1、鱼类的应激反应实例实例鱼类应激的监测鱼类应激的监测鱼类应激反应的概论鱼类应激反应的概论目录鱼类应激反应的概论 应激学说是由加拿大病理学家Selye于1936年首先提出来的，并将应激反应分为3 个阶段，即紧急反应阶段、抵抗适应阶段和衰竭阶段。鱼类的应激反应 鱼类的应激反应(stress response)是鱼体对各种环境因子的超常刺激(应激原，stressor)所产生的一种非特异性生理反应。过强的或过长的应激反应会对机体产生危害,导致生长发育缓慢、繁殖能力下降、免疫机能低下及发病率和死亡率提高等。鱼类的应激反应的分类 初级应激反应神经内分泌系统水平 次级反应组织与器官水平 第三级反应个体与群体水
2、平初级应激反应神经内分泌系统水平 交感嗜铬组织系统 嗜铬细胞释放儿茶酚胺类激素（CA）下丘脑垂体肾间组织轴 导致血浆皮质醇含量显著升高水产养殖中常见的应激原 第一类属环境因子,包括水温、盐度、溶氧、氨、pH、亚硝酸盐、水流等 第二类为物理干扰因子,包括运输、分池、性别分选、防治疾病的操作等 第三类为生物因子,包括拥挤、病原生物的侵袭。急性应激急性应激鱼类应激的监测 应激的监测不仅在于判断应激发生与否及应激程度，还在于判断鱼体的敏感性，对改善鱼类养殖管理和选育抗应激鱼类种群具有重要意义。监测指标 血浆中的CA 血浆中的皮质醇 血糖含量 血浆ACTH、血浆乳酸、血浆游离脂肪酸、红细胞比容、组蛋白样
3、蛋白、血浆渗透离子等（应综合评价）监测指标为CA的原因 几乎所有的应激因子都能激活HPI轴，使血浆皮质醇水平迅速升高,其幅度及持续时间与应激因子的强度及作用时间呈正相关 血浆皮质醇的升高时效较为缓慢，相对易于监测 血浆皮质醇含量的持续升高对鱼类的生长、繁殖与免疫机能有重要影响,因此与养殖生产密切相关。血浆皮质醇的效应 对生长显著提高鱼体糖异生作用中的关键酶类活性,加速组织蛋白和脂肪的分解；皮质醇还可通过减少摄食和降低消化吸收效率影响鱼体生长。对繁殖导致性类固醇激素水平降低,并伴有卵巢萎缩现象等 对免疫机能能直接抑制B淋巴细胞的增殖并诱导细胞凋亡实例 急性温度应激对吉富品系尼罗罗非鱼幼鱼生化指标
4、和肝脏HSP70 mRNA表达的影响HSP70(Heat Shock Protein 70)在降低温度胁迫对鱼类影响效应方面发挥着重要作用,通常HSP70可以协助新生链折叠、修复和降解变性或已损坏的蛋白。实验设计 实验设置 16、21、26(对照)、31和35，共5 个温度水平，每个水平下设置3 组平行。每个处理组放鱼30 尾,各组之间体质量无显著差异(P0.05)。采样与处理 分别于 0h、2h、6h、12h 和24h进行采样。每个养殖桶随机选取3 尾鱼尾静脉采血，-80 冰箱储存取0.1g 左右的肝脏用液氮速冻 测定指标 血液生化指标的测定（血浆皮质醇、葡萄糖）肝脏抗氧化指标的测定（SOD
5、、CAT 的活性与MDA的测定）肝脏 HSP70 mRNA 表达的测定结果与分析 温度应激对尼罗罗非鱼血清皮质醇和葡萄糖水平的影响分析 皮质醇是一种与许多生物活性相关联的类固醇激素。鱼类面对应激胁迫时,血浆皮质醇水平会明显提高。本实验中,在温度应激下,各应激组血清皮质醇水平显著升高。除低温处理组外,高温组葡萄糖水平与对照组相比,随着应激时间的增加而略有上升。可能原因为，随着温度升高,呼吸率加快,鱼体能量代谢水平随之上升,机体增加对糖原的利用,葡萄糖的合成速率也会增加。低温组（16）于24h处葡萄糖含量急剧升高，原因可能是鱼体为抵御冷应激的胁迫,避免冻伤或冻死,机体会将大量糖原分解为葡萄糖。21
6、的实验组随应激时间的增加,血糖浓度呈先上升后下降的变化,可能是因为鱼体已经适应水环境温度,机体代谢恢复正常。温度应激对尼罗罗非鱼肝脏丙二醛含量与超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力的影响 分析：MDA、SOD、CAT增加的效应可能是降低过氧化氢对鱼体造成的氧化损伤。然而,随着应激时间的延长,肝脏损伤加剧,机体的新陈代谢可能会受到抑制,氧化还原反应产生的氧自由基不断积累,当抗氧化酶难以抵御细胞内的氧化损伤时,机体的抗氧化酶活力将会降低。温度应激对尼罗罗非鱼肝脏HSP70 mRNA表达的影响 分析：21和31应激组在6h 时，HSP70 mRNA表达量达到最高，此时应激强度较低，罗非鱼可以通过提高细胞中HSP70 mRNA 表达来适应环境应激。低温(16)和高温(35)实验组在应激处理24h后，HSP70 mRNA 表达水平急剧下降，可能的原因为HSP70 对细胞的保护作用只能在一定范围内,如果应激超过一定强度,或延续时间过久,引起肝脏细胞膜结构和蛋白质组成的异常,从而导致HSP70 在细胞内分布的改变,HSP70 对机体的保护能力也会随之下降。
