1、解毒与活血配伍干预解毒与活血配伍干预高脂血症与动脉粥样硬化高脂血症与动脉粥样硬化的临床及机理研究的临床及机理研究张文高张文高 吴吴 敏敏 刘美霞刘美霞刘龙涛刘龙涛 殷镜海殷镜海 孟红艳孟红艳山东中医药大学及附属医院山东中医药大学及附属医院中国中医科学院广安门医院、西苑医院中国中医科学院广安门医院、西苑医院广州中医药大学，山东省立医院广州中医药大学，山东省立医院2009-09-05基金项目资助n高等学校博士学科点专项科研基金高等学校博士学科点专项科研基金（No.20060441002）n中国博士后科学基金中国博士后科学基金 （20070410622）n国家中医药管理局科技计划项目国家中医药管理局
2、科技计划项目 （04-05LP30）n山东省中医管理局科技计划项目山东省中医管理局科技计划项目研究背景与研究思路n高脂血症是高脂血症是动脉粥样硬化动脉粥样硬化（As）主要的病）主要的病理基础理基础nAs导致的心脑血管疾病是当今人类死亡的导致的心脑血管疾病是当今人类死亡的首位原因首位原因nAs易损斑块易损斑块（即（即“不稳定斑块不稳定斑块”）的溃破、）的溃破、出血，随后血栓形成，是引起急性冠脉综出血，随后血栓形成，是引起急性冠脉综合征（合征（ACS）、急性脑梗死等心脑血管病）、急性脑梗死等心脑血管病急症的主要内因急症的主要内因研究背景与研究思路n如何如何调脂调脂、抗抗As、抑制抑制As斑块形成斑
3、块形成和和稳定稳定斑块斑块，对于防治心脑血管疾病、改善其预，对于防治心脑血管疾病、改善其预后有着极重要的价值后有着极重要的价值n多种多种活血化瘀药活血化瘀药有调脂作用，有调脂作用，活血化瘀活血化瘀防防治治As性疾病的疗效已得到公认性疾病的疗效已得到公认n如何进一步如何进一步提高提高活血化瘀药对于此类疾病活血化瘀药对于此类疾病的疗效、的疗效、寻求更有效的中医药治法寻求更有效的中医药治法？值得？值得我们深思。我们深思。研究背景与研究思路nRoss教授教授1999年提出的年提出的“As是一种炎是一种炎症性疾病症性疾病”已得到学术界共识。已得到学术界共识。炎症介炎症介质质在在As斑块的起始、进展以及斑
4、块的易斑块的起始、进展以及斑块的易损性（不稳定性）和最终破裂损性（不稳定性）和最终破裂过程中，过程中，都起着都起着重要作用重要作用。研究背景与研究思路n将这一现代医学新进展联系中医药理论将这一现代医学新进展联系中医药理论和临床，进行中西医结合创新性思考，和临床，进行中西医结合创新性思考，我们认为单纯的活血化瘀对炎症病理环我们认为单纯的活血化瘀对炎症病理环节作用显得不足，提出节作用显得不足，提出从毒邪致病理论从毒邪致病理论对对心血管病急重症心血管病急重症中医病机与治则进行中医病机与治则进行创新探讨创新探讨的思路的思路 研究背景与研究思路n7年前提出，不稳定型心绞痛作为心绞痛年前提出，不稳定型心绞
5、痛作为心绞痛的特殊类型具的特殊类型具有有毒邪致病毒邪致病的特点，的特点，毒损心毒损心络络为为不稳定型心绞痛不稳定型心绞痛的的重要病机，解毒重要病机，解毒为为其其重要治法重要治法；n5年前提出年前提出毒邪损心毒邪损心是是充血性心力衰竭充血性心力衰竭的的重要病机重要病机，通过临床研究验证了益气活血，通过临床研究验证了益气活血解毒的疗效优势；解毒的疗效优势；n后来又提出后来又提出“毒、瘀致易损斑块毒、瘀致易损斑块”和和“解解毒活血法稳定易损斑块毒活血法稳定易损斑块”的假说。的假说。研究背景与研究思路n相应提出相应提出清热解毒与活血化瘀配伍清热解毒与活血化瘀配伍可望可望进一步进一步提高提高对相关疾病的
6、疗效。对相关疾病的疗效。n沿着这一思路，进行了沿着这一思路，进行了解毒与活血解毒与活血配伍，配伍，以及以及解毒与益气活血解毒与益气活血配伍，防治配伍，防治高脂血高脂血症症、颈动脉粥样硬化颈动脉粥样硬化、不稳定型心绞痛不稳定型心绞痛等临床研究和等临床研究和干预干预As斑块斑块、稳定斑块稳定斑块相相关的实验研究。关的实验研究。C57BL株株系系 Jackson 实验室实验室 美国缅因州，世界上最重要的老鼠遗传学研究中心之一 1986-1989年培育出第一只基因敲除小鼠ApoE基因敲除小鼠于1992年培育成功 基因敲除小基因敲除小鼠鼠 ApoE基因敲除小鼠美国科学家于美国科学家于1992年培育成功的
