1、第三章第三章 制药卫生制药卫生第一节第一节 概述概述 一药剂卫生的重要性一药剂卫生的重要性 防止微生物污染是保证药剂安全可靠，质量防止微生物污染是保证药剂安全可靠，质量稳定，便于长期保存的重要环节。稳定，便于长期保存的重要环节。二药剂质量变化的原因二药剂质量变化的原因1 1、自身物理化学性质不稳定。外观、色泽改变。、自身物理化学性质不稳定。外观、色泽改变。2 2、微生物污染，变质、疗效降低。、微生物污染，变质、疗效降低。三三.药剂被微生物污染的后果药剂被微生物污染的后果1.1.物理性状改变物理性状改变2.2.有效成分破坏：有效成分破坏：如生物碱提供某些微生物的氮源与碳源。如生物碱提供某些微生物
2、的氮源与碳源。3.3.产生有害毒素。产生有害毒素。如黄曲霉素，油发酵产生丙烯醛。如黄曲霉素，油发酵产生丙烯醛。4.4.药源性继发感染药源性继发感染5.5.致敏：热原（脂多糖）致敏：热原（脂多糖）6.6.产生微粒（直径产生微粒（直径50um50um）物质，）物质，致脉管炎，血栓、肉芽肿。致脉管炎，血栓、肉芽肿。四、微生物限度标准药品卫生标准：1977，1986，1989（一）致病菌 口服药品每g或每ml不得检出大肠杆菌，含动物药及脏器的药品同时不得检出沙门菌，外用每g或每ml不得检出绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌；阴道、创伤、溃疡用制剂同时不得检出破伤风杆菌。一次为准，检出以不合格处理（二）活螨 不得
3、检出 1 1、要求、要求无菌或标示无菌的无菌或标示无菌的制剂：制剂：应符合应符合无菌无菌检查规定检查规定2 2口服口服制剂：制剂：1 1）不含药材原粉的制剂：）不含药材原粉的制剂：细菌数：细菌数：10001000个个/g/g，100100个个/ml/ml霉菌和酵母菌数：霉菌和酵母菌数：100 100个个/ml/ml或或g g大肠埃希菌：每大肠埃希菌：每1g1g或或1ml1ml不得检出不得检出(各口服制各口服制剂均同）剂均同）2 2）含药材原粉的制剂）含药材原粉的制剂细菌数：细菌数：10 00010 000个个/g/g，50000个个/ml/ml 丸剂丸剂 30 0000 000个个/g/g霉菌
4、和酵母菌数：霉菌和酵母菌数：100100个个/ml/ml或或g g大肠埃希菌：每大肠埃希菌：每1g1g或或1ml1ml不得检出不得检出大肠菌群：大肠菌群：100100个个/g/g，10 0个个/ml/ml3 3）含豆豉、）含豆豉、神曲等发酵成分的制剂：神曲等发酵成分的制剂：细菌数：细菌数：100 000100 000个个/g/g，10001000个个/ml/ml霉菌和酵母菌数：霉菌和酵母菌数：500500个个/g/g，100100个个/ml/ml大肠埃希菌：每大肠埃希菌：每1g1g或或1ml1ml不得检出不得检出大肠菌群：大肠菌群：100100个个/g/g，10 0个个/ml/ml 3 3、局
5、部给药制剂、局部给药制剂1 1）用于手术、烧伤或严重创伤的：）用于手术、烧伤或严重创伤的：应符合应符合无菌无菌检查规定检查规定2 2）用于表皮或粘膜不完整、含药材原粉的：）用于表皮或粘膜不完整、含药材原粉的：细菌数：细菌数：10001000个个/g/g或或10cm10cm2 2，10000个个/ml/ml 霉菌和酵母菌数：霉菌和酵母菌数：100100个个/g/g、mlml或或10cm10cm2 2 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：不得检出不得检出/g/g、mlml或或10cm10cm2 2(各外用制剂均同）各外用制剂均同）3 3）用于表皮或粘膜完整、含药材原粉的：）
6、用于表皮或粘膜完整、含药材原粉的：细菌数：细菌数：10 00010 000个个/g/g或或10cm10cm2 2，10000个个/ml/ml霉菌和酵母菌数：霉菌和酵母菌数：100100个个/g/g、mlml或或10cm10cm2 2金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：不得检出不得检出/g/g、mlml或或10cm10cm2 24 4）、眼部给药制剂）、眼部给药制剂细菌数：细菌数：1010个个/g/g或或mlml霉菌和酵母菌数：霉菌和酵母菌数：每每1g1g或或1ml1ml不得检出不得检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌：金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌：每
