1、引引 言言电泳的概念电泳的概念：带电物质在电场中向相反电极移带电物质在电场中向相反电极移动的现象称为电泳（动的现象称为电泳（electrophoresiselectrophoresis）。）。电泳现象早在十九世纪初就已发现（电泳现象早在十九世纪初就已发现（18081808年俄年俄国物理学家国物理学家ReRessss进行了世界上第一次电泳实进行了世界上第一次电泳实验）。但电泳技术的广泛应用，则是在验）。但电泳技术的广泛应用，则是在19371937年年用滤纸作为支持介质成功地进行纸电泳以后，用滤纸作为支持介质成功地进行纸电泳以后，特别是近几十年以来，电泳技术发展很快，各特别是近几十年以来，电泳技术
2、发展很快，各种类型的电泳技术相继诞生，在生物化学、医种类型的电泳技术相继诞生，在生物化学、医学、免疫学等领域得到了广泛应用。学、免疫学等领域得到了广泛应用。原则上按电泳的原理来分，可分为二类：原则上按电泳的原理来分，可分为二类：自由界面电泳：自由界面电泳：又称移动界面电泳，是指在又称移动界面电泳，是指在没有支持介质的溶液中进行的电泳。其装置没有支持介质的溶液中进行的电泳。其装置复杂，价格昂贵，费时费力，不便于推广应复杂，价格昂贵，费时费力，不便于推广应用。用。区带电泳：区带电泳：是指有支持介质的电泳，待分离是指有支持介质的电泳，待分离物质在支持介质上分离成若干区带。支持介物质在支持介质上分离成
3、若干区带。支持介质的作用主要是防止电泳过程中的对流和扩质的作用主要是防止电泳过程中的对流和扩散，以使被分离的成分得到最大分辨率的分散，以使被分离的成分得到最大分辨率的分离。区带电泳由于采用的介质不同以及技术离。区带电泳由于采用的介质不同以及技术上的差异，又可分为不同的类型。上的差异，又可分为不同的类型。电泳的分类电泳的分类引引 言言 淀粉凝胶电泳淀粉凝胶电泳：多用于同工酶分析，凝胶铺厚些，可一：多用于同工酶分析，凝胶铺厚些，可一层一层剥层分析（一板多测）。天然淀粉经加工处理即层一层剥层分析（一板多测）。天然淀粉经加工处理即可使用，但孔径度可调性差，并且由于其批号之间的质可使用，但孔径度可调性差
4、，并且由于其批号之间的质量相差很大，很难得到重复的电泳结果，加之电泳时间量相差很大，很难得到重复的电泳结果，加之电泳时间长，操作麻烦，分辨率低，实验室中已很少使用。长，操作麻烦，分辨率低，实验室中已很少使用。琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳：一般用于核酸的分离分析。琼脂糖凝：一般用于核酸的分离分析。琼脂糖凝胶孔径度较大，对大部分蛋白质只有很小的分子筛效应。胶孔径度较大，对大部分蛋白质只有很小的分子筛效应。聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳：可用于核酸和蛋白质的分离、纯：可用于核酸和蛋白质的分离、纯化及检测。其分辨率较高。化及检测。其分辨率较高。v聚丙烯酰胺和琼脂糖是目前实验室最常用的支持介聚丙烯
5、酰胺和琼脂糖是目前实验室最常用的支持介质质引引 言言引引 言言 另外根据支持介质形状不同，区带另外根据支持介质形状不同，区带电泳可分为：电泳可分为：薄层电泳、薄层电泳、板电泳、板电泳、柱电泳柱电泳。据用途不同，可分为：据用途不同，可分为：分析电泳、分析电泳、制备电泳、定量、免疫电泳。制备电泳、定量、免疫电泳。第一节第一节 电泳的基本原理电泳的基本原理 电泳是在电场的作用下而产生的物质运电泳是在电场的作用下而产生的物质运动，不同的物质在一定的电场强度下，动，不同的物质在一定的电场强度下，由于所带电荷不同，因此受到的引力不由于所带电荷不同，因此受到的引力不同，向相反电极泳动速度不同进而达到同，向相
