1、第43届药物制剂论坛暨胶囊制剂技术专题研讨会 巴戟天寡糖胶囊新工艺、新规格研究 盐酸苯环壬酯口腔崩解片的研究 盐酸二甲双胍肠溶胶囊的研究 结肠息肉预防和治疗的美洛昔康肠溶胶囊的研究 酒石酸美托洛尔缓释胶囊的研究汇报纲要汇报纲要研究的趋势：研究的趋势：中药现代化已成为提升我国中药制造水平以及将中药推向世界的必由之路。中药提取物的成型工艺研究是中药现代化的内容之一。多糖类的中药提取物占据中草药研究内容的一大部分。问题的提出：问题的提出：中药多糖普遍存在严重的吸湿问题，巴戟天寡糖是这一问题典型的代表，采用传统工艺，必须进行疏水化处理并用大量的赋形剂进行稀释，才使制剂成型成为可能。这样客观上造成制剂的
2、剂量偏大，增加了成本和服药量，与制剂“三小”、“三效”的现代发展趋势不相称。解决的方案：解决的方案：流化床是一种现代化的药物制剂工艺设备，由于它具有独特的制药功能而在中药造粒上有重要意义。通过该技术手段制备颗粒，可将传统的混合、制软材、制粒、干燥、整粒等单元操作于一体，一次成型。更为重要的是，采用流化床顶喷制粒技术，可使中药多糖提取物无需浓缩、固化，在严格控制溶液密度的前提下，直接以雾滴的方式喷于赋形剂表面上，这样可能避免多糖遇水变硬的难题，在赋形剂 用量较少的情况下，可能会顺利成型。实验的目的：实验的目的：本研究针对上述问题，以巴戟天寡糖为多糖药物模型，探索多糖提取物的流化床成型工艺，重点考
3、察该工艺的可行性以及赋形剂的最小用量限度。巴戟天水提取物：北京同仁堂股份有限公司 微晶纤维素：PH102，日本旭化成株式会社流化床：GPGC1型，德国GLATT公司 粉末基础物性测定仪：天津药物研究所 影响胶囊质量的关键工艺指标是颗粒的流动性及颗粒的粒经大小，它直接影响胶囊能否顺利灌装以及灌装能否均一。本文采用流化床进行巴戟天寡糖胶囊成型工艺研究，以作为指标来反映工艺的合理性。颗粒的流动性指数是休止角、抹角、压缩度、均一度等各参数的统颗粒的流动性指数是休止角、抹角、压缩度、均一度等各参数的统计学加和值：计学加和值：休止角是颗粒动态摩擦系数的反应，它与粒子形态、粒子含水量、表面电性质、粒度分布情
4、况等因素有关，休止角小的颗粒流动性好。抹角反应的是物料静态摩擦系数的大小，抹角越大，说明颗粒间相互作用力越大，流动性越差。压缩度反应的是可伸缩性和填充性，其值越小则填充性能越好。颗粒大小的均匀程度用均一度值表现，均一度一般1，越接近1越好，均匀性好的颗粒。上述参数只是从某一个侧面反映了微粒的流动性能，只有将上述参数综合考虑，才能对粉末的流动性有一个全面客观的评价。利用统计学知识将上述各参数进行标准化，用一个指数代替参数的具体数值，将各个参数对应的指数相加得到了一个总的指数，即。FI值是综合了休止角、抹角、压缩度和均一度结果在内的一个人为规定指数，它是对颗粒流动性全面客观的反映。FI值越高，流动
5、性越好。当FI60时，颗粒流动性较差，胶囊灌装时可能会出现“架桥”现象，影响胶囊装量的均一性。颗粒的流动性需要通过粉体物性测定仪的测量得到。它是休止角、抹角、松密度、轻敲密度、压缩度、均一度，经量化评估后得到的综合结果。采用固定圆锥底法，取一定量的待测颗粒，在一定振动强度下使颗粒通过漏斗均匀流出，直至获得最高的圆锥体为止，测量圆锥体斜面与平面的夹角即得，重复三次，取其平均值。待测颗粒置于测定仪上，将升降台缓慢降下，测定物料斜面与抹板的角度，给予一固定强度的振动后，再次测量这一角度，平均两值即为抹角，重复实验三次，取平均值。在一定的振动频率下，使物料均匀流入100ml杯中，用刮片刮掉杯上多余的物
6、料，称重，物料的重量除以100为松密度。将100ml杯子套上杯套，加入物料，置撞击台上撞击180次，边撞击边加入物料，取下杯套，刮下多余颗粒，称重，该重量除以100即为轻敲密度。压缩度按下面公式计算而得：压缩度=（1 松密度/轻敲密度）100%将一系列筛网按孔径大小置于粉末物性测定仪的振动台上，取10g待测物料，在100HZ的机械强度下振动10min，测定不同目筛网上滞留物料的重量，计算累积筛下重量百分比，在粒度分布图上得到累积筛下重量百分比为10%、50%、60%的粉体粒径D50、D10、D60。D60/D10的值为均一度，D50为其平均粒径。Tab.1 The Effects of Inl
