1、习题：习题：1、犬的感觉系统有哪些特点？、犬的感觉系统有哪些特点？2、举出小型猪的三个在医学中适用的解剖生、举出小型猪的三个在医学中适用的解剖生理特点。理特点。3、哪些动物不能在体内合成维生素、哪些动物不能在体内合成维生素C？4、举出猫的三个在医学中适用的解剖生理特、举出猫的三个在医学中适用的解剖生理特点。点。第九章第九章 动物实验的基本动物实验的基本方法和技术及影响因素方法和技术及影响因素 第一节第一节 动物实验基本方法动物实验基本方法 一、动物实验的常用方法一、动物实验的常用方法动物实验方法是多种多样的，在医学动物实验方法是多种多样的，在医学的各个领域内都有其不同的应用，其中一的各个领域内
2、都有其不同的应用，其中一些基本方法都是共同性的，如动物的选择、些基本方法都是共同性的，如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等，不管是从事采尿、急救、处死、尸检等，不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法，何种课题的医学研究都要用这套基本方法，因此，动物实验基本方法，已成为医学科因此，动物实验基本方法，已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。技工作者必须掌握的一项基本功。动物实验按机体水平不同的可分为动物实验按机体水平不同的可分为整整体实验体实验和和离体实验离体实验两种，还可进一步具体两种，还可进一步具体地分为地分为
3、亚细胞亚细胞、细胞细胞、组织组织、器官器官，整体整体动物动物和和无损伤动物无损伤动物等水平的实验。按动物等水平的实验。按动物实验的时间长短可分为实验的时间长短可分为急性实验急性实验（2 2天以天以内）、内）、亚急性实验亚急性实验（1 14 4周）和周）和慢性实验慢性实验（2 26 6个月或更长时间甚至整个生命期）。个月或更长时间甚至整个生命期）。下面举一些动物实验的常用方法：下面举一些动物实验的常用方法：1 1复制动物模型法：复制动物模型法：此法是动物实验最基本的方法，是采此法是动物实验最基本的方法，是采用人工的方法使动物在一定致病因素（机用人工的方法使动物在一定致病因素（机械、化学、生物和物
4、理）作用下，造成动械、化学、生物和物理）作用下，造成动物的组织，器官或全身的一定损伤，复制物的组织，器官或全身的一定损伤，复制成与人类疾病相似的动物疾病模型，来研成与人类疾病相似的动物疾病模型，来研究各种疾病的发生、发展规律及防治方法。究各种疾病的发生、发展规律及防治方法。2 2切开、分离法：切开、分离法：此法是以活体动物为对象的整体实验此法是以活体动物为对象的整体实验常用方法。习惯上把在麻醉情况下，制备常用方法。习惯上把在麻醉情况下，制备一些实验条件（如活体解剖、分离暴露器一些实验条件（如活体解剖、分离暴露器官、组织或进行一些手术制备等措施）进官、组织或进行一些手术制备等措施）进行研究者称行
5、研究者称“急性动物实验急性动物实验”。3 3切除和注入提取液法切除和注入提取液法 ：常用于研究内分泌器官的生理和病理常用于研究内分泌器官的生理和病理病变，如研究切除某一腺体后看出现什么病变，如研究切除某一腺体后看出现什么症状而推论这种腺体的功能；如蝌蚪无甲症状而推论这种腺体的功能；如蝌蚪无甲状腺素，如注入甲状腺素，蝌蚪很快变成状腺素，如注入甲状腺素，蝌蚪很快变成了蛙。了蛙。4 4离体组织器官法：离体组织器官法：离体实验是利用动物的离体组织、器离体实验是利用动物的离体组织、器官等，置于一定的存活条件下（如温度、官等，置于一定的存活条件下（如温度、营养成分、氧气、水、营养成分、氧气、水、pHpH等
6、）进行观察的等）进行观察的一种实验方法。如可利用离体肠管观察药一种实验方法。如可利用离体肠管观察药物对肠管活动、吸收、通透性、血流情况物对肠管活动、吸收、通透性、血流情况等的影响，并进行作用机理的分析；利用等的影响，并进行作用机理的分析；利用离体胆囊来筛选引起胆囊舒缩的药物。动离体胆囊来筛选引起胆囊舒缩的药物。动物组织、细胞的培养也常用此种方法。物组织、细胞的培养也常用此种方法。离体实验的优点是方法比较简单，一般离体实验的优点是方法比较简单，一般不需要很复杂的仪器设备。实验条件比较容不需要很复杂的仪器设备。实验条件比较容易控制，牵涉的人力较少，因此常被列为分易控制，牵涉的人力较少，因此常被列为