6、反电极泳动速度不同进而达到分离目的。分离目的。.电泳的基本原理电泳的基本原理 在一定在一定pHpH条件下，每一种分子都具有特定条件下，每一种分子都具有特定的电荷（种类和数量）、大小和形状，在的电荷（种类和数量）、大小和形状，在一定时间内它们在相同电场中泳动速度不一定时间内它们在相同电场中泳动速度不同，各自集中到特定的位置上而形成紧密同，各自集中到特定的位置上而形成紧密的泳动带。这就是带电粒子可以用电泳技的泳动带。这就是带电粒子可以用电泳技术进行分离、分析和鉴定的基本原理。术进行分离、分析和鉴定的基本原理。+-带电粒子在电场中的移动与带电粒子在电场中的移动与:粒子大小有关，颗粒直径愈小愈快粒子大
7、小有关，颗粒直径愈小愈快 粒子的电荷有关，电荷愈多愈快粒子的电荷有关，电荷愈多愈快 粒子的形状有关，愈接近球形愈快粒子的形状有关，愈接近球形愈快迁移率还和下列因素有关迁移率还和下列因素有关:1.电场强度电场强度 电场强度是指每厘米的电位降电场强度是指每厘米的电位降 凝胶两端距离凝胶两端距离20厘米，电压降厘米，电压降200伏特，电伏特，电场强度为场强度为10伏特伏特/厘米厘米 电场强度越高电泳速度越快电场强度越高电泳速度越快2.溶液的溶液的PH值值 PH值决定带电颗粒的解离程度，决定物质值决定带电颗粒的解离程度，决定物质所带净电荷的多少所带净电荷的多少3.溶液的离子强度溶液的离子强度 缓冲液的
8、离子强度越高，电泳速度越慢缓冲液的离子强度越高，电泳速度越慢 一般在一般在0.02-0.24.电渗现象电渗现象 在电场中液体对固体支持物的相对移动在电场中液体对固体支持物的相对移动 纸或纤维素带负电荷，使其接触的水溶液纸或纤维素带负电荷，使其接触的水溶液带正电荷，向负极移动。带正电荷，向负极移动。应尽量避免选用有电渗作用的支持物应尽量避免选用有电渗作用的支持物 滤纸或醋酸纤维薄膜滤纸或醋酸纤维薄膜滤纸桥滤纸桥电泳缓冲液电泳缓冲液一、琼脂糖凝胶电泳（水平电泳）一、琼脂糖凝胶电泳（水平电泳）OOOCH2OHHOOHCH2OHHOOn1.具有大量微孔具有大量微孔 孔径大小取决于浓度：孔径大小取决于浓
9、度：0.075%浓度孔径浓度孔径800nm 0.16%浓度孔径浓度孔径500nm 1%浓度孔径浓度孔径150nm2.具有较高的机械强度具有较高的机械强度 可以在可以在1%或更低浓度下使用或更低浓度下使用3.无毒，不需要催化剂无毒，不需要催化剂4.具有热可逆性，低熔点琼脂糖回收样品容易具有热可逆性，低熔点琼脂糖回收样品容易5.生物中性，与别的生物材料结合性低生物中性，与别的生物材料结合性低6.具有高灵敏度放射自显影具有高灵敏度放射自显影7.胶凝温度胶凝温度34-43 熔化温度熔化温度75-90 低熔点琼脂糖胶凝温度低于低熔点琼脂糖胶凝温度低于30 (融化温度高于融化温度高于30)电极缓冲液电极缓
10、冲液TAE:40mM/L Tris-醋酸醋酸 1mM/L EDTA 5：24.2克克Tris 5.7ml冰醋酸冰醋酸 10ml 0.5M/L EDTATBE:45mM/L Tris-硼酸硼酸 1mM/L EDTA 5：54克克Tris 27.5克硼酸克硼酸 10ml 0.5M/L EDTA 样品缓冲液（样品缓冲液（6x）：）：0.25%溴酚蓝溴酚蓝 0.25%二甲苯氰二甲苯氰FF 30%甘油水溶液甘油水溶液 琼脂糖凝胶分离范围琼脂糖凝胶分离范围 琼脂糖浓度琼脂糖浓度%线状线状DNADNA分子分离范围分子分离范围KbKb 0.3 5-60 0.6 1-20 0.7 0.8-10 0.9 0.5-
