1、1乙肝治疗的新模式乙肝治疗的新模式 靶向性靶向性CIKCIK治疗肝病技术治疗肝病技术2一、乙肝的流行现状一、乙肝的流行现状3乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(HBV)HBV)感染呈全球性分布感染呈全球性分布20亿人曾感染亿人曾感染HBV，占全球人口占全球人口1/3慢性慢性HBV感染者感染者3.85亿，占全亿，占全球人口球人口6%，其中其中亚洲占亚洲占2/3，中国占中国占1/3 25%40%最终将最终将死于肝硬化或肝癌死于肝硬化或肝癌每年因乙肝每年因乙肝相关死亡相关死亡75万例！万例！4我国乙肝的流行现状我国乙肝的流行现状1 1、我国在世界上属于、我国在世界上属于HBVHBV感染的感染的高发区。流行病学
2、调查显示高发区。流行病学调查显示,我国有我国有6.96.9亿人感染乙肝病毒亿人感染乙肝病毒,超过超过1.21.2亿人携带乙肝病毒。亿人携带乙肝病毒。慢性乙肝病人有约慢性乙肝病人有约30003000万人万人,每年新增乙肝病人数约每年新增乙肝病人数约200200万；万；每年死于肝病的患者约每年死于肝病的患者约3030万万人人 。2 2、乙肝与肝硬化和肝癌的发生密、乙肝与肝硬化和肝癌的发生密切相关。切相关。3 3、突变株的感染越来越多见。、突变株的感染越来越多见。5Yang HI,et al.N Engl J Med,2002累计发生率累计发生率(%)0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10HB
3、sAg(+),HBeAg(+)HBsAg(+),HBeAg(-)HBsAg(-),HBeAg(-)乙型肝炎与发生肝细胞癌的危险性乙型肝炎与发生肝细胞癌的危险性11,893例男性乙肝进展及肝细胞癌发生的研究例男性乙肝进展及肝细胞癌发生的研究121084206年限年限RR=60.2RR=9.66携带者是否需要治疗携带者是否需要治疗n乙肝病毒携带者是乙肝病毒赖以生存和繁殖的宿主，是乙肝乙肝病毒携带者是乙肝病毒赖以生存和繁殖的宿主，是乙肝的重要传染源。的重要传染源。n绝大多数乙肝病毒携带者的肝脏都有轻或重的炎性改变，但绝大多数乙肝病毒携带者的肝脏都有轻或重的炎性改变，但因为肝脏自身的代偿能力很强，所以
4、肝功上表现为正常；对因为肝脏自身的代偿能力很强，所以肝功上表现为正常；对携带者进行肝穿活检，发现携带者进行肝穿活检，发现70%70%为轻型肝炎或非特异性炎症为轻型肝炎或非特异性炎症反应，反应，20%20%为明显活动型肝炎，有的甚至已有肝纤维化、肝为明显活动型肝炎，有的甚至已有肝纤维化、肝硬化，仅硬化，仅10%10%肝组织正常。肝组织正常。n美国的资料显示：美国的资料显示：5 5岁前与岁前与5 5岁后感染岁后感染HBVHBV的携带者，肝硬化的携带者，肝硬化肝癌的发病率分别为肝癌的发病率分别为25%25%和和15%15%。n慢性乙肝携带者也需要积极治疗。慢性乙肝携带者也需要积极治疗。7二、乙肝的治
5、疗现状二、乙肝的治疗现状8n慢性乙型肝炎的总体治疗目标是：最大限度地慢性乙型肝炎的总体治疗目标是：最大限度地长期抑制或消除长期抑制或消除HBVHBV，减轻肝细胞炎症坏死及肝，减轻肝细胞炎症坏死及肝纤维化，延缓和阻止疾病进展，减少和防止肝纤维化，延缓和阻止疾病进展，减少和防止肝脏失代偿、肝硬化、脏失代偿、肝硬化、HCCHCC及其并发症的发生，从及其并发症的发生，从而改善生活质量和延长存活时间。而改善生活质量和延长存活时间。治疗的总体目标治疗的总体目标9 已注册：已注册：-干扰素干扰素 PEG-PEG-干扰素干扰素 拉米夫定拉米夫定 阿德福韦阿德福韦 恩替卡韦恩替卡韦 替比夫定替比夫定研发中：研发