7、分析性研究的一种手段。不足之处是模拟的存析性研究的一种手段。不足之处是模拟的存活条件毕竟与整体的实际情况有较大的出入，活条件毕竟与整体的实际情况有较大的出入，其结果也往往与体内的变化有一定距离，因其结果也往往与体内的变化有一定距离，因此可以作为整体研究的补充和参考。此可以作为整体研究的补充和参考。5 5瘘管法：瘘管法：用无菌手术方法给动物造成不同的人用无菌手术方法给动物造成不同的人造瘘管如胃肠道瘘管、膀胱瘘管、唾液腺造瘘管如胃肠道瘘管、膀胱瘘管、唾液腺瘘管、食道瘘管、胆囊瘘管等。这些瘘管瘘管、食道瘘管、胆囊瘘管等。这些瘘管可以收集内脏液体，是生理学消化研究的可以收集内脏液体，是生理学消化研究的
8、主要方法。此种方法是慢性动物实验所常主要方法。此种方法是慢性动物实验所常用的方法。慢性动物实验一般是先在无菌用的方法。慢性动物实验一般是先在无菌操作下制备好实验模型（瘘管法是其中一操作下制备好实验模型（瘘管法是其中一种），待动物恢复健康后进行研究。种），待动物恢复健康后进行研究。这类研究方法的优点在于被研究的对这类研究方法的优点在于被研究的对象，其机体内外环境已处于较自然的相对象，其机体内外环境已处于较自然的相对平衡状态，条件比较稳定，所得的结果接平衡状态，条件比较稳定，所得的结果接近生理情况。但需要事先制备，术后护理，近生理情况。但需要事先制备，术后护理，等动物恢复健康后才能从事实验，花费时
9、等动物恢复健康后才能从事实验，花费时间较长，工作量较大，因而在选用上受到间较长，工作量较大，因而在选用上受到一定限制。一定限制。6 6移植法：移植法：一般是将动物的器官、组织或细胞进一般是将动物的器官、组织或细胞进行相互移植的一种方法。行相互移植的一种方法。7 7生物电、活性观察法生物电、活性观察法 ：对动物体各种生物电用电生理记录仪对动物体各种生物电用电生理记录仪进行观察记录，如心电、肌电、脑电等；进行观察记录，如心电、肌电、脑电等；对动物组织中各种活动物质用生物化学法对动物组织中各种活动物质用生物化学法测定，如各种酶，激素等。测定，如各种酶，激素等。8 8病理解剖学、组织学观察法病理解剖学
10、、组织学观察法 ：采用肉眼观察、光镜和电镜检查，来观采用肉眼观察、光镜和电镜检查，来观察、分析动物各种疾病时病理组织学改变。察、分析动物各种疾病时病理组织学改变。可从组织学的角度来探讨疾病防治机理。可从组织学的角度来探讨疾病防治机理。近年来由于电子显微技术的进展，不仅近年来由于电子显微技术的进展，不仅可以观察到病变时细胞内细胞器等亚细胞结可以观察到病变时细胞内细胞器等亚细胞结构的变化，而且也可以运用电子扫描方法对构的变化，而且也可以运用电子扫描方法对动物器官的微小结构进行完整的表层观察。动物器官的微小结构进行完整的表层观察。9 9免疫学观察法：免疫学观察法：注入抗原使动物致敏，制备各种抗血清。
11、注入抗原使动物致敏，制备各种抗血清。采用免疫荧光技术、酶标记免疫技术、放采用免疫荧光技术、酶标记免疫技术、放射免疫测定技术、免疫电镜技术等对动物免疫射免疫测定技术、免疫电镜技术等对动物免疫后各种免疫变化进行检查。后各种免疫变化进行检查。1010其它方法：其它方法：如联体动物法，条件反射法、生物遗传法、如联体动物法，条件反射法、生物遗传法、放射生物法、药物化学等等。放射生物法、药物化学等等。二、实验动物的抓取固定方法二、实验动物的抓取固定方法正确的抓取固定动物，是为了不损害正确的抓取固定动物，是为了不损害动物健康，不影响观察指标，并防止被动物动物健康，不影响观察指标，并防止被动物咬（抓）伤，保证
12、实验顺利进行。抓取固定咬（抓）伤，保证实验顺利进行。抓取固定动物的方法依实验内容和动物类而定。抓取动物的方法依实验内容和动物类而定。抓取固定动物前，必须对各种动物的一般习性有固定动物前，必须对各种动物的一般习性有所了解，抓取固定时既要小心仔细，不能粗所了解，抓取固定时既要小心仔细，不能粗暴，又要大胆敏捷，确实达到正确抓取固定暴，又要大胆敏捷，确实达到正确抓取固定动物的目的。动物的目的。（一）小鼠抓取固定方法（一）小鼠抓取固定方法小鼠温顺，一般不会咬人，抓取时先小鼠温顺，一般不会咬人，抓取时先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台向后拉，在其向前爬行时，用左手拇
13、指和向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指和置于左手心中，把后肢拉直，以无名指和小指压紧鼠尾后肢即可。有经验者直接用小指压紧鼠尾后肢即可。有经验者直接用左手小指钩起鼠尾，迅速以拇指和食指、左手小指钩起鼠尾，迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。小鼠的抓取固定方法小鼠的抓取固定方法这种在手中固定方式，能进行实验动这种在手中固定方式，能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。他实验操作。如进行解剖、手术