7、每1g1g或或1ml1ml不得检出不得检出5 5）、耳、鼻及呼吸道给药制剂）、耳、鼻及呼吸道给药制剂细菌数：细菌数：100100个个/g/g、mlml或或10cm10cm2 2霉菌和酵母菌数：霉菌和酵母菌数：1010个个/g/g、mlml或或10cm10cm2 2金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌:不得检出不得检出/g/g、mlml或或10cm10cm2 2大肠埃希菌：鼻及呼吸道给药制剂大肠埃希菌：鼻及呼吸道给药制剂 不得检出不得检出/g/g、mlml或或10cm10cm2 26 6）、阴道、尿道给药制剂）、阴道、尿道给药制剂细菌数：细菌数：100100个个/g/g或或m
8、lml霉菌和酵母菌数：霉菌和酵母菌数：1010个个/g/g或或mlml金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、梭菌梭菌：不得检出不得检出/g/g或或mlml7 7）、直肠给药制剂）、直肠给药制剂细菌数：细菌数：10001000个个/g/g，100100个个/ml/ml霉菌和酵母菌数：霉菌和酵母菌数：100100个个/g/g或或mlml金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌大肠杆菌：不得检出不得检出/g/g或或mlml 8 8）、其它局部给药制剂）、其它局部给药制剂细菌数：细菌数：100100个个/g/g、mlml或或cmcm2 2霉菌和酵母菌数
9、：霉菌和酵母菌数：100100个个/g/g、mlml或或10cm10cm2 2 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：不得检出不得检出/g/g、mlml或或10cm10cm2 24 4、含动物组织及动物类原药材粉（蜂蜜、含动物组织及动物类原药材粉（蜂蜜、王浆、动物角、阿胶除外）的口服制剂：王浆、动物角、阿胶除外）的口服制剂：每每10g10g或或10ml10ml还不得检出还不得检出沙门氏菌沙门氏菌5 5、有兼用途径制剂：应符合合途径的标准、有兼用途径制剂：应符合合途径的标准6 6、霉变、长螨者：、霉变、长螨者：以不合格论以不合格论。7 7、中药提取物及辅料：参照相应制剂的限
10、、中药提取物及辅料：参照相应制剂的限度标准度标准二药物被微生物污染的途径与预防措施二药物被微生物污染的途径与预防措施1.1.药物原料：药物原料：中药材，带有泥土和微生物。中药材，带有泥土和微生物。并含有营养成分并含有营养成分,使微生物生长和繁殖。应使微生物生长和繁殖。应对原料作前期处理，减少或杀灭微生物。对原料作前期处理，减少或杀灭微生物。2.2.辅助材料辅助材料：制药用水（有相应的质量要：制药用水（有相应的质量要求），常用的赋形剂和附加剂带有微生求），常用的赋形剂和附加剂带有微生物应严格选择与消毒物应严格选择与消毒 3.3.制药器械制药器械：制药设备和用具，用后应尽快：制药设备和用具，用后应
11、尽快地清洗干燥，必要时消毒灭菌。地清洗干燥，必要时消毒灭菌。4.4.环境条件环境条件：不洁空气中微生物数量多。车：不洁空气中微生物数量多。车间内应达到规定洁净程度。间内应达到规定洁净程度。5.5.操作人员操作人员 人体外表，穿戴的衣、帽带有人体外表，穿戴的衣、帽带有微生物。微生物。必须对工作人员的个人卫生作出具体规必须对工作人员的个人卫生作出具体规定。定。6 6包装材料包装材料 应采用适宜方法进行消毒，以应采用适宜方法进行消毒，以杜绝微生物的污染。杜绝微生物的污染。第二节第二节 制药环境的卫生管理制药环境的卫生管理一、中药制药环境的基本要求：一、中药制药环境的基本要求：P34P34（一）环境（
12、一）环境（二）布局（二）布局（三）厂房设计与设施装备要求（三）厂房设计与设施装备要求二空气洁净技术与应用二空气洁净技术与应用 1.1.空气洁净技术含义空气洁净技术含义 系指创造洁净的空气环境系指创造洁净的空气环境(洁净空气室、洁净空气室、洁净工作台洁净工作台)的各种技术总称。的各种技术总称。两类目的：人类保健；工业生产两类目的：人类保健；工业生产 中药制药生产场所空气洁净技术的目的中药制药生产场所空气洁净技术的目的是控制生产场所中空气的是控制生产场所中空气的尘粒浓度和细菌尘粒浓度和细菌污染污染，以及适当，以及适当的温度、湿度的温度、湿度，以防止对以防止对产品质量的影响；产品质量的影响；概念：以