7、年培育成功的载脂蛋白载脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠）基因敲除小鼠，在正，在正常饮食下即可形成明显的高脂血症及弥漫纤维增殖性常饮食下即可形成明显的高脂血症及弥漫纤维增殖性As损伤病灶。成为研究损伤病灶。成为研究As发病机理、干预措施、筛选抗发病机理、干预措施、筛选抗As药物及机理研究较理想的动物模型。药物及机理研究较理想的动物模型。研究背景与研究思路n本课题组从本课题组从2000年开始，在国内外率先年开始，在国内外率先应用应用ApoE基因敲除小鼠开展心血管病中基因敲除小鼠开展心血管病中医、中西医结合基础研究，得到多项基金医、中西医结合基础研究，得到多项基金资助资助 n山东省自然科学基金（山东
8、省自然科学基金（Y2001C14）n国家自然科学基金（国家自然科学基金（30472275）n山东省科技项目（山东省科技项目（200571-6）n高校博士点科研基金（高校博士点科研基金（20060441002）研究背景与研究思路n进行进行血脂康血脂康、脂欣康脂欣康、脉心康脉心康和多种单和多种单味味活血化瘀活血化瘀、清热解毒清热解毒中药以及多种中药以及多种解解毒活血配伍药对毒活血配伍药对对对ApoE基因敲除小鼠降基因敲除小鼠降脂、抗脂、抗As及稳定及稳定As易损斑块作用与机理易损斑块作用与机理研究，为中医药防治高脂血症、研究，为中医药防治高脂血症、As及稳及稳定易损斑块提供了科学依据，也为解毒定易
9、损斑块提供了科学依据，也为解毒与活血配伍抗与活血配伍抗As研究奠定了基础。研究奠定了基础。研究背景与研究思路在此实验研究基础上，结合长期临床经验，在此实验研究基础上，结合长期临床经验，重点研究了若干重点研究了若干解毒与活血配伍的创新解毒与活血配伍的创新药对药对:n虎杖虎杖与与山楂山楂配伍配伍n大黄大黄与与红曲红曲配伍配伍n虎杖虎杖与与芎芍胶囊芎芍胶囊配伍配伍虎杖与山楂虎杖虎杖具有解毒消肿、利湿等功效具有解毒消肿、利湿等功效山楂山楂擅长活血行滞而消积擅长活血行滞而消积两者配伍不仅有前期实验论证的基础，两者配伍不仅有前期实验论证的基础，而且已经应用于临床科研，疗效显著。而且已经应用于临床科研，疗效
10、显著。虎杖与山楂为了深入研究解毒（虎杖）与活血（山楂）为了深入研究解毒（虎杖）与活血（山楂）配伍的调脂、抗配伍的调脂、抗As、稳定斑块作用及其作、稳定斑块作用及其作用机制用机制n临床研究临床研究高脂血症高脂血症 颈动脉粥样硬化斑块颈动脉粥样硬化斑块n实验研究实验研究ApoE基因敲除小鼠腹腔巨噬基因敲除小鼠腹腔巨噬细胞源性泡沫细胞试验细胞源性泡沫细胞试验第一部分第一部分解毒与活血配伍干预高脂血症与动解毒与活血配伍干预高脂血症与动脉粥样硬化的临床研究脉粥样硬化的临床研究一、解毒与活血配伍（虎杖山楂配伍）治疗中老年高脂血症合并脂肪肝的临床研究二、解毒与活血配伍（虎杖山楂配伍）对颈动脉粥样硬化斑块及其
11、稳定性干预作用研究 一、解毒与活血配伍（虎杖山楂配伍）治疗中老年高脂血症合并脂肪肝的临床研究研究方法与内容参照参照血脂异常防治建议血脂异常防治建议标准、标准、非酒非酒精性脂肪性肝病诊断标准精性脂肪性肝病诊断标准及及腹部疾病腹部疾病超声诊断超声诊断制定。制定。本研究纳入病例来自济南市机床二厂集团本研究纳入病例来自济南市机床二厂集团职工及家属。职工及家属。符合上述高脂血症及脂肪肝诊断标准者。符合上述高脂血症及脂肪肝诊断标准者。年龄在年龄在4069岁之间者。岁之间者。诊断标准诊断标准病例来源病例来源纳入标准纳入标准空白对照组空白对照组 20例例 山楂虎杖配伍组山楂虎杖配伍组（活血解毒配伍组）（活血解