7、et Air Temperature on Granule Properties进风温度()流动性参数总评流动性指数FI平均粒经D50(m)休止角(度)抹角(度)压缩度(%)均一度354848212.965325403653212.274230453454181.981200 通过对进风温度的考察，可以看到随着进风温度的降低，平均粒径逐渐增加。当进风温度为35时，颗粒粒径最大，同时颗粒的均一度值最大，说明粒径均匀性差。此时，FI指数最低，表明水分的蒸发效率不足，一部分颗粒发生粘连。当进风温度增高至40以上后，蒸发效率变高，均一度值明显减小，流动性变好。结果见表1。可见，进风压力(bar)流动性
8、参数总评流动性指数FI平均粒经D50(m)休止角(度)抹角(度)压缩度(%)均一度23343752201.978220455259193.160120Tab 2 The Effects of Air Volume on Granule Properties 进风压力决定着物料的流化状态，流化状态又影响着物料混合的均匀性及颗粒形态的好坏。由于气源压力的变化和过滤袋的振动，进风量会在一定范围内波动。本次实验结果见表2。在低进风压力：2bar-3bar时，风量过低，物料没有被充分流化，上下层物料的润湿几率不同，同时由于热量没有即时排出，制粒之初，物料温度及出风温度一直居高不下，随着水量的加入，最终物
9、料在锅底形成浆状物。在高进风压力：4bar-5bar时，风量太大，粉末间难于充分接触，导致颗粒的粒经偏小，均一度较差，流动性偏低。实验表明：。喷液速率(rpm)流动性参数总评流动性指数FI平均粒经D50(m)休止角(度)抹角(度)压缩度(%)均一度154157162.272147203853181.874230253851181.977325303953222.471355Tab3 The Effects of Spray Rate on Granule Properties 不同的喷液速率对制粒影响的结果见表3。随着喷液速率的增加，流动性指数变化并不明显，但粒径明显增大。当喷液速率达到30r
10、pm时，物料过湿而发生部分颗粒相互粘连现象。其原因可能是在喷液速率过高时，成颗粒的芯核增长速度过快，芯核形成后，流化时间过短，颗粒干燥不彻底导致相互粘连。为控制芯核的增长速度，防止粘连，应采取，使粒子获得较佳的表面形态。雾化压力(bar)流动性参数总评流动性指数FI平均粒经D50(m)休止角(度)抹角(度)压缩度(%)均一度1.24152203.1613501.54150202.3762552.04051192.1782202.5Tab4 The Effects of Spray Nozzle Pressure on Granule properties 雾化压力决定着喷雾液滴的大小，雾化压力
11、越大，液滴被剪切得越细小。制粒对喷雾液滴的要求比较严格，结果见表4。当雾化压力为 1.2bar时，喷雾状态不佳，粘合剂多以大液滴形式从喷嘴射出，颗粒粒经增大且均一度较差，颗粒流动性指数偏小。当雾化压力在1.5bar时，物料表面可被液滴均匀润湿，颗粒的平均粒经变小，均一度变好，流动性指数增高。当雾化压力在2.0bar时，颗粒的粒经变小，均一度变好但不明显，流动性指数增高但不显著。当雾化压力升高至2.5bar以后，喷嘴压力过大，物滴喷射时冲击力太强，粘合剂密集于底筛中央，导致物料粘筛，通过筛网的风量下降，制粒难于继续进行。结果表明：本文通过对流化床工艺参数进行单因素考察，优化出中药巴戟天寡糖胶囊颗
12、粒一次成型的主要工艺参数:选用上述工艺参数可以制备出粒经均一的巴戟天寡糖颗粒，能够顺利完成胶囊的灌装。性能指标流化床工艺传统湿法工艺规格150mg50mg颗粒流定性指数7863颗粒均一性1.493.11颗粒平均粒经230m345m胶囊装量225mg200mg崩解时间8min22min水分含量3.275.48考察条件新规格（150mg/粒）旧规格（50mg/粒）常温、常湿，05天，胶囊裸置1.711.15常温、常湿，10天，胶囊裸置2.111.38RH75%，05天，胶囊裸置5.362.57RH75%，10天，胶囊裸置8.714.38RH92.5%，05天，胶囊裸置20.8815.77RH92.