13、紊流气流运动形式，使用高度概念：以紊流气流运动形式，使用高度净化空气将操作室内空气产生的尘埃净化空气将操作室内空气产生的尘埃稀释。稀释。1 1、原理：鼓风机开动、原理：鼓风机开动 空气进入送风室空气进入送风室油油浸玻璃丝滤过器浸玻璃丝滤过器(或聚胺酯泡沫塑料或聚胺酯泡沫塑料,除尘除尘埃和细菌埃和细菌)洗涤降温室（喷雾管喷水雾洗洗涤降温室（喷雾管喷水雾洗涤除尘埃和细菌，冷却器降温，水气凝结除涤除尘埃和细菌，冷却器降温，水气凝结除去，并可调节湿度）去，并可调节湿度）挡水板除雾挡水板除雾加热器加热器调温调温油浸玻璃丝滤器油浸玻璃丝滤器(或泡沫塑料或泡沫塑料)鼓鼓风机送入室内风机送入室内室内空气输回送
14、风室循环。室内空气输回送风室循环。操作室内压力应稍大于一个大气压，相操作室内压力应稍大于一个大气压，相对湿度为对湿度为40406060。2 2、特点：、特点：可除去大部分尘埃。可除去大部分尘埃。气流属紊流，呈错乱状态，可使室内静止气流属紊流，呈错乱状态，可使室内静止的微粒混合聚集或重新飞扬，室内部分空的微粒混合聚集或重新飞扬，室内部分空气停滞。气停滞。只能用纯净空气稀释粒子浓度，不能全部只能用纯净空气稀释粒子浓度，不能全部除净。除净。设备费用低，达到的洁净级别较低设备费用低，达到的洁净级别较低 （万或万级）万或万级）（二）层流洁净空气技术 广泛采用。1、概念：气流运动形式是层流，用高度净化的气
15、流作载体，将操作室内空气产生的尘埃排出2、工作原理：水平层流洁净室（层流净化工作台基本相同）：由若干台净化单元组成一面墙体，每台净化单元由送风机、静压箱体、高效空气滤过器组成。净化单元机组吸入部分新鲜空气与洁净室内空气高效空气滤过器洁净室向对面排风墙流去部分由余压阀排出室外，大部分经循环使用。水平层流（水平层流（horizontal laminar flowhorizontal laminar flow）以高效过滤器为送风口满布一侧壁面，对以高效过滤器为送风口满布一侧壁面，对应壁面为回风墙，气流以水平方向流动。应壁面为回风墙，气流以水平方向流动。可达级可达级为克服尘粒沉降，端面风速不小于为克服
16、尘粒沉降，端面风速不小于0.35m/s0.35m/s。水平层流的造价比垂直层流低水平层流的造价比垂直层流低。垂直层流（垂直层流（vertical laminar flowvertical laminar flow）以）以高效过滤器为送风口布满顶棚，地板全部做高效过滤器为送风口布满顶棚，地板全部做成回风口，使气流自上而下地流动。成回风口，使气流自上而下地流动。可达级可达级实现层流必须有足够的气速，以克服空气实现层流必须有足够的气速，以克服空气对流。垂直层流的端面风速在对流。垂直层流的端面风速在0.25 m/s0.25 m/s以上，以上，换气次数载换气次数载400400次次/h/h左右，造价以及运
17、转费左右，造价以及运转费用很高。用很高。3 3、层流洁净空气技术特点：、层流洁净空气技术特点：a.a.层流是粒子流体连续稳定的运动形式，层流是粒子流体连续稳定的运动形式，粒子不易聚结，流速高，粒子不沉积；粒子不易聚结，流速高，粒子不沉积；b.b.室内空气不停滞；室内空气不停滞；c.c.空气经净化，无尘埃，无菌；空气经净化，无尘埃，无菌；d.d.新脱落的微粒经气流很快带走有自行新脱落的微粒经气流很快带走有自行除尘能力；除尘能力；e.e.可避免粉末交叉污染。可避免粉末交叉污染。因此，采用层流洁净空气技术可使洁因此，采用层流洁净空气技术可使洁净室内达到很高的洁净度。净室内达到很高的洁净度。三、洁净室
18、的卫生与管理三、洁净室的卫生与管理 制剂生产厂房的内部布置必须根据药品的种制剂生产厂房的内部布置必须根据药品的种类、剂型以及生产工序、生产要求等合理划类、剂型以及生产工序、生产要求等合理划分区域，即一般生产区、控制区、洁净区、分区域，即一般生产区、控制区、洁净区、无菌区。无菌区。控制区控制区：要求达到：要求达到1010万级，人员均须更衣后经万级，人员均须更衣后经缓冲室才能进入。缓冲室才能进入。洁净区洁净区：要求达到：要求达到1 1万级或万级或100100级。人员应经淋级。人员应经淋浴、更衣、风淋后才能进人。浴、更衣、风淋后才能进人。要求较高的关键工序，还可在洁净室的局要求较高的关键工序，还可在