6、中：Emtrictabine(FTCEmtrictabine(FTC)Clevudine(LClevudine(L-FMAU)-FMAU)L-dTL-dTValyl-L-dCValyl-L-dCL-L-Fd4C(ACH-126)-Fd4C(ACH-126)MCC-478(LY582563)MCC-478(LY582563)治疗性疫苗治疗性疫苗目前用于治疗目前用于治疗HBVHBV感染的药物感染的药物10三种抗三种抗HBVHBV一线药物的局限性一线药物的局限性拉米夫定拉米夫定中度抑制病毒中度抑制病毒停止治疗后出停止治疗后出 现病毒反跳现病毒反跳复发率高复发率高耐药性突变多见耐药性突变多见阿德福韦阿
7、德福韦中度抑制病毒中度抑制病毒停止治疗后出停止治疗后出 现病毒反跳现病毒反跳潜在的耐药性突变潜在的耐药性突变潜在的肾毒性潜在的肾毒性尚无持续应答的尚无持续应答的 资料资料常规常规IFN 效果不理想效果不理想给药不便：每周给药不便：每周 注射三次注射三次有一定不良反应有一定不良反应持续应答低持续应答低病毒型别差异明显病毒型别差异明显目前无论是干扰素还是核苷类药物在乙型肝炎的治疗中，目前无论是干扰素还是核苷类药物在乙型肝炎的治疗中，效果均不甚理想。效果均不甚理想。11乙肝病毒乙肝病毒耐药变异的累耐药变异的累计计发生发生概概率率 (阿德福韦或拉米夫定阿德福韦或拉米夫定单药治疗单药治疗)0%10%20
8、%30%40%50%60%70%80%1 年年 2 年年3 年年4 年年阿德福韦耐药阿德福韦耐药 LAM LAM 耐药耐药 0%24%3%42%11%53%70%耐药发生率18%12乙肝病毒基因突变与疾病的关系（乙肝病毒基因突变与疾病的关系（a a）13乙肝病毒基因突变与疾病的关系（乙肝病毒基因突变与疾病的关系（b b）14n cccDNAcccDNA半衰期长，难以降解和清除半衰期长，难以降解和清除n 免疫低应答，尤见于幼年性感染免疫低应答，尤见于幼年性感染n 复制环节多，靶点难以选择复制环节多，靶点难以选择n 存在肝外感染存在肝外感染 如胆管上皮细胞、肾系膜细如胆管上皮细胞、肾系膜细 胞、胰
9、岛细胞和淋巴细胞，病毒储藏库胞、胰岛细胞和淋巴细胞，病毒储藏库n 基因变异或准种性感染基因变异或准种性感染 耐药耐药n 参与免疫应答的免疫细胞数量下降和功能的缺失参与免疫应答的免疫细胞数量下降和功能的缺失慢性慢性HBVHBV感染难治的原因感染难治的原因15慢性乙肝患者的免疫状态慢性乙肝患者的免疫状态n慢性乙型肝炎患者机体呈现一种免疫耐受状态，慢性乙型肝炎患者机体呈现一种免疫耐受状态，表现为免疫应答水平低下或免疫功能缺失，尤其表现为免疫应答水平低下或免疫功能缺失，尤其表现在抗原呈递细胞表现在抗原呈递细胞-树突状细胞（树突状细胞（DC)DC)。n造成这种免疫耐受的原因是患者体内树突状细胞造成这种免
10、疫耐受的原因是患者体内树突状细胞抗原呈递功能的缺陷，所以不能把病毒抗原的信抗原呈递功能的缺陷，所以不能把病毒抗原的信号传递给机体的免疫系统，从而不能诱发特异性号传递给机体的免疫系统，从而不能诱发特异性的的CD8+CTLCD8+CTL反应。反应。16三、乙肝治疗的新模式三、乙肝治疗的新模式 靶向性靶向性CIKCIK治疗技术治疗技术17过继免疫治疗中的过继免疫治疗中的CIKCIK治疗方法治疗方法n 细胞因子诱导的杀伤细胞（细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced cytokine induced killerkiller，CIKCIK）是一种非）是一种非MHCMHC限制性的高效溶肿
