1、A biased look at Biomarkers我国目前的肿瘤概况癌症是造成我国居民死亡的第一原因癌症是造成我国居民死亡的第一原因。 据统计，我国每年新发癌症220万例，因癌症死亡人数为160万。 到2020年，我国每年癌症的发病人数可能达到550万，每年因癌症死亡的人数将可能达到400万。癌症发病率上升的主要因素是：癌症发病率上升的主要因素是： 人口老龄化 吸烟和大气污染 生活与工作方式的改变 饮食结构改变Top ten in maleTop ten in femaleLung cancerGastric carcinomaLiver cancerColon / rectal canc
2、er Esophageal cancerBladder cancer Pancreatic cancer LeukaemiaLymphomaBrain tumor Breast cancerLung cancerColon / rectal cancerGastric carcinomaLiver cancerOvarian cancer Pancreatic cancerEsophageal cancerCancer of the uterusBrain tumor我国目前肿瘤发生情况我国目前肿瘤的发病率及死亡率恶性肿瘤诊断的十大方法X线检查：如胸部检查、骨骼X线、钡餐造影X线。血管造影：血
3、道和淋巴道的转移，小肿瘤诊断。计算机X线体层摄影，CT，脑、纵膈、胰腺、腹膜后和盆腔肿瘤。磁共振成像MRI （无放射性）：用于脑、脊髓、软组织等。超声波检查：甲状腺、肝、胆、胰、肾、卵巢等。肿瘤生物标志物筛查。肿瘤生物标志物筛查。放射性核素扫描技术：甲状腺、肝、骨。放射免疫闪烁照相技术：放射性核素标记抗体，检测相应的抗原。内镜检查：胃镜、肠镜、喉镜、支气管镜。病理学检查：细胞学以及活体组织的检查。肿瘤诊断的金标准。肿瘤生物标志物（Tumor Tumor BioarkersBioarkers, TM, TM）定义定义: 一般指由肿瘤细胞合成和释放的生物性物质，或机体对肿瘤组织反应产生的物质。定量
4、：定量： 这些物质必须在正常人中不存在或者是在癌肿患者中出现的水平显著高于正常人。定位定位： 可存在于细胞、组织或体液中，能用化学或免疫方法定量的、能证实癌肿存在(或在某一脏器存在)的，能监测肿瘤治疗和预后的物质。用途：用途： 生物标志物可用于疾病诊断、判断疾病分期或者用来评价新药或新疗法在目标人群中的安全性及有效性。肿瘤标志物的种类肿瘤胚胎抗原肿瘤胚胎抗原标志物标志物肿瘤相关糖类肿瘤相关糖类抗原标志物抗原标志物激素、酶及蛋激素、酶及蛋白类标志物白类标志物AFPCEA糖基决定簇糖基决定簇：如CA19-9黏蛋白类黏蛋白类：如CA15-3糖蛋白类糖蛋白类：如CA125，SCC(鳞状细胞癌抗原, 糖
5、蛋白)激素类：激素类：如proGRP （胃泌素释放肽前体）酶类：酶类：如NSE（神经元特异性烯醇化酶）蛋白类蛋白类：如CYFRA21-1癌基因及其产物类：癌基因及其产物类：p53、C-myc、k-ras等肿瘤标志物的特点理想的肿瘤标志物特点准确性好，肿瘤准确性好，肿瘤诊断应达到诊断应达到100%准确。准确。血清中浓度与瘤血清中浓度与瘤体大小、临床分体大小、临床分期有相关性，可期有相关性，可用以判断预后。用以判断预后。测定方法精密度测定方法精密度好、操作简便，好、操作简便，试剂盒价廉。试剂盒价廉。能反应肿瘤的动能反应肿瘤的动态变化，检测治态变化，检测治疗效果、复发和疗效果、复发和转移。转移。有器
6、官特异性，有器官特异性，能对肿瘤进行定能对肿瘤进行定位。位。敏感性高，能早敏感性高，能早期预测出所有肿期预测出所有肿瘤患者。瘤患者。Great sensitivityAccuracySpecificityOutcome and treatmentPrognosisSimple, cheap convenient生物标记物的检测方法(Biomarker for Screening methods)血清学水平的检测-通过采集血液标本完成（常用）组织学水平的检测-通过病理组织切片完成（常用）Detection of biomarker定性 (Qualitative) 生物标记物的存在与疾病之间的关系