12、毒配伍组）虎杖组（解毒组）虎杖组（解毒组）20例例山楂组（活血组）山楂组（活血组）20例例洛伐他汀组洛伐他汀组 20例例分分组组及及治治疗疗方方法法 山楂提取物山楂提取物 虎杖提取物虎杖提取物 山楂提取物及山楂提取物及 虎杖提取物虎杖提取物 洛伐他汀洛伐他汀 不给予药物不给予药物20例例A BC DE虎杖组虎杖组山楂虎杖组山楂虎杖组洛伐他汀组洛伐他汀组 一般体格 检查项目 肾功能指标 Cr BUN TC TG HDL-C LDL-C ALT hs-CRP sICAM-1 sVCAM-1 脂肪肝超声 声像分度药物治疗药物治疗6个月饮食调节个月饮食调节空白组空白组山楂组山楂组观察项目观察项目安全性
13、观察安全性观察疗效性观察疗效性观察临床症状总疗效对血脂的影响降脂疗效 对肝功能的影响 对脂肪肝超声声像分度改善疗效 对炎症因子的影响结 论n解毒活血配伍（虎杖山楂配伍）方案解毒活血配伍（虎杖山楂配伍）方案治疗高脂血症合并脂肪肝疗效可靠，治疗高脂血症合并脂肪肝疗效可靠，n优于单纯解毒（虎杖）或活血（山优于单纯解毒（虎杖）或活血（山楂），楂），n其作用机制与降脂、抗炎和保肝等有其作用机制与降脂、抗炎和保肝等有关。关。二、解毒与活血配伍（虎杖山楂配伍）对颈动脉粥样硬化斑块及其稳定性干预作用研究 颈动脉粥样硬化斑块检测意义 颈动脉粥样硬化的病变程度与心脑血管疾颈动脉粥样硬化的病变程度与心脑血管疾病的发
14、生有直接的相关性病的发生有直接的相关性通过观察颈动脉粥样硬化程度，可客观地通过观察颈动脉粥样硬化程度，可客观地估计以估计以AsAs为病理基础的心脑血管疾病的发为病理基础的心脑血管疾病的发病危险性及治疗效果病危险性及治疗效果颈动脉粥样硬化及斑块的诊断颈动脉内中膜厚度（颈动脉内中膜厚度（IMT）是指动脉内膜和中膜平滑肌的厚度，即由管腔内膜面的前缘是指动脉内膜和中膜平滑肌的厚度，即由管腔内膜面的前缘到中膜平滑肌与外膜交界面前缘的垂直距离。到中膜平滑肌与外膜交界面前缘的垂直距离。稳定性斑块扁平斑扁平斑 硬斑硬斑 软斑软斑 溃疡斑溃疡斑 不稳定性斑块解毒组（虎杖提取物组，A组）活血组（山楂提取物组，B组
15、）解毒活血配伍组（虎杖提取物与山楂提取物配伍组，C组）洛伐他汀对照组（D组）空白对照组（E组）各30例，疗程6个月 解 毒 组（虎 杖 组）活活 血血 组组（山山 楂楂 组组）一 般临 床 资 料I M T,I M T a r e aM I M T,D颈 动 脉 超 声声 像 病 理 分 型颈 动 脉 斑 块超 声 声 像 分 型颈 动 脉 斑 块超 声 检 测 指 标P S V,E D V,V mP I,R I,S R颈 动 脉 血 流 量颈 动 脉血 流 动 力 学免 疫 比 浊 法h s-C P RE L IS A 法s I C A M-1,s V C A M-1炎 症 因 子E L I
16、S A 法M M P-1,T IM P-1基 质 降 解 相 关 因 子斑 块 稳 定 性血 清 指 标常 规 检 测：肝 肾 功、血 糖解解 毒毒 活活 血血 配配 伍伍 组组（虎虎 杖杖 山山 楂楂 配配 伍伍 组组）洛洛 法法 他他 汀汀对对 照照 组组空 白对 照 组各组病例治疗后临床症状总疗效比较 各组病例治疗前后中医症状积分比较 中医症状积分比较中医症状积分比较05101520253035A组B组C组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后*颈动脉粥样硬化斑块超声检测指标比较治疗前后颈动脉内膜中膜厚度比较治疗前后颈动脉内膜中膜厚度比较00.20.40.60.811.21.41.6A组B组C