19、洁净室的局部安置层流净化工作台部安置层流净化工作台 我国我国GMPGMP把药厂洁净度分为四级：把药厂洁净度分为四级：洁净区：洁净区：100100级，级，1000010000级级控制区：控制区：100000100000级，级，300000300000级。级。各级适用范围如下。各级适用范围如下。1 1）100100级（或级（或10,00010,000级背景下的局部级背景下的局部100100级）：级）：均为无菌药品生产均为无菌药品生产（即法定药品标准中列有无（即法定药品标准中列有无菌检查项目的制剂）：菌检查项目的制剂）：a.a.最终灭菌药品：大容量注射剂（最终灭菌药品：大容量注射剂（50ml50ml
20、）的）的罐装。罐装。b.b.非最终灭菌药品：灌装前不需除菌过滤的药非最终灭菌药品：灌装前不需除菌过滤的药液的配制；注射剂的灌封、分装和压塞，冻液的配制；注射剂的灌封、分装和压塞，冻干粉针的罐装、压塞；直接接触药品的包装干粉针的罐装、压塞；直接接触药品的包装材料最终处理后的暴露环境。材料最终处理后的暴露环境。c.c.无菌原料药的暴露环境无菌原料药的暴露环境 2 2）10,00010,000级：均为无菌药品级：均为无菌药品 a.a.最终灭菌药品：注射剂的稀配、过滤；小最终灭菌药品：注射剂的稀配、过滤；小容量注射剂的罐封；直接接触药品的包装材容量注射剂的罐封；直接接触药品的包装材料的最终处理。料的最
21、终处理。b.b.非最终灭菌药品：罐装前需除菌过滤的药非最终灭菌药品：罐装前需除菌过滤的药液的配制。供角膜创伤或手术用滴眼剂的配液的配制。供角膜创伤或手术用滴眼剂的配制和罐装等；制和罐装等；3 3）100,000100,000级：级：包括无菌药品与非无菌药品包括无菌药品与非无菌药品.（1 1）无菌药品）无菌药品a.a.最终灭菌药品：注射剂的浓配或采用密闭系统最终灭菌药品：注射剂的浓配或采用密闭系统的稀配。的稀配。b.b.非最终灭菌药品：轧盖。直接接触药品的包装非最终灭菌药品：轧盖。直接接触药品的包装材料最后一次清洗的最低要求。材料最后一次清洗的最低要求。（2 2）非无菌药品）非无菌药品a.a.非
22、最终灭菌口服液体药品的暴露工序；非最终灭菌口服液体药品的暴露工序；b.b.深部组织创伤外用药品、眼用药品的暴深部组织创伤外用药品、眼用药品的暴 露工露工序；序；c.c.除直肠用药外的腔道用药的暴露工序。除直肠用药外的腔道用药的暴露工序。4)4)300,000300,000级：均为非无菌药品级：均为非无菌药品 a.a.最终灭菌口服液体药品的暴露工序最终灭菌口服液体药品的暴露工序;b.b.口服固体药品的暴露工序口服固体药品的暴露工序;c.c.表皮外用药品暴露工序表皮外用药品暴露工序;d.d.直肠用药的暴露工序直肠用药的暴露工序.e.e.非无菌原料药的暴露环境的最低要求。非无菌原料药的暴露环境的最低
23、要求。第三节第三节 灭菌法与无菌操作灭菌法与无菌操作一、概述一、概述 1.1.灭菌（灭菌（sterilizationsterilization）：是）：是指采用物理或化学方法将所有致病和指采用物理或化学方法将所有致病和非致病的微生物繁殖体和芽胞全部杀非致病的微生物繁殖体和芽胞全部杀灭的技术。灭的技术。2.2.除菌（除菌（debacteriadebacteria）是利用过滤介质或）是利用过滤介质或静电法将杂菌予以捕集、截留的技术。静电法将杂菌予以捕集、截留的技术。3.3.防腐（防腐（antisepsisantisepsis）是指以物理或化学）是指以物理或化学方法防止和抑制微生物生长与繁殖的技方法
24、防止和抑制微生物生长与繁殖的技术。术。4.4.消毒（消毒（disinfectiondisinfection）是指采用物理和）是指采用物理和化学方法将病原微生物杀死的技术。化学方法将病原微生物杀死的技术。5.5.灭菌法的分类：灭菌法的分类：干热灭菌法干热灭菌法 热力灭菌法热力灭菌法 湿热灭菌法湿热灭菌法 物理灭菌法物理灭菌法 射线灭菌法射线灭菌法 过滤灭菌法过滤灭菌法灭菌法灭菌法 气体灭菌法气体灭菌法 化学灭菌法化学灭菌法 化学药品杀菌法化学药品杀菌法 无菌操作法无菌操作法 一一D D值、值、Z Z值、值、F F值与值与F F0 0值值微生物的死亡速度属于一级或近似一级动力学过微生物的死亡速度属
25、于一级或近似一级动力学过程，符合下列方程：程，符合下列方程：式中式中N为原始的微生物数，为原始的微生物数，Nt为为t时残存的微生时残存的微生物数，物数，k为微生物致死速度常数为微生物致死速度常数D值定义为：在一定灭菌温度下被灭菌物品中微生值定义为：在一定灭菌温度下被灭菌物品中微生物数物数减少减少90所需时间所需时间。根据。根据D值值的定义，则：的定义，则：z值：在一定温度条件下对特定的微生物灭值：在一定温度条件下对特定的微生物灭菌时，菌时，降低一个降低一个1gD所需升高的温度数所需升高的温度数，z值的单位为值的单位为。可用公式表。可用公式表示为：示为：F值：值：在在一定一定灭菌温度灭菌温度(整
