1、能力目标能力目标知识目标知识目标能够通过临诊检疫对新城疫进行初步诊断能够通过临诊检疫对新城疫进行初步诊断能够通过血凝抑制试验对新城疫进行检疫能够通过血凝抑制试验对新城疫进行检疫掌握新城疫的临诊检疫掌握新城疫的临诊检疫能够对患新城疫病鸡、死鸡及污染的环境能够对患新城疫病鸡、死鸡及污染的环境进行妥善处理。进行妥善处理。掌握血凝和血凝抑制试验掌握血凝和血凝抑制试验 主要内容主要内容主要目的主要目的鸡新城疫的临诊检疫鸡新城疫的临诊检疫鸡新城疫的实验室检疫、检疫后处理鸡新城疫的实验室检疫、检疫后处理鸡新城疫的血凝和血凝抑制试验鸡新城疫的血凝和血凝抑制试验通过临床诊断能对新城疫进行检疫通过临床诊断能对新城
2、疫进行检疫 掌握新城疫掌握新城疫HI/HIHI/HI试验检疫技术试验检疫技术 引入项目引入项目观看幻灯片，请同学们判断是什么病？观看幻灯片，请同学们判断是什么病？幻灯片幻灯片1 1月龄商品代蛋鸡接种强毒后出现神经症状，头颈月龄商品代蛋鸡接种强毒后出现神经症状，头颈后仰或头颈歪曲后仰或头颈歪曲3 3月龄蛋鸡接种强毒后出现月龄蛋鸡接种强毒后出现的神经症状，头颈歪曲的神经症状，头颈歪曲1 1月龄蛋鸡接种强毒后排出月龄蛋鸡接种强毒后排出的绿色稀薄粪便的绿色稀薄粪便1 1月龄蛋鸡接种强毒后出现月龄蛋鸡接种强毒后出现的神经症状死亡鸡，剖检大的神经症状死亡鸡，剖检大脑膜出血脑膜出血1 1月龄蛋鸡接种强毒后出
3、现月龄蛋鸡接种强毒后出现的神经症状死亡鸡，剖检大的神经症状死亡鸡，剖检大脑膜出血斑脑膜出血斑1 1月龄蛋鸡接种强毒后出现月龄蛋鸡接种强毒后出现的神经症状死亡鸡，腺胃部的神经症状死亡鸡，腺胃部分乳头出血，乳头基部黏膜分乳头出血，乳头基部黏膜瘀血瘀血3 3月龄蛋鸡接种强毒后出现月龄蛋鸡接种强毒后出现的神经症状死亡鸡，腺胃黏的神经症状死亡鸡，腺胃黏膜不出形式出血，肠道浆膜膜不出形式出血，肠道浆膜面出血面出血1 1月龄蛋鸡接种强毒后出现月龄蛋鸡接种强毒后出现的神经症状死亡鸡，胸腺有的神经症状死亡鸡，胸腺有出血条带出血条带3 3月龄蛋鸡接种强毒后出现的月龄蛋鸡接种强毒后出现的神经症状死亡鸡，肾脏病变，神
4、经症状死亡鸡，肾脏病变，肾小管尿酸盐沉积产生的花肾小管尿酸盐沉积产生的花斑肾斑肾自然死亡鸡，见腺胃黏膜严自然死亡鸡，见腺胃黏膜严重出血，一些肠段黏膜出现重出血，一些肠段黏膜出现出血和溃疡出血和溃疡病鸡嗉囊内充满酸臭液体，病鸡嗉囊内充满酸臭液体，倒提时从口腔中流出倒提时从口腔中流出病鸡冠发紫，精神委顿病鸡冠发紫，精神委顿有的病鸡表现眼结膜炎，上下有的病鸡表现眼结膜炎，上下眼睑肿胀，结膜充血和出血眼睑肿胀，结膜充血和出血病鸡有神经症状，头颈向一病鸡有神经症状，头颈向一侧扭转侧扭转病鸡有神经症状，头颈向后病鸡有神经症状，头颈向后扭曲扭曲病死鸡皮下和腹腔脂肪出血病死鸡皮下和腹腔脂肪出血盲肠扁桃体出血，