7、 (a link between exist of a marker and disease)定量 (Quantitative) 生物标记物的定量与疾病之间的关系 (a link between quantity of the marker and disease)生物标记物的检测方法(Biomarker for Screening methods)流式细胞术检测-通过采集人体组织细胞完成PCR方法检测-体外DNA扩增技术生物芯片检测-基因芯片、组织芯片、蛋白芯片电镜检测乳腺癌Breast cancerBreast cancerThe morbidity and mortality of br
8、east cancer are global problemscost for treatment$1216/per caseaboutwill be diagnosed with breast cancer in 2015, anddie from breast cancer in our country.About 1 in 8-10 women in Chinawill get breast cancer in China It is estimated that of people will survive or more years afterbeing diagnosed with
9、 breast cancer.5Current situation of breast cancer in ChinaCurrent situation of breast cancer in ChinaMetastasis is responsible for up toof deaths associated with solid tumors乳腺的解剖与组织学结构脂肪组织（纤维组织）上皮组织（小叶、导管）间质组织（脂肪、纤维组织）。脂肪分隔为15-20个乳腺叶 小乳管（导管）10-100个腺泡腺上皮细胞肌上皮细胞腺腔乳腺癌的病理学分型乳腺导管癌乳腺导管癌：是最常见的类型。癌细胞局限于导管
10、内，未突破管壁基底膜。导管内的癌细胞可排列呈实性、筛状、低乳头状或管状，不再分亚型。浸润性导管癌浸润性导管癌：亦是最常见的形式，根据美国癌症协会，是诊断时癌症已经超越了管道蔓延到周围的墙壁结构，甚至超出了乳腺导管，扩张成为转移性癌。另外还有一些比较少见的浸润性导管癌特殊类型如乳腺癌管状癌，黏液腺癌，乳头状癌，乳腺髓样癌，筛状乳房癌，乳房癌化生和混合癌等。小叶癌小叶癌：小叶癌发生于小叶内，癌细胞未突破末梢乳管或腺泡基底膜的小叶癌，小叶增大，管、泡增多，明显变粗，充满无极性的癌细胞。管、泡腔及肌上皮细胞消失，癌细胞体积稍大，形状大小较一致，胞浆较丰富，通常被称为小叶原位癌。其他罕见癌其他罕见癌。如
11、分泌型癌，富脂质癌，腺纤维瘤癌变及乳头状瘤病癌变、伴化生的癌。其中尤以腺纤维瘤癌变及乳头状瘤病癌变较为常见。腺纤维瘤癌变可表现为导管癌或小叶原位癌，亦可进一步发展成为浸润性癌。而乳头状瘤病癌变，则出现灶性癌组织，且两者在形态上有过渡性改变。癌变区常表现为导管内癌。乳腺癌的病理学分型广泛应用的与乳腺癌相关的MarkerMarkerProtein(sProtein(s) detected) detectedCA 15-3MUC1BR 27.29 (CA27.29)MUC1CEA (Carcinoembryonic antigen)CEACyfra21-1TPATPAtissue polypepti
12、de specific antigenFragment of cytokeratin 18HER-2 (the extracellular domain)Extracellular form of HER-2常用的检测方法： ELISA， 化学发光， RIA (Radioimmunoassay)原理：原理：ELISA的基础是抗原或抗体的固相化固相化及抗原或抗体的酶标记酶标记。结合在固相 载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留 其免疫学活性，又保留酶的活性。进行检测时，样品中的受检物质（抗原 或抗体）与固定的抗体或抗原结合。通过洗板除去非结合物，再加入酶标 记的抗原或抗
13、体，此时，能固定下来的酶量与样品中被检物质的量相关。 通过加入与酶反应的底物后显色，根据颜色的深浅可以判断样品中物质的 含量，进行定性或定量的分析。ELISAELISA的基本类型：的基本类型：1.双抗体夹心法测抗原2.竞争法测定抗原3.免疫抑制法测抗原4.间接法测抗体酶联免疫吸附测定（enzyme linked enzyme linked immunosorbentimmunosorbent assay, ELISA assay, ELISA）1.双抗体夹心法测抗原针对抗原分子上两个不同抗原决定簇抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体。适用于测定二价或二价以上的大分