14、、心脏采血和尾静如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时，则需将小鼠作一定形式的固定，脉注射时，则需将小鼠作一定形式的固定，解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位（必要时先行麻醉），再用大头针或卧位（必要时先行麻醉），再用大头针或线绳将鼠前后肢依次固定在固定板上。线绳将鼠前后肢依次固定在固定板上。尾静脉注射时，可用小鼠固定盒固定，尾静脉注射时，可用小鼠固定盒固定，先根据动物大小选择好合适的固定盒，并先根据动物大小选择好合适的固定盒，并打开鼠盒盖，手提鼠尾巴，让动物头对准打开鼠盒盖，手提鼠尾巴，让动物头对准鼠盒口并送入筒内，露出尾巴，盖好即可鼠盒口并送入筒内
15、，露出尾巴，盖好即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。也进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。也可采用简易的烧杯扣放法。可采用简易的烧杯扣放法。小鼠尾静脉注射方法小鼠尾静脉注射方法（二）大鼠的抓取固定方法（二）大鼠的抓取固定方法大鼠的抓取基本同小鼠，只不过大鼠大鼠的抓取基本同小鼠，只不过大鼠比小鼠牙尖性猛，不易用袭击方式抓取，比小鼠牙尖性猛，不易用袭击方式抓取，否则会被咬伤手指，抓取时为避免咬伤，否则会被咬伤手指，抓取时为避免咬伤，可带上帆布手套。可带上帆布手套。从笼内抓大鼠时，同小鼠一样抓住尾从笼内抓大鼠时，同小鼠一样抓住尾巴提起来，要抓鼠尾巴的基部或中部，不巴提起来，要抓鼠尾巴的基部或中部，不
16、能捉尾尖，也不能让大鼠悬在空中时间过能捉尾尖，也不能让大鼠悬在空中时间过长，否则会激怒大鼠，并易致尾部皮肤脱长，否则会激怒大鼠，并易致尾部皮肤脱落。落。如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃时，同样可采用左手固定法，只是用拇胃时，同样可采用左手固定法，只是用拇指和食指捏住鼠颈背部，余下三指紧捏鼠指和食指捏住鼠颈背部，余下三指紧捏鼠背皮肤，置于左掌心中，背皮肤，置于左掌心中，这样右手即可进这样右手即可进行各种实验操作。行各种实验操作。也可伸开左手之虎口，敏捷地从后，也可伸开左手之虎口，敏捷地从后，一把抓住。若做手术或解剖等，则需事先一把抓住。若做手术或解剖等，则需事先
17、麻醉或处死，然后用细棉线绳活缚腿，背麻醉或处死，然后用细棉线绳活缚腿，背卧位绑在大鼠固定板上；尾静脉注射时的卧位绑在大鼠固定板上；尾静脉注射时的固定同小鼠。固定同小鼠。（三）蛙类的抓取固定方法（三）蛙类的抓取固定方法蛙类抓取方法宜用左手将动物背部贴蛙类抓取方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定，以中指、无名指、小指压住紧手掌固定，以中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左、其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左、右前肢，右手进行操作。右前肢，右手进行操作。蛙、蟾蜍抓取固定方法蛙、蟾蜍抓取固定方法 在抓取蟾蜍时，注意勿挤压其两侧耳在抓取蟾蜍时，注意勿挤压其两侧耳部突起之毒腺，以免毒液
18、射进眼中。部突起之毒腺，以免毒液射进眼中。实验如需长时间观察，可破坏其脑脊实验如需长时间观察，可破坏其脑脊髓（观察神经系统反应时不应破坏脑脊髓）髓（观察神经系统反应时不应破坏脑脊髓）或麻醉后用大头针固定在蛙板上。依实验或麻醉后用大头针固定在蛙板上。依实验需要采取俯卧位或仰卧位固定。需要采取俯卧位或仰卧位固定。（四）豚鼠的抓取固定方法（四）豚鼠的抓取固定方法豚鼠较为胆小易惊，不宜强烈刺激和豚鼠较为胆小易惊，不宜强烈刺激和受惊，所以在抓取时，必须稳、准和迅速。受惊，所以在抓取时，必须稳、准和迅速。一般抓取方法是：先用手掌迅速扣住鼠背，一般抓取方法是：先用手掌迅速扣住鼠背，抓住其肩胛上方，以拇指和食
19、指环握颈部，抓住其肩胛上方，以拇指和食指环握颈部，力量要适中，另一只手托住臀部。不能抓力量要适中，另一只手托住臀部。不能抓腰腹部，这样容易造成肝破裂而引起死亡。腰腹部，这样容易造成肝破裂而引起死亡。固定的方式基本同大鼠。固定的方式基本同大鼠。豚鼠的抓取固定方法豚鼠的抓取固定方法（五）兔的抓取固定方法（五）兔的抓取固定方法1 1抓取：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的抓取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让其体重的大部分集中在左手上，这样就避其体重的大部分集中在左手