13、5%，10天，胶囊裸置21.4920.85 考察条件新规格（150mg/粒）旧规格（50mg/粒）常温、常湿，05天，泡罩密封0.050.07常温、常湿，10天，泡罩密封0.070.06RH75%，05天，泡罩密封1.111.45RH75%，10天，泡罩密封1.211.57RH92.5%，05天，泡罩密封2.182.47RH92.5%，10天，泡罩密封2.492.25 本文探索了流化床顶喷制粒技术在中药制剂成型工艺上的应用。以巴戟天本文探索了流化床顶喷制粒技术在中药制剂成型工艺上的应用。以巴戟天水提取物为中药模型，优化出流化床顶喷制粒的工艺参数，并对巴戟天寡糖新水提取物为中药模型，优化出流化床
14、顶喷制粒的工艺参数，并对巴戟天寡糖新规格进行相应性质的考察，显示出该工艺在中药造粒上的实用性：规格进行相应性质的考察，显示出该工艺在中药造粒上的实用性：流化床制粒技术流化床制粒技术在中药制粒上的应用成果在中药制粒上的应用成果品 名：盐酸苯环壬酯口腔崩解片申请分类：新药注册分类：化药5(新剂型)规 格：2mg适 应 症：用于预防晕车、晕船、晕机进 度：完成临床前研究完成临床前研究它的出现被誉为是药品技术的一大革命，即，固体制剂具有液体制剂的起效速度，且服用极为方便，它既可象普通片用水吞服，又可象分散片、泡腾片置于水中迅速分散后送服，还可不需用水置口腔中用唾液吞咽，特别适用于儿童患者、老年患者、吞
15、咽困难患者、取水不方便患者、以及服药顺应性差的患者。19981998年，年，FDAFDA的的CDERCDER命命名委员会首次将该类产品定义为一种新的剂型名委员会首次将该类产品定义为一种新的剂型口口腔崩解片腔崩解片(Orally disintegrating tablet(Orally disintegrating tablet，ODT)ODT)。其定义如下：口腔崩解其定义如下：口腔崩解片是一种含药的固体制剂，当放在舌面上时，可以迅速地、通常在几秒钟内崩片是一种含药的固体制剂，当放在舌面上时，可以迅速地、通常在几秒钟内崩解。解。口腔崩解片是口服给药的新型方式，西方发达国家特别口腔崩解片是口服给药
16、的新型方式，西方发达国家特别关注和重点发展。关注和重点发展。FDAFDA首次将该类产品定义为新剂型首次将该类产品定义为新剂型上世纪90年代初，为提高药物使用的方便性，解决特定适应症和特殊患者人群的用药顺应性，制药企业开发了一类只需放在舌面上就可以咽下的产品。该指导原则首先对该原则发布的背景进行了说明，然后对口腔崩解片研发中需要考虑的技术要点进行了讨论，还给出了崩解时限测定方法的建议。美国是对口腔崩解片最推崇的国家，美国是对口腔崩解片最推崇的国家，20072007年年4 4月月6 6日日,FDA,FDA首次给出关于口腔崩解片的技术指导原则首次给出关于口腔崩解片的技术指导原则可见，经济越是发达的国
17、家越是注重给药方式的技可见，经济越是发达的国家越是注重给药方式的技术升级。美国是药品消费最大的国家，人们已经将术升级。美国是药品消费最大的国家，人们已经将药品不仅仅看作是治病救命的手段，而已将其纳入药品不仅仅看作是治病救命的手段，而已将其纳入生活消费的范畴，更加注重服药质量的改善和提高。生活消费的范畴，更加注重服药质量的改善和提高。针对改善服药质量问题，我们与国外基本同步，系统开展针对改善服药质量问题，我们与国外基本同步，系统开展了基于粉末直接压片工艺的口腔崩解片的技术研究了基于粉末直接压片工艺的口腔崩解片的技术研究课题名称：盐酸苯环壬酯盐酸苯环壬酯/甲磺酸酚妥拉明速释制剂研究甲磺酸酚妥拉明速
18、释制剂研究课题来源：国家国家“九五九五”攻关项目攻关项目课题编号：96-902-02-1796-902-02-17获得经费：国家经费国家经费3030万元，企业经费万元，企业经费5050万元万元负 责 人：崔光华崔光华起止时间：19961996年年20002000年年20032003年年本人在硕士期间具体承担了该工作。论文被评为军事医学科学院优秀论文及研究生该类制剂当时国外没有确切定义,我们称之为。98年FDA将其统一命名为掩味技术是目前制约口腔崩解片顺利研发的瓶颈。盐酸苯环掩味技术是目前制约口腔崩解片顺利研发的瓶颈。盐酸苯环壬酯是该类问题典型的代表壬酯是该类问题典型的代表改变味蕾对苦味的敏感度