26、个灭菌过程中所经历整个灭菌过程中所经历的各种温度的各种温度)时，给定时，给定Z值所产生的灭菌效果，值所产生的灭菌效果，与与参比参比温度温度给定值所产生的给定值所产生的灭菌效果相同灭菌效果相同时所相当的时间时所相当的时间，单位为，单位为“min”F F0 0值：值：Z Z值为值为1010时，一定灭菌温度（时，一定灭菌温度（T T）所产生）所产生的灭菌效果，与的灭菌效果，与121121（即（即参比温度参比温度）产生）产生的灭菌效力相同时所相当的时间（的灭菌效力相同时所相当的时间（minmin）。）。Z Z值为值为1010，意思是当灭菌时间减少到原来，意思是当灭菌时间减少到原来灭菌时间的灭菌时间的1
27、0%10%时如从时如从10min10min变为变为1min1min，即降，即降低低1 1个个1gD或或1gD10101gD1 1，需具有，需具有相同的灭菌效果，所需升高的灭菌温度为相同的灭菌效果，所需升高的灭菌温度为1010。F F0 0值可认为是将在一定温度（如值可认为是将在一定温度（如115 115）和一定时间（如）和一定时间（如30min30min）下灭菌的效）下灭菌的效果，果，折算为在折算为在121121下灭菌下灭菌的效果相同时的效果相同时所需要的时间所需要的时间.一般规定一般规定F F0 0值值8min.8min.为增加安全系数，为增加安全系数，实际控制时应增加，以实际控制时应增加，
28、以F F0 0=8=812min12min为宜为宜二、物理灭菌法二、物理灭菌法 利用各种物理因素灭菌。利用各种物理因素灭菌。（一）干热灭菌法（一）干热灭菌法 （thermal sterilizationthermal sterilization）高热破坏蛋白质和核酸中的氢键，使高热破坏蛋白质和核酸中的氢键，使酶失去活性。酶失去活性。干热灭菌法主要包括：火焰灭菌法和干干热灭菌法主要包括：火焰灭菌法和干热空气灭菌法。热空气灭菌法。1 1、火焰灭菌法火焰灭菌法 直接在火焰中烧灼灭菌的直接在火焰中烧灼灭菌的方法。灭菌迅速、可靠、简便。方法。灭菌迅速、可靠、简便。适用：耐火焰材质的物品，如金属、玻适用：
29、耐火焰材质的物品，如金属、玻璃及瓷器等用具的灭菌，不适用于药品的璃及瓷器等用具的灭菌，不适用于药品的灭菌。灭菌。方法：酒精火焰，通过火焰方法：酒精火焰，通过火焰3 3次，每次次，每次数秒。注意利用外部氧化焰。燃烧在器壁数秒。注意利用外部氧化焰。燃烧在器壁的酒精不能灭菌。的酒精不能灭菌。2 2、干热空气灭菌法、干热空气灭菌法 在高温在高温（160-170160-170）干热空气中灭菌的方干热空气中灭菌的方法。法。适用：适用：耐高温的玻璃制品、耐高温的玻璃制品、金属制品、金属制品、不允许湿气穿透的油脂类、不允许湿气穿透的油脂类、耐高温的粉末材料耐高温的粉末材料 缺点：是穿透力弱，温度不易均匀，而缺
30、点：是穿透力弱，温度不易均匀，而且灭菌温度较高，灭菌时间较长，不适于且灭菌温度较高，灭菌时间较长，不适于橡胶、塑料及大部分药品。橡胶、塑料及大部分药品。方法：方法：14031403小时；小时；160-1702160-1702小时；小时；热原热原250250，30min30min，或，或200200以上以上45min45min 注意：烤箱内温度是否均匀，辅层宜薄。注意：烤箱内温度是否均匀，辅层宜薄。3 3、高速热风灭菌法、高速热风灭菌法 利用利用190190高温，高温，30-80m/s30-80m/s高风速迅高风速迅速加热灭菌。速加热灭菌。用于小剂量注射剂灭菌，比长时间用于小剂量注射剂灭菌，比长
31、时间低温灭菌破坏少。因细菌死亡速度超过低温灭菌破坏少。因细菌死亡速度超过化学反应速度。但耗能大。化学反应速度。但耗能大。（二）、湿热灭菌法（二）、湿热灭菌法 是在饱和蒸气或沸水或流通蒸气是在饱和蒸气或沸水或流通蒸气中进行灭菌的方法。中进行灭菌的方法。原理与特点原理与特点 ：由于：由于蒸气潜热大，穿蒸气潜热大，穿透力强透力强，容易使蛋白质变性或凝固，容易使蛋白质变性或凝固，具有很强的灭菌效果，灭菌可靠，具有很强的灭菌效果，灭菌可靠，操作简单操作简单是在制剂生产中应用是在制剂生产中应用最广泛最广泛的一的一种灭菌方法。种灭菌方法。1 1、热压灭菌法、热压灭菌法是在高压灭菌锅内，利用是在高压灭菌锅内，