14、子抗原，适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。2.竞争法测定抗原首先将特异性抗体包被于固相载体表面，经洗涤后分成两组：一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液，另一组只加酶标记抗原，经孵育洗涤后加底物显色，这两组底物降解量之差，即为所要测定的未知抗原的量。此方法测定的抗原只要有一个结合部位即可，对小分子抗原如激素和药物类的测定常用此法。优点：快。缺点：是需要较多量的酶标记抗原。4.间接法测抗体3.免疫抑制法测抗原被检标本对底物显色的抑制程度与标本中所含抗原的量成正比，二者之差即为预测抗原的量。是检测抗体最常用的方法，原理为利用酶标记的抗抗体
15、以检测已与固相结合的受检抗体。广泛应用的与乳腺癌相关的血清学标志物CA15-3CA15-3：基本概述：由基本概述：由MUC1基因编码的黏蛋白（mucins），是乳腺癌、肺癌的肿瘤标志物。类别：类别：糖类抗原（粘蛋白类） BR27.29，CA-549， MCA，CA-M26和CA-M29定位：定位：跨膜蛋白。检测方法：检测方法：放射免疫法(RIA) （66.7%），酶联免疫吸附法( ELISA) （25%），化学发光免疫法(CLIA) （47.17%）。正常值：正常值：女性血清CA15-3值平均为22.2216.31u/ml。CA15-3CA15-3：临床意义：临床意义：1. 是目前应用最广的血
16、清抗原。 2. 在乳腺癌早期诊断中没有太大意义 ，血清CA15-3 诊断乳腺癌 的敏感性仅为13 % 一27 % 。 3. 主要用于乳腺癌治疗中的监控, 有报道其诊断转移性乳腺癌的敏 感性达91 %监视肿瘤转移和复发中有较高的临床应用价值。 广泛应用的与乳腺癌相关的血清学标志物广泛应用的与乳腺癌相关的血清学标志物BR27.29 (CA27.29 )BR27.29 (CA27.29 )基本概述：基本概述：乳腺癌粘蛋白类的肿瘤标志物。使用一种以上的粘蛋白肿瘤标志物并不能提供更多的信息。来源：来源：MUC1类别：类别：糖类抗原临床意义：临床意义： FDA只批准了CA15-3和BR27.29用于乳腺癌
17、和乳腺癌转移病人的临床诊断。检测方法：检测方法： ELISA法检测。正常值：正常值：女性血清BR27.29的正常值平均为40U/ml（RIA）。CA125CA125基本概述：基本概述： CA125(基因为MUC16)，分子量 35 KDa mucin, 类别：类别：黏蛋白。临床意义：临床意义： CA125是一种卵巢相关抗原，可见于卵巢上皮癌、子宫内膜癌、乳腺癌等恶性肿瘤中。尽管在对乳腺癌的诊断敏感度不如卵巢癌，但同时与其他肿瘤标志物联合测定，能提高对乳腺癌的诊断准确率。 检测方法：检测方法： ELISA法检测和RIA 法。正常值：正常值： 35 U/ml 广泛应用的与乳腺癌相关的血清学标志物C
18、EA (CEA (CarcinoembryonicCarcinoembryonic antigen) antigen) 基本概述：基本概述：癌胚抗原是1965年Gold和Freedman首先从胎儿及结肠癌组织中发现的编码CEA的基因位于19号染色体。是一种分子量为22ku的多糖蛋白复合物，45为蛋白质。来源：来源：一般情况下，CEA是由胎儿胃肠道上皮组织、胰和肝的细胞所合成，通常在妊娠前6个月内CEA含量增高，出生后血清中含量已很低下。类别：类别：糖蛋白，作为抗原可引起患者的免疫反应。此种抗原称为癌胚抗原。临床意义：临床意义： 1. CEA经胃肠道代谢，健康成年人血清中CEA浓度小于2.5g/
19、L。肿瘤状态时的CEA则进入血和淋巴循环，引起血清CEA异常增高，使上述各种肿瘤患者的血清CEA均有增高。 2. 广谱性肿瘤标志物，反映多种肿瘤的存在，如对大肠癌、乳腺癌和肺癌的疗效判断、病情发展、监测和预后估计是一个较好的肿瘤标志物，但特异性不强，灵敏度不高，对肿瘤早期诊断作用不明显。 3. 癌胚抗原不是恶性肿瘤的特异性标志，吸烟、妊娠期和心血管疾病、糖尿病、非特异性结肠炎等疾病，癌胚抗原也会升高，所以在诊断上只有辅助价值。检测方法：检测方法： ELISA法检测和RIA 法。正常值：正常值： 5g/L。TPA (Tissue polypeptide antigen)TPA (Tissue p