19、改变味蕾对苦味的敏感度矫味剂矫味剂 甜味剂：糖精钠、阿司巴坦 芳香剂：苹果香精、香蕉香精 氨基酸：味精(谷氨酸钠)麻痹剂麻痹剂：苯酚钠、丁香油苦味阻滞剂苦味阻滞剂：腺苷酸降低与味蕾接触的药量或药物浓度降低与味蕾接触的药量或药物浓度包衣法：包衣法：颗粒(粉体)包衣：100m,Eudragit E 微囊化：100m,明胶分散制粒分散制粒：固体分散体环糊精包合环糊精包合：适合于低剂量药物熔融制粒法熔融制粒法：硬脂酸、十八醇、聚乙二醇改变溶液黏度改变溶液黏度：黄芪胶、CMC-Na离子交换结合离子交换结合：盐酸曲马多多孔物质吸附吸收多孔物质吸附吸收：沸石、二氧化硅改变药物结构改变药物结构：前体药物(纳洛
20、酮);成盐(克拉霉素)（1 1）流化床包衣技术。）流化床包衣技术。将500g盐酸苯环壬酯粉碎，过80目筛，使用沸腾床或流化床等设备包衣。包衣材料选用Eudragit E，用水配制成2-10%水分散体分散或用乙醇溶解，辅之以适量增塑剂和润滑剂。在物料温度25-50、雾化压力2.0-3.0bar、进液速率5-30ml/min的条件下包衣，包衣增重30-100%，即可。（2 2）环糊精包合技术。）环糊精包合技术。将盐酸苯环壬酯与-环糊精，在一定的反应温度下，加水溶解，调节溶液pH值近中性，搅拌8-10小时，冷处静置24小时，过滤，或冷冻干燥，即可。（3 3）固体分散技术。）固体分散技术。选用在中性或
21、偏碱性不溶，而在酸性水溶液中溶解的药用高分子材料，用适当有机溶剂如乙醇溶解，将主药加入并溶解，真空干燥或冷冻干燥使之固化，或直接作为药用粘合剂，即可。我们采取三种技术措施，对盐酸苯环壬酯进行掩味处理，均我们采取三种技术措施，对盐酸苯环壬酯进行掩味处理，均能够得到理想的结果。能够得到理想的结果。通过现代释药系统以及新型工艺技术，对疗效确切的口服畅销药物进通过现代释药系统以及新型工艺技术，对疗效确切的口服畅销药物进行品种的技术革新，存在巨大的临床需求和市场空间。盐酸苯环壬酯行品种的技术革新，存在巨大的临床需求和市场空间。盐酸苯环壬酯具备上述特征。具备上述特征。盐酸苯环壬酯口腔崩解片的出现，能显著提
22、高病患者的服药质量，使盐酸苯环壬酯口腔崩解片的出现，能显著提高病患者的服药质量，使病患者的服药不受时间、空间以及环境的影响，变得更加省事、更加病患者的服药不受时间、空间以及环境的影响，变得更加省事、更加方便、更加有效。方便、更加有效。盐酸苯环壬酯口腔崩解片的出现，能进一步挖掘国家级一类新药盐酸苯环壬酯口腔崩解片的出现，能进一步挖掘国家级一类新药“飞飞赛乐赛乐”的价值，提高产品的科技含量，延长产品的市场周期，拓展产的价值，提高产品的科技含量，延长产品的市场周期，拓展产品的使用范围、适应时代的发展需求。品的使用范围、适应时代的发展需求。申请日：申请日：2003.11.072003.11.07授权日
23、：授权日：2006.11.082006.11.08期期 限：限：2023.11.07(202023.11.07(20年年)其核心的技术特征已被其核心的技术特征已被中国发明专利授权保护中国发明专利授权保护酒石酸美托洛尔（酒石酸美托洛尔（040901040901，广东肇庆定康药业，广东肇庆定康药业 ）；盐酸二甲双胍）；盐酸二甲双胍（040622040622，昆山双鹤药业）；美洛昔康（福建永春制药厂）。，昆山双鹤药业）；美洛昔康（福建永春制药厂）。（罗姆公司）；空白丸芯（罗姆公司）；空白丸芯（610610750m750m，上海爱的发）；，上海爱的发）；HPMCHPMC（6cps6cps，上海运宏）；
24、，上海运宏）；（GPCG-1GPCG-1，德国，德国GlattGlatt公司）；智能溶出测定仪（公司）；智能溶出测定仪（ZRS-6ZRS-6型，天津大型，天津大学精密仪器厂）；紫外可见分光光度计（学精密仪器厂）；紫外可见分光光度计（UV-160AUV-160A，日本岛津）。，日本岛津）。（SEM,Jeol JSM 5600 LV,Jeol,SEM,Jeol JSM 5600 LV,Jeol,东京日本）；金粉喷射头东京日本）；金粉喷射头（JFC-1300,Jeol,JFC-1300,Jeol,东京，日本）。东京，日本）。步骤一、上药层包衣：步骤一、上药层包衣：空白丸芯药物的水溶液步骤二、隔离层包
25、衣：步骤二、隔离层包衣：载药丸芯HPMC的水溶液步骤三、功能层包衣：步骤三、功能层包衣：隔离丸芯Eudragit水分 散体或乙醇溶液步骤四：样品的老化：步骤四：样品的老化：水分散体包衣样品需40 烘置24小时。11 11 参参 数数上药包衣上药包衣隔离包衣隔离包衣肠溶包衣肠溶包衣乙醇溶液乙醇溶液水分散体水分散体进风温度进风温度/60606565505052524040454545455050锅内温度锅内温度/空气压力空气压力/barbar0.350.350.350.350.350.350.350.35雾化压力雾化压力/barbar1.51.51.51.51.51.51.51.5喷嘴直径喷嘴直径
