1、第五节 有害微生物的控制消 毒（部 分 杀 灭）杀 菌溶 菌灭 菌（彻 底 杀 灭）杀 灭防 腐（抑 制 霉 腐 微 生 物）化 疗（抑 制 宿 主 体 内 病 原 菌）抑 制除 菌控 制 有 害 菌 的 措 施一、几个基本概念灭菌（灭菌（sterilization）采用强烈的礼花因素是任何物体内外部的一切微生物永采用强烈的礼花因素是任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施，称为灭菌。远丧失其生长繁殖能力的措施，称为灭菌。消毒（消毒（disinfection）采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部的一部采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的病原菌，而对
2、被处理物体基本无害的措分对人体有害的病原菌，而对被处理物体基本无害的措施，称为消毒。施，称为消毒。防腐（防腐（antisepsis）利用理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达利用理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止物品发生霉腐的措施，称为防腐。到防止物品发生霉腐的措施，称为防腐。化疗（化疗（chemotherapy）即化学治疗。利用具有高度选择毒力的化学物质抑制宿即化学治疗。利用具有高度选择毒力的化学物质抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，以达到治疗该传染病的主体内病原微生物的生长繁殖，以达到治疗该传染病的一种措施。一种措施。二、物理灭菌的代表高温火焰灼烧法烘箱热空气灭菌法干
3、热灭菌法巴氏消毒法煮沸消毒法间歇灭菌法高压蒸汽灭菌法湿热灭菌（消毒）法高温灭菌（消毒）法1 1、高温灭菌、高温灭菌（消毒）法（消毒）法是最常用的是最常用的物理方法。高物理方法。高温可引起蛋白温可引起蛋白质、核酸等活质、核酸等活性大分子氧化性大分子氧化或变性失活而或变性失活而导致微生物死导致微生物死亡。亡。干热灭菌法（干热灭菌法（dry heat sterilization）干燥热空气灭菌法干燥热空气灭菌法(hot-air oven)：将物品放入烘箱内，然将物品放入烘箱内，然后升温至后升温至150150170 170，维持，维持1 12 2小时。适用于玻璃、陶小时。适用于玻璃、陶瓷和金属物品的灭
4、菌，不适合液体样品，及棉花、纸张、纤瓷和金属物品的灭菌，不适合液体样品，及棉花、纸张、纤维和橡胶类物质的灭菌。由于空气传热穿透力差，菌体在脱维和橡胶类物质的灭菌。由于空气传热穿透力差，菌体在脱水状态下不易杀死，所以温度高、时间长。水状态下不易杀死，所以温度高、时间长。灼烧法（灼烧法（incineration）：）：将被灭菌物品在火焰中灼烧，将被灭菌物品在火焰中灼烧，使所有的生物质碳化。适用于不怕烧的实验器具，如接种使所有的生物质碳化。适用于不怕烧的实验器具，如接种环、镊子、试管或三角瓶口的灭菌等。环、镊子、试管或三角瓶口的灭菌等。湿热法湿热法(moist heat sterilization)