20、上，这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。双耳或抓提腹部。家兔抓取家兔抓取方法方法 1、2、3均为不正均为不正确的抓取方法确的抓取方法（1可损伤两肾，可损伤两肾，2可造成皮下出可造成皮下出血，血，3可伤两可伤两耳），耳），4、5为正确为正确的抓取方法。颈后的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，部的皮厚可以抓，并用手托兔体。并用手托兔体。2 2固定：一般将家兔的固定分为盒式、台固定：一般将家兔的固定分为盒式、台式和马蹄形三种。盒式固定，适用于兔耳式和马蹄形三种。盒式固定，适用于兔耳采血、耳血管注射等情况；若做血压测量、采血、耳血管注射等情况；若
21、做血压测量、呼吸等实验和手术时，则需将兔固定在兔呼吸等实验和手术时，则需将兔固定在兔台上，四肢用粗棉绳活结绑住，绑在兔台台上，四肢用粗棉绳活结绑住，绑在兔台四周的固定木块上，头以固定夹固定或用四周的固定木块上，头以固定夹固定或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上。一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上。家兔盒式固定法家兔盒式固定法 家兔台式固定法家兔台式固定法 马蹄形固定多用于腰背部，尤其是颅马蹄形固定多用于腰背部，尤其是颅脑部位的实验，固定时先剪去两侧眼眶下脑部位的实验，固定时先剪去两侧眼眶下部的毛皮，暴露颧骨突起，调节固定器两部的毛皮，暴露颧骨突起，调节固定器两端钉形金属棒。使其正好嵌在突起下
22、方的端钉形金属棒。使其正好嵌在突起下方的凹处，然后在适当的高度固定金属棒。用凹处，然后在适当的高度固定金属棒。用马蹄形固定器可使兔取用背卧位和腹卧位，马蹄形固定器可使兔取用背卧位和腹卧位，所以是研究中常采用的固定方法。所以是研究中常采用的固定方法。家兔马蹄形固定家兔马蹄形固定 （六）狗的抓取固定方法（六）狗的抓取固定方法未经训练用于急性实验的狗性凶恶，未经训练用于急性实验的狗性凶恶，能咬人，因此进行实验时第一个步骤就是能咬人，因此进行实验时第一个步骤就是要绑住狗嘴。驯服的狗绑嘴时可从侧面靠要绑住狗嘴。驯服的狗绑嘴时可从侧面靠近轻轻抚摸其颈背部皮毛，然后迅速用布近轻轻抚摸其颈背部皮毛，然后迅速用
23、布带缚住其嘴。方法是用布带迅速兜住狗的带缚住其嘴。方法是用布带迅速兜住狗的下颌，绕到上颌打一个结，再绕回下颌下下颌，绕到上颌打一个结，再绕回下颌下打第二结，然后将布带引至头后颈项部打打第二结，然后将布带引至头后颈项部打第三个结，并多系一个活结（以备麻醉后第三个结，并多系一个活结（以备麻醉后解脱）。注意捆绑松紧度要适宜。解脱）。注意捆绑松紧度要适宜。狗嘴捆绑法狗嘴捆绑法 倘若此举不成，应用狗头钳夹住其颈倘若此举不成，应用狗头钳夹住其颈部，将狗按倒在地，再绑其嘴。如实验需部，将狗按倒在地，再绑其嘴。如实验需要静脉麻醉时，可先使动物麻醉后再移去要静脉麻醉时，可先使动物麻醉后再移去狗头钳，还应解去绑嘴
24、带（以免影响呼狗头钳，还应解去绑嘴带（以免影响呼吸），把动物放在实验台上，然后先固定吸），把动物放在实验台上，然后先固定头部，再固定四肢。头部，再固定四肢。1 1头部固定：固定狗头需用一特制的狗头固头部固定：固定狗头需用一特制的狗头固定器。操作时先将狗舌拉出，把狗嘴插入固定定器。操作时先将狗舌拉出，把狗嘴插入固定器内，旋转螺丝固定在实验台的铁柱上。器内，旋转螺丝固定在实验台的铁柱上。2.2.四肢固定：如采取仰卧位，四肢固定方法与四肢固定：如采取仰卧位，四肢固定方法与家兔相同。家兔相同。三、实验动物被毛的去除方法三、实验动物被毛的去除方法 动物的被毛可影响实验操作和结果的动物的被毛可影响实验操作
25、和结果的观察，因此实验中常需去除或剪短动物的观察，因此实验中常需去除或剪短动物的被毛。除毛的方法有被毛。除毛的方法有:拔毛法、机械法（剪拔毛法、机械法（剪毛法或剃毛法）和化学法（脱毛法）三种。毛法或剃毛法）和化学法（脱毛法）三种。1 1、拔毛法：兔耳缘静脉、小白鼠尾静脉注、拔毛法：兔耳缘静脉、小白鼠尾静脉注射或取血时，需用拇指、食指将局部被毛射或取血时，需用拇指、食指将局部被毛拔去，以利操作。拔去，以利操作。2 2、剃毛法：在大动物做慢性手术时常用。、剃毛法：在大动物做慢性手术时常用。先用温肥皂水将需剃毛部位充分浸润透，先用温肥皂水将需剃毛部位充分浸润透，然后用剃须刀顺被毛方向进行剃毛。若采然