26、/mm/mm1.21.21.21.21.21.21.21.2喷液速率喷液速率/gmin gmin-1-1包衣前流化预热时间包衣前流化预热时间/minmin2 22 22 22 2包衣后流化干燥时间包衣后流化干燥时间/minmin5(45)5(45)2(45)2(45)5(45)5(45)10(45)10(45)包衣后老化处理条件包衣后老化处理条件02040608010000.511.522.53t t/h hD Di is ss so ol lu ut ti io on n/%15%20%25%30%35%Weight gain：02040608010000.511.522.53t t/h h
27、D Di is ss so ol lu ut ti io on n/%15%20%25%30%35%Weight gain：不含隔离层；释放介质：0-2 hpH1.2 盐酸；2-3 hpH6.8 磷酸缓冲液 02040608010010152025303540W We ei ig gh ht t g ga ai in n o of f c co oa at ti in ng g/%D Di is ss so ol lu ut ti io on n/Organic media,without subcoatOrganic media,with subcoatAqueous media,witho
28、ut subcoatAqueous media,with subcoat 本试验目的本试验目的是评价由北京利龄恒泰药业有限公司研制生产的盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg/粒）与市售盐酸二甲双胍肠溶片（250mg/片）之间的相对生物利用度，为北京利龄恒泰药业有限公司研制生产的盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg/粒）是否与成分相同的市售盐酸二甲双胍肠溶片（250mg/片）具有生物等效性提供试验依据。本试验严格遵守赫尔辛基宣言的人体医学研究的伦理准则，公正、尊重人格，力求使受试者最大程度受益和尽可能避免伤害；本试验方案及其修订申请均经首都医科大学附属北京朝阳医院首都医科大学附属北京朝阳医院伦理委员会审
29、核批准。试验总体设计及方案的描述试验总体设计及方案的描述 采用双周期自身交叉对照试验设计。两周期，洗脱期为采用双周期自身交叉对照试验设计。两周期，洗脱期为7 7天。天。将受试者（人数将受试者（人数1919人）按体重指数随机等分为两组，方法为将受试者按体重指数排序后，依次从人）按体重指数随机等分为两组，方法为将受试者按体重指数排序后，依次从随机表中抽出对应数字，根据随机数字分组。随机分组结束后，再给每个受试者编上试验号。分随机表中抽出对应数字，根据随机数字分组。随机分组结束后，再给每个受试者编上试验号。分别在两周期内服用试验制剂或参比制剂别在两周期内服用试验制剂或参比制剂500 mg500 mg
30、。受试者分组和服药顺序见下表。受试者分组和服药顺序见下表。受试者编号随机数筛选号试验号服药顺序受试者编号随机数筛选号试验号服药顺序1162911RT11060715RT201191TR1209407TR3142812RT13123716RT407222TR14080617RT519413TR1515398TR6102613RT16040118RT703134TR1713109TR817125TR18052010TR9022714RT19202419RT1011356TR单剂量试验单剂量试验 志愿者在两周期内分别接受下列两种处置；志愿者在两周期内分别接受下列两种处置；1 1：试验制剂：给药二粒（
31、含盐酸二甲双胍：试验制剂：给药二粒（含盐酸二甲双胍500 mg500 mg）；）；2 2：参比制剂：给药二片（含盐酸二甲双胍：参比制剂：给药二片（含盐酸二甲双胍500 mg500 mg）。）。受试者禁食过夜（至少受试者禁食过夜（至少1010小时），第二日早小时），第二日早8 8：0000服药，用服药，用200200250mL250mL左右温开左右温开水送服。水送服。确定依据确定依据 依照依照化学药物制剂人体生物利用度和生物等效性研究技术指导原则化学药物制剂人体生物利用度和生物等效性研究技术指导原则，进，进行生物等效性研究时，给药剂量一般应与临床单次用药剂量一致。受试制剂和参比行生物等效性研究时
