结果进行审核，批准其用于血液检测。n应建立和保存试剂采购验收、质量抽检和审核批准的记录（见附录C）。 4.2.7 4.2.7 试剂保存和质量监控试剂保存和质量监控n应对经批准使用的试剂进行标识和放行，宜对试剂盒粘贴“可用”标签。n应按试剂说明书要求的保存条件进行保存，应在有效期内使用。n应对试剂的库存（批号、失效期、库存量等）进行管理，防止试剂过期或者中断。n在试剂保存和使用过程中应注意试剂性能出现衰减，如果试剂盒对照品和室内质控品的检测值呈现连续走低趋势且无法使其回升纠正，应考虑终止使用。 4.3 4.3 仪器设备使用要求仪器设

27、备使用要求n4.3.1 新的或者经过大修的检测设备在正式投入正常使用之前应经过确认。新设备的确认应包括安装确认、运行确认和性能确认。经过大修的设备根据需要进行适当确认，必要时应进行计量检定或校准。 （设备确认）n4.3.2 按照检测设备用户手册要求进行操作，包括使用、校准、维护等工作。 （制定SOP）n4.3.3 如果使用多台设备检测同一个项目，应对设备之间的性能和差异进行比较。 （设备性能比对）n4.3.4 应定期检查自动化检测设备试验参数的设置，应保存检查记录。 （定期参数核查）n4.3.5 在试验过程中自动化检测设备出现故障需要进行手工操作时，应注意自动化设备操作和手工操作的衔接及其对结

28、果的影响。应记录手工操作步骤和操作者。 （中断应急） 确认活动遵循的原则n1. 全方位原则：确认活动涵盖了设备安装、调试运行、性能确认、人员培训及设备监控等方面。n2.全周期原则：自动化设备的确认是一个过程，它涵盖设备的整个生命周期，包括使用前、中、后。n3. 可测量原则：设备的性能需要通过可测量指标来证明是否满足要求。n4. 风险评估原则 4.4 4.4 实验室信息管理系统实验室信息管理系统 n4.4.1 应使用实验室信息管理系统对整个检测过程（从标本接收、试验、结果和结论判定）进行信息化管理。 （ LIS范围）n4.4.2 实验室信息管理系统的功能应包括：1）标本接收；2）试验项目选择；3

29、）试验数据记录与汇总；4）试验数据的计算；5）试验结果的判定；6）血液筛查结论的判定；7）血液筛查结论传输至血液管理信息系统并为其所利用。 （ LIS功能）n4.4.3 实验室信息管理系统运行参数的设置应建立权限控制。应保存设置参数的书面记录，并定期将其与实际设置参数对照，确保设置无误，应保存核实记录。 （LIS权限及应用程序控制） 新规程新规程-检测前过程控制要求检测前过程控制要求n2.3 采血器材准备n2.13 留取标本n2.14 血袋及血液标本标识n2.17 血液标本处理和保存n4.5 血液检测标本 2.3 2.3 采血器材准备采血器材准备n2.3.3 标本管 1）带有分离胶用于检测病毒

30、核酸的标本管；2）用于酶联免疫吸附法（以下简称ELISA）、 ALT和血型检测的标本管。 2.13 2.13 留取标本留取标本n2.13.1 检测结果用于判定血液能否放行的标本只能 在献血时同步留取，不得在献血者健康检查 时提前留取。 （留取时点）n2.13.2 如果使用带留样袋的采血袋，将留样针插入 真空采血管，留取血样。（留取方式）n2.13.3 如果使用不带留样袋的采血袋，将静脉穿刺 针插入真空采血管，留取血样。应单手操 作，避免手被针头刺伤。 （留取方式）n2.13.4 将标本管内促凝剂或抗凝剂与血液充分混匀。 2.14 2.14 血袋及血液标本标识血袋及血液标本标识n2.14.2 宜

31、在标本管与留样针/静脉穿刺针分离前开始 标识，对采血袋和标本管的标识应当首先连 续完成，不应中断。(贴标签时点及方式）n2.14.3 宜在标本管与留样针/静脉穿刺针分离前核查采血 袋、血液标本、献血登记表，所标识的献血条形 码、应一致。宜采用计算机程序进行核查。 (核查时点及方式） 2.17 2.17 血液标本处理和保存血液标本处理和保存n2.17.1 核酸检测标本应及时离心。n2.17.2 血液标本采集后应尽快处理， 在合适的温度下保存。 4.5 4.5 血液检测标本血液检测标本 n4.5.1 血液标本的一般要求1）标本与血液、献血者一一对应；2）标本质量符合检测项目技术要求；3）标本信息具