32、利用高压水蒸气高压水蒸气杀灭微杀灭微生物的方法。公认最可靠的方法生物的方法。公认最可靠的方法所需的温度（蒸气表压）与时间的关系如下：所需的温度（蒸气表压）与时间的关系如下：115(67kPa)115(67kPa)，30min30min；121(97kPa)121(97kPa)，20min20min；126126(139kPa)(139kPa)，15min15min。（1 1）适用：耐高压蒸气的药物制剂、玻璃容器、）适用：耐高压蒸气的药物制剂、玻璃容器、金属容器、瓷器、橡胶塞、膜过滤器等。金属容器、瓷器、橡胶塞、膜过滤器等。灭菌柜基本结构灭菌柜基本结构(2)(2)注意事项：注意事项：检查灭菌品，
33、必须使用检查灭菌品，必须使用饱和蒸气饱和蒸气；必须将灭菌器内的必须将灭菌器内的空气排除空气排除。如果灭菌器内有空气存在，则压如果灭菌器内有空气存在，则压力表上的压力是蒸气与空气二者的力表上的压力是蒸气与空气二者的总压，并非纯蒸气压，温度达不到总压，并非纯蒸气压，温度达不到规定值。规定值。灭菌时间灭菌时间必须由全部药液温度真正必须由全部药液温度真正达到所要求的温度时算起；达到所要求的温度时算起；灭菌完毕后停止加热，必须使灭菌完毕后停止加热，必须使压力压力逐渐降到逐渐降到0 0，才能放出锅内蒸气，使，才能放出锅内蒸气，使锅内压力和大气压相等后，稍稍打锅内压力和大气压相等后，稍稍打开灭菌锅，待开灭菌
34、锅，待10min10min15min15min，再全，再全部打开。以避免锅内外压差太大、部打开。以避免锅内外压差太大、温差太大而使物品冲出和使玻璃瓶温差太大而使物品冲出和使玻璃瓶炸裂。炸裂。装封于密封容器内的干燥固体药物装封于密封容器内的干燥固体药物或辅料因无湿热穿透，相当于干热或辅料因无湿热穿透，相当于干热灭菌，灭菌，不宜不宜用本法。用本法。(3)(3)灭菌器内温度的检查法：灭菌器内温度的检查法：留点温度计；留点温度计；温度指示剂，如利用某些熔点正好是温度指示剂，如利用某些熔点正好是灭菌所需温度的化学药品作指示剂，以灭菌所需温度的化学药品作指示剂，以判断灭菌温度是否达到。（灭菌后观察判断灭菌
35、温度是否达到。（灭菌后观察药品是否熔化）并可加着色剂以便观察，药品是否熔化）并可加着色剂以便观察，但无法表明该温度的持续时间。但无法表明该温度的持续时间。温度和时间自动控制自动记录装置温度和时间自动控制自动记录装置 。2 2、流通蒸气灭菌、流通蒸气灭菌 是在常压下（不密闭容器）使用是在常压下（不密闭容器）使用100100器蒸气加热杀灭微生物的方法。器蒸气加热杀灭微生物的方法。通常灭菌时间为通常灭菌时间为30min30min60min60min。本法不能保。本法不能保证杀灭所有的芽胞，系非可靠的灭菌法证杀灭所有的芽胞，系非可靠的灭菌法.适用：于消毒及适用：于消毒及不耐高热的制剂不耐高热的制剂(安
36、瓿）安瓿）或不或不耐压容器与器械的灭菌。耐压容器与器械的灭菌。注意：必须到达注意：必须到达100100度后再计时，包件不宜过度后再计时，包件不宜过大。大。3 3、煮沸灭菌法、煮沸灭菌法 把待灭菌物品放入沸水中加热灭把待灭菌物品放入沸水中加热灭菌的方法。通常菌的方法。通常煮沸煮沸30min30min60min60min。本法灭菌效果差，本法灭菌效果差，适用：注射器、注射针等器皿的适用：注射器、注射针等器皿的消毒。消毒。必要时加入适当的抑菌剂必要时加入适当的抑菌剂，如甲酚、氯甲酚、苯酚、三氯叔丁如甲酚、氯甲酚、苯酚、三氯叔丁醇等，可杀死芽胞菌。醇等，可杀死芽胞菌。4 4、低温间歇灭菌法、低温间歇灭
37、菌法 将待灭菌的物品，用将待灭菌的物品，用60608080水或流通蒸水或流通蒸气加热气加热1h1h，将其中的细胞繁殖体杀死，然后在，将其中的细胞繁殖体杀死，然后在室温中放置室温中放置24h24h，让其中的芽胞发育成为繁殖体，让其中的芽胞发育成为繁殖体，再次加热灭菌、放置，再次加热灭菌、放置，反复进行反复进行3 35 5次次，直至，直至消灭芽胞为止。消灭芽胞为止。适用适用：必须用：必须用加热加热法灭茵而又法灭茵而又不耐较高温度不耐较高温度的的制剂与药品。制剂与药品。不足：（不足：（1 1）操作时间长，效果不理想，少用；）操作时间长，效果不理想，少用；（2 2）添加适量抑菌剂。）添加适量抑菌剂。、