32、，给药剂量一般应与临床单次用药剂量一致。受试制剂和参比制剂一般应服用相等剂量。盐酸二甲双胍临床单次给药剂量为制剂一般应服用相等剂量。盐酸二甲双胍临床单次给药剂量为500mg500mg，故确定次计，故确定次计量为研究剂量。量为研究剂量。剂量设置和确定依据剂量设置和确定依据 生物样本采集和试验过程生物样本采集和试验过程 生物样本采集：生物样本采集：服药前及服药后服药前及服药后0.5h0.5h，1.0h1.0h，1.5h1.5h，2.0h2.0h，2.5h2.5h，3.0h3.0h，4.0h4.0h，6.0h6.0h，8.0h8.0h，12.0h12.0h，24h 24h 分别取静脉血分别取静脉血5
33、mL5mL，离心分取血浆，离心分取血浆，-20-20 C C保存至测定。交叉给药后保存至测定。交叉给药后取血方法和时间相同。取血方法和时间相同。试验过程：试验过程：试验期间，统一饮食试验期间，统一饮食,主要食物为米饭、豆制品、鸡蛋、猪肉、青菜等，不主要食物为米饭、豆制品、鸡蛋、猪肉、青菜等，不严格限制饮水量。标本收集和分析四周内完成。试验过程中研究人员详细记录采严格限制饮水量。标本收集和分析四周内完成。试验过程中研究人员详细记录采血时间和药物不良反应。血时间和药物不良反应。在临床医生的严密监护下进行；在临床医生的严密监护下进行；准备急救条件和措施；准备急救条件和措施；受试者禁食过夜受试者禁食过
34、夜（至少（至少1010小时），第二日早小时），第二日早8 8：0000服药，用服药，用200 250mL200 250mL左右温开水送服，早、中、左右温开水送服，早、中、晚三餐统一进食。晚三餐统一进食。按时取静脉血，并记录实际取血时间；按时取静脉血，并记录实际取血时间；受试期间避免剧烈受试期间避免剧烈运动；运动；监护医生观察并记录受试者的不良反应发生情况并采取相应措施。监护医生观察并记录受试者的不良反应发生情况并采取相应措施。生物样本的测定方法生物样本的测定方法 主要仪器主要仪器岛津岛津CBM-20ACBM-20A高效液相色谱仪，高效液相色谱仪，API 3200API 3200，APCIAPC
35、I源，源，SHIMADZU VP-ODS 150LSHIMADZU VP-ODS 150L2.02.0，TDL-5MTDL-5M台式大容量冷冻离心机。台式大容量冷冻离心机。试药试药盐酸二甲双胍盐酸二甲双胍(含量含量99.5%99.5%，天津中新药业集团，天津中新药业集团)；内标（盐酸苯乙双胍，含量；内标（盐酸苯乙双胍，含量99.3%99.3%，常州亚邦制药有限公司）；甲醇、乙腈（色谱纯，常州亚邦制药有限公司）；甲醇、乙腈（色谱纯，FisherFisher）；醋酸铵（色谱纯，）；醋酸铵（色谱纯，DikmaDikma）。）。血浆样品的处理血浆样品的处理精密量取血浆样品精密量取血浆样品200 200
36、 L L，加入内标溶液和甲醇各，加入内标溶液和甲醇各100100 L L，混匀。加，混匀。加 1111 L L稀醋酸，稀醋酸，涡旋涡旋10s10s。加入乙腈。加入乙腈1mL1mL，涡旋，涡旋20 s20 s，3000 r/min3000 r/min离心离心5min5min，取上清液于，取上清液于5mL5mL离心管中，离心管中，4545 C N2C N2吹干。残渣加吹干。残渣加100100 L L石油醚，涡旋石油醚，涡旋5s5s，3000 r/min3000 r/min离心离心2min2min，取上清液，弃去。，取上清液，弃去。待石油醚完全挥干后，加待石油醚完全挥干后，加200 200 L L去
37、离子水，涡旋去离子水，涡旋10s10s，12000 r/min12000 r/min离心离心3min3min，取上，取上清液进样清液进样5 5 L L。质谱与色谱条件质谱与色谱条件 质谱条件：质谱条件：离子源：离子源：APCIAPCI源；离子喷雾电流：源；离子喷雾电流：4.04.0；温度：；温度：300300；GS1GS1（N2N2）流速：）流速：35pisg.35pisg.；GS2GS2（N2N2）流速：）流速：30 pisg30 pisg；碰撞能量为；碰撞能量为30eV30eV；检测方式：正离子检测；扫描方式：；检测方式：正离子检测；扫描方式：选择性离子反应检测（选择性离子反应检测（MRM
38、MRM）方式，用于定量分析的离子反应分别为盐酸二甲双胍）方式，用于定量分析的离子反应分别为盐酸二甲双胍m/zm/z 130.2-71.0 130.2-71.0，盐酸苯乙双胍，盐酸苯乙双胍m/zm/z 206.1-59.9 206.1-59.9。色谱条件色谱条件：流动相：甲醇流动相：甲醇-乙腈乙腈-10mM-10mM醋酸铵溶液（醋酸铵溶液（2020：2020：6060）；流速：）；流速：0.2 ml/min0.2 ml/min；盐酸二甲双胍及内标特征离子图见图盐酸二甲双胍及内标特征离子图见图1 1；空白血浆、盐酸二甲双胍及内标加入空白；空白血浆、盐酸二甲双胍及内标加入空白血浆中的色谱图、受试者血