32、有可追溯性。 n4.5.2 血液标本采集与送检程序的制定相关方：实验室，标本采集和送检部门程序内容n采集程序n送检程序审核职责：质量管理部门批准职责：法定代表人（集中化检测过程） 4.5 4.5 血液检测标本血液检测标本 4.5.2 血液标本采集与送检程序的制定 4.5.2.3 标本采集和送检程序的要点n1）标本类型及检测项目、标本量、标本管、标 本运输及包装要求；n2）标本的惟一性标识（条形码）；n3）标本的质量要求；n4）标本采集、送检和接收；n5）标本信息和检测报告信息的传输与接收，检 测报告时限；n6）如为集中化检测，检测的委托方和受托方的 标识与联系方式。 4.5 4.5 血液检测标

33、本血液检测标本n4.5.3 血液标本管的选择 （与2.3.3对应）4.5.3.1 应根据每项试验的技术要求，采用相应类型的真空采血管留取检测标本。试管应无裂痕、无渗漏，容量应满足检测项目求。4.5.3.2 将病毒核酸检测结果列入血液放行依据的实验室，应按照试剂说明书要求选择合适的标本管，最好采用含惰性分离胶的EDTAK2真空采血管留取核酸检测标本。n4.5.4 血液标本的采集与标识 （与2.13，2.14对应）4.5.4.1应对血液标本采集前的准备、标本的采集、标识、登记和保存过程实施有效控制，一次只对一袋血液和同源血液标本管贴签，确保标本与血液、献血者一一对应，贴签无误。标本质量符合检测项目

34、技术要求。 （贴标签要求）4.5.4.2 检测结果用于血液放行的血液标本，应在采集血袋血液的同时或者从血袋血液中留取。 （标本留取时点要求）4.5.4.3 血液标本的采集与标识的具体操作见本规程第2章全血采集。 （操作要求指向第2章采血） 4.5 4.5 血液检测标本血液检测标本n4.5.5 血液标本采集后的处理4.5.5.1 可以电子或纸面方式登记标本信息，应进行核对，防止信息录入错误。可通过网络、传真或其它形式传输标本信息。 （信息采集方式）4.5.5.2 核酸检测标本采集后，根据所采用的采血管和试验的技术要求实施离心。 （ NAT标本的处理需要，如离心）4.5.5.3 血液标本在采血现场

35、的临时保存温度为210。 （临时保存温度210 ） 4.5 4.5 血液检测标本血液检测标本n4.5.6 血液标本包装与运输4.5.6.1 标本应隔离密封包装，包装材料应满足防水、防破损、 防 外泄、保持温度、易于消毒处理。装箱时应保持标 本管口向上。 （标本包装一般要求）4.5.6.2 对于送交集中化检测实验室的标本的包装要求主要有： 1）可使标本运输在过程中保持在210； 2）外包装有明确标识（放置朝向、易碎）和交付接收双方的 联系方式。 （NAT标本包装要求）4.5.6.3 标本应在210条件下运输，应对运输过程的冷链 效果进行确认并定期监测。 （运输温度的要求）4.5.6.4 应对标本

36、运输过程进行记录，其要点有： 1）启运时间、地点； 2）运抵时间、地点； 3）标本箱编号、标本类型、数量；4）运输包装有无受损、 有无泄漏； 5）运输时间2小时以上的 应记录箱内温度； 6）标本交运人、承运人； 7）运输过程中发生的可能影响标本质量的意外事件及处理措施。 （记录要求）4.5 4.5 血液检测标本血液检测标本n4.5.7 血液标本的交接4.5.7.1 接收时标本应核查：1）标本来源、数量、采集时间；2）标本采集管使用正确与否；3）标本是否满足既定的质量要求；4）标本与送检单信息对应性和完整性。 （核查内容）4.5.7.2 如发现溢漏应立即将尚存留的标本移出，对溢出标本管和原包装箱

37、进行消毒并记录，必要时报告实验室负责人和送检单位。 （事件处理）4.5.7.3 应拒收标本的情形有：1）检测申请关键信息缺失或不符；2）标本管上无标识或标识不清、不正确；3）标本管选用错误；4）标本量不足或被稀释； 5）不符合试剂说明书要求的情形。 （标本拒收）4.5.7.4 标本交接双方应在标本交接记录签名。 （职责确认 ）新规程新规程-检测中过程控制要求检测中过程控制要求n4.6 试验操作n4.7 试验性能监控 n4.8 试验结果的判定n4.9 ELISA初次试验有反应性标本 的重复试验 n4.10 核酸初次试验有反应性的进 一步处理（见试剂说明书）n4.11 血型检测 n4.12 血液检