11、7 1.2 0.4-6 1.5 0.2-3 2.0 0.1-2操作操作1.琼脂糖加电极缓冲液水浴或微波炉融化，加琼脂糖加电极缓冲液水浴或微波炉融化，加 EB终浓度终浓度0.5ug/ml.2.样品端在负极样品端在负极 1-5V/cm 指示剂近凝指示剂近凝胶的另一端胶的另一端3.紫外灯观察条带并拍照紫外灯观察条带并拍照 聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)(PAGE)聚丙烯酰胺凝胶电泳（聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel polyacrylamide gel electrophoresiselectrophoresis，PAGEPAGE）是以）是以聚丙烯酰胺凝胶聚
12、丙烯酰胺凝胶作为支作为支持介质的一种电泳方法。聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度持介质的一种电泳方法。聚丙烯酰胺凝胶具有机械强度好，有弹性，透明，化学性质稳定，对好，有弹性，透明，化学性质稳定，对pHpH和温度变化小，和温度变化小，没有吸附和电渗作用小的特点，是一种很好的电泳支持没有吸附和电渗作用小的特点，是一种很好的电泳支持介质。聚丙烯酰胺凝胶是由介质。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体丙烯酰胺单体（acry-acry-lamidelamide，简称，简称AcrAcr）和）和交联剂交联剂N N，N N-甲叉双丙烯酰胺甲叉双丙烯酰胺（methylane bisacrylamidemethylane bis
13、acrylamide，简称，简称BisBis）在催化剂作用）在催化剂作用下合成的。下合成的。聚丙烯酰胺凝胶电泳按原理和操作形式的不同，主要聚丙烯酰胺凝胶电泳按原理和操作形式的不同，主要有不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳、有不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳和双向电泳等类型。泳、等电聚焦电泳和双向电泳等类型。一、概述一、概述CHCH2 2=CH=CHC=OC=ONHNH2 2CH2=CHCH2=CH C=O C=O NH NH CH CH2 2 NH NH C=O C=O CH CH2 2=CH=CH-CH-CH2 2-CH-CH-CHCH2 2-
14、CH-CH-n nCHCH2 2-CH-CH-C=O C=O C=O C=O NH NH2 2 NH NH CH CH2 2 NH NH C=O C=O-CH-CH2 2-CH-CH-CHCH2 2-CH-CH-n nCHCH2 2-CH-CH-C=O C=O C=O C=O NH NH NH NH2 2丙烯酰胺丙烯酰胺N,NN,N-甲叉双丙烯酰胺甲叉双丙烯酰胺聚丙烯酰胺聚丙烯酰胺二、聚丙烯酰胺凝胶的制备二、聚丙烯酰胺凝胶的制备 聚丙烯酰胺凝胶聚合的催化体系有两种：聚丙烯酰胺凝胶聚合的催化体系有两种：1 1.化学聚合化学聚合 化学聚合的催化剂通常采用化学聚合的催化剂通常采用过硫酸铵过硫酸铵（a
15、mmonium ammonium persulfatepersulfate，ApAp），此外还需要加速剂），此外还需要加速剂TEMEDTEMED（N N，N N，N N，N N-四甲基乙二胺），它能以自由基的形式存在。微量四甲基乙二胺），它能以自由基的形式存在。微量TEMEDTEMED的加入，可使过硫酸铵形成自由基：的加入，可使过硫酸铵形成自由基：S S2 2O O8 82-2-2SO 2SO4 4-这些自由基的产生可引发丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的这些自由基的产生可引发丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的聚合、交联反应，形成有一定平均孔径的聚丙烯酰胺。聚合、交联反应，形成有一定平均孔径的聚丙烯酰胺。.在
