1、药物分析药物分析Pharmaceutical AnalysisPharmaceutical Analysis主讲教师：金黎明主讲教师：金黎明电话电话:13504088982 E-mail:Dalian Nationalities University复习复习 巴比妥类镇静催眠药物的分析巴比妥类镇静催眠药物的分析第一节第一节 巴比妥类药物的结构与性质巴比妥类药物的结构与性质第二节第二节 鉴别试验鉴别试验第三节第三节 特殊杂质检查特殊杂质检查第四节第四节 含量测定含量测定第五节第五节 巴比妥类药物的体内药物分析巴比妥类药物的体内药物分析CCNHCNHCOOOR1R2123456KEY WORDSb
2、arbitalbarbitalphenobarbital phenobarbital secobarbitalsecobarbitalpentobarbitalpentobarbitalamobarbitalamobarbitalthipental sodiumthipental sodium 1.1.司可巴比妥钠司可巴比妥钠中国药典中国药典规定的含量测规定的含量测定方法为定方法为 A.A.中和法中和法 B.B.溴量法溴量法 C.C.碘量法碘量法 D.D.紫外分光法紫外分光法 E.E.高锰酸钾法高锰酸钾法练习与思考练习与思考 2.2.于于NaNa2 2COCO3 3溶液中加溶液中加AgNOAg
3、NO3 3试液，开始生成白试液，开始生成白色沉淀经振摇即溶解，继续加色沉淀经振摇即溶解，继续加AgNOAgNO3 3试液，试液，生成的沉淀则不再溶解，该药物应是生成的沉淀则不再溶解，该药物应是A.A.盐酸可待因盐酸可待因 B.B.咖啡因咖啡因C.C.新霉素新霉素 D.D.维生素维生素C CE.E.异戊巴比妥异戊巴比妥练习与思考练习与思考 3.3.与与KNOKNO3 3H H2 2SOSO4 4反应生成黄色产物的反应生成黄色产物的药物是药物是A.A.苯巴比妥苯巴比妥B.B.司可巴比妥司可巴比妥C.C.巴比妥巴比妥D.D.硫喷妥钠硫喷妥钠E.E.硫酸奎宁硫酸奎宁 练习与思考练习与思考 4.4.下列
4、巴比妥类药物中，可与下列巴比妥类药物中，可与铜盐吡啶铜盐吡啶试剂生成绿色配合物，又与铅盐生成试剂生成绿色配合物，又与铅盐生成白色沉淀的是白色沉淀的是A.A.苯巴比妥苯巴比妥B.B.异戊巴比妥异戊巴比妥C.C.司可巴比妥司可巴比妥D.D.巴比妥巴比妥E.E.硫喷妥钠硫喷妥钠 练习与思考练习与思考 5.5.下列反应中，用于苯巴比妥鉴别的是下列反应中，用于苯巴比妥鉴别的是A.A.硫酸反应硫酸反应B.B.甲醛甲醛-硫酸反应硫酸反应C.C.与碘液的反应与碘液的反应D.D.二硝基氯苯反应二硝基氯苯反应E.E.戊烯二醛反应戊烯二醛反应 练习与思考练习与思考 6.6.下列金属盐中，一般不用于巴比妥药下列金属盐
5、中，一般不用于巴比妥药物鉴别的是物鉴别的是A.A.铜盐铜盐B.B.银盐银盐C.C.汞盐汞盐D.D.钴盐钴盐E.E.锌盐锌盐练习与思考练习与思考 7.7.苯巴比妥的特殊杂质检查项目有苯巴比妥的特殊杂质检查项目有A.A.酸度酸度B.B.炽灼残渣炽灼残渣C.C.有关物质有关物质D.D.中性或碱性物质中性或碱性物质E.E.乙醇溶液的澄清度乙醇溶液的澄清度练习与思考练习与思考 8.8.下列方法中，可用于巴比妥类药物含下列方法中，可用于巴比妥类药物含量测定的有量测定的有A.A.碘量法碘量法B.B.银量法银量法C.C.紫外分光光度法紫外分光光度法D.D.酸碱滴定法酸碱滴定法E.E.溴量法溴量法练习与思考练习