38、测最终结论的判定 4.6 4.6 试验操作试验操作n4.6.1 按照试剂生产方提供的试剂使用说明书进行操作。 （操作的基本依据）n4.6.2 如需对个别试验参数进行修改，应进行确认。 （变更控制）n4.6.3 宜采用自动化检测设备操作标本和试剂加样以及试 验过程。 （操作方式）n4.6.4 自动化设备运行参数的设置应建立权限控制。应保 存设置参数的书面记录，并定期将其与实际设置参 数对照，确保设置无误，应保存核实记录。 （设备参数控制） 4.6 4.6 试验操作试验操作n4.6.5 应保存自动化检测设备运行记录，并定期对运行 状态进行审核。 （试验追踪）n4.6.6 自动化检测设备运行时，如果

39、需要人工辅助或干 预，应对实施人工辅助或干预的人员、人工辅助 或干预的时间和内容、与自动化检测设备运行的 衔接等进行记录。 （操作干预控制）n4.6.7 如果是采用手工操作标本和试剂加样或试验微孔 板，应完整记录每一加样和操作步骤。 （手工操作要求） 4.7 4.7 试验性能监控试验性能监控n4.7.1.1 在血液筛查过程中，应对试验性能持续进行 监测，以发现正在发生的任何性能变化，这 些变化如果没有得到及时纠正，最终可能导 致试验批次的失败，或者弱阳性样本的漏检。 4.7 4.7 试验性能监控试验性能监控n4.7.1.2 选择能够及时反映试验性能或试验应用（试验 或者试验操作者/操作系统）变

40、化的1项或者多 项参数进行监测，以保证试验性能。这些参数 包括：1）试验对照的检测值； 2）质控品的检测值； 3）初、复试有反应率及两者的比例（复试有反应性标本数/初次试验有反应性标本数）。n4.7.1.3 应当根据质控品的特性和用途加以选择和使用。 （使用目的）监控有效性监控稳定性4.7 4.7 试验性能监控试验性能监控 质控品的使用要求质控品的使用要求n4.7.1.4 作为试验有效性的外部对照应具备：1）经过国际（国家）标准溯源 （国际或国家溯源）2）以合适的基质进行稀释； （减少干扰）3）检测标志物含量接近检测限（S/CO值为25）。 （阳性外部对照检测限）n4.7.1.5 用于监测试验

41、稳定性的质控品，不要求经过国际 （国家）标准溯源。n4.7.1.6 实验室应当尽可能使用质控品。 关于标准物质溯源n国家计量局颁布标准物质管理办法一级标准物质n用绝对测量法或两种以上不同原理的准确可靠的方法定值。在只有一种定值方法的情况下，用多个实验室以同种准确可靠的方法定值； n准确度具有国内最高水平，均匀性在准确度范围之内； n稳定性在一年以上或达到国际上同类标准物质的先进水平； n包装形式符合标准物质技术规范的要求。 二级标准物质n用与一级标准物质进行比较测量的方法或一级标准物质的定值方法定值； n准确度和均匀性未达到一级标准物质的水平，但能满足一般测量的需要； n稳定性在半年以上，或能

42、满足实际测量的需要； n包装形式符合标准物质技术规范的要求。 关于标准物质溯源n中华人民共和国制造计量器具许可证n标准物质证书n由国务院剂量行政部门批准（中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局）4.7 4.7 试验性能监控试验性能监控 质控品的使用要求质控品的使用要求n4.7.1.7 质控品所含目标检测物的浓度应满足实验要求。在日常使用 前应对质控品的种类、规格、外观、批号和效期进行检查。EIA n监控有效性的阳性外部对照（S/CO值为25）；溯源性？反应性/非反应性n监控稳定性QCS规格要求？是否需要？SPCn阴性QCS是否需要？n选择适合不同的试验的QCSNAT（是否适用？）n监控有效性的

43、阳性外部对照？规格？（分析灵敏度的2-5倍）n监控稳定性QCS是否需要？n阴性QCS是否需要？n溯源？性能稳定？4.7 4.7 试验性能监控试验性能监控质控品确认质控品确认n4.7.1.7 质控品所含目标检测物的浓度应满足实验要求。 在日常使用前应对质控品的种类、规格、外观、 批号和效期进行检查。质控品确认的SOPALT质控品：医学决定水平；使用前预确认；记录EIA质控品：S/CO2-5；使用前预确认；记录NAT质控品n配置：容器、耗材无RNA酶n预试验n稳定性：试验周期1月？2月n记录4.7 4.7 试验性能监控试验性能监控 质控品的使用要求质控品的使用要求n4.7.1.8 质控品应与血液检