26、后用剃须刀顺被毛方向进行剃毛。若采用电动剃刀，则逆被毛方向剃毛。用电动剃刀，则逆被毛方向剃毛。3 3、剪毛法：急性实验时常用。固定动物后，、剪毛法：急性实验时常用。固定动物后，用粗剪刀剪去所需部位的被毛。剪毛时需注用粗剪刀剪去所需部位的被毛。剪毛时需注意以下几点：意以下几点：把剪刀贴紧皮肤剪，不可用手提起被毛，把剪刀贴紧皮肤剪，不可用手提起被毛，以免剪破皮肤；以免剪破皮肤；依次剪毛，不要乱剪；依次剪毛，不要乱剪；先将剪毛部位用水浸润，剪下的毛集中放先将剪毛部位用水浸润，剪下的毛集中放在一个容器内，勿遗留在手术野和兔台周围，在一个容器内，勿遗留在手术野和兔台周围，以保证手术野的清洁。以保证手术野
27、的清洁。4 4、脱毛法：脱毛系指用化学药品脱去动物、脱毛法：脱毛系指用化学药品脱去动物的被毛，适用于无菌手术野的准备以及观的被毛，适用于无菌手术野的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和病理变化。察动物局部皮肤血液循环和病理变化。常用脱毛剂的配方：常用脱毛剂的配方：硫化钠硫化钠3g3g、肥皂粉、肥皂粉1g1g，淀粉，淀粉7g7g，加水适量调成，加水适量调成 糊状。糊状。硫化钠硫化钠8g8g、淀粉、淀粉7g7g、糖、糖4g4g、甘油、甘油5g5g、硼砂、硼砂1g1g，加水加水75ml75ml。硫化钠硫化钠8g8g，溶于，溶于100ml100ml水中。水中。以上脱毛剂配方适用于家兔、大白鼠、小白以上脱
28、毛剂配方适用于家兔、大白鼠、小白鼠等小动物的脱毛。鼠等小动物的脱毛。硫化钠硫化钠10g10g、生石灰、生石灰15g15g，溶于，溶于100ml100ml水内，此配水内，此配 方适用于狗等大动物的脱毛。方适用于狗等大动物的脱毛。使用以上各种脱毛剂，都应事先剪短使用以上各种脱毛剂，都应事先剪短被毛，以节省脱毛剂，并减少对皮肤的刺被毛，以节省脱毛剂，并减少对皮肤的刺激反应，应用时用棉球蘸脱毛剂，在所需激反应，应用时用棉球蘸脱毛剂，在所需局部涂一薄层，局部涂一薄层，2-32-3分钟后，用温水洗去脱分钟后，用温水洗去脱落的被毛，以纱布擦干局部，涂一层油脂落的被毛，以纱布擦干局部，涂一层油脂即可。即可。四
29、、实验动物给药途径和方法四、实验动物给药途径和方法 在动物实验中，为了观察药物对机体在动物实验中，为了观察药物对机体功能、代谢及形态引起的变化，常需用药功能、代谢及形态引起的变化，常需用药物给动物。物给动物。给药的方法可分为注射法、摄入法给药的方法可分为注射法、摄入法（用于消化道）、涂布法（用于皮肤）和（用于消化道）、涂布法（用于皮肤）和吸入法（用于呼吸道）等。吸入法（用于呼吸道）等。给药的途径是多种多样的，可根据实给药的途径是多种多样的，可根据实验目的、实验要求、实验动物种类和药物验目的、实验要求、实验动物种类和药物剂型等情况确定。剂型等情况确定。（一）注射法：（一）注射法：1 1、皮下注射
30、：、皮下注射：注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有注射器的连有注射器的5 5（1/21/2）号针头刺入皮下。皮下）号针头刺入皮下。皮下注射一般常用于手术部位的麻醉。注射一般常用于手术部位的麻醉。2 2、肌肉注射、肌肉注射 肌肉注射应选肌肉发达，无大血管通过肌肉注射应选肌肉发达，无大血管通过的部位，一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入的部位，一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，即可进行注射。肌肉，回抽针栓如无回血，即可进行注射。3 3、皮内注射、皮内注射 皮内注射是将药液注入皮肤的表皮和皮内注射是将药液注入皮肤的表皮和真皮之间，操作时需将注射的
31、局部脱去被真皮之间，操作时需将注射的局部脱去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮肤毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用结核菌素注并使之绷紧，在两指之间，用结核菌素注射器连射器连4 4号细针头，紧贴皮肤表层刺入皮内，号细针头，紧贴皮肤表层刺入皮内，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射药然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射药液，此时会感到有较大阻力，可见皮肤表液，此时会感到有较大阻力，可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。面鼓起一白色小皮丘。多用于接种、过敏试验等。多用于接种、过敏试验等。4 4、腹腔注射、腹腔注射 用大、小白鼠做实验时，以左手抓住动用大、小白鼠做实验时，以左手抓住动