11、瘤限制性的高效溶肿瘤细胞毒性细胞毒性T T细胞。细胞。n CIKCIK在外周血淋巴细胞中的比例为在外周血淋巴细胞中的比例为1%1%5%5%，经大，经大量扩增具有杀伤肿瘤和病毒的活性，是目前最新、量扩增具有杀伤肿瘤和病毒的活性，是目前最新、疗效最好的免疫治疗手段。疗效最好的免疫治疗手段。n 国际国内应用国际国内应用CIKCIK细胞治疗技术已经非常成熟。细胞治疗技术已经非常成熟。在我国，多家医疗机构都将其用于治疗肿瘤和病在我国，多家医疗机构都将其用于治疗肿瘤和病毒性疾病。毒性疾病。18树突状细胞树突状细胞(DC)的作用的作用n功能最强的抗原递呈细胞功能最强的抗原递呈细胞,能摄取、加工、及递呈抗原。
12、能摄取、加工、及递呈抗原。n缺乏其他任何刺激因子的条件下启动缺乏其他任何刺激因子的条件下启动T T细胞介导的应答。细胞介导的应答。n将抗原递呈给将抗原递呈给T T细胞，经细胞，经T T细胞识别后即启动细胞识别后即启动MHCIMHCI类限制性细类限制性细胞毒性胞毒性T T细胞应答和细胞应答和MHCIIMHCII类限制性类限制性T T辅助细胞的应答。此外，辅助细胞的应答。此外，DCDC还高水平的的表达一系列共刺激分子，如还高水平的的表达一系列共刺激分子，如CD80CD80、CD86CD86、CD40CD40等，可介导等，可介导DCDC与与T T细胞结合细胞结合 。nDCDC用于病毒的免疫治疗主要是
13、通过体外病毒抗原冲击致敏用于病毒的免疫治疗主要是通过体外病毒抗原冲击致敏DC-DC-CIKCIK，再回输体内，诱导出病毒抗原特异性，再回输体内，诱导出病毒抗原特异性CTLCTL，清除病毒和，清除病毒和杀伤病毒感染的细胞。杀伤病毒感染的细胞。19靶向性靶向性CIKCIK的治疗机理的治疗机理n 免疫细胞能以不同的机制识别病毒感染细胞免疫细胞能以不同的机制识别病毒感染细胞,通过直通过直接的细胞质颗粒穿透封闭的细胞膜进行胞吐，实现对接的细胞质颗粒穿透封闭的细胞膜进行胞吐，实现对病毒感染细胞的裂解；病毒感染细胞的裂解；n 通过诱导细胞凋亡杀伤病毒感染细胞；通过诱导细胞凋亡杀伤病毒感染细胞；n使用乙肝病毒
14、特异性抗原，在使用乙肝病毒特异性抗原，在DCDC呈递抗原的作用下，呈递抗原的作用下，使使CIKCIK细胞成为特异性杀伤乙肝病毒的细胞成为特异性杀伤乙肝病毒的CTLCTL；n CTLCTL分泌分泌IL-2IL-2、IL-6IL-6、IFN-IFN-等多种抗病毒的细胞因等多种抗病毒的细胞因子；子；n CTLCTL细胞释放的某些颗粒酶通过非穿孔素依赖途径进细胞释放的某些颗粒酶通过非穿孔素依赖途径进入靶细胞内，直接杀灭胞内病毒；入靶细胞内，直接杀灭胞内病毒；n 免疫细胞回输后可以绕过体内种种免疫障碍，从而选免疫细胞回输后可以绕过体内种种免疫障碍，从而选择性地操作抗病毒免疫反应；择性地操作抗病毒免疫反应
15、；n 激活机体免疫系统，提高机体的免疫功能；激活机体免疫系统，提高机体的免疫功能；n 免疫细胞的体外活化、扩增可避免体内大量应用一些免疫细胞的体外活化、扩增可避免体内大量应用一些免疫制剂带来的严重毒性反应。免疫制剂带来的严重毒性反应。20CIK的特点和优势的特点和优势n增殖速度快；增殖速度快；n杀病毒活性高；杀病毒活性高；n使用了特异性抗原，可以靶向性杀灭病毒；使用了特异性抗原，可以靶向性杀灭病毒；n对耐药病毒同样敏感；对耐药病毒同样敏感；n杀伤活性不受杀伤活性不受CSACSA、FK506FK506等免疫抑制剂的影响；等免疫抑制剂的影响；n对正常骨髓造血前体细胞毒性很小；对正常骨髓造血前体细胞