17、组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后治疗前后颈动脉内膜中膜面积比较治疗前后颈动脉内膜中膜面积比较010203040506070A组B组C组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后治疗前后颈动脉平均内膜-中膜厚度比较治疗前后颈动脉平均内膜-中膜厚度比较00.20.40.60.811.21.41.61.8A组A组B组B组C组C组D组D组E组E组治疗前治疗前治疗后治疗后治疗前后颈动脉内径比较治疗前后颈动脉内径比较012345678A组B组C组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后*#*颈动脉粥样硬化斑块超声检测指标比较 治疗前后颈动脉粥样硬化斑块积分比较治疗前后颈动脉粥样硬化斑块积分比较012345678A组B组C
18、组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后*#*颈动脉粥样硬化斑块超声检测指标比较 颈动脉粥样硬化斑块超声检测指标比较*颈动脉血流动力学检测比较治疗前后收缩期峰值血流速度比较治疗前后收缩期峰值血流速度比较020406080100120A组B组C组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后治疗前后舒张末期血流速度比较治疗前后舒张末期血流速度比较05101520253035A组B组C组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后治疗前后平均血流速度比较治疗前后平均血流速度比较010203040506070A组B组C组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后治疗前后搏动指数比较治疗前后搏动指数比较00.511.522.5A组B组C组D组
19、E组治疗前治疗前治疗后治疗后*颈动脉血流动力学检测比较治疗前后阻力指数比较治疗前后阻力指数比较00.10.20.30.40.50.60.70.80.91A组B组C组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后治疗前后最大剪切率比较治疗前后最大剪切率比较0102030405060708090100A组B组C组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后治疗前后颈动脉血流量比较治疗前后颈动脉血流量比较020406080100120A组B组C组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗后*斑块稳定性血清指标检测 治疗前后血清超敏C反应蛋白水平比较治疗前后血清超敏C反应蛋白水平比较0123456A组B组C组D组E组治疗前治疗前治疗后治疗
20、后*斑块稳定性血清指标检测 治疗前后血清粘附分子水平比较治疗前后血清粘附分子水平比较050100150200250sICAM-1治疗前sICAM-1治疗后sVCAM-1治疗前sVCAM-1治疗后A组A组B组B组C组C组D组D组E组E组*#治疗前后血清基质降解相关因子水平比较治疗前后血清基质降解相关因子水平比较050100150200250MMP-1治疗前MMP-1治疗后TIMP-1治疗前TIMP-1治疗后A组B组C组D组E组#*斑块稳定性血清指标检测 第二部分第二部分 研究结果研究结果斑块稳定性血清指标检测 治疗前后MMP-1/TIMP-1比较治疗前后MMP-1/TIMP-1比较00.10.2
21、0.30.40.50.6治疗前治疗后A组B组C组D组E组#*血压水平比较 治疗前后血压水平比较治疗前后血压水平比较020406080100120140160180SBP治疗前SBP治疗后DBP治疗前DBP治疗后PP治疗前PP治疗后A组B组C组D组E组*治疗前后血脂水平比较治疗前后血脂水平比较01234567TC治疗前后TG治疗前后HDL治疗前后LDL治疗前后A组B组C组D组E组血脂水平比较 *小 结解毒与活血配伍n显著改善患者症状显著改善患者症状n显著减小颈动脉显著减小颈动脉IMTIMT、IMTareaIMTarea、MIMTMIMT、斑块、斑块积分，增大管腔内径，缓解管腔狭窄程度，积分，增大