32、物，使腹部向上，右手将注射针头于左（或物，使腹部向上，右手将注射针头于左（或右）下腹部刺入皮下，使针头向前推右）下腹部刺入皮下，使针头向前推 0.5 0.51.0cm1.0cm，再以，再以4545角穿过腹肌，固定针头，缓角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤及内脏，可使动物处缓注入药液，为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。若实验动物为于头低位，使内脏移向上腹。若实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm1cm处。处。小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射方法方法 5 5、静脉注射：、静脉注射：静脉注射应根据不同动物选择血管部静脉注射应根据不同动
33、物选择血管部位。大、小鼠多选用尾静脉注射，兔多选位。大、小鼠多选用尾静脉注射，兔多选用耳缘静脉注射，犬多选用后肢小隐静脉用耳缘静脉注射，犬多选用后肢小隐静脉或前肢内侧头静脉注射，豚鼠多选用耳静或前肢内侧头静脉注射，豚鼠多选用耳静脉或后肢小隐静脉注射。脉或后肢小隐静脉注射。因为静脉注射是通过血管内给药，所因为静脉注射是通过血管内给药，所以只限于液体药物，但不能用混悬液。以只限于液体药物，但不能用混悬液。耳缘静脉注射主要用于兔、豚鼠等。兔耳缘静脉注射主要用于兔、豚鼠等。兔耳部血管分布清晰。耳中央为动脉，耳外耳部血管分布清晰。耳中央为动脉，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不常缘为静脉。内缘静脉深
34、不易固定，故不常用。外缘静脉表浅易固定，常用。先拔去用。外缘静脉表浅易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注射器连指垫在下面，右手持注射器连6 6号针头尽量号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入，固定针头，放开食指和中指，将药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。家兔
35、耳缘静脉注射方法家兔耳缘静脉注射方法 尾静脉注射主要用于大、小鼠。鼠尾静尾静脉注射主要用于大、小鼠。鼠尾静脉有三根（上、左、右），左右两侧尾静脉有三根（上、左、右），左右两侧尾静脉比较容易固定，多采用，上侧一根也可脉比较容易固定，多采用，上侧一根也可采用，但位置不容易固定。操作时先将动采用，但位置不容易固定。操作时先将动物固定在鼠盒内或扣在烧杯中，使尾巴露物固定在鼠盒内或扣在烧杯中，使尾巴露出，尾部用出，尾部用45455050的温水浸润的温水浸润1 1分钟或用分钟或用酒精擦拭使血管扩张，并可使表皮角质软酒精擦拭使血管扩张，并可使表皮角质软化。化。以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使以左手拇指和食指
36、捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指和小指夹住尾巴的末梢，右手持注射名指和小指夹住尾巴的末梢，右手持注射器连器连4 4号细针头，使针头与静脉平行（小于号细针头，使针头与静脉平行（小于3030），从尾下），从尾下1/31/3处（约距尾尖处（约距尾尖2-32-3厘米）厘米）处进针，此处皮薄易于刺入，先缓注少量处进针，此处皮薄易于刺入，先缓注少量药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入。注射完毕后把尾部向注射侧可继续注入。注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血。如需反复注射，应尽可能从弯曲以止血。如需反复注
37、射，应尽可能从末端开始，以后向尾根部方向移动注射。末端开始，以后向尾根部方向移动注射。小鼠尾静脉注射方法小鼠尾静脉注射方法狗静脉注射多选前肢内侧皮下头静脉或狗静脉注射多选前肢内侧皮下头静脉或后肢小隐静脉（豚鼠也有时用）注射。后肢小隐静脉（豚鼠也有时用）注射。注射前由助手将动物侧卧，剪去注射注射前由助手将动物侧卧，剪去注射部位的被毛，消毒后，用胶皮带扎紧（或部位的被毛，消毒后，用胶皮带扎紧（或用手捏紧）静脉近端，使血管充盈，从静用手捏紧）静脉近端，使血管充盈，从静脉的远端将注射针头平行刺入血管，待有脉的远端将注射针头平行刺入血管，待有回血后，松开绑带（或两手），缓缓注入回血后，松开绑带（或两手）