44、测标本在相同的检测条件下进 行检测。如单一微板为一批试验，每一微板至少 包括1份外部质控品。与标本检测条件相同批的概念：ALT，EIA，NATn4.7.1.9 外部质控品和内部（试剂盒）对照不可相互替代。n4.7.1.10 外部质控品的用途（用于判定试验有效性或监 控试验稳定性）一经确定，不应随意更改。 （质控策略的稳定性）4.7.2 ELISA4.7.2 ELISA室内质控室内质控 附录附录D D 血液检测室内质控方法血液检测室内质控方法n针对试验过程。基于试验结果和检测数据n血站血液检测试验的类型ELISA试验：血清学抗体或抗原检测ALT酶学试验NAT试验： HBV/HCV/HIV DNA

45、或RNA检测n推荐的室内质控方法ELISA试验n有效性：通常采用试剂盒阴阳性对照、弱阳性质控品实时监控实验的有效性n稳定性：采用弱阳性质控品和Levey-Jennings质控图监控实验的稳定性ALT试验：定量试验。通常采用Levey-Jennings质控图监控ALT实验的精密性和有效性。NAT试验以及其它定性试验：可借鉴ELISA 的质控方法。 D.2 ELISAD.2 ELISA实验过程稳定性控制实验过程稳定性控制 n质控规则13s：一个质控值超过。用于提示可能存在随机误差。7x：7个连续的质控值落在均值一侧，用于提示可能存在系统误差。 n质控图框架建立1020天，至少20个数据累计框架的适

46、用性？cv20n控制限关注-3S是否低于1n质控框架的重建更换新批质控品更换新批试剂过程变化4.8 4.8 试验结果的判定试验结果的判定n4.8.1 试验结果判定规则 应制定明确的试验有效性和 标本试验结果判定规则，将其编写或设置成为计 算机程序，对其编写、设置、修改和启用应进行 控制，所有修改均应保存原版本，确保其具有可 追溯性。试验有效性规则试验结果判定规则采用LIS判定变更控制4.8 4.8 试验结果的判定试验结果的判定n4.8.2 试验有效的判定n4.8.2.1 应核查每批试验所使用的试剂、设备、试验过程、有无人工干预或其他非正常工作步骤出现等关键控制点，正确无误后方可对试验有效性进行

47、判定 （确定结果判断的CCP）n4.8.2.2 试剂盒各种试验对照的检测值符合试剂说明书的要求，是判定试验有效的最低要求。n4.8.2.3 如果外部质控品的检测值是作为试验有效性的判定依据之一，其检测值应符合既定要求。 （外部质控品的使用有效性）n4.8.2.4 如果外部质控品的检测值是作为试验稳定性的监控，其检测值应符合既定范围。如果超出既定范围，按既定程序决定试验是否有效。 （外部质控品的使用稳定性）n4.8.2.5 如果采用人工判定，应详细记录每一判定依据，应双人核查。 （人工判定的控制：记录）n4.8.2.6 如果判定一批试验无效，则该批试验所有标本的检测结果均为无效。 （质控结果与标

48、本结果的制约关系）4.8 4.8 试验结果的判定试验结果的判定n4.8.3 标本试验结果计算和判定 判定试验有效后，按照试剂说明书的要求计算临界值和灰区。根据标本检测值与临界值的比较结果，判定为标本检测结论为无反应性、有反应性或不确定。 关于灰区关于灰区n从统计学角度，灰区决定了cutoff的设定范围。在这个范围内设定cutoff，影响试验灵敏性或特异性。n在灰区内设定Cutoff试剂盒说明书指定的计算方法用户自己的计算方法 目的：提高分析灵敏度，减少假阴性 方式：依据说明书计算出的cutoff下移一定百分比ncutoff下移比例的设定依据试剂盒说明书C50试验ROC曲线试验变异关于灰区NAT

49、与EIA结果HBVDisDis+ +DisDis - -HBsAgHBsAg （NAT+ NAT+ and and EIA+EIA+）376376EIA EIA +3323322972973535EIA +EIA +4444A A2 20 02 2B B424236366 6NAT与EIA结果HCV血站检测结果血站检测结果罗氏电化学发光检测罗氏电化学发光检测RIBARIBA确认结果确认结果阳性结果阳性结果试试剂剂代代码码初次检初次检测测S/CS/CO O值值复检复检S/S/COCO值值1 1复检复检S/COS/CO值值2 2检测信号检测信号值值COICOI检测结果检测结果C100C100C33

50、cC33cC22pC22pNS5NS5hSODhSOD结果结果判判定定B B1.4571.9641.0710.113N N - - + + - - + + +/-+/-P PB B1.5291.1071.15555.1555.1R R + + 2+2+ 4 4+ + - - - -P PA A0.8581.2031.2060.4410.441N N - - - - + + + + - -P PA A1.0321.2631.2650.1770.177N N + + + + - - +/-+/- - -P PA A1.5541.8451.7120.0920.092N N - - + + 2 2+