16、毒性很小；n细胞的记忆性和长寿命，可以长期在体内发挥特异细胞的记忆性和长寿命，可以长期在体内发挥特异性免疫应答；性免疫应答；n非溶胞机制的存在，可以在清除病毒、消除炎症的非溶胞机制的存在，可以在清除病毒、消除炎症的同时大大降低对感染细胞的损伤。同时大大降低对感染细胞的损伤。21 四、靶向性四、靶向性CIK技术方法技术方法22(一一)技术开展条件技术开展条件23 设备、材料和试剂设备、材料和试剂 n千级超洁净工作间、百级超洁净工作台千级超洁净工作间、百级超洁净工作台n大容量低温离心机、大容量低温离心机、COCO2 2培养箱、倒置显微镜、血细胞分离机、培养箱、倒置显微镜、血细胞分离机、流式细胞仪、
17、化学发光免疫分析仪、彩色多普勒、全自动血液流式细胞仪、化学发光免疫分析仪、彩色多普勒、全自动血液生化分析仪、酶标仪、生化分析仪、酶标仪、DNADNA分析仪、基因突变检测系统分析仪、基因突变检测系统n大容量培养瓶、细胞培养基大容量培养瓶、细胞培养基nGM-CSFGM-CSF、IL-4IL-4、IL-2IL-2、INF-INF-、IL-1IL-1、抗、抗CD3CD3单抗等单抗等 24机构、人员和管理机构、人员和管理符合国家非血缘造血干细胞采集和符合国家非血缘造血干细胞采集和移植技术管理规范移植技术管理规范 n医疗机构基本要求医疗机构基本要求 n人员基本要求人员基本要求 n技术管理基本要求技术管理基
18、本要求 n其他管理要求其他管理要求 25(二二)靶向靶向CIKCIK治疗乙肝的流程治疗乙肝的流程26筛选适合筛选适合CIK治疗的患者治疗的患者建立患者病历并准备建立患者病历并准备治疗前检查治疗前检查单单 采采细胞培养细胞培养回输治疗回输治疗治疗过程中的检查治疗过程中的检查治疗后的疗效评估治疗后的疗效评估27（三）治疗效果（三）治疗效果28病毒学指标病毒学指标在在HBeAgHBeAg(-)(-)病例治疗病例治疗2020周后，周后，HBV-DNAHBV-DNA平均下降超过平均下降超过3.43.4个数量级（个数量级（3.4253.425）；）；在在HBeAgHBeAg(+)(+)患者治疗患者治疗20
19、20周后，周后，HBV-DNAHBV-DNA平均下降超过平均下降超过2.22.2个数量级（个数量级（2.2352.235）。）。经统计学检验，经统计学检验，P P值均小于值均小于0.050.05，这说明治疗效果具有统计学意义。，这说明治疗效果具有统计学意义。29病毒学指标病毒学指标HBV-DNAHBV-DNA指标治疗有效率统计指标治疗有效率统计e（-）患者治疗）患者治疗20周后，周后，100%的患者其的患者其HBV-DNA载量下降；载量下降；e（+）患者治疗）患者治疗20周后，周后，83.53%的患者其的患者其HBV-DNA载量下降。载量下降。30血清学指标血清学指标HBsAg定量指标定量指标
20、在疗程中的变化情况在疗程中的变化情况HBeAgHBeAg(-)(-)患者在治疗患者在治疗2020周后，该指标平均下降周后，该指标平均下降1540.71；HBeAgHBeAg(+)(+)的该指标平均的该指标平均下降下降6702.51 ，配对，配对t t检验结果检验结果 p0.01,p0.01,治疗有显著疗效。治疗有显著疗效。31血清学指标血清学指标HBeAg(+)患者血清学血清学应答情况HBeAgHBeAg（+）患者，在治疗）患者，在治疗2020周后，周后，HBeAgHBeAg应答达到应答达到82.4%82.4%32肝功指标肝功指标 ALTALT超过正常值的患者治疗有效率统计超过正常值的患者治疗
