1、放射免疫分析放射免疫分析2n掌握放射免疫分析的基本原理n了解放射免疫分析实验室配置n掌握质量控制目的与要求3n必须掌握放免分析的基本原理一一. 基本原理基本原理4n基本试剂基本试剂抗体抗体 (高亲和力、高特异性、高滴度)标记抗原标记抗原(比活性和放化纯度、抗原原特性)标准品标准品分离试剂分离试剂(双抗体,聚乙三醇,葡萄球菌A蛋白等)5n基本步骤基本步骤 u 加样加样u 孵育孵育u 分离分离u 测放射性测放射性u 数据处理数据处理6n剂量反应曲线剂量反应曲线认识标准曲线的形态结合率(%)Ag剂量7掌握标准曲线的斜率对测定的影响 标准曲线的斜率对放射免疫分析方法的灵敏度和精密度均有影响。 影响标准
2、曲线斜率的因素: 1、亲和常数K 2、标记抗原和标准抗原的用量 3、特异性抗体的用量掌握Bo(总结合)、T(总管)、NSB的概 念8二二. .非放射性标记技术与自动化非放射性标记技术与自动化n酶联免疫吸附试验(原理及优缺点)n化学发光免疫分析(原理及优缺点)n电化学发光免疫分析(原理及优缺点)n时间分辨荧光免疫分析(原理及优缺点)9ADVIA Centaur以吖啶酯为发光物质,在碱性条件下遇到过氧化物便发生单光子发射,缺点是只能一次短时间内发光.10BECKMAN COULTER11Elecys 20210以三丙胺为发光物质,三价钌化合物为底物,在电极作用下可多次反复发光,检测灵敏度极高. 12IMMULITE13IMMULITE 100014AUTO DELFIA以镧系元素为标记物,在激发光的作用下,发光长寿命的特异荧光,检测灵敏度可达10-18mol/L,可实现双标或多标.