38、影响湿热灭菌的因素、影响湿热灭菌的因素微生物种类、不同发育期与数量：微生物种类、不同发育期与数量：不同细菌，同一细菌的不同发育阶段不同细菌，同一细菌的不同发育阶段对热的抵抗力有所不同；对热的抵抗力有所不同；繁殖期繁殖期对热的抵对热的抵抗力比衰老时期大得多，抗力比衰老时期大得多，细菌芽胞细菌芽胞的耐热的耐热性更强；细菌数越少，灭菌时间越短，故性更强；细菌数越少，灭菌时间越短，故注射剂在配制灌封后应立即灭菌，以缩短注射剂在配制灌封后应立即灭菌，以缩短整个灭菌时间，且能使灭菌充分。整个灭菌时间，且能使灭菌充分。介质的性质（制剂中的附加剂与赋形剂介质的性质（制剂中的附加剂与赋形剂或杂质的性质）：或杂质
39、的性质）：制剂中含有营养物质，如糖类、蛋白制剂中含有营养物质，如糖类、蛋白质等，增强细菌的抗热性。质等，增强细菌的抗热性。细菌的生活能力也受介质细菌的生活能力也受介质PHPH值的影响：值的影响：一般中性环境的耐热性最好，碱性次之，一般中性环境的耐热性最好，碱性次之，酸性不利于细菌的发育。酸性不利于细菌的发育。蒸气的性质：蒸气的性质：饱和蒸气：饱和蒸气：热含量较高，热的穿透力较大，热含量较高，热的穿透力较大，灭菌效力高。灭菌效力高。湿饱和蒸气湿饱和蒸气：带有水分，热含量较低，穿：带有水分，热含量较低，穿透力差，灭菌效力较低。透力差，灭菌效力较低。过热蒸气过热蒸气：温度高于饱和蒸气，但穿透：温度高
40、于饱和蒸气，但穿透力差，灭菌效率低；力差，灭菌效率低；灭菌时间灭菌时间 灭菌时间与灭菌温度相关，灭菌时间与灭菌温度相关，高温灭高温灭菌即可缩短灭菌时间菌即可缩短灭菌时间，但温度越高，药，但温度越高，药物的分解速度加快；物的分解速度加快；低温长时间灭菌，低温长时间灭菌，也增加药物的分解量。也增加药物的分解量。因此，应在达到有效灭菌的前提下适因此，应在达到有效灭菌的前提下适当选择灭菌温度和灭菌时间；当选择灭菌温度和灭菌时间；（三）紫外线灭菌法（三）紫外线灭菌法 紫外线灭菌法是指用紫外线照射紫外线灭菌法是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。杀灭微生物的方法。一般用于灭菌的紫外线波长是一般用于灭菌的紫外线
41、波长是200nm200nm300nm300nm，灭菌力最强的波长灭菌力最强的波长是是254nm254nm。适用：适用：1 1）空气消毒）空气消毒 在在6 615m15m3 3的空间用的空间用3030瓦瓦紫外灯一盏，灯距离地紫外灯一盏，灯距离地2.5-3m2.5-3m，相对湿，相对湿度度45456060，杀菌效果比较理想，杀菌效果比较理想.2)2)表面灭菌表面灭菌:灯管下灯管下10cm10cm，10-15min10-15min。3 3）水的消毒）水的消毒：紫外线可穿透纯净的水。：紫外线可穿透纯净的水。（四）微波灭菌法（四）微波灭菌法 用微波照射而产生的热杀灭微生物的方法。用微波照射而产生的热杀灭
42、微生物的方法。微波是指频率在微波是指频率在300300兆赫到兆赫到300300千兆赫千兆赫之间的之间的高频电磁波。高频电磁波。灭菌原理：极性分子在微波电磁场的作用灭菌原理：极性分子在微波电磁场的作用下，按电磁场方向整齐排列，而微波电磁场方下，按电磁场方向整齐排列，而微波电磁场方向在每秒钟内改变向在每秒钟内改变24.524.5亿次，这些极性分子的亿次，这些极性分子的排列位置将随电场的改变而急剧改变，分子在排列位置将随电场的改变而急剧改变，分子在快速改变方向的过程中互相撞击、摩擦而产生快速改变方向的过程中互相撞击、摩擦而产生热，变成宏观的微波加热。热，变成宏观的微波加热。因微波能穿透到介质的深部，
43、故可以内外因微波能穿透到介质的深部，故可以内外均匀地加热，需含水。均匀地加热，需含水。功率为功率为3 35Kw5Kw、2450MHz2450MHz的微波作用的微波作用15s15s以上，安瓿温度接近以上，安瓿温度接近110110左右，可将细菌左右，可将细菌全部杀死。全部杀死。（五）辐射灭菌法（五）辐射灭菌法 以放射性同位素（或）放射的以放射性同位素（或）放射的射线或射线或射线杀菌的方法。射线杀菌的方法。射线穿透力强（射线穿透力强（6060CoCo）特点：物品特点：物品温度升高小温度升高小（2 23 3），适用于），适用于热敏性药物；灭菌作用可靠，广泛用于各种热敏性药物；灭菌作用可靠，广泛用于各种
44、液液体、半固体、固体物料体、半固体、固体物料。但设备费用高，对某些药品可能降低效力、但设备费用高，对某些药品可能降低效力、产生毒性或发热物质，且溶液不如固体稳定，产生毒性或发热物质，且溶液不如固体稳定，同时要注意安全防护等问题。同时要注意安全防护等问题。三、过滤除菌法三、过滤除菌法 用用无菌过滤器无菌过滤器除去介质中活的或除去介质中活的或死的微生物的方法，是一种机械除菌死的微生物的方法，是一种机械除菌的方法。的方法。1.1.适用：对适用：对热不稳定的低粘度药物（生热不稳定的低粘度药物（生化药物）溶液、气体、水等化药物）溶液、气体、水等的除菌。的除菌。要求无菌操作。可减少热原，但不要求无菌操作。