22、管腔内径，缓解管腔狭窄程度，改善颈动脉斑块超声病理分型及颈动脉血流改善颈动脉斑块超声病理分型及颈动脉血流动力学动力学n具有调脂、降压、抗炎（降低具有调脂、降压、抗炎（降低hshs-CRP-CRP、sICAM-1sICAM-1、sVCAM-1sVCAM-1）、减少细胞外基质降解）、减少细胞外基质降解（降低（降低MMP-1MMP-1及及MMP-1/TIMP-1MMP-1/TIMP-1比值）等作用比值）等作用小 结n解毒与活血配伍具有抗动脉粥样硬化、稳定斑块的作用n解毒与活血配伍疗效优于单纯解毒组、活血组及洛伐他汀组第二部分第二部分解毒与活血配伍干预解毒与活血配伍干预载脂蛋白载脂蛋白E E基因敲除小
23、鼠动脉基因敲除小鼠动脉粥样硬化泡沫化细胞形成机制研究粥样硬化泡沫化细胞形成机制研究 一、解毒与活血配伍（虎杖山楂配伍）干预载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化泡沫化细胞形成的炎症机制研究 二、从PPAR、ABCA1、CD36途径探讨解毒活血中药配伍干预载脂蛋白E基因敲除小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞的分子机制nApoE基因敲除小鼠的腹腔巨噬细胞基因敲除小鼠的腹腔巨噬细胞较普较普通小鼠更容易摄取通小鼠更容易摄取ox-LDL而形成泡沫细而形成泡沫细胞，是进行体外培养巨噬细胞源性泡沫胞，是进行体外培养巨噬细胞源性泡沫细胞研究的理想选择。细胞研究的理想选择。n单核巨噬细胞经外源性致炎物质脂多糖单核巨噬细胞经外
24、源性致炎物质脂多糖（LPS）激活，摄取）激活，摄取ox-LDL，并吞噬大，并吞噬大量脂质形成泡沫细胞，是早期量脂质形成泡沫细胞，是早期As的标志。的标志。一、解毒与活血配伍（虎杖山楂配伍）干预载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化泡沫化细胞形成的炎症机制研究技技 术术 路路 线线这部分工作明天上午将由刘美霞、刘龙涛博士汇报IL-1含量含量TNF-含量含量NF-B蛋白表达蛋白表达TLR4蛋白表达蛋白表达结结 论论 n解毒活血中药配伍能显著减少解毒活血中药配伍能显著减少ox-LDL、LPS诱导诱导的的ApoE基因敲除小鼠腹腔巨噬细胞源性泡沫细胞基因敲除小鼠腹腔巨噬细胞源性泡沫细胞内内TLR4的表达，的
25、表达，n抑制抑制NF-B的激活，的激活，n进而减弱进而减弱TLR4/NF-B信号途径及信号途径及IL-1、TNF的合成与释放，的合成与释放，n抑制炎症反应，干预巨噬细胞泡沫化，延缓抑制炎症反应，干预巨噬细胞泡沫化，延缓As的的发生与发展；发生与发展；n解毒活血配伍的上述作用优于罗格列酮，也优于解毒活血配伍的上述作用优于罗格列酮，也优于单纯解毒或活血。单纯解毒或活血。二、从PPAR、ABCA1、CD36途径探讨解毒活血中药配伍干预载脂蛋白E基因敲除小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞的分子机制PPAR、CD36与与ABCA1n过氧化物酶体增殖物激活受体过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）调）调控体系是目前
26、控体系是目前As研究中的热点之一。研究中的热点之一。PPAR属于核受体超家族中属于核受体超家族中PPARs家族的成员，是家族的成员，是配体依赖性的转录因子，在调节脂质代谢、配体依赖性的转录因子，在调节脂质代谢、脂肪细胞分化和能量代谢中起关键性作用。脂肪细胞分化和能量代谢中起关键性作用。PPAR、CD36与与ABCA1nB类清道夫受体类清道夫受体CD36、三磷酸腺苷结合盒转、三磷酸腺苷结合盒转运子运子A1(ABCA1)都是都是PPAR转录调控的下转录调控的下游靶基因。游靶基因。nPPAR配体调控网络已被证实具有抗配体调控网络已被证实具有抗As作用。作用。近年研究表明近年研究表明PPAR可通过其活