5、肠管浆膜盲肠扁桃体出血，肠管浆膜出血出血肠黏膜严重出血肠黏膜严重出血腺胃黏膜和乳头有点状出血，腺胃黏膜和乳头有点状出血，肌胃也见有出血肌胃也见有出血气管黏膜和气管环出血气管黏膜和气管环出血卵泡严重出血，卵泡破裂后卵泡严重出血，卵泡破裂后可导致腹膜炎可导致腹膜炎病料接种鸡胚，死亡的胚胎病料接种鸡胚，死亡的胚胎全身出血全身出血新城疫病毒的新城疫病毒的HAHA和和HIHI试验试验操练操练为什么有些同学认为是鸡新城疫呢？为什么有些同学认为是鸡新城疫呢？重新观看幻灯片，说出症状与病变。重新观看幻灯片，说出症状与病变。返回返回深化深化通过上述的观看与讨论，请同学们说一说通过上述的观看与讨论，请同学们说一说
6、鸡新城疫的临诊检疫要点？鸡新城疫的临诊检疫要点？患有鸡新城疫时如何处理呢？患有鸡新城疫时如何处理呢？新城疫的临诊检疫要点及处理新城疫的临诊检疫要点及处理新城疫的临诊检疫要点新城疫的临诊检疫要点1 1、主要侵害鸡。不同品种、年龄、性别的鸡都易感，但幼龄鸡更易感。、主要侵害鸡。不同品种、年龄、性别的鸡都易感，但幼龄鸡更易感。秋、冬季多发。感染率、病死率都很高。呈暴发或地方流行性。秋、冬季多发。感染率、病死率都很高。呈暴发或地方流行性。2 2、在少数突然发病，迅速死亡之后，出现多数体温升高，缩颈闭眼，、在少数突然发病，迅速死亡之后，出现多数体温升高，缩颈闭眼，冠暗紫，离群独处。口鼻流出多量黏液，甩头
7、、吞咽，呼吸困难，病冠暗紫，离群独处。口鼻流出多量黏液，甩头、吞咽，呼吸困难，病鸡群中鸡群中“咯咯咯咯”喘鸣此起彼伏。便稀黄绿，混有血丝。肢体麻痹，昏喘鸣此起彼伏。便稀黄绿，混有血丝。肢体麻痹，昏迷死亡。病程迷死亡。病程2-52-5天。天。5 5天以上不死者，神经症状明显，歪头斜颈，旋天以上不死者，神经症状明显，歪头斜颈，旋转运动，后退倒地，共济失调，受刺激时发作加剧。温和型成鸡产蛋转运动，后退倒地，共济失调，受刺激时发作加剧。温和型成鸡产蛋率急剧下降，间有拉稀，病程较长。率急剧下降，间有拉稀，病程较长。3 3、特征性病变、特征性病变 全身浆膜、黏膜出血，尤其消化道、呼吸道最明显。全身浆膜、黏
8、膜出血，尤其消化道、呼吸道最明显。腺胃乳头和肌胃角质层下出血，盲肠扁桃体肿大、出血、坏死，肠黏腺胃乳头和肌胃角质层下出血，盲肠扁桃体肿大、出血、坏死，肠黏膜出血、纤维素性坏死，形成伪膜及溃疡。膜出血、纤维素性坏死，形成伪膜及溃疡。新城疫的处理新城疫的处理1 1、确诊为新城疫的鸡群、可疑鸡只，全部销毁。垃、确诊为新城疫的鸡群、可疑鸡只，全部销毁。垃圾、粪便等焚烧或深埋，笼舍、场地应彻底消毒。圾、粪便等焚烧或深埋，笼舍、场地应彻底消毒。2 2、假定健康鸡全群隔离饲养，并进行紧急免疫接种，、假定健康鸡全群隔离饲养，并进行紧急免疫接种，如在接种观察期内出可可疑鸡只，亦按销毁方法处理。如在接种观察期内出
9、可可疑鸡只，亦按销毁方法处理。观察观察2121天后，对临诊健康，免疫滴度达到天后，对临诊健康，免疫滴度达到2 25 5以上的鸡以上的鸡只，经体不消毒后按健康鸡对待。只，经体不消毒后按健康鸡对待。3 3、发生过新城疫的鸡场半年之内，其鸡只不准出售、发生过新城疫的鸡场半年之内，其鸡只不准出售、外运外运引入项目引入项目鸡新城疫与高致病禽流感在症状与鸡新城疫与高致病禽流感在症状与病变上极为相似，如何区别？病变上极为相似，如何区别？新城疫新城疫HI/HIHI/HI试验检疫技术试验检疫技术操练操练血凝（血凝（HAHA）试验）试验（学生分组操作）（学生分组操作）制备制备0.5%0.5%红细胞液红细胞液操作操