20、olypeptide antigen)组织多肽抗原。组织多肽抗原。TPATPA被细胞角蛋白被细胞角蛋白8 8、1818和和1919的抗体所识别的抗体所识别基本概述与来源：基本概述与来源：组织多肽抗原(TPA)的分子量17-43KD，由B1、B2和C三个亚基组成，其活性主要在B1。组织多肽抗原是存在于胎盘和大部分肿瘤组织细胞膜和细胞质中的一种单链多肽。各种恶性肿瘤(卵巢癌、结肠癌、直肠癌、肝细胞癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、子宫内膜癌、睾丸肿瘤等)患者血清TPA的检出率可从20%至90%，有人认为高达80%-100%。类别：类别：分泌性多肽。临床意义与特点：临床意义与特点：1. 此标志物缺乏较高的特
21、异性。 2. TPA类的升高表明细胞处于增殖转化期，TPA更多地被看做 细胞增殖的标志。 3. 鉴别诊断胆管癌(TPA升高)和肝细胞癌(TPA不升高)。 4.和CEA以及糖蛋白类抗原结合判断膀胱癌、乳腺癌、直肠癌 、肺癌、卵巢癌有无转移。检测方法：检测方法：ELISA或RIA正常值：正常值： ELISA 120U/L； RIA参考值法为 50 % 和升幅 25 %可分别作为转移性乳腺癌缓解和进展的判定指标。 4.血清TPS 升高为监测标准较临床出现体征和X 线改变早1.5 个月。检测方法：检测方法：ELISAELISA正常值：正常值：30ng/ml，原发性支气管肺癌的可能性非常高。各类非小细胞
22、肺癌阳性检出率为70%85%。CYFRA21-1的血清浓度水平高低与肿瘤临床分期正相关，也可作为肺癌手术和放化疗后追踪早期复发的有效指标。 2. CYFRA21-1对各型肺癌诊断的敏感性依次为：鳞癌腺癌大细胞癌小细胞癌。 3. CYFRA21-1对其他肿瘤，如侵袭性膀胱癌、头颈部、乳腺、宫颈、消化道肿瘤均有一定的阳性率。 4.肺炎、肺结核、支气管炎、支气管哮喘、肺气肿等疾病CYFRA21-1有一定升高。良性肝病、肾衰竭可引起轻微升高，但很少超过10ng/ml。检测方法：检测方法：ELISA正常值：正常值：30ng/ml广泛应用的与乳腺癌相关的血清学标志物乳腺珠蛋白（乳腺珠蛋白（mammaglo
23、binmammaglobin, MG, MG）基本概述：基本概述：一种分泌性乳房特异性乳腺癌蛋白来源：来源：可特异性地表达于乳腺组织类别：类别：分泌性蛋白临床意义：临床意义： 1. MG 在正常、原发性乳腺癌和转移性乳腺癌患者3类人群血清的阳性率分别为4 % 、33% 和44 % , 乳腺良、恶性疾病中MG 的表达有显著差异，因此用于诊断乳腺癌。 2. MG mRNA 已成为判断乳腺癌淋巴结微转移、骨髓微转移和外周血乳腺癌细胞的新标志物。 3. 脑脊液中MG阳性表达是乳腺癌脑部转移的重要分子指标。 4. 乳腺癌患者外周血中检出MG被认为预后较差。检测方法：检测方法： ELISA 正常值：正常值
24、：7.18g/L广泛应用的与乳腺癌相关的血清学标志物广泛应用的与乳腺癌相关的血清学标志物HER-2HER-2基本概述：基本概述：人类表皮生长因子受体-2（HER2）,Neu, p185HER2 (erbB2)是表皮生长因子受体家族成员，属受体酪氨酸激酶。在此家族中，只有 Her-2没有已知的配体。其表达水平与乳腺癌细胞的生长密切相关.Diagnostic/prognostic applications.HER2-positive metastatic breast cancer have a more aggressive disease, greater likelihood of recu
25、rrence, poorer prognosis and decreased survival. HER-2HER-2类别：类别：跨膜的受体酪氨酸激酶家族分子临床意义：临床意义：对乳腺癌及胃癌的诊断、以及乳腺癌的治疗至关重要。检测方法：此分子部位不同检测方法各异检测方法：此分子部位不同检测方法各异广泛应用的与乳腺癌相关的血清学标志物检测部位：检测部位：HER2分子的细胞外段。参考值：参考值：15ng/ml。检测方法：检测方法：化学发光法。影响因素：影响因素：肝脏疾病会导致血清HER2升高。样本要求：样本要求：血清，2ml。临床意义：临床意义：1. 在37%的HER2组织阳性患者中血清检测为阳性