27、化后对下游可通过其活化后对下游靶基因靶基因CD36、ABCA1转录水平调控及相关转录水平调控及相关细胞因子的释放来影响细胞因子的释放来影响As泡沫细胞的形成。泡沫细胞的形成。研究方法 PPAR上游引物为上游引物为5-CCC TGG CAA AGC ATT TGT AT-3，下游引物为下游引物为5-AAT CCT TGG CCC TCT GAG AT-3（403bp）；）；ABCA1上游引物为上游引物为5-CAG ATG CCC TAC CCC TGT TA-3，下游引物为下游引物为5-GGG AGA AGA GCG TGC TAA TG-3（364bp）；）；CD36 上游引物为上游引物为5-
28、CCT TAA AGG AAT CCC CGT GT-3，下，下游引物为游引物为5-CCA ATG GTC CCA GTC TCA TT-3（418bp）；）；-actin上游引物为上游引物为5-TCC TCC CTG GAG AAG AGC TA-3，下，下游引物为游引物为5-TCA GGA GGA GCA ATG ATC TTG-3（302bp）。）。各引物序列细胞总细胞总RNARNA提取及提取及RT-PCRRT-PCR反应均采反应均采用用RT-PCRRT-PCR检测细胞因子试剂盒（购自检测细胞因子试剂盒（购自上海生工生物工程技术有限公司）。上海生工生物工程技术有限公司）。收集收集1071
29、07细胞沉淀提取细胞总细胞沉淀提取细胞总RNARNA，取取1ug1ug逆转录成逆转录成cDNAcDNA，进行，进行PCRPCR扩增扩增（所有操作均严格按照试剂盒说明书（所有操作均严格按照试剂盒说明书进行）。进行）。9494度度1 1分钟，分钟，5858度度1 1分钟，分钟，7272度度 1 1分钟，共分钟，共3535个循环，最后个循环，最后7272度延长度延长7 7分钟。分钟。取各基因扩增产物取各基因扩增产物10ul10ul，经，经琼脂糖凝胶琼脂糖凝胶电泳电泳，溴化乙锭染色，多功能紫外投射反射，溴化乙锭染色，多功能紫外投射反射分析仪下观察并拍照，采用美国分析仪下观察并拍照，采用美国KodakK
30、odak凝胶分凝胶分析系统，应用析系统，应用1 D Image Analysis Software1 D Image Analysis Software进行产物灰度图像分析，以各基因与进行产物灰度图像分析，以各基因与-actinactin的电泳条带光密度值的比值作为各基因的电泳条带光密度值的比值作为各基因的相对表达量。的相对表达量。研究结果1 解毒活血中药配伍对解毒活血中药配伍对ApoEApoE(-/-)(-/-)小鼠巨噬细胞小鼠巨噬细胞PPARmRNAPPARmRNA表达的影响表达的影响研究结果 1#与模型组比较 与解毒活血配伍组比较 研究结果2 解毒活血中药配伍对解毒活血中药配伍对ApoE
31、ApoE(-/-)(-/-)小鼠巨噬细胞小鼠巨噬细胞ABCA1mRNAABCA1mRNA表达的影响表达的影响 解毒活血中药配伍对解毒活血中药配伍对ApoEApoE(-/-)(-/-)小鼠巨噬细胞小鼠巨噬细胞ABCA1mRNAABCA1mRNA表达的影响表达的影响#与解毒活血配伍组比较 与模型组比较#研究结果3 解毒活血中药配伍对解毒活血中药配伍对ApoEApoE(-/-)(-/-)小鼠巨噬细胞小鼠巨噬细胞CD36mRNACD36mRNA表达的影响表达的影响 研究结果3 解毒活血中药配伍对解毒活血中药配伍对ApoEApoE(-/-)(-/-)小鼠巨噬细胞小鼠巨噬细胞CD36mRNACD36mRN
32、A表达的影响表达的影响#与解毒活血配伍组比较#小 结n用用ox-LDL、LPS刺激刺激ApoE(-/-)小鼠腹小鼠腹腔巨噬细胞，可以诱导泡沫细胞的形成，腔巨噬细胞，可以诱导泡沫细胞的形成，n细胞内细胞内PPAR、ABCA1、CD36的的mRNA表达均显著增高。表达均显著增高。小 结n与模型组比较，与模型组比较，n以洛伐他汀、罗格列酮作为对照，以洛伐他汀、罗格列酮作为对照，n以解毒中药虎杖、活血中药山楂及其配伍作以解毒中药虎杖、活血中药山楂及其配伍作为主要研究药物进行干预为主要研究药物进行干预48h后，后，n各用药组各用药组PPAR、ABCA1的的mRNA表达均表达均显著增高，显著增高，n各用药