10、作 准备准备9696孔反应板孔反应板 结果判定结果判定 步骤步骤0.5%0.5%红细胞液制备红细胞液制备：从健康鸡：从健康鸡翅静脉采血翅静脉采血2 23ml3ml，加入有抗，加入有抗凝剂的离心管中，然后用灭菌凝剂的离心管中，然后用灭菌生理盐水离心洗涤生理盐水离心洗涤3 3次，第次，第1 1、2 2次次2000r/min2000r/min，离心，离心5min5min，第，第3 3次次3000r/min3000r/min，离心，离心8min8min，洗，洗去血清和白细胞，直至上清液去血清和白细胞，直至上清液完全透明，弃去上清液，取红完全透明，弃去上清液，取红细胞泥细胞泥0.5%0.5%红细胞悬液。
11、红细胞悬液。9696孔反应板的准备孔反应板的准备：将每个孔：将每个孔刷净，置于刷净，置于2%2%盐酸中浸泡盐酸中浸泡2424小小时，长流水漂洗数小时，然后时，长流水漂洗数小时，然后再用蒸馏水冲洗再用蒸馏水冲洗5 5 6 6次，放次，放置置3030恒温箱内干燥（试验前恒温箱内干燥（试验前准备）准备）按表操作，按表操作，置置3737恒温恒温箱中箱中15min15min后后观察结果观察结果结果判定及结果判定及记录记录 孔孔 号号123456789101112病毒稀释倍数病毒稀释倍数212223242526272829210211212生理盐水生理盐水病毒液病毒液0.5%0.5%红细胞红细胞50505
12、05050505050505050505050505050505050505050505050505050505050505050观察观察 弃去50振荡振荡1min1min，3737静置静置20min20min，每，每5 min5 min观察一次，观察观察一次，观察1h1h新城疫新城疫-HA-HA试验加样表（微量法）试验加样表（微量法）新城疫新城疫-HA-HA试验结果判定试验结果判定 “+”“+”表示红细胞完全凝集后沉于孔底，呈颗粒状，边缘不整表示红细胞完全凝集后沉于孔底，呈颗粒状，边缘不整齐或呈锯齿状，液体中无悬浮的红细胞。齐或呈锯齿状，液体中无悬浮的红细胞。“-”-”表示红细胞未凝集，反应
13、孔底部的红细胞沉淀成小圆点，表示红细胞未凝集，反应孔底部的红细胞沉淀成小圆点，位于小孔最底端，边缘水平。位于小孔最底端，边缘水平。“”表示可疑。红细胞下沉情况介于表示可疑。红细胞下沉情况介于“+“+“与与”-”-”之间。之间。新城疫病毒液能凝集鸡的红细胞，但随着病毒液被稀释，其凝新城疫病毒液能凝集鸡的红细胞，但随着病毒液被稀释，其凝集红细胞的作用逐渐变弱。当稀释到一定倍数时，就不能使红细胞集红细胞的作用逐渐变弱。当稀释到一定倍数时，就不能使红细胞出现明显的凝集，从而出现可疑或阴性结果。能使红细胞发生完全出现明显的凝集，从而出现可疑或阴性结果。能使红细胞发生完全凝集的病毒的最大稀释倍数为该病毒的