26、，即组织与血清阳性之间存在差异。而在转移患者中，89%的HER2组织阳性患者其血清检测也为阳性。原发性乳腺癌转移性乳腺癌3. 靶向治疗效果监测。2. 与其它肿瘤标志物联合应用监测肿瘤复发。血清HER2HER2检测推荐流程MarkerMarker检测方法检测方法癌基因C-erbB-2免疫组化（乳腺癌五项）免疫组化（乳腺癌五项）PCNA(增殖细胞核抗原)免疫组化（乳腺癌五项）免疫组化（乳腺癌五项）p53基因免疫组化（乳腺癌五项）免疫组化（乳腺癌五项）ER(雌激素受体)免疫组化（乳腺癌五项）免疫组化（乳腺癌五项）PR(孕激素受体)免疫组化（乳腺癌五项）免疫组化（乳腺癌五项）CD44免疫组化免疫组化E
27、-cad免疫组化免疫组化常用的乳腺癌病理组织检测 基本概述：基本概述：除了上述血清学检查，在临床上，手术切除后，需要对切除的组织作病理检查，为乳腺癌进行确诊。结果判断：结果判断：得出的结果用阳性(+、+、+、+)和阴性(-)表示。免疫组化在病理学中的应用肌上皮细胞腔上皮细胞腺腔基底膜乳腺基质VVim （波形蛋白）S-100 （神经组织标志）CD34 （血管源性肿瘤）SMA（平滑肌肌动蛋白）Actin（平滑肌标志）1. 确定细胞类型 2. 了解分化程度3. 发现微小转移灶4. 确定肿瘤分期5. 辅助疾病诊断和分类6. 辨认细胞产物7. 鉴定病变性质8. 探讨肿瘤起源或分化表型9. 指导治疗和预后
28、10. 寻找感染病因HER2基本概述：基本概述：人表皮生长因子受体-2（HER2）是迄今为止乳腺癌中研究较为透彻的基因之一。HER2基因的过表达不仅与肿瘤的发生发展相关外，还是一个重要的临床治疗监测及预后指标，并且是肿瘤靶向治疗药物选择的一个重要靶点。检测方法：免疫组织化学（检测方法：免疫组织化学（IHC）检测）检测HER2蛋白过度表达或应用荧光原位杂交方法蛋白过度表达或应用荧光原位杂交方法（fluorescence in situ hybridization，FISH）检测）检测HER2基因扩增的水平。基因扩增的水平。临床意义：临床意义：C-erB2癌基因：在正常乳腺组织呈低表达，在乳腺癌组
29、织中表达率可增高，其表达与乳腺癌分级、淋巴结转移和临床分期呈正相关，表达率越高，预后可能也越差。结果判读：结果判读：HER2HER2阴性：阴性： 指IHC 0或1+（任何比例的肿瘤细胞有微弱的、不完整的胞膜染色或无着色）或FISH中HER2/CEP171.8，或在无内对照探针的检测中平均每个细胞核内30%的浸润性癌细胞的胞膜呈现完整的强着色）或FISH结果显示HER2基因扩增（在未设内对照探针的检测中，平均每个细胞核内6个基因拷贝）或HER2/17号染色体（HER2/CEP17）信号比2.2。Her-2/neuHer-2/neu检测结果判读HER2HER2可疑：可疑：2+为可疑IHC结果：指1
30、0% 30%的肿瘤细胞呈现弱至中度完整的胞膜染色。少数情况下30%的肿瘤细胞呈现强的、完整的胞膜着色，也被划归为可疑结果。可疑的FISH结果是指HER2/CEP17在1.82.2，或在无内对照探针的检测中平均每个细胞核内基因拷贝数在4.06.0。 Control slidesControl slidesBreast tissueBreast tissue+2+2+3+3Control slidesControl slidesBreast tissueBreast tissue乳腺癌病理组织检测 Ki67Ki67基本概述：基本概述：Ki67抗原是1983年Gerdes等人首次发现的一种增殖细胞相
31、关的核抗原，其功能与有丝分裂密切相关,在细胞增殖中是不可缺少 ,但其确切机制尚不清楚。来源：来源：增殖细胞表达类别：类别：细胞核蛋白临床意义：临床意义： 1. ki67的表达与很多肿瘤疾病的发生发展密切相关,如乳腺癌、卵巢癌、淋巴癌等。 2. 利用ki67指数,反映正常和病变组织或细胞的增殖活性,对良、恶性肿瘤进行鉴别诊断,帮助恶性肿瘤的早期诊断、治疗方法选择和疗效的评估。 3. ki6714%是Luminal A 型与Luminal B 型的分界点。检测方法：检测方法：免疫组织化学染色正常值：正常值：14%为高表达，14%为低表达PCNAPCNA基本概述：基本概述：增殖细胞核抗原（Proli