38、，缓缓注入药液。药液。狗前肢头静脉狗前肢头静脉注射注射 狗后肢小隐狗后肢小隐静脉注射静脉注射蛙（或蟾蜍）：将蛙或蟾蜍脑脊髓破坏蛙（或蟾蜍）：将蛙或蟾蜍脑脊髓破坏后，仰卧固定于蛙板上，沿腹中线稍左剪后，仰卧固定于蛙板上，沿腹中线稍左剪开腹肌，可见到腹壁静脉贴着腹壁肌肉下开腹肌，可见到腹壁静脉贴着腹壁肌肉下行，将注射针头沿血管平行方向刺入即可。行，将注射针头沿血管平行方向刺入即可。其它还有浅背侧足中静脉注射、股静其它还有浅背侧足中静脉注射、股静脉或颈外静脉注射在不同动物中也偶用。脉或颈外静脉注射在不同动物中也偶用。蛙腹壁静脉蛙腹壁静脉注射注射 几种常用的动物不同给药途径的注射量几种常用的动物不同给
39、药途径的注射量(ml)注射注射途径途径 小鼠小鼠 大鼠大鼠 豚鼠豚鼠 兔兔 狗狗 腹腔腹腔 0.2-1.0 1-3 2-5 5-10 5-15 肌肉肌肉 0.1-0.2 0.2-0.5 0.2-0.5 0.5-1.0 2-5 静脉静脉 0.2-0.5 1-2 1-5 3-10 5-15 皮下皮下 0.1-0.5 0.5-1.0 0.5-2 1.0-3.0 3-10 6 6、淋巴囊注射、淋巴囊注射 蛙类常采用此法，因其皮下有数个淋巴蛙类常采用此法，因其皮下有数个淋巴囊，注入药物甚易吸收。腹部淋巴囊和头背淋囊，注入药物甚易吸收。腹部淋巴囊和头背淋巴囊常作为蛙类给药途径。一般多选用腹部淋巴囊常作为蛙
40、类给药途径。一般多选用腹部淋巴囊给药。注射时将针头从蛙大腿上端刺入，巴囊给药。注射时将针头从蛙大腿上端刺入，经大腿肌层入腹壁肌层，再进入腹壁皮下，即经大腿肌层入腹壁肌层，再进入腹壁皮下，即进入淋巴囊，然后注入药液。有时也可采用胸进入淋巴囊，然后注入药液。有时也可采用胸淋巴囊给药。方法是将针头刺入口腔，使穿过淋巴囊给药。方法是将针头刺入口腔，使穿过下颌肌层入胸淋巴囊内注入药液，一次最大注下颌肌层入胸淋巴囊内注入药液，一次最大注射量为射量为1 1毫升。蛙全身分布为咽、胸、背、腹毫升。蛙全身分布为咽、胸、背、腹侧、腹、大腿和脚等七个淋巴囊。侧、腹、大腿和脚等七个淋巴囊。蛙全身淋巴囊分布蛙全身淋巴囊分
41、布7 7、椎管内注射：、椎管内注射：此法主要用于椎管麻醉或抽取脑脊液。此法主要用于椎管麻醉或抽取脑脊液。将家兔作自然俯卧式，在第七腰椎位置剪将家兔作自然俯卧式，在第七腰椎位置剪毛消毒。将其尾端向腹侧弯曲，使腰骶部毛消毒。将其尾端向腹侧弯曲，使腰骶部凸出，在第七腰椎与第一骶椎之间摸到第凸出，在第七腰椎与第一骶椎之间摸到第七腰椎间隙，插入腰椎穿刺针头。当针到七腰椎间隙，插入腰椎穿刺针头。当针到达椎管内时（珠网膜下腔），可见到兔的达椎管内时（珠网膜下腔），可见到兔的后肢跳动，即证明穿刺针头已进入椎管。后肢跳动，即证明穿刺针头已进入椎管。这时不要再向下刺，以免损伤脊髓。固定这时不要再向下刺，以免损伤脊
42、髓。固定好针头，即可将药物注入。好针头，即可将药物注入。8 8小脑延髓池给药小脑延髓池给药 此种给药是在动物此种给药是在动物麻醉情况下进行的。而且常采用大动物如麻醉情况下进行的。而且常采用大动物如狗等，小动物很少采用。将狗麻醉后，使狗等，小动物很少采用。将狗麻醉后，使狗头尽量向胸部屈曲，用左手摸到其第一狗头尽量向胸部屈曲，用左手摸到其第一颈椎上方的凹陷（枕骨大孔），固定位置，颈椎上方的凹陷（枕骨大孔），固定位置，右手取右手取7 7号钝针头（将针头尖端磨钝），号钝针头（将针头尖端磨钝），由此凹陷的正中线上，顺平行狗的方向，由此凹陷的正中线上，顺平行狗的方向，小心地刺入小脑延髓池。小心地刺入小脑延
43、髓池。当针头正确刺入小脑延髓池时，注射当针头正确刺入小脑延髓池时，注射者会感到针头再向前穿时无阻力，同时可者会感到针头再向前穿时无阻力，同时可以听到很轻的以听到很轻的“咔嚓咔嚓”一声，即表示针头一声，即表示针头已穿过硬脑膜进入小脑延髓池，而且可抽已穿过硬脑膜进入小脑延髓池，而且可抽出清亮的脑脊液，注射药物前，先抽出一出清亮的脑脊液，注射药物前，先抽出一些脑脊液，抽取量根据实验需要注入多少些脑脊液，抽取量根据实验需要注入多少药液决定，即注入多少抽取多少，以保持药液决定，即注入多少抽取多少，以保持原来脑脊髓腔里的压力。原来脑脊髓腔里的压力。狗小脑延髓池给药狗小脑延髓池给药9 9、脑内给药：、脑内给
44、药：此法常用于微生物学动物实验，将病此法常用于微生物学动物实验，将病原体等接种于被检动物脑内，然后观察接原体等接种于被检动物脑内，然后观察接种后的各种变化。小鼠脑内给药时，选套种后的各种变化。小鼠脑内给药时，选套有塑料管、针尖露出有塑料管、针尖露出2mm2mm深的针头，消毒深的针头，消毒后，由鼠正中额部刺入脑内，注入药物或后，由鼠正中额部刺入脑内，注入药物或接种物。给豚鼠、兔、狗等进行脑内注射接种物。给豚鼠、兔、狗等进行脑内注射时，须先用穿颅钢针穿透颅骨，再用注射时，须先用穿颅钢针穿透颅骨，再用注射器针头刺入脑部，再徐徐注入被检物。注器针头刺入脑部，再徐徐注入被检物。注射速度一定要慢，避免引起