14、血凝滴度或称凝集价。凝集的病毒的最大稀释倍数为该病毒的血凝滴度或称凝集价。深化深化血凝（血凝（HIHI）试验）试验（学生分组操作）（学生分组操作）制取制取4 4个血凝单位的病毒抗原个血凝单位的病毒抗原操作操作 结果判定结果判定 步骤步骤制取制取4 4个血凝单位的病毒抗原个血凝单位的病毒抗原 如病毒的凝集价为如病毒的凝集价为2 26 6，则将病原病毒液稀释，则将病原病毒液稀释2 24 4倍即为倍即为4 4个血凝单位的病毒抗原。个血凝单位的病毒抗原。4病病毒毒的的血血凝凝滴滴度度病病毒毒抗抗原原应应稀稀释释倍倍数数 用生理盐水稀释病毒抗原，使之含用生理盐水稀释病毒抗原，使之含4 4个血凝单位的病个
15、血凝单位的病毒。稀释倍数按下式计算：毒。稀释倍数按下式计算：孔孔 号号123456789101112病毒稀释倍数病毒稀释倍数212223242526272829210病毒病毒对照对照盐水盐水对照对照生理盐水生理盐水免疫血清免疫血清4 4单位病毒单位病毒505050505050505050505050505050505050505050505050505050505050505050/观察观察 弃去50 振荡振荡1min1min，3737静置静置20min20min0.5%0.5%红细胞红细胞50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 振荡振荡1min1min，373
16、7静置静置20min20min结果举例结果举例-+#-新城疫新城疫-HI-HI试验加样表（微量法）试验加样表（微量法）新城疫新城疫-HI-HI试验结果判定试验结果判定 “一一”表示红细胞不凝集。高浓度的新城疫病毒抗血清能抑制新城疫表示红细胞不凝集。高浓度的新城疫病毒抗血清能抑制新城疫病毒对鸡红细胞的凝集作用，使反应孔中的红细胞呈圆点状沉淀于反应孔病毒对鸡红细胞的凝集作用，使反应孔中的红细胞呈圆点状沉淀于反应孔底端中央，而不出现血凝现象底端中央，而不出现血凝现象 “+”+”表示红细胞完全凝集。随着血清被稀释，它对病毒血凝作用的抑表示红细胞完全凝集。随着血清被稀释，它对病毒血凝作用的抑制减弱。反应
17、孔中的病毒逐渐表现出血凝作用。而最终使红细胞完全凝集，制减弱。反应孔中的病毒逐渐表现出血凝作用。而最终使红细胞完全凝集，沉于反应孔底层，边缘不整或呈锯齿状。沉于反应孔底层，边缘不整或呈锯齿状。“”表示可疑。红细胞凝集情况介于表示可疑。红细胞凝集情况介于“一一”与与“+”+”之间。之间。能使红细胞完全发生凝集抑制的血清最高稀释倍数为该血清的血凝抑能使红细胞完全发生凝集抑制的血清最高稀释倍数为该血清的血凝抑制滴度或抗体的血凝抑制效价，当病鸡或康复鸡血清抗体水平超过制滴度或抗体的血凝抑制效价，当病鸡或康复鸡血清抗体水平超过1ooo1ooo倍倍以上，可判为新城疫感染。以上，可判为新城疫感染。归纳总结归纳总结能力能力知识知识能够通过临诊检疫对新城疫进行初步诊断能够通过临诊检疫对新城疫进行初步诊断能够通过血凝抑制试验对新城疫进行检疫能够通过血凝抑制试验对新城疫进行检疫能够对患新城疫病鸡、死鸡及污染的环境能够对患新城疫病鸡、死鸡及污染的环境 进行妥善处理。进行妥善处理。新城疫的临诊检疫新城疫的临诊检疫血凝和血凝抑制试验血凝和血凝抑制试验 作业作业1 1新城疫的临诊检疫要点新城疫的临诊检疫要点2 HA2 HA、HIHI试验方法、结果分析报告试验方法、结果分析报告