33、组各用药组CD36mRNA的表达显著降低，的表达显著降低，n解毒活血配伍组优于单纯解毒组、活血组及解毒活血配伍组优于单纯解毒组、活血组及洛伐他汀组，相当于或优于罗格列酮组。洛伐他汀组，相当于或优于罗格列酮组。研究提示n解毒活血中药配伍具有与罗格列酮相似的解毒活血中药配伍具有与罗格列酮相似的PPAR激激动作用，动作用，n可能通过激活可能通过激活PPAR，从转录水平调节下游靶基因，从转录水平调节下游靶基因CD36、ABCA1及炎症因子的表达，及炎症因子的表达，n干预干预ox-LDL-PPAR-CD36与与ox-LDL-PPAR-ABCA1两条信号通路，使两条信号通路，使ABCA1mRNA表达上调、
34、表达上调、CD36mRNA表达下调，表达下调，n从而起到显著抑制巨噬细胞泡沫化过程，最终达到从而起到显著抑制巨噬细胞泡沫化过程，最终达到抗抗As的作用。的作用。n解毒活血中药配伍有望成为中医药领域抗解毒活血中药配伍有望成为中医药领域抗As泡沫细泡沫细胞形成的新型药物。胞形成的新型药物。结结 语语临床研究表明临床研究表明n虎杖与山楂配伍所体现的解毒活血配伍方案，虎杖与山楂配伍所体现的解毒活血配伍方案，干预高脂血症、颈动脉粥样硬化等，临床疗干预高脂血症、颈动脉粥样硬化等，临床疗效突出，效突出，n并具有降脂、抗并具有降脂、抗As、抑制及稳定斑块等作用，、抑制及稳定斑块等作用，n初步阐明其抗炎、调脂、
35、减少细胞外基质降初步阐明其抗炎、调脂、减少细胞外基质降解、降压与改善血流动力学等作用机理，解、降压与改善血流动力学等作用机理，n显著优于单纯活血或解毒。显著优于单纯活血或解毒。结结 语语基础实验研究表明，该解毒活血配伍药对基础实验研究表明，该解毒活血配伍药对抑制巨噬细胞泡沫化、抗抑制巨噬细胞泡沫化、抗As作用的机制，作用的机制，n一方面是通过抑制泡沫细胞内一方面是通过抑制泡沫细胞内TLR4的表的表达，抑制达，抑制NF-B的激活，进而减弱的激活，进而减弱TLR4/NF-B信号途径及信号途径及IL-1、TNF的合成与释放，从而抑制炎症反应；的合成与释放，从而抑制炎症反应；结结 语语n另一方面具有与
36、罗格列酮相似的另一方面具有与罗格列酮相似的PPAR激动作用，其可能通过激活激动作用，其可能通过激活PPAR，从，从转录水平调节下游靶基因转录水平调节下游靶基因CD36、ABCA1及炎症因子的表达，干预及炎症因子的表达，干预ox-LDL-PPAR-CD36与与ox-LDL-PPAR-ABCA1两条信号通路，使两条信号通路，使ABCA1mRNA表达上调、表达上调、CD36mRNA表达下调。表达下调。结结 语语n解毒活血配伍解毒活血配伍对这两方面机制的几乎所对这两方面机制的几乎所有指标的作用均有指标的作用均显著优于单纯解毒或活显著优于单纯解毒或活血血。n这些抗炎途径调控机制不仅抑制这些抗炎途径调控机
37、制不仅抑制As形成形成与发展，对干预与发展，对干预As斑块易损性、促使斑斑块易损性、促使斑块稳定也可望发挥重要作用。块稳定也可望发挥重要作用。结结 语语n解毒与活血两者配伍，对解毒与活血两者配伍，对提高活血化瘀疗法提高活血化瘀疗法的疗效的疗效有重要价值，有重要价值，n可望更好地发挥中医药可望更好地发挥中医药多途径多途径、多环节多环节、多多靶点靶点干预病理过程的优势，干预病理过程的优势，n有助于提高其干预有助于提高其干预As形成、发展和稳定易损形成、发展和稳定易损斑块的效果，斑块的效果，n为为虎杖山楂虎杖山楂这这一新的药对一新的药对和和解毒活血配伍治解毒活血配伍治法法用于防治用于防治As性疾病特别是与斑块不稳定相性疾病特别是与斑块不稳定相关的心脑血管急症，提供了科学依据。关的心脑血管急症，提供了科学依据。