21、有效率统计HBeAgHBeAg(-)(-)患者在治疗患者在治疗2020周后，周后，ALTALT指标治疗有效率达到指标治疗有效率达到100%100%HBeAg HBeAg(+)(+)患者在治疗患者在治疗2020周后，周后，ALTALT指标治疗有效率达到指标治疗有效率达到84.2%84.2%。33肝功指标：肝功指标：A/G患者在治疗过程中患者在治疗过程中A/GA/G比例呈现出总体上升趋势。比例呈现出总体上升趋势。这说明治疗对肝纤维化、肝硬化有明显的抑制作用。这说明治疗对肝纤维化、肝硬化有明显的抑制作用。34n所有的纳入治疗病例在治疗第二十周，即一个周所有的纳入治疗病例在治疗第二十周，即一个周期结束
22、后未见头疼，皮疹，胃肠道反应等。期结束后未见头疼，皮疹，胃肠道反应等。n其中少量患者出现低热，体温为其中少量患者出现低热，体温为37.537.5以下，均以下，均在在6h6h内恢复正常。内恢复正常。n在治疗过程中，有个别谷丙转氨酶一过性升高。在治疗过程中，有个别谷丙转氨酶一过性升高。安全性和副反应事件安全性和副反应事件35总总 结结n利用靶向性利用靶向性CIKCIK治疗慢性乙型肝炎患者二十周后治疗慢性乙型肝炎患者二十周后,病人病人的病毒学指标表现出明显的下降趋势。的病毒学指标表现出明显的下降趋势。n抗原定量结果显示外周血中的表面抗原和抗原定量结果显示外周血中的表面抗原和E E抗原呈现持抗原呈现持
23、续下降。续下降。n生化指标和生化指标和HBV DNAHBV DNA的变化呈现一致下降趋势。的变化呈现一致下降趋势。n患者患者A/GA/G均上升，提示肝功能处于良性循环。均上升，提示肝功能处于良性循环。n结果显示，用基于结果显示，用基于CIKCIK的免疫细胞治疗慢性乙肝可以有的免疫细胞治疗慢性乙肝可以有效抑制效抑制HBVHBV的复制，综合指标显示该疗法完全可以达到的复制，综合指标显示该疗法完全可以达到对乙肝治疗的总体目标。对乙肝治疗的总体目标。36五、靶向性五、靶向性CIKCIK治疗乙肝的有效性、治疗乙肝的有效性、安全性和合法性安全性和合法性37技术有效性技术有效性 n方法的有效性方法的有效性n
24、靶向性靶向性CIKCIK是将人外周血单核细胞在体外用多种是将人外周血单核细胞在体外用多种细胞因子共同培养一段时间后，所获得的一群细胞因子共同培养一段时间后，所获得的一群异质性细胞；异质性细胞；n靶向性靶向性CIKCIK细胞兼具有细胞兼具有MHCMHC限制的特异性限制的特异性T T淋巴细淋巴细胞强大的抗病毒活性和胞强大的抗病毒活性和NKNK细胞的非细胞的非MHCMHC限制性杀限制性杀病毒优点；病毒优点；nCIKCIK的广谱抗病毒和抗肿瘤特性已被多家医疗机的广谱抗病毒和抗肿瘤特性已被多家医疗机构在临床上验证并推广使用。构在临床上验证并推广使用。38技术有效性技术有效性 n增强免疫机能的有效性增强免
25、疫机能的有效性n靶向性靶向性CIKCIK技术中的技术中的DCDC和和CIKCIK能互相调节增加细能互相调节增加细胞因子的释放和细胞活性，提高胞因子的释放和细胞活性，提高CIKCIK的增殖能力的增殖能力和杀伤活性；和杀伤活性；n靶向性靶向性CIKCIK细胞能解除机体免疫抑制，进行免疫细胞能解除机体免疫抑制，进行免疫重建进而增强患者免疫功能；重建进而增强患者免疫功能；nCIKCIK细胞治疗方法被认为是新一代抗病毒过继细细胞治疗方法被认为是新一代抗病毒过继细胞免疫治疗的优秀方案。胞免疫治疗的优秀方案。39技术有效性技术有效性 n靶向性靶向性CIKCIK细胞对细胞对cccDNAcccDNA的清除作用的