6、与思考 A.A.与碘试液的加成反应与碘试液的加成反应B.B.硝酸钠硫酸反应硝酸钠硫酸反应C.C.硫元素反应硫元素反应D.D.水解后重氮化偶合反应水解后重氮化偶合反应E.E.重氮化偶合反应重氮化偶合反应1.1.司可巴比妥钠司可巴比妥钠2.2.苯巴比妥苯巴比妥3.3.硫喷妥钠硫喷妥钠练习与思考练习与思考 简述巴比妥类药物与银盐、铜盐、钴盐及简述巴比妥类药物与银盐、铜盐、钴盐及汞盐反应的原理和现象。汞盐反应的原理和现象。练习与思考练习与思考 今有三瓶药物分别为苯巴比妥（今有三瓶药物分别为苯巴比妥（A A）,司可司可巴比妥钠（巴比妥钠（B B）和硫喷妥钠（）和硫喷妥钠（C C）,但瓶上但瓶上标签脱落，
7、请采用适当的化学方法将三者标签脱落，请采用适当的化学方法将三者区分开。区分开。练习与思考练习与思考 维生素维生素A维生素维生素D维生素维生素E维生素维生素B维生素维生素C脂溶性水溶性第九章第九章 维生素类药物的分析维生素类药物的分析vitaminn人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。n例如：VA夜盲症 VB1脚气病 VD佝偻病第九章第九章 维生素类药物的分析维生素类药物的分析第九章第九章 维生素类药物的分析维生素类药物的分析第一节第一节 维生素维生素A的分析的分析第二节第二节 维生素维生素B1的分析的分析第三节第三节 维生素维生素C的分析的分析第四节第四节 维生
8、素维生素D的分析的分析第五节第五节 维生素维生素E的分析的分析第一节第一节 维生素维生素A的分析的分析一、结构与性质一、结构与性质二、鉴别试验二、鉴别试验三、含量测定三、含量测定CH3CH3CH2ORCH3CH3CH3-H 维生素维生素A醇醇-COCH3 维生素维生素A醋酸酯醋酸酯-COC15H31 维生素维生素A棕榈酸酯棕榈酸酯R:维生素维生素ACH2ORCH3CH3CH3CH3CH3环己烯环己烯共轭多共轭多烯侧链烯侧链多异构体多异构体易被氧化易被氧化UV结构分析结构分析维生素维生素A 325.5 100%新维生素新维生素Aa 328 75%新维生素新维生素Ab 320.5 24%新维生素新
9、维生素Ac 310.5 15%异维生素异维生素Aa 323 21%异维生素异维生素Ab 324 24%max 相对生物效价相对生物效价1.1.具有共轭多烯侧链具有共轭多烯侧链结构与性质结构与性质v 具有具有UV吸收特性吸收特性v 存在多种立体异构化合物存在多种立体异构化合物v 易发生脱氢、脱水、聚合反应易发生脱氢、脱水、聚合反应v 易被氧化易被氧化2.2.与三氯化锑发生呈色反应与三氯化锑发生呈色反应3.3.溶解性：溶解性：不溶于水；易溶于有机溶剂和植物油等不溶于水；易溶于有机溶剂和植物油等*三氯化锑反应三氯化锑反应UVUVTLCTLC 鉴别试验鉴别试验1.1.三氯化锑反应三氯化锑反应条件条件
10、无水无醇无水无醇CHCl3紫红紫红蓝色蓝色3SbClVitA-RCOOSbCl5+CH2蓝色蓝色紫红色紫红色+CH2-RCOOSbCl5VitAVitAHCl去水去水无水乙醇无水乙醇5个共轭双键个共轭双键max为为326nm一个吸收峰一个吸收峰2.UV2.UV法法6个共轭双键个共轭双键max为为350390nm三个吸收峰三个吸收峰溶剂：无水乙醇溶剂：无水乙醇-盐酸（盐酸（100:1）USP 显色剂显色剂 磷钼酸磷钼酸 规定斑点颜色和规定斑点颜色和Rf值值BP 杂质对照品法杂质对照品法 显色剂显色剂 三氯化锑三氯化锑3.TLC3.TLC法法1.1.紫外分光光度法紫外分光光度法*2.HPLC2.H