5、：特点：温度低、时间短、灭菌效果高特点：温度低、时间短、灭菌效果高原因：原因：1)菌体内含水量越高，则凝固温度越低；菌体内含水量越高，则凝固温度越低；2)蒸汽冷凝会放出潜热；蒸汽冷凝会放出潜热；3)饱和水蒸汽穿透力强；饱和水蒸汽穿透力强；4)易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定性，如氢键结构。易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定性，如氢键结构。高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升，以达到利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升，以达到100 以上高温灭菌的方法。以上高温灭菌的方法。方法：方法：121（1kg/cm2或或15磅磅/英寸英寸2）维持）维持1520min。112（0.5k
6、g/cm2或或8磅磅/英寸英寸2）2030min。115（0.75kg/cm2或或11磅磅/英寸英寸2）2030min。应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度例如：例如：生理盐水、营养琼脂等培养基用生理盐水、营养琼脂等培养基用121。含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112。适用：适用：耐高温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品。耐高温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品。高高 压压 蒸蒸 汽汽 灭灭 菌菌 锅锅注意事项：注意事项：排净冷空气；排净冷空气；灭菌终了，缓慢降压；灭菌终了，缓慢降压；灭菌结束，趁热取出物品。灭菌结束，趁
7、热取出物品。煮沸消毒法煮沸消毒法 将水加热至将水加热至100，煮沸，煮沸15min30min，可杀死所有营养细，可杀死所有营养细胞和部分芽孢，达到消毒物的目的。胞和部分芽孢，达到消毒物的目的。巴斯德消毒法（巴斯德消毒法（Pasteurization）：）：用较低的温度来杀死其中的病源微生物，这样既保持食品用较低的温度来杀死其中的病源微生物，这样既保持食品的营养风味，又进行了消毒。该法一般是将待消毒的液体食的营养风味，又进行了消毒。该法一般是将待消毒的液体食品置于品置于62处理处理30min，然后迅速冷却。即可达到消毒目的。，然后迅速冷却。即可达到消毒目的。低温长时法：低温长时法：62.930m
8、in处理牛奶；处理牛奶；高温瞬时法：高温瞬时法：71.615s处理牛奶；处理牛奶；超高温巴斯德灭菌法：超高温巴斯德灭菌法：让液体食品停留在让液体食品停留在140左右左右3-4s，急，急剧冷却至剧冷却至75，经匀质化后冷却至，经匀质化后冷却至20。间歇灭菌法：间歇灭菌法：将待灭菌物品在将待灭菌物品在80-10080-100蒸煮蒸煮151560min60min，冷却后搁置，冷却后搁置室温（室温（28283737）下过夜，并重复以上过程三遍以上。）下过夜，并重复以上过程三遍以上。其蒸煮过程可杀死微生物的营养体，但不能杀死芽胞，其蒸煮过程可杀死微生物的营养体，但不能杀死芽胞，室温过夜促使残留的芽孢萌发
9、成营养体，再经蒸煮过程可室温过夜促使残留的芽孢萌发成营养体，再经蒸煮过程可杀死新的营养体；循环三次以上可保证彻底灭菌的目的。杀死新的营养体；循环三次以上可保证彻底灭菌的目的。适用于不耐高温的物品灭菌，如不适于高压灭菌的特殊适用于不耐高温的物品灭菌，如不适于高压灭菌的特殊培养基、药品的灭菌。培养基、药品的灭菌。缺点是麻烦、费时。缺点是麻烦、费时。高温对培养基的影响及其防止措施高温对培养基的不利影响：高温对培养基的不利影响：产生混浊或形成不溶性沉淀产生混浊或形成不溶性沉淀破坏营养（破坏营养（PO4-3存在，葡萄糖生成酮糖，菌不利用存在，葡萄糖生成酮糖，菌不利用）；）；色泽加深（褐变如产生氨基糖等）