32、ferating Cell Nuclear Antigen简称PCNA）由Miyachi等于1978年在SLE（系统性红斑狼疮）患者的血清中首次发现并命名，因其内而得名。来源：来源：只存在于正常增殖细胞及肿瘤细胞类别：类别：细胞核蛋白临床意义：临床意义： 1. PCNA与细胞DNA合成关系密切，在细胞增殖的启动上起重要作用。 2.是反映细胞增殖状态的良好指标。 3. PCNA(增殖细胞核抗原)、突变型P53基因这两项指标的阳性对于乳腺癌患者就不那么好了，它们的阳性加号越多，说明肿瘤的侵袭性高，容易复发、转移、预后差。检测方法：检测方法：免疫组织化学染色正常值：正常值：依照免疫组化判定标准乳腺癌
33、病理组织检测 P53P53基本概述：基本概述：p53基因，人体抑癌基因。该基因编码一种分子量为53kDa的蛋白质，命名为P53。来源：来源：类别：类别：细胞核蛋白临床意义：临床意义：1. p53基因的失活对肿瘤形成起重要作用。 2. p53基因与人类50%的肿瘤有关，有肝癌、乳腺癌、膀胱癌、胃癌、结肠癌、前列腺癌、软组织肉瘤、卵巢癌、脑瘤、淋巴细胞肿瘤、食道癌、肺癌、成骨 肉瘤等。 3. 主要为p53基因的突变。检测方法：检测方法：免疫组织化学染色（野生型抗体或突变型抗体）正常值：正常值：依照免疫组化判定标准乳腺癌病理组织检测 ERER ( (雌激素受体雌激素受体) )基本概述：基本概述：激素
34、受体是一种蛋白质分子，它们较多地存在于靶器官的细胞内，可与激素发生特异性结合而形成激素-受体复合物，使激素发挥其生物学效应。来源：来源：正常乳腺上皮细胞内存在ER类别：类别：细胞膜、核蛋白临床意义：临床意义：1. 当细胞发生癌变时， ER和PR出现部分和全部缺失。2. 如果细胞仍保留ER和（或）PR，则该乳腺癌细胞的生长和增殖仍然受内分泌的调控，成为激素依赖性乳腺癌；对内分泌治疗有效率高。3. 如果ER和（或）PR缺失，则该乳腺癌细胞的生长和增殖不再受内分泌的调控，成为非激素依赖性乳腺癌，对内分泌治疗的效果不好。检测方法：检测方法：免疫组织化学染色正常值：正常值：依照免疫组化判定标准乳腺癌病理
35、组织检测 PR(PR(孕激素受体孕激素受体) )基本概述：基本概述：雌激素受体蛋白一旦形成即被激活而移入细胞核内，经过基因转录而导致孕激素受体合成，因此，孕激素受体阳性才是雌激素受体具有生物活性的指标。 来源：来源：正常乳腺上皮细胞内存在PR类别：类别：细胞核蛋白临床意义：临床意义：1. 1. 如果肿瘤细胞保留雌激素受体和孕激素受体，说明肿瘤细胞的功能仍接受体内内分泌的调节，称为激素依赖性细胞； 2. 雌激素受体和孕激素受体阴性，这种肿瘤不受体内激素的调控，称为非激素依赖性细胞。 3. 唯有激素依赖性乳腺恶性肿瘤才能应用内分泌治疗而使患者获益。 4. ER、PR检测结果阳性与预后有一定的关系，
36、提示患者可能对应用内分泌治疗敏感，具有指导和评估预后及临床治疗的双重作用。检测方法：检测方法：免疫组织化学染色正常值：正常值：依照免疫组化判定标准乳腺癌病理组织检测 乳腺癌的分子分型Her-2Her-2执行标准：对有关执行标准：对有关“阳性阳性”、“可疑可疑”和和“阴性阴性”结果进行了定义。结果进行了定义。 “阳性阳性”定义为定义为3+3+表达（表达（IHCIHC），）， “可疑可疑”定义为定义为2+2+表达（表达（IHCIHC），），“阴性阴性”定义为定义为0 0或或1+1+表达（表达（IHCIHC）Her-2Her-2阳性，赫赛丁靶向治疗阳性，赫赛丁靶向治疗阿霉素蒽环类药物（阿霉素蒽环类药
37、物（TOPTOP抑制剂）毒效性基因表达，对部分优效减毒的病抑制剂）毒效性基因表达，对部分优效减毒的病人分层筛选。人分层筛选。铂类、紫杉类、铂类、紫杉类、5-Fu5-Fu类相关基因实时定量表达、帮助选择化疗方案。类相关基因实时定量表达、帮助选择化疗方案。乳腺癌化疗评价指标 乳腺癌总结biomarkersbiomarkers乳腺癌术后病情的监测乳腺癌的免疫组化检查CA15-3+CEA+Cyfra21-1ER、PR、P53、Her-2、CD44、E-cad、PGP、MDR、TOPO-2等CD44CD44基本概述：基本概述：人类CD44基因位于11号染色体短臂，全长约50kb，共由20个高度保守的外显
38、子组成，每个外显子长度70-210bp不等，中间由长短不一的内含子分隔。 按照转录方式不同可分为组成型外显子（C）和变异型拼接外显子（V）两大类。来源：来源：增殖细胞表达类别：类别：细胞膜蛋白乳腺癌病理组织检测 CD44CD44临床意义：临床意义： 1. 细胞的生长与生存。 2. 细胞的迁移。 3. 细胞与细胞的粘附。 4. 角细胞的分化。检测方法：检测方法：免疫组织化学染色正常值：正常值：阳性判断标准乳腺癌病理组织检测 乳腺癌病理组织检测 TOPO-2TOPO-2基本概述：基本概述：拓扑异构酶（topoisomerase , TOP）是DNA复制过程中的关键酶, 在DNA的合成、转录、核分裂