11、PLC法法3.3.三氯化锑比色法三氯化锑比色法含量测定含量测定 UVUV法法（三点校正法）（三点校正法）测定依据：分子结构中测定依据：分子结构中多烯共轭体系多烯共轭体系，具有紫外吸，具有紫外吸 收特性，在收特性，在325-328nm呈现选择性吸收呈现选择性吸收 药典附录药典附录 本法是在三个波长处分别测定吸收度，本法是在三个波长处分别测定吸收度，根据校正公式计算吸收度根据校正公式计算吸收度A校正值后，再计校正值后，再计算含量，故本法亦称算含量，故本法亦称“三点校正法三点校正法”“三点校正法三点校正法”由来由来 维生素维生素A中存在相关物质和不相关物质，中存在相关物质和不相关物质，杂质杂质在在3
12、10340nm波长范围内有吸收干扰紫外测定，波长范围内有吸收干扰紫外测定，采用采用“三点校正法三点校正法”消除干扰消除干扰立体异构体、氧化产物及光照产物、合成中间体、立体异构体、氧化产物及光照产物、合成中间体、去氢维生素去氢维生素A（VitA2）、去水维生素）、去水维生素A（VitA3）、）、稀释用油等稀释用油等 “三点校正法三点校正法”测定原理测定原理 1、杂质的吸收在、杂质的吸收在310340nm波长波长 范围内呈一条直线范围内呈一条直线，随波长的增大随波长的增大 而吸收度变小而吸收度变小 2、物质对光的吸收具有加和性、物质对光的吸收具有加和性 即样品各波长的吸收度是维生素即样品各波长的吸
13、收度是维生素A与杂与杂质吸收度的代数和质吸收度的代数和 三点校正法三点校正法n问题之一：问题之一：波长（三点）选择：波长（三点）选择：（1 1）1 1 VitA VitA的的 maxmax（328nm328nm）（2 2）2 2 3 3 分别在分别在 1 1的两侧各选一点的两侧各选一点 第一法第一法 第二法第二法测定对象测定对象:VitA醋酸酯醋酸酯第一法第一法 等波长差法等波长差法1=328nm2=316nm3=340nm 等波长差法等波长差法测定波长测定波长 300、316、328、340、360328340316328 3403163283282523AAA.A 校校正正测定对象测定对象
14、:VitA醇醇第二法第二法 等吸收度法等吸收度法(皂化法皂化法)1=325nm2=310nm3=334nm等吸收度法等吸收度法（6/7吸收度法）吸收度法）测定波长测定波长 300、310、325、334334310325AAA76 第一法无法消除杂质干扰时用此法第一法无法消除杂质干扰时用此法 334310325325260455528156A.A.A.A 校校正正 问题之二：问题之二：生物效价及换算因数生物效价及换算因数 维生素维生素A含量是用生物效价表示含量是用生物效价表示 单位单位 IU/g（国际单位）（国际单位）%11%11标标样样标标样样）（含量含量）（含量含量cmcmEEgIUgIU
15、%11%11标标标标样样样样）（含量含量）（含量含量cmcmEgIUEgIU 换算因数换算因数1g维生素维生素A醋酸酯相当的国际单位数为醋酸酯相当的国际单位数为）（IU2907000g344.0g1 1g维生素维生素A醇相当的国际单位数为醇相当的国际单位数为）（IU3330000g300.0g1 醇醇全全反反式式维维生生素素醋醋酸酸酯酯全全反反式式维维生生素素Ag1IUAg1IU 300.0344.0 ）（含量含量标标gIU%11%11标标标标样样样样）（含量含量）（含量含量cmcmEgIUEgIU 190015302907000 183018203330000(VitA酯酯)(VitA醇醇)
16、换算因数换算因数换换算算因因数数含含量量样样%11(cmEIU/g)用第一法测定维生素用第一法测定维生素A醋酸酯时，醋酸酯时，换算因素为换算因素为1900用第二法测定维生素用第二法测定维生素A醇时，醇时，换算因素为换算因素为1830 换算因数由纯品计算而得换算因数由纯品计算而得lmlgCAcm )100/(%)(1样样求标示量求标示量标示量标示量100)1830(1900)100/(WmlgCA100100标示量标示量平均丸重平均丸重换算因数换算因数E E%1cm(样)1cm(样)1830(1900)100/(mlgCA（1 1）判断法选择）判断法选择A:选择依据：选择依据：所选所选A值中杂质