26、清除作用 n靶向性靶向性CIKCIK细胞增强了患者自身细胞免疫功能，细胞增强了患者自身细胞免疫功能，可以打破乙肝患者的免疫耐受状态；可以打破乙肝患者的免疫耐受状态；n靶向性靶向性CIKCIK细胞能杀灭游离的乙肝病毒，彻底清细胞能杀灭游离的乙肝病毒，彻底清除肝细胞核以外的除肝细胞核以外的HBVDNAHBVDNA，使核内的，使核内的cccDNAcccDNA缺缺乏补充来源，通过自身代谢得到清除；乏补充来源，通过自身代谢得到清除；n靶向性靶向性CIKCIK细胞清除胞内病毒具有溶胞和非溶胞细胞清除胞内病毒具有溶胞和非溶胞两种机制，使胞内两种机制，使胞内cccDNAcccDNA因受感染的肝细胞死因受感染的
27、肝细胞死亡而得到清除，同时也可以通过多种细胞因子亡而得到清除，同时也可以通过多种细胞因子的免疫功能将其清除。的免疫功能将其清除。40技术有效性技术有效性 n靶向性靶向性CIKCIK细胞阻断肝纤维化细胞阻断肝纤维化 n肝纤维化是各种慢性肝脏疾病的共同终末途径，肝纤维化是各种慢性肝脏疾病的共同终末途径，有炎症就有纤维化，炎症不控制，纤维化程度有炎症就有纤维化，炎症不控制，纤维化程度就会加重；就会加重；n具有长期记忆的靶向性具有长期记忆的靶向性CIKCIK细胞能够不断清除游细胞能够不断清除游离在血中和肝细胞内的乙肝病毒，去除引起肝离在血中和肝细胞内的乙肝病毒，去除引起肝脏炎症的病因；脏炎症的病因；n
28、因此因此CIKCIK细胞回输治疗能极大的激活体内的细胞细胞回输治疗能极大的激活体内的细胞免疫，有效阻断慢性肝炎向肝纤维化、肝硬化免疫，有效阻断慢性肝炎向肝纤维化、肝硬化发展的进程。发展的进程。41技术有效性技术有效性 n靶向性靶向性CIKCIK细胞治疗的长期有效性细胞治疗的长期有效性 nT T细胞寿命较长，从几个月到十几年；细胞寿命较长，从几个月到十几年；nT T细胞与少量抗原作用，细胞与少量抗原作用，4 46 6天内就可以形成天内就可以形成良好的免疫记忆；良好的免疫记忆；n长寿命的记忆性长寿命的记忆性T T细胞在血中不断循环，当再次细胞在血中不断循环，当再次与抗原接触时，能更强烈地引起细胞增
29、殖，短与抗原接触时，能更强烈地引起细胞增殖，短时间内形成大量特异性时间内形成大量特异性CTLCTL细胞，对病原体发生细胞，对病原体发生迅速而特异的杀伤作用。迅速而特异的杀伤作用。42技术安全性技术安全性 n靶向性靶向性CIKCIK细胞的安全性细胞的安全性nCIKCIK细胞治疗是国际上一项成熟的技术；细胞治疗是国际上一项成熟的技术；n靶向性靶向性CIKCIK细胞的输注治疗应用全自动血细胞分离机以细胞的输注治疗应用全自动血细胞分离机以及一次性耗材；及一次性耗材；n采集病人外周血单核细胞，然后在无菌条件下采集病人外周血单核细胞，然后在无菌条件下(1000(1000级级洁净层流实验室，百级生物安全柜洁
30、净层流实验室，百级生物安全柜)，加入多种细胞因，加入多种细胞因子和乙肝特异性抗原进行培养；子和乙肝特异性抗原进行培养；n增殖和活性增强的自体免疫细胞通过静脉回输到病人增殖和活性增强的自体免疫细胞通过静脉回输到病人体内，达到杀伤病毒和增强病人整体免疫机能的目的，体内，达到杀伤病毒和增强病人整体免疫机能的目的，不会产生自体排斥反应，安全性良好。不会产生自体排斥反应，安全性良好。43技术安全性技术安全性 n靶向性靶向性CIKCIK细胞的作用机制和非溶胞途径细胞的作用机制和非溶胞途径 nCTLCTL会分泌多种细胞因子会分泌多种细胞因子(如如干扰素、干扰素、TNF-TNF-等等)，同时可以激活巨噬细胞和