10、；色泽加深（褐变如产生氨基糖等）；改变培养基的改变培养基的pH值值（通常下降（通常下降0.2）；形成有害物质，抑制微生物生长；形成有害物质，抑制微生物生长；消除有害影响的措施消除有害影响的措施采用特殊的加热灭菌法采用特殊的加热灭菌法过滤除菌法过滤除菌法其他方法其他方法三、消毒剂、防腐剂和治疗剂（一）一）消毒剂和防腐剂消毒剂和防腐剂消毒剂消毒剂:可以抑制或杀灭微生物，但对人体也可能产生可以抑制或杀灭微生物，但对人体也可能产生有害作用的化学试剂有害作用的化学试剂.主要用于抑制或杀灭物体表面主要用于抑制或杀灭物体表面、器械、排泄物和环境中的微生物。、器械、排泄物和环境中的微生物。防腐剂防腐剂:可以抑
11、制或阻止微生物生长，但对人体或动物可以抑制或阻止微生物生长，但对人体或动物体的毒性较低的化学药剂体的毒性较低的化学药剂.用于机体表面，如皮肤用于机体表面，如皮肤、粘膜、伤口等处防止感染，也有的用于食品、饮料、粘膜、伤口等处防止感染，也有的用于食品、饮料药品的防腐作用。药品的防腐作用。但现时消毒剂和防腐剂间的界限已并不很严格但现时消毒剂和防腐剂间的界限已并不很严格.消毒防腐剂的作用机理消毒防腐剂的作用机理一般有下列三种方式一般有下列三种方式:使微生物蛋白质凝固变性使微生物蛋白质凝固变性,发生沉淀发生沉淀.如酒精等如酒精等.破坏菌体的酶系统破坏菌体的酶系统,影响菌体代谢影响菌体代谢.如过氧化氢如过
12、氧化氢等等.降低微生物表面张力降低微生物表面张力,增加细胞膜的通透性增加细胞膜的通透性,使使细胞发生破裂或溶解细胞发生破裂或溶解.如来苏儿等酚类物质如来苏儿等酚类物质.常用的消毒防腐剂及其应用 类型类型 名称及使用方法名称及使用方法 作用原理作用原理 应用范围应用范围 醇类醇类 70%75%乙醇乙醇脱水、蛋白质脱水、蛋白质变性变性皮肤、器皿皮肤、器皿 醛类醛类 0.5%10%甲醛甲醛2%戊二醛（戊二醛（pH=8）蛋白质变性蛋白质变性房间、物品消毒（不房间、物品消毒（不适合食品厂）适合食品厂）酚类酚类 3%5%石炭酸石炭酸 2%来苏儿来苏儿3%5%来苏儿来苏儿破坏细胞膜、破坏细胞膜、蛋白质变性蛋
13、白质变性地面、器具地面、器具皮肤皮肤地面、器具地面、器具氧化氧化剂剂0.1%高锰酸钾高锰酸钾3%过氧化氢过氧化氢0.2%0.5%过氧乙酸过氧乙酸氧化蛋白质活氧化蛋白质活性基团，酶失性基团，酶失活活皮肤、水果、蔬菜皮肤、水果、蔬菜皮肤、物品表面皮肤、物品表面水果、蔬菜、塑料等水果、蔬菜、塑料等类型类型 名称及使用方法名称及使用方法 作用原理作用原理 应用范围应用范围重重金金属属盐盐类类0.05%0.1%升汞升汞2%红汞红汞0.1%1%硝酸银硝酸银0.1%0.5%硫酸铜硫酸铜蛋白质变性、酶失活蛋白质变性、酶失活变性、沉淀蛋白变性、沉淀蛋白蛋白质变性、酶失活蛋白质变性、酶失活非金属器皿非金属器皿皮肤
14、、粘膜、伤口皮肤、粘膜、伤口皮肤、新生儿眼睛皮肤、新生儿眼睛防治植物病害防治植物病害表表面面活活性性剂剂0.05%0.1%新洁尔灭新洁尔灭0.05%0.1%杜灭芬杜灭芬蛋白变性、破坏细胞蛋白变性、破坏细胞膜膜皮肤、粘膜、器械皮肤、粘膜、器械皮肤、金属、棉织皮肤、金属、棉织品、塑料品、塑料类型类型 名称及使用方法名称及使用方法 作用原理作用原理 应用范围应用范围卤素及其卤素及其化合物化合物0.20.5mg/L氯气氯气10%20%漂白粉漂白粉0.5%1%漂白粉漂白粉2.5%碘酒碘酒破坏细胞膜、蛋破坏细胞膜、蛋白质白质饮水、游泳池水饮水、游泳池水地面地面水、空气等水、空气等皮肤皮肤 染料染料2%4%