39、浆色谱图，见图血浆中的色谱图、受试者血浆色谱图，见图2 2 图图4 4。盐酸二甲双胍的保留时间约为。盐酸二甲双胍的保留时间约为1.8 min1.8 min，内标的保留时间约为，内标的保留时间约为3.1 min3.1 min。内源性物质基本不干扰测定。内源性物质基本不干扰测定。图图1 1 盐酸二甲双胍（盐酸二甲双胍（A A）及内标苯乙双胍（）及内标苯乙双胍（B B）特征离子图谱）特征离子图谱AB盐酸二甲双胍及内标特征离子图盐酸二甲双胍及内标特征离子图盐酸二甲双胍及内标加入空白血浆中色谱图盐酸二甲双胍及内标加入空白血浆中色谱图 空白血浆空白血浆空白血浆空白血浆主药主药+空白血浆空白血浆色谱图色谱图
40、内标内标+空白血浆空白血浆色谱图色谱图线性关系及检测限线性关系及检测限 精密吸取空白血浆200L于5mL塑料离心管中，加入盐酸二甲双胍标准溶液和内标溶液各100L，制成含盐酸二甲双胍浓度分别为2.0，10.0，125.0，500.0，1000，1500，2000ngmL-1浓度系列样品，混匀，按“血浆样品的处理”项下同法操作，记录盐酸二甲双胍及内标的峰面积。以盐酸二甲双胍和内标峰面积比（Y）与盐酸二甲双胍浓度（C）进行线性回归，得回归方程为：Y=0.00194C+0.0134(r=0.9996)Y=0.00194C+0.0134(r=0.9996)由此可知，血浆中盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250m
41、g）在2.02000 ngmL-1浓度范围内与峰面积比线性良好,血浆中盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg）最低定量浓度为最低定量浓度为2.0ng2.0ngmLmL-1-1.盐酸二甲双胍与内标提取回收率盐酸二甲双胍与内标提取回收率名称浓度（ng/mL）测定次数提取前峰面积提取后峰面积提取回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）内标850129200013300068.366.33.2232800014100064.5331000012800061.9428700012800066.9527600012900070.1盐酸二甲双胍101223001220082.174.94.522400011900
42、74.43242001180073.14236001100069.95238001190075.0500126700012800071.964.45.3228900012200063.3329000011900061.6431699912300058.2525500011400067.11500195100040100063.264.02.2297300041400063.8398600040000060.9488100039200066.7592500040300065.4 相对回收率及精密度相对回收率及精密度 分析批加入量(ng.ml-1)105001500110.67501.514299
43、.9516.3139210.43501.6139510.69520.9148911.18519.7140211.24483.81502210.05531.813209.7449213149.72495.213228.71510.713428.71476.413518.7464.1132739.6551714129.26499.515319.32543.213519.44498.6145610.33505.7140610.11480.11349n181818均值9.88503.21393.9SD0.7920.02966.44准确度(%)95.997.489.9日内CV(%)4.652.843.4
44、1日间CV(%)7.963.984.77盐酸二甲双胍肠溶胶囊（盐酸二甲双胍肠溶胶囊（250mg250mg）血浆样品的稳定性）血浆样品的稳定性试验结果试验结果 室温条件放置冻融试验（次）冷冻放置（天）时间（h）浓度（ng.ml-1）次数（次）浓度（ng.ml-1）时间（天）浓度（ng.ml-1）105001500105001500105001500010.67501.51429010.67501.51429010.67501.514299.90516.313929.90516.313929.9516.3139210.43501.6139510.43501.6139510.43501.613951