17、的干扰是否已基本消除值中杂质的干扰是否已基本消除测定方法和计算方法测定方法和计算方法A测定测定或或A校正校正 方法：方法：（2 2）第一法）第一法维生素维生素A醋酸酯醋酸酯iAnm360340328316300ml/IU159S处测处测、分别于分别于溶液溶液环己烷环己烷判断判断 是否在是否在326329nm之间之间max max 在在326329nm之间之间 求算求算 并与规定值比较并与规定值比较328iA/A改用第二法改用第二法是是否否 299.0AA811.0AA0000.1AA907.0AA555.0AA328360328340328328328316328300 规定值规定值 差值差值
18、328iA/A 判断差值是否超过规定值的判断差值是否超过规定值的02.0有一个以上超有一个以上超过过02.0 无超过无超过02.0 计算计算 A328（校正）（校正）用用A328计算计算 3403163283282523AAA.A 校校正正%100AAAf328328)(328 校正校正 03%15%3%第二法第二法 校校正正328A328A第二法第二法（a a）校正吸收度与未校正吸收度相差不超过）校正吸收度与未校正吸收度相差不超过 3.0%3.0%，则用，则用未校正吸收度未校正吸收度计算含量计算含量（b b）校正吸收度与未校正吸收度相差在）校正吸收度与未校正吸收度相差在 -15%-15%-3
19、.0%-3.0%之间，则以之间，则以校正吸收度校正吸收度计算含量计算含量（c c）校正吸收度超过未校正吸收度的）校正吸收度超过未校正吸收度的-15%-15%或或+3.0%+3.0%或吸收峰波长不在或吸收峰波长不在326-329nm326-329nm之间，则供试品须之间，则供试品须 按按第二法第二法测定测定小结（3 3）第二法）第二法适用于维生素适用于维生素A醇醇第一法无法消除杂质干扰时用此法第一法无法消除杂质干扰时用此法i i挥干乙醚挥干乙醚乙醚提取乙醚提取KOH/乙醇KOH/乙醇A A25、334nm处测25、334nm处测于300、310、3于300、310、3mlml稀释至915IU/稀
20、释至915IU/异丙醇溶解异丙醇溶解除去植物油的干扰除去植物油的干扰甘油和脂肪酸盐甘油和脂肪酸盐植物油植物油VitA醇VitA醇VitA醋酸酯VitA醋酸酯皂化液皂化液S S 第二节第二节 维生素维生素B1的分析的分析一、结构与性质一、结构与性质二、鉴别试验二、鉴别试验三、含量测定三、含量测定氨基嘧啶环氨基嘧啶环CH2噻唑环噻唑环(季铵碱季铵碱)NSCH3CH2CH2OHNNH3CNH2CH2+HClCl-盐酸硫胺盐酸硫胺UV结构与性质结构与性质NNH3CNH2NSCH3CH2CH2OH+Cl HCl-还原性还原性碱性碱性与酸成盐与酸成盐与生物碱与生物碱非水碱量法非水碱量法(1：2)结构与性质
21、结构与性质结构与性质结构与性质n溶解性溶解性 易溶于水，水溶液呈酸性易溶于水，水溶液呈酸性n共轭双键共轭双键 具有具有UV吸收、吸收、max=246nmn氨基嘧啶环和噻唑环氨基嘧啶环和噻唑环 具有硫色素反应具有硫色素反应 具有杂环的沉淀反应具有杂环的沉淀反应n盐酸根盐酸根 呈氯化物反应呈氯化物反应 蓝色荧光蓝色荧光硫色素硫色素正丁醇正丁醇 OOH与生物碱与生物碱ChP鉴别试验鉴别试验硫色素反应硫色素反应荧光消失荧光消失硫硫色色素素铁铁氰氰化化钾钾维维生生素素 OH1B正丁醇正丁醇蓝色荧光蓝色荧光H+OH-碱性碱性NaOHNNH3CNH2HClNSCH3C2H4OHCH2CH2NNH3CNH2C