45、可减少热原，但不能滤除它。能滤除它。2.2.滤器要求与种类：滤器要求与种类：有效地从溶液中除净微生物，滤器容易清洗，操有效地从溶液中除净微生物，滤器容易清洗，操作简便。作简便。细菌芽胞大小：细菌芽胞大小：0.50.51m.m.通过毛细通过毛细管阻留、筛孔阻留或静电吸附除菌管阻留、筛孔阻留或静电吸附除菌1 1）微孔薄膜滤器）微孔薄膜滤器 高分子薄膜为滤材，夹于金属或有机玻璃滤高分子薄膜为滤材，夹于金属或有机玻璃滤器中而成。器中而成。膜材有醋酸纤维膜、硝酸纤维膜、醋酸纤维膜材有醋酸纤维膜、硝酸纤维膜、醋酸纤维素硝酸纤维混合能滤膜、聚酞胺滤膜、聚四氟素硝酸纤维混合能滤膜、聚酞胺滤膜、聚四氟乙烯膜等。
46、乙烯膜等。膜的孔径：膜的孔径：除菌用除菌用0.22um0.22um以下。以下。2 2）垂熔玻璃滤器）垂熔玻璃滤器 是用硬质中性玻璃细粉经高温加热至接近是用硬质中性玻璃细粉经高温加热至接近其熔点，熔合而成均匀孔径的滤材，再粘连于其熔点，熔合而成均匀孔径的滤材，再粘连于不同形状玻璃器内而成的，或由硬质中性玻璃不同形状玻璃器内而成的，或由硬质中性玻璃粉烧制而成玻璃滤棒。粉烧制而成玻璃滤棒。通常有：通常有：垂熔玻璃漏斗、垂熔玻璃滤球和垂垂熔玻璃漏斗、垂熔玻璃滤球和垂熔玻璃滤棒熔玻璃滤棒三种三种 性质稳定，对药物溶液不吸附，性质稳定，对药物溶液不吸附，不影响药液不影响药液的的PHPH，常用于除杂质和除菌
47、。常用于除杂质和除菌。除菌用规格：除菌用规格：6 6号，号垂熔玻璃号，号垂熔玻璃滤器。滤器。3)3)沙滤棒沙滤棒 常用类型：常用类型：a.a.硅藻土滤棒，规格：粗号，中号，细号（硅藻土滤棒，规格：粗号，中号，细号（3-3-4 4m m）。细号可除部分菌。）。细号可除部分菌。b.b.素瓷滤棒素瓷滤棒:分八级，三级以上为孔径为分八级，三级以上为孔径为2.5-2.5-1.3m,1.3m,1.3um1.3um可除菌可除菌.沙滤棒主要用于除杂质与除预滤，较少直接应沙滤棒主要用于除杂质与除预滤，较少直接应用于除菌用于除菌.四、化学灭菌法四、化学灭菌法 化学灭菌法系指用化学药品来杀灭微生物的方化学灭菌法系指
48、用化学药品来杀灭微生物的方法。化学药品因品种和用量不同，可法。化学药品因品种和用量不同，可灭菌或抑灭菌或抑菌菌或二者兼有。包括或二者兼有。包括 气体灭菌法与表面消毒法气体灭菌法与表面消毒法 机理：机理：1.1.蛋白质变性，发生沉淀；蛋白质变性，发生沉淀；2.2.与细菌的酶系统结合，影响其代谢功能；与细菌的酶系统结合，影响其代谢功能；3.3.降低细菌表面张力，增加膜的通透性，使细菌降低细菌表面张力，增加膜的通透性，使细菌破裂或溶解。破裂或溶解。（一）气体灭菌法（一）气体灭菌法 含义：指使用能形成含义：指使用能形成气体或蒸气的化学药品气体或蒸气的化学药品以达到灭菌的方法。以达到灭菌的方法。适用：药
49、物的适用：药物的混悬液、粉末和固体药物易混悬液、粉末和固体药物易被热破坏被热破坏，不能加热，又不能滤过，可用本，不能加热，又不能滤过，可用本法。法。灭菌气体灭菌气体必须具备的条件：必须具备的条件：1 1）室温形成气体或蒸汽；）室温形成气体或蒸汽；2 2）穿透力强并易于除去；）穿透力强并易于除去；3 3）作用快，毒性低，）作用快，毒性低，4 4）无腐蚀性、爆炸性及刺激性；）无腐蚀性、爆炸性及刺激性；5 5）价格低廉。来源丰富。）价格低廉。来源丰富。1.1.环氧乙烷灭菌法：制药工业多用。室温下环氧乙烷灭菌法：制药工业多用。室温下为气体，易穿透塑料、纸板及固体粉末。具有为气体，易穿透塑料、纸板及固体
50、粉末。具有可燃性。可燃性。空气中含量达空气中含量达3.03.0(V(VV)V)时可爆炸时可爆炸，故应用时故应用时需用惰性气体需用惰性气体。对人肤及粘膜有损伤。对人肤及粘膜有损伤。杀菌机理：使菌体蛋白分子、酶、核酸中杀菌机理：使菌体蛋白分子、酶、核酸中的一的一COOH.COOH.NHNH2 2,一一SHSH，OHOH基与基与CHCH2 2CHCH2 2相结相结合合.O.O 对细胞的代谢产生不可逆的损害对细胞的代谢产生不可逆的损害 适用适用 ：塑料容器、对热敏感的固体：塑料容器、对热敏感的固体药物、纸或塑料药物、纸或塑料包装的药物包装的药物，橡胶制品、，橡胶制品、针筒、针头，衣着敷料，器械。针筒、