31、同时可以激活巨噬细胞和NKNK细胞释放更多的细胞因子；细胞释放更多的细胞因子；n细胞因子进入感染的肝细胞，抑制乙肝病毒的复制；细胞因子进入感染的肝细胞，抑制乙肝病毒的复制；n降解细胞内病毒核酸和转录产物降解细胞内病毒核酸和转录产物n使病毒核衣壳不能合成使病毒核衣壳不能合成n清除病毒的核衣壳颗粒清除病毒的核衣壳颗粒n分泌颗粒酶进入感染的肝细胞，直接杀死细胞内的乙分泌颗粒酶进入感染的肝细胞，直接杀死细胞内的乙肝病毒，而不破坏肝脏细胞。肝病毒，而不破坏肝脏细胞。44CIK治疗方法的政策依据治疗方法的政策依据n20022002年由年由“中国医药生物技术协会中国医药生物技术协会中国抗癌协会中国抗癌协会”
32、召开的召开的“20022002全国生物治疗学术研讨会全国生物治疗学术研讨会”，四十几，四十几个医学院校和研究所共同制定了个医学院校和研究所共同制定了“CIKCIK治疗常规治疗常规”。n“过继性免疫疗法过继性免疫疗法”作为经常性医疗项目在各省医作为经常性医疗项目在各省医疗收费目录中明确收录，财务分类：疗收费目录中明确收录，财务分类：E E，编码：，编码：310800024310800024，项目名称，项目名称:细胞因子活化杀伤（细胞因子活化杀伤（CIKCIK）细）细胞输注治疗，二级以上医院均可开展胞输注治疗，二级以上医院均可开展 。n医疗机构诊疗科目名录医疗机构诊疗科目名录（见（见 卫生部卫生部
33、 卫医发卫医发19941994第第2727号）有：代码号）有：代码03.03.内科内科,其中有其中有03.0803.08免疫免疫学专业学专业 45六、六、CIKCIK技术在肝病中的广泛应用技术在肝病中的广泛应用46国内对国内对CIK治疗肝病的研究和应用治疗肝病的研究和应用 n北京解放军北京解放军302302医院应用医院应用CIKCIK细胞治疗慢性乙肝细胞治疗慢性乙肝n武汉协和医院应用武汉协和医院应用CIKCIK细胞疗法治疗乙肝细胞疗法治疗乙肝n北大人民医院应用北大人民医院应用CIKCIK细胞疗法治疗乙肝、丙肝细胞疗法治疗乙肝、丙肝n第三军医大学全军免疫学研究所应用基于第三军医大学全军免疫学研究
34、所应用基于 HBVHBV核心抗原核心抗原 CTL CTL 表位的治疗性多肽在体内诱导抗原特异性细胞免疫表位的治疗性多肽在体内诱导抗原特异性细胞免疫应答治疗乙肝应答治疗乙肝n江苏省人民医院应用江苏省人民医院应用CIKCIK细胞疗法治疗肝病细胞疗法治疗肝病n兰州军区总医院应用兰州军区总医院应用CIKCIK细胞疗法治疗肝病细胞疗法治疗肝病47总总 结结n我们以乙肝靶向性我们以乙肝靶向性CIK治疗技术为核心，建立了包括高治疗技术为核心，建立了包括高通量通量HBV基因突变检测及患者感染状态评价体系、靶基因突变检测及患者感染状态评价体系、靶向性向性CIK技术治疗乙肝体系和疗效综合评估体系在内的技术治疗乙肝体系和疗效综合评估体系在内的三大体系。三大体系。n在明确了患者感染特异性和疾病状态的基础上，应用在明确了患者感染特异性和疾病状态的基础上，应用体外扩增并具有靶向性的自体杀伤性体外扩增并具有靶向性的自体杀伤性T细胞回输的方法，细胞回输的方法，进行免疫重建，激活患者自身特异性免疫应答，实现进行免疫重建，激活患者自身特异性免疫应答，实现了乙肝的个体化治疗。了乙肝的个体化治疗。n治疗前后应用多种方法，对多个指标的联合检测，构治疗前后应用多种方法，对多个指标的联合检测，构成了疗效综合评估的科学体系。成了疗效综合评估的科学体系。48