16、浓度为在浓度为7.5%7.5%的凝胶中，大多数生物体内的凝胶中，大多数生物体内的蛋白质能得到满意的分离效果。因此，把浓的蛋白质能得到满意的分离效果。因此，把浓度为度为7.5%7.5%凝胶称为标准胶。对于一个未知样凝胶称为标准胶。对于一个未知样品，常用品，常用7.5%7.5%的标准胶或的标准胶或4%-10%4%-10%的凝胶梯度的凝胶梯度来测试，而后选出适宜的凝胶浓度。来测试，而后选出适宜的凝胶浓度。用于研究大分子核酸的凝胶多为用于研究大分子核酸的凝胶多为2.4%2.4%的大的大孔凝胶，此时凝胶太软，不易操作，可加入孔凝胶，此时凝胶太软，不易操作，可加入0.5%0.5%琼脂糖，或在琼脂糖，或在3
17、%3%凝胶中加入凝胶中加入20%20%蔗糖以增蔗糖以增加机械强度而又不影响凝胶孔径大小。加机械强度而又不影响凝胶孔径大小。光聚合通常用光聚合通常用核黄素核黄素为催化剂，核黄素经光为催化剂，核黄素经光照形成无色基，再被痕量氧氧化形成自由基，引照形成无色基，再被痕量氧氧化形成自由基，引发聚合反应。发聚合反应。TEMEDTEMED的存在，可以加速聚合。的存在，可以加速聚合。上述聚合反应受许多因素的影响：上述聚合反应受许多因素的影响：（1 1）大气氧能淬灭自由基，阻止多聚体链长的）大气氧能淬灭自由基，阻止多聚体链长的增加。在进行化学聚合前，一般用减压抽气的办增加。在进行化学聚合前，一般用减压抽气的办法
18、除去溶液中溶解的空气。在胶液表面，往往覆法除去溶液中溶解的空气。在胶液表面，往往覆盖一层水或溶液，隔绝空气，可加速聚合。盖一层水或溶液，隔绝空气，可加速聚合。（2 2）低温、低）低温、低pHpH都会减慢聚合反应速度。都会减慢聚合反应速度。（3 3）有些材料如聚丙烯酸甲酯有机玻璃，一些）有些材料如聚丙烯酸甲酯有机玻璃，一些金属等可抑制聚合反应。金属等可抑制聚合反应。2.2.光聚合光聚合不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳 系统的不连续性表现在以下几个系统的不连续性表现在以下几个方面：方面：1.凝胶由上、下两层凝胶组成，两层凝胶由上、下两层凝胶组成，两层凝胶的孔径不同，上层为大孔径的浓
19、凝胶的孔径不同，上层为大孔径的浓缩胶，下层为小孔径的分离胶。缩胶，下层为小孔径的分离胶。2.缓冲液离子组成及各层凝胶的缓冲液离子组成及各层凝胶的pHpH不不同。电极缓冲液为同。电极缓冲液为pH8.3pH8.3的的Tris-Tris-甘氨甘氨酸缓冲液，浓缩胶为酸缓冲液，浓缩胶为pH6.7pH6.7的的Tris-Tris-HClHCl缓冲液，而分离胶为缓冲液，而分离胶为pH8.9pH8.9的的Tris-HClTris-HCl缓冲液。缓冲液。3.在电场中形成不连续的电位梯度。在电场中形成不连续的电位梯度。在这样一个不连续的系统里，存在在这样一个不连续的系统里，存在三种物理效应，即样品的浓缩效应，三种
20、物理效应，即样品的浓缩效应，凝胶的分子筛效应和电荷效应，由于凝胶的分子筛效应和电荷效应，由于这三种物理效应，使样品分离效果好，这三种物理效应，使样品分离效果好，分辨率高。分辨率高。8.38.38.96.7水平板式电泳槽水平板式电泳槽垂直板式电泳槽垂直板式电泳槽1.1.不连续的聚丙烯酰胺凝胶电泳不连续的聚丙烯酰胺凝胶电泳储备液：储备液：丙烯酰胺丙烯酰胺（30%）14.55克丙烯酰胺，克丙烯酰胺，0.45克甲叉丙烯酰胺，双克甲叉丙烯酰胺，双蒸水溶解，稀释到蒸水溶解，稀释到50ml,棕色瓶储存。棕色瓶储存。浓缩胶缓冲液浓缩胶缓冲液 0.5M/L Tris-HCl,pH6.8分离胶缓冲液分离胶缓冲液