39、过程以及在形成正确的染色体结构、染色体分离、浓缩中发挥重要作用。来源：来源：核蛋白类别：类别：酶临床意义：临床意义： 1.研究显示TOP是蒽环类药物的潜在靶点, 其表达降低将严重影响肿瘤化疗的敏感性 , 其可能成为临床预后的重要预测指标。检测方法：检测方法：免疫组织化学染色正常值：正常值：依照免疫组化判定标准E-E-cadherincadherin基本概述：基本概述：是一类建立细胞间紧密连接、维持细胞极性、保持组织结构完整性的重要分子。 类别：类别：钙依赖性跨膜糖蛋白。临床意义：临床意义：1. 1. E-ca主要介导同型细胞的粘附能力。 2. E-ca表达下降或功能缺失使癌细胞与邻近的粘附能力
40、下降，从而增加了肿瘤细胞的浸润、与转移能力，可作为乳腺癌的预后判断指标。检测方法：检测方法：免疫组织化学染色正常值：正常值：根据免疫组化判定标准乳腺癌病理组织检测 PgpPgp基本概述：基本概述：是最早发现和克隆的耐药蛋白, 由mdr1基因编码, 1280个氨基酸残基、分子量约为170KD的糖蛋白。 类别：类别：属于ABC超家族膜转运蛋白。临床意义：临床意义： 1. 1. 作为一种药物排出泵，Pgp将进入细胞内的化疗药物泵出细胞。 2. MDR1/ Pgp介导的耐药机制在乳腺癌中占有重要地位 3. Pgp高表达与化疗反应差均密切相关。 4. 但其能否有效预测乳腺癌的预后尚不清楚。检测方法：检测
41、方法：免疫组织化学染色正常值：正常值：根据免疫组化判定标准乳腺癌病理组织检测 肺癌肺癌概况发病情况：发病情况：男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位，女性发病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌的病因肺癌的病因：1.1.吸烟：吸烟：吸烟是肺癌的最重要的高危因素，烟草中有超过3000种化学物质，如：苯并芘、亚硝胺等均有很强的致癌活性，这些化合物通过多种机制导致支气管上皮细胞DNA损伤，使得癌基因（如Ras基因）激活和抑癌基因（如p53，FHIT基因等）失活，进而引起细胞的转化，最终癌变。2.2.职业和环境接触：职业和环境接触：10%的肺癌患者有环境和职业接触史。现已证明以下9种职业环境致癌物
42、增加肺癌的发生率：铝制品的副产品、砷、石棉、bis-chloromethylether、铬化合物、焦炭炉、芥子气、含镍的杂质、氯乙烯。长期接触铍、镉、硅、福尔马林等物质也会增加肺癌的发病率，空气污染，特别是工业废气均能引发肺癌。3.3.电离辐射：电离辐射：肺脏是对放射线较为敏感的器官，以鳞癌为主。日本原子弹爆炸幸存者中患肺癌者显著增加。4.4.既往肺部慢性感染：既往肺部慢性感染：如肺结核、支气管扩张症等患者，支气管上皮在慢性感染过程中可能化生为鳞状上皮致使癌变，但较为少见。5.5.遗传等因素：遗传等因素：家族聚集、遗传易感性以及免疫功能降低，代谢、内分泌功能失调等也可能在肺癌的发生中起重要作用
43、。6.6.大气污染：大气污染：发达国家肺癌的发病率高。大气污染与吸烟对肺癌的发病率可能互相促进，起协同作用。肺癌诊断方法胸部X/CT/MRI支气管镜、胸腔镜、纵膈镜（EBUS/TBNA）经胸壁细针穿刺活检PET/ECT即SPECT (发射型计算机断层显像)痰脱落细胞学检查、其它细胞或病理检查开胸肺活检免疫及血清学检查：肿瘤标志物肺癌常用标志物肿瘤标志生物学特性分子量临床应用NSE烯醇化酶的二聚体87KD小细胞肺癌、神经母细胞瘤、神经内分泌肿瘤CEA糖蛋白180KD肺癌、胃肠肿瘤及其他腺癌CYFRA21-1细胞角蛋白片段1930KD肺癌和膀胱癌SCC肿瘤抗原T4的糖蛋白片段48KD鳞癌CA125
44、糖蛋白200KD肺癌、卵巢癌ProGRP胃泌素释放肽前体30KD小细胞肺癌常用的肺癌肿瘤标志物非小细胞肺癌非小细胞肺癌（主要是鳞状细胞癌、腺癌及腺鳞混合性癌等）的相关标志物主要有：CEA、Cyfra21-1、 CA125、 CA153、TPA及SCC-Ag（鳞状细胞癌抗）。 小细胞癌小细胞癌（即燕麦细胞癌,较为多见，而且恶性程度高，预后较差）相关标志物主要有：NSE、ProGRP、CA125、Cyfra21-1、CA153。 CEA（阳性标准5ng/ml）以肺腺癌水平最高，肺腺癌CEA阳性率为54.2%83.3%。在肺腺癌组中血清CEA水平与病期呈正相关。CEA是一种广谱的肿瘤标志物，虽然不能