45、0.69520.9148910.69520.9148910.69520.9148911.18519.7140211.18519.7140211.18519.71402249.29499.7168028.614241468309.2500.815328.93493.716338.95420.614839.28497.115059.11442.815368.44441.8141610.00496.6150410.08425.416319.28435.314449.43498.715358.74427.913869.70474.314509.79497.81495平均9.90485.01497平均9
46、.78475.61437平均10.06505.11468SD0.8537.9115.0SD0.9541.435.8SD0.679.7957.2CV(%)8.67.87.7CV(%)9.78.72.5CV(%)6.61.93.9盐酸二甲双胍血浆样品测定方法学质量控制样品盐酸二甲双胍血浆样品测定方法学质量控制样品测定结果（测定结果（ng.mlng.ml-1-1）靶值：10靶值：500靶值：1500测得值落在靶值的（%）测得值落在靶值的（%）测得值落在靶值的（%）第一批9.2689.9519.6100.6145994.19.4491.7561.5108.7133486.110.3100.050698
47、.01580101.9第二批10.36100.6456.788.4134987.09.6193.3482.693.4152898.69.9997.0439.385.1137488.6第三批9.0087.4478.592.6144693.38.5683.1472.291.4141391.29.2489.7550.7106.61612104.0均值9.5392.5496.396.1145593.9SD0.605.841.58.099.96.4CV(%)6.36.38.48.46.96.9统计处理统计处理 药代动力学参数计算药代动力学参数计算用用DAS 2.0 DAS 2.0 软件分析数据，计算软件
48、分析数据，计算TmaxTmax、CmaxCmax、t1/2t1/2、AUCAUC0 0t t和和AUCAUC00，阐述盐酸二甲，阐述盐酸二甲双胍肠溶胶囊（双胍肠溶胶囊（250mg250mg）在健康志愿者体内的药物代谢动力学特征。）在健康志愿者体内的药物代谢动力学特征。统计学处理方案统计学处理方案对药代动力学参数对药代动力学参数CmaxCmax、AUCAUC0 0t t和和AUCAUC00，进行方差分析，再以双单侧，进行方差分析，再以双单侧 t t 检验进行检验进行等效性判断。若受试制剂等效性判断。若受试制剂AUCAUC的的90%90%可信限落在参比制剂可信限落在参比制剂8080125%125%
49、范围内，范围内，CmaxCmax的的9090可信限落在参比制剂可信限落在参比制剂7070143%143%范围内，则认定受试制剂与参比制剂生物等效。范围内，则认定受试制剂与参比制剂生物等效。试验中进行的修改试验中进行的修改依照依照20092009年年3 3月月3 3日申报医学伦理委员会的原临床试验方案进行了日申报医学伦理委员会的原临床试验方案进行了2 2名受试者的预试验。名受试者的预试验。根据对根据对2 2名受试者药代动力学研究结果，调整了采血点，并加强了质量控制措施。故名受试者药代动力学研究结果，调整了采血点，并加强了质量控制措施。故对原方案进行了修改。修改后的方案获得了申办者的同意，并获得伦
50、理委员会的批准。对原方案进行了修改。修改后的方案获得了申办者的同意，并获得伦理委员会的批准。研究结果数据研究结果数据 1919名男性志愿者单剂量口服二甲双胍受试制剂或参比制剂名男性志愿者单剂量口服二甲双胍受试制剂或参比制剂500mg500mg后血药浓度后血药浓度-时间曲线见图时间曲线见图6 6；单剂量口服二甲双胍肠溶胶囊受试制剂或参比制剂单剂量口服二甲双胍肠溶胶囊受试制剂或参比制剂500mg500mg后血药浓度后血药浓度-时间曲线见图时间曲线见图8 8；1919名男性志愿者单剂量口服二甲双胍受试制剂或参比制剂名男性志愿者单剂量口服二甲双胍受试制剂或参比制剂500mg500mg后平均血药浓度后平