21、1.5M/L Tris-HCl,pH8.8 凝胶配方凝胶配方储存液储存液 凝胶终浓度凝胶终浓度T(C=3%)4%7.5%10%15%20%单体储液单体储液ml 0.65 3.8 5.0 7.5 10.浓缩胶缓冲液浓缩胶缓冲液 0.10分离胶缓冲液分离胶缓冲液 0.3 0.3 0.3 0.3双蒸水双蒸水 4.25 10.9 9.7 7.2 4.710%过硫酸铵过硫酸铵ul 5 15 15 15 15TEMED ul 2.5 7 7 7 7长玻璃板长玻璃板短玻璃板短玻璃板浓缩胶浓缩胶分离胶分离胶不同浓度分离胶分离蛋白质范围：不同浓度分离胶分离蛋白质范围：15%15-45Kd 12.5%15-60K
22、d 10%18-75Kd 7.5%30-120Kd 5%60-210Kd电极缓冲液电极缓冲液 0.025M/L Tris，0.2M/L甘氨酸，甘氨酸，pH8.3样品缓冲液样品缓冲液 0.1M/L Tris-HCl pH6.8 2ml 87%甘油甘油 1ml 溴酚蓝溴酚蓝 1mg 双蒸水双蒸水 加到加到 10ml样品和缓冲液同煮沸，离心，上清加入样品孔样品和缓冲液同煮沸，离心，上清加入样品孔染色和脱色染色和脱色考马斯亮蓝染色考马斯亮蓝染色1.染色液：染色液：考马思亮蓝考马思亮蓝R-250 1.0克克 甲醇甲醇 450ml 冰醋酸冰醋酸 100ml 加加H2O 到到 1000ml2.脱色液：脱色液
23、：甲醇甲醇 100ml 冰醋酸冰醋酸 100ml 加加H2O 到到 1000ml1）考马斯亮蓝染色最小检出蛋白量）考马斯亮蓝染色最小检出蛋白量0.1ug2）小分子多肽用）小分子多肽用G-250效果更好效果更好银染色银染色配液：配液：2.0.36%NaOH 1%柠檬酸 50%甲醇、10%醋酸 1%醋酸2.新配制：新配制：A 0.8克硝酸银溶于4ml H2O中 B 0.36%NaOH 21ml 30%氨水 1.4ml C 将A 滴加到B中，棕色沉淀消失，加H2O到 100ml D 0.5ml 1%柠檬酸、50ul 38%甲醛，家H2O 到 100ml 操作：操作：1.1.50%50%甲醛、甲醛、1
24、0%10%醋酸浸泡醋酸浸泡6060分钟分钟2.2.H H2 2O O漂洗漂洗3030分钟分钟3.3.C C中振荡染色中振荡染色1515分钟分钟4.4.漂洗漂洗5.5.D D中显色（中显色（1010分钟内）分钟内）6.6.1%1%醋酸终止反应醋酸终止反应7.7.H H2 2O O浸泡浸泡6060分钟分钟1 1）银染色蛋白最低检出量）银染色蛋白最低检出量2ng 2ng 2)2)银染主要在胶表面，薄胶效果好。银染主要在胶表面，薄胶效果好。2.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS是阴离子去污剂，带大量的负电荷是阴离子去污剂，带大量的负电荷 SDS和蛋白结合后，抵消了和蛋白结合后，抵消了
25、 蛋白所带电荷蛋白所带电荷的差异，蛋白质只根据分子量大小泳动的差异，蛋白质只根据分子量大小泳动 SDS使亚基解聚使亚基解聚 电极缓冲液、样品缓冲液都加电极缓冲液、样品缓冲液都加SDS 凝胶配方凝胶配方储存液储存液 凝胶终浓度凝胶终浓度T(C=3%)3%5%10%15%20%单体储液单体储液ml 3.4 5 10 15 20浓缩胶缓冲液浓缩胶缓冲液 2.4分离胶缓冲液分离胶缓冲液 7.5 7.5 7.5 7.510%SDS 0.2 0.3 0.3 0.3 0.3双蒸水双蒸水 14 17.2 12.2 7.2 2.2 10%过硫酸铵过硫酸铵ul 10 10 10 10 10TEMED ul 10