15、龙胆紫龙胆紫与蛋白质的羧基与蛋白质的羧基结合结合皮肤、伤口皮肤、伤口 酸类酸类 0.1%苯甲酸苯甲酸 0.1%山梨酸山梨酸食品防腐食品防腐食品防腐食品防腐效应评价指标：效应评价指标：最低抑制浓度（最低抑制浓度（Minimum Inhibitory Concentration,MIC）半致死剂量（半致死剂量（50 lethal dose,LD50）最低致死剂量（最低致死剂量（Minimum lethal dose,MLD）石碳酸系数石碳酸系数（phenol coefficient）（二）化学治疗剂概念概念：化学治疗剂是指那些化学治疗剂是指那些能够能够特异性特异性地作用于某些微生地作用于某些微生物
16、并物并具有选择毒性具有选择毒性的化学药剂，它们与非特异的化学药剂的化学药剂，它们与非特异的化学药剂相比对人体几乎没有什么毒性或毒性很小，可用作治疗微相比对人体几乎没有什么毒性或毒性很小，可用作治疗微生物引起的疾病。生物引起的疾病。既可涂抹肌体表面，也可以通过口服或注射吸收到体内。既可涂抹肌体表面，也可以通过口服或注射吸收到体内。种类：种类：.抗代谢药物抗代谢药物人工合成人工合成 .抗生素抗生素微生物产生微生物产生1、抗代谢类药物（生长因子类似物）:概念：概念：有些化合物在结构上与生物体有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢物所必需的代谢物很相似，很相似，以致于可以和特定的酶结合，从而阻碍酶的功
17、能，干扰代谢以致于可以和特定的酶结合，从而阻碍酶的功能，干扰代谢的正常进行，这些物质叫的正常进行，这些物质叫抗代谢物抗代谢物，用于疾病治疗，称抗代，用于疾病治疗，称抗代谢类药物，如：磺胺类药物。谢类药物，如：磺胺类药物。机理：机理：作为细菌细胞基本生长因子的竞争性抑制剂作为细菌细胞基本生长因子的竞争性抑制剂（与相应酶（与相应酶竞争性结合）竞争性结合）而阻止微生物对生长因子的利用，因而可以抑制而阻止微生物对生长因子的利用，因而可以抑制微生物的生长。微生物的生长。只有当正常代谢产物的量少或不存在时，抗代只有当正常代谢产物的量少或不存在时，抗代谢物才有用。谢物才有用。种类种类：磺胺药磺胺药对氨基苯甲
18、酸对氨基苯甲酸 ；6-6-巯基嘌呤巯基嘌呤嘌呤；嘌呤；5-5-甲基色氨酸甲基色氨酸氨基酸；氨基酸；异烟肼异烟肼吡哆醇。吡哆醇。磺胺药作用机理：细菌需要利用对氨基苯甲酸细菌需要利用对氨基苯甲酸(PABA)合成生长所需的叶酸合成生长所需的叶酸(THFA)：二氢蝶啶二氢蝶啶 +对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸 二氢蝶酸二氢蝶酸 二氢叶酸二氢叶酸 四氢叶酸四氢叶酸磺胺药磺胺药 核酸合成核酸合成 辅酶辅酶F F二氢蝶酸合成酶二氢叶酸 还原酶二氢叶酸合成酶2、抗生素：概念：概念：抗生素：抗生素：微生物在其生命过程中所产生的一类微生物在其生命过程中所产生的一类低分子量低分子量代谢代谢产物，在产物，在很低浓度下很低浓
19、度下就能抑制或杀死其它微生物的生长。就能抑制或杀死其它微生物的生长。抗菌谱：抗菌谱：抗生素的作用对象有一定范围，这种作用范围称该抗生素的作用对象有一定范围，这种作用范围称该抗生素的抗菌谱。广谱：对多种微生物有作用（如：土霉抗生素的抗菌谱。广谱：对多种微生物有作用（如：土霉素、四环素）；窄谱：仅对某一类微生物有作用（如：多素、四环素）；窄谱：仅对某一类微生物有作用（如：多粘菌素）粘菌素）作用机制：l抑制细胞壁的合成；（如：青霉素）抑制细胞壁的合成；（如：青霉素）l破坏细胞膜功能；（如：多粘菌素可作用于膜磷脂使膜溶解）破坏细胞膜功能；（如：多粘菌素可作用于膜磷脂使膜溶解）l抑制蛋白质合成；（如：氯霉素，四环素、链霉素等）抑制蛋白质合成；（如：氯霉素，四环素、链霉素等）l干扰核酸代谢；（如：利福霉素、新生霉素、丝裂霉素、灰黄霉干扰核酸代谢；（如：利福霉素、新生霉素、丝裂霉素、灰黄霉素）素）