22、H3NNaSC2H4OHONNH3CNNNaSCH3C2H4OH-H2OSCH3C2H4OHNNH3CNNH 环环合合 H2 ONNH3CNNSCH3C2H4OH硫色素硫色素VitB1 4242HgIHBHgIK 淡淡黄黄H+2KIIIHIB2 红色红色H+白白色色硅硅钨钨酸酸 H+白色扇形白色扇形苦酮酸苦酮酸 H+沉淀反应沉淀反应 OH4WO12OHSiOB23222 PbSNaSVitBNOPbNaOH231 蓝蓝淀粉试纸淀粉试纸 KIMnOCl H 硝酸铅反应硝酸铅反应Cl-反应反应其他反应其他反应 OHNHAgNOAgCl白白3HNO3HNO三、含量测定n1.非水溶液滴定法 用高氯酸滴
23、定 电位滴定法指示终点 1mol维生素B1与2mol高氯酸相当n2.紫外分光光度法 片剂、注射剂采用此法 以吸收系数法计算含量n3.硫色素荧光法 对照品对照法计算含量，方法专属，不受氧化产物干扰1维生素维生素A的鉴别试验为的鉴别试验为 A.三氯化铁反应三氯化铁反应 B.硫酸锑反应硫酸锑反应 C.2,6-二氯靛酚反应二氯靛酚反应 D.三氯化锑反应三氯化锑反应 E.间二硝基苯的碱性乙醇液反应间二硝基苯的碱性乙醇液反应练习与思考练习与思考 2.下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是丁醇，显蓝色荧光的是 A.维生素维生素A B.维生素维
24、生素B1 C.维生素维生素C D.维生素维生素D E.维生素维生素E练习与思考练习与思考 3.非水溶液滴定法测定维生素非水溶液滴定法测定维生素B1时，维生素时，维生素B1与与高氯酸的摩尔比是高氯酸的摩尔比是 A.1:5 B.1:4 C.1:3 D.1:2 E.1:1 练习与思考练习与思考 4.三点校正紫外分光光度法测定维生素三点校正紫外分光光度法测定维生素A醋酸酯含量时，采用的溶剂是醋酸酯含量时，采用的溶剂是 A.甲醇甲醇 B.丙酮丙酮 C.乙醚乙醚 D.环己烷环己烷 E.三氯甲烷三氯甲烷 练习与思考练习与思考 5.三点校正紫外分光光度法测定维生素三点校正紫外分光光度法测定维生素A醋醋酸酯含量
25、时，规定在酸酯含量时，规定在300nm,316nm,328nm,340nm,360nm五个波长下测得五个波长下测得的吸光度比值与药典规定的吸光度比值之差的吸光度比值与药典规定的吸光度比值之差不超过以下数值时，用在不超过以下数值时，用在328nm波长处测波长处测得的吸光度计算含量得的吸光度计算含量 A.0.1 B.0.2 C.0.01 D.0.02 E.0.002 练习与思考练习与思考 6.下面哪些描述适用于维生素下面哪些描述适用于维生素A A.分子具有长二烯醇侧链，易被氧化分子具有长二烯醇侧链，易被氧化 B.具有较长的共轭多烯侧链结构具有较长的共轭多烯侧链结构 C.含酯键，经水解后产生苯并二氢
26、吡喃衍生物，易被含酯键，经水解后产生苯并二氢吡喃衍生物，易被氧化氧化 D.与三氯化锑的无醇氯仿液中呈不稳定蓝色，很快转与三氯化锑的无醇氯仿液中呈不稳定蓝色，很快转变为紫红色变为紫红色 E.样品用无水乙醇溶解后，加硝酸加热后，呈橙红色样品用无水乙醇溶解后，加硝酸加热后，呈橙红色 练习与思考练习与思考 维生素维生素B1 的噻唑环在的噻唑环在 介质中可开环，介质中可开环，再与嘧啶环上氨基缩合环合，然后经再与嘧啶环上氨基缩合环合，然后经 等氧化剂氧化生成具有荧光的等氧化剂氧化生成具有荧光的 ，加，加 荧光荧光消失，加消失，加 荧光又显出；此反应称为荧光又显出；此反应称为 反应。反应。碱性碱性铁氰化钾铁氰化钾硫色素硫色素酸酸碱碱硫色素硫色素练习与思考练习与思考 n1.三点校正法测定维生素A的原理是什么？练习与思考练习与思考