26、10 10 10 10SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳测蛋白分子量聚丙烯酰氨凝胶电泳测蛋白分子量分子量对数分子量对数相对迁移率相对迁移率3.制备电泳制备电泳4.转移电泳转移电泳三、等点聚焦三、等点聚焦1.用两性电解质建立电场中连续线性用两性电解质建立电场中连续线性pH梯度梯度2.只适用于两性解离的物质电泳只适用于两性解离的物质电泳pH1018642pI将第一相胶条加到第二相电泳中，走向与 第一相垂直等电聚焦等电聚焦(IEF)pH3.0pH10.0 第一相IEF按pI进行分离SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 （SDS-PAGE）电泳走向 第二相SDS-PAGE 按分子大小分离pH3.0pH10.0+四、双向
27、电泳（四、双向电泳（two dimensional electrophoresis）：）：五、脉冲场电泳五、脉冲场电泳1.大于大于40Kb线性线性DNA用琼脂糖电泳不能分离用琼脂糖电泳不能分离2.脉冲场电泳脉冲场电泳可以解决可以解决A-A+B-B+A-B+A+B-免疫电泳免疫电泳 把电泳技术与免疫扩散结合起来，叫做免疫电泳。把电泳技术与免疫扩散结合起来，叫做免疫电泳。免疫电泳技术是基于免疫电泳技术是基于抗原的电泳迁移以及与抗体的专抗原的电泳迁移以及与抗体的专一性免疫沉淀反应一性免疫沉淀反应。在大部分电泳中，样品中的抗原。在大部分电泳中，样品中的抗原通过含有相应抗体的通过含有相应抗体的pH8.6
28、pH8.6的薄层琼脂糖凝胶，抗原的薄层琼脂糖凝胶，抗原在在pH8.6pH8.6时通常时通常带强负电带强负电，而抗体在此，而抗体在此pHpH不带电，不不带电，不能迁移动。抗原在含有抗体的凝胶中电泳时发生免疫能迁移动。抗原在含有抗体的凝胶中电泳时发生免疫反应。最初，抗原过量，所以仅产生可溶性的免疫混反应。最初，抗原过量，所以仅产生可溶性的免疫混合物，与抗原一起向阳极移动，当抗体与抗原比例合合物，与抗原一起向阳极移动，当抗体与抗原比例合适时就形成大的、不溶性的免疫沉淀。适时就形成大的、不溶性的免疫沉淀。可用于检查蛋白质制剂的纯度，研究抗血清制剂中是可用于检查蛋白质制剂的纯度，研究抗血清制剂中是否具有
29、抗某种已知抗原的抗体，检验两种抗原是否相否具有抗某种已知抗原的抗体，检验两种抗原是否相同等。同等。免疫电泳：免疫电泳：琼脂平板电泳与双向免疫扩散相结合琼脂平板电泳与双向免疫扩散相结合 抗原在琼脂电泳分离，加抗体形成沉淀线抗原在琼脂电泳分离，加抗体形成沉淀线对流免疫电泳对流免疫电泳 在在pH8.6琼脂电泳中，抗体带微弱负电荷，琼脂电泳中，抗体带微弱负电荷，不能抵抗电渗作用，向负极移动。不能抵抗电渗作用，向负极移动。抗原分子小，负电荷多，向正极移动抗原分子小，负电荷多，向正极移动火箭电泳火箭电泳 单向定量电泳单向定量电泳 抗原在含定量抗体琼脂中电泳，二者比例抗原在含定量抗体琼脂中电泳，二者比例合适时，产生火箭型沉淀线，火箭型的高度合适时，产生火箭型沉淀线，火箭型的高度与抗原量成正比。与抗原量成正比。交叉免疫电泳交叉免疫电泳 琼脂平板电泳与火箭电泳相结合琼脂平板电泳与火箭电泳相结合 抗原在琼脂电泳中分离，以分离的抗原以抗原在琼脂电泳中分离，以分离的抗原以原泳动方向原泳动方向90度角泳向含抗体的琼脂中度角泳向含抗体的琼脂中 根据沉淀线的位置和高度确定抗原的质与根据沉淀线的位置和高度确定抗原的质与量。量。谢谢 谢谢