45、颅内压急骤升射速度一定要慢，避免引起颅内压急骤升高。高。1010、关节腔内给药、关节腔内给药：此种方法常用于关节炎的动物模型此种方法常用于关节炎的动物模型复制。兔给药时，将兔仰卧固定于兔固定复制。兔给药时，将兔仰卧固定于兔固定台上，剪去关节部被毛，用碘酒或酒精消台上，剪去关节部被毛，用碘酒或酒精消毒，然后用手从下方和两旁将关节固定，毒，然后用手从下方和两旁将关节固定，把皮肤稍移向一侧，在膑韧带附着点处上把皮肤稍移向一侧，在膑韧带附着点处上方约方约0.50.5厘米处进针。针头从上前方向下后厘米处进针。针头从上前方向下后方倾斜刺进，直至针头遇阻力变小，然后方倾斜刺进，直至针头遇阻力变小，然后针头稍
46、后退，以垂直方向推到关节腔中。针头稍后退，以垂直方向推到关节腔中。针头进入关节腔时，通常可有好象刺破薄针头进入关节腔时，通常可有好象刺破薄膜的感觉，表示针头已进入膝关节腔内，膜的感觉，表示针头已进入膝关节腔内，即可注入药液。即可注入药液。（二）摄入法给药（二）摄入法给药 摄入法给药可分为自动口服给药、强摄入法给药可分为自动口服给药、强制灌胃给药和注入直肠给药三种方式。制灌胃给药和注入直肠给药三种方式。1 1、自动口服给药：把药物放入饲料或溶入、自动口服给药：把药物放入饲料或溶入饮水中让动物自动摄取。此法简单方便，饮水中让动物自动摄取。此法简单方便，不会因操作失误导致动物死亡。但由于动不会因操作
47、失误导致动物死亡。但由于动物状态和嗜好不同，饮水和饲料的摄取量物状态和嗜好不同，饮水和饲料的摄取量不同不能保证给药量准确。一般适用于动不同不能保证给药量准确。一般适用于动物疾病的防治、药物的毒性观察、某些与物疾病的防治、药物的毒性观察、某些与食物有关的人类疾病的复制等。食物有关的人类疾病的复制等。2 2、强制灌胃给药：在急性试验中，经口给、强制灌胃给药：在急性试验中，经口给药多用灌胃法，此法剂量准确，适用于小白药多用灌胃法，此法剂量准确，适用于小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔等动物。鼠、大白鼠、豚鼠、家兔等动物。小鼠、大鼠（或豚鼠）用输血针头或小号小鼠、大鼠（或豚鼠）用输血针头或小号腰穿针头，将其尖
48、端斜面磨去，用焊锡在针腰穿针头，将其尖端斜面磨去，用焊锡在针尖周围焊一圆头，注意勿堵塞针孔，即成灌尖周围焊一圆头，注意勿堵塞针孔，即成灌胃针；亦可用烧成圆头的硬质玻璃毛细管或胃针；亦可用烧成圆头的硬质玻璃毛细管或特制的塑料毛细管，作为导管。特制的塑料毛细管，作为导管。灌胃时将针接在注射器上，吸入药液。灌胃时将针接在注射器上，吸入药液。左手抓住鼠背部及颈部皮肤将动物固定，右左手抓住鼠背部及颈部皮肤将动物固定，右手持注射器，将灌胃针插入动物口中，沿咽手持注射器，将灌胃针插入动物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。动物应固定成垂直体位，后壁徐徐插入食道。动物应固定成垂直体位，针插入时应无阻力。若感到阻力或动
49、物挣扎针插入时应无阻力。若感到阻力或动物挣扎时，应立即停止进针或将针拔出，以免损伤时，应立即停止进针或将针拔出，以免损伤或穿破食道以及误入气管。或穿破食道以及误入气管。一般当灌胃针插入小鼠一般当灌胃针插入小鼠3 34cm4cm，大鼠或，大鼠或豚鼠豚鼠4-6cm4-6cm后可将药物注入。常用的灌胃量小后可将药物注入。常用的灌胃量小鼠为鼠为1ml1ml，大鼠，大鼠4-7ml4-7ml，豚鼠为，豚鼠为5-8ml5-8ml。狗、兔、猫、猴灌胃时，先将动物固定，狗、兔、猫、猴灌胃时，先将动物固定，再将特制的扩口器放入动物口中，扩口器再将特制的扩口器放入动物口中，扩口器之宽度可视动物口腔大小而定，如狗的扩
50、之宽度可视动物口腔大小而定，如狗的扩口器可用木料制成长方形，长约口器可用木料制成长方形，长约10-15cm10-15cm，粗细应适合狗嘴，约粗细应适合狗嘴，约2-3cm2-3cm，中间钻一小孔，中间钻一小孔，孔的直径为孔的直径为0.5-1.0cm0.5-1.0cm。灌胃时将扩口器放于上述动物上下门灌胃时将扩口器放于上述动物上下门牙之后，并用绳将它固定于嘴部，将带有牙之后，并用绳将它固定于嘴部，将带有弹性的橡皮导管（如导尿管），经扩口器弹性的橡皮导管（如导尿管），经扩口器上的小圆孔插入，沿咽后壁而进入食道，上的小圆孔插入，沿咽后壁而进入食道，此时应检查导管是否正确插入食道，可将此时应检查导管是否