45、作为诊断肺癌的特异指标，但在肺癌的鉴别诊断方面仍有重要临床价值。 (2) Cyfra21-1( 阳性标准3.3ng/ml ) 是一种酸性多肽，水溶性细胞角蛋白，主要分布在肺泡上皮。当这些细胞发生癌变时，可释放Cyfra211进入血液循环，导致Cyfra211的血清水平升高。肺癌中晚期患者血清中Cyfra211含量明显升高。Cyfra211是鳞状上皮细胞癌目前首选的肿瘤标志物，灵敏度可达60，特异性可达95。它对非小细胞肺癌的早期诊断、疗效监测和预后判断均有重要意义。肺癌根治术后Cyfra21-1的浓度显著下降，若持续升高，应考虑肿瘤进展和复发。 (3) NSE 是检测小细胞癌的首选标志物，60
46、-81%的小细胞癌患者NSE升高，NSE也可作为神经母细胞癌的首选标志物，NSE（神经元特异性烯醇化酶)对该病的早期诊断有较高的临床应用价值,健康成人血清NSE均值为5.2ng/ml,（正常值20ng/ml）。当组织发生癌变时，细胞内的NSE释放进入血液，导致此酶在血清中含量增高，一般用于小细胞肺癌与非小细胞肺癌的鉴别诊断。 （4） CA125 是由免疫卵巢癌细胞株产生的单克隆抗体OC125所识别的抗原决定簇，由于与免疫肺腺癌细胞识别的分子OC125相同，因此CA125是卵巢癌和肺癌细胞共同具有的抗原。肺癌血清CA125水平（诊断肺癌临界值CA12520u/ml）显著高于肺良性疾病组及健康对照
47、组。肺腺癌CA125水平明显高于肺鳞癌与小细胞肺癌。对肺癌的诊断、鉴别诊断具有重要意义。 （5）CA153 存在于多种腺癌内，如乳腺癌、肺腺癌、卵巢癌及胰腺癌。CA153对肺癌诊断的灵敏度低下，但是，由于血清CA153测定对肺良性疾病的假阴性率低，血清CA153异常升高，则可基本上判断为肺癌，特异性高。 （6） SCC-Ag ( 阳性标准1.5ng/ml )是由非小细胞肺癌特别是肺鳞癌所分泌的一种糖蛋白。但其灵敏度较低，可作为肺癌的辅助诊断指标。常用的肺癌肿瘤标志物（7）TPA (组织多肽抗原 1 ng/ml）用于肺鳞癌、膀胱癌、宫颈癌等鳞状上皮癌检测），多见于肺鳞癌、膀胱癌、宫颈癌等鳞状上皮
48、癌。良性疾病如急性肝炎、胰腺炎、肺炎、妊娠妇女最后3个月TPA都可升高。恶性肿瘤血清中的TPA水平可显著升高，术前增高非常显著者提示预后不良。经治疗好转后再次增高者常提示复发的可能。在肺鳞癌的诊断和预后判断方面TPA是目前最好的一项肿瘤标志物。 （8）ProGRP: 胃泌素释放肽前体(ProGRP)是近年来新发现的一种SCLC肿瘤标志物，它不仅可用于SCLC的早期诊断，还有助于判断治疗效果及早期发现肿瘤复发。 ProGRP作为脑肠肽一种的促胃液素释放肽(GRP)的前体，存在于人胎儿肺的神经内分泌细胞内。 肺腺癌患者CEA水平显著高于鳞癌及小细胞肺癌患者，小细胞肺癌患者NSE水平显著高于腺癌及鳞
49、癌患者，鳞癌患者Cyfra21-1、 SCC-Ag水平显著高于腺癌及小细胞癌患者，肺腺癌血清CA125、 CA153水平显著高于肺鳞癌与小细胞肺癌。6种标志物与3种类型肺癌有一定的相关性。 研究表明肺癌、期与A 期之间有统计学差异，敏感度也增加，提示分期晚，肿瘤标志物增高。而且这几种标志物与化疗有效有关，化疗有效者则明显降低。如持续增高的患者生存时间短，预后差。常用的肺癌肿瘤标志物肺癌常用肿瘤标志物 NSENSE肺癌常用肿瘤标志物 SCCSCC肺癌常用肿瘤标志物 ProGRPProGRP: : 胃泌素释放肽前体肺癌常用肿瘤标志物 糖类抗原CA72-4CA72-4Cyfra21-1Cyfra21
50、-1与肺癌鳞癌相关性最高Cyfra21-1Cyfra21-1与肺癌的TNMTNM分期ProGRPProGRP与SCLCSCLCCyfra21-1Cyfra21-1与肺癌手术疗效手术完全切除的患者，CYFRA21-1迅速下降至正常水平，且维持在一个较低的水平（虚线）术后出现CYFRA21-1水平的持续升高，则提示肿瘤的复发，并且这种改变在临床症状出现数月前Yeh JJ. Lung. 2002；180（5）：273-9NSENSE与肺癌患者中位生存时间治疗前SCLC患者的NSE血清水平反映肿瘤负荷的大小治疗前血清NSE水平特别高的患者预后一般不佳EGTM/NACBEGTM/NACB指南肺癌标志物前
