1、1临床基础检验学临床基础检验学clinical laboratory technologyclinical laboratory technology2(一)尿蛋白的组成 按分子量大小三组:1.高分子量蛋白:9万,如T-H蛋白、IgA;正常含量极微。2.中分子量蛋白:49万,以白蛋白为主;占1/2 2/3。3.低分子量蛋白:4万,游离轻链、2-微球蛋白等。正常尿液中极少。第二节 尿液蛋白质检查P12230130mg/24h3蛋白尿蛋白尿:各种原因造成蛋白质含量超各种原因造成蛋白质含量超150mg/24h150mg/24h或或100mg/L100mg/L时,蛋白定性试验时,蛋白定性试验()时称蛋
2、白尿。时称蛋白尿。肾小球性蛋白尿肾小球性蛋白尿肾小管性蛋白尿肾小管性蛋白尿混合性蛋白尿:混合性蛋白尿:溢出性蛋白尿:溢出性蛋白尿:偶然性蛋白尿:偶然性蛋白尿:生理性蛋白尿:生理性蛋白尿:4一一 蛋白尿的形成原因和机制蛋白尿的形成原因和机制1.1.肾小球性蛋白尿:临床最多见的蛋白尿肾小球性蛋白尿:临床最多见的蛋白尿 肾小球受损害,毛细血管壁破裂,孔径加大,电荷屏障受损 成分:白蛋白为主,约占70%80%,尿蛋白排出量较多,常2g/24h。见于:肾小球疾病:5(1)选择性蛋白尿:肾小球损伤较轻)选择性蛋白尿:肾小球损伤较轻 成分:成分:中相对分子质量的清蛋白(中相对分子质量的清蛋白(AT、Tf)及
3、少量小相对分)及少量小相对分 子质量蛋白,子质量蛋白,尿蛋白半定量多为尿蛋白半定量多为+(2)非选择性蛋白尿:肾小球毛细血管壁严重破裂)非选择性蛋白尿:肾小球毛细血管壁严重破裂 成分:成分:大和中相对分子质量蛋白质同时存在大和中相对分子质量蛋白质同时存在 尿蛋白半定量多为尿蛋白半定量多为+多见于原发性肾小球疾病多见于原发性肾小球疾病 出现提示预后差出现提示预后差 62.2.肾小管性蛋白尿肾小管性蛋白尿 近曲小管对低分子量蛋白的重吸收功能减退 成分:成分:以小分子蛋白为主。如2微球蛋白增多,尿蛋白含量较低,一般1g/24h。见于:肾盂肾炎、间质肾炎、肾小管性酸中毒、重金属中毒3.3.混合性蛋白尿
4、:混合性蛋白尿:肾小球及肾小管都受损 成分:2微球蛋白清蛋白为主,大、中、小均增多 见于:病变同时累及肾小球和肾小管74.4.溢出性蛋白尿:溢出性蛋白尿:超过肾小管回吸收的极限超过肾小管回吸收的极限 成分:成分:主要为低分子量蛋白质。主要为低分子量蛋白质。见于:见于:MMMM,HAHA和肌损伤和肌损伤5.5.组织性蛋白尿:组织性蛋白尿:组织破坏、组织细胞代谢等产生组织破坏、组织细胞代谢等产生成分:成分:T-HT-H为主为主含量:含量:定性:定性:+定量:定量:0.0.g gh h86.6.生理性蛋白尿:生理性蛋白尿:功能性蛋白尿:一般不超过(),定量小于0.5g/24h,多见于青少年。体位性蛋
5、白尿:起床活动时蛋白定性可达(2)甚至(3)平卧后(-)。多见于青少年。97.7.偶然性蛋白尿:偶然性蛋白尿:一般不伴有肾本身的损害,又称假性蛋白尿。一般不伴有肾本身的损害,又称假性蛋白尿。成分:成分:尿中有多量血、脓、粘液等。尿中有多量血、脓、粘液等。见于:见于:泌尿道泌尿道 的炎症、出血等。的炎症、出血等。10尿蛋白定性试验尿蛋白定性试验加热乙酸法:加热乙酸法:【原理】加热煮沸蛋白质变性凝固加乙酸 尿PH接近蛋白质等电点(PH5左右)加速蛋白质沉淀。结果判断 仍清晰(-)黑色背景下轻微混浊()白雾状混浊(+)明显白色颗粒状混浊(2+)大量絮状沉淀(3+)出现白色凝固块沉淀(4+)【参考值】
6、尿蛋白定性试验:(-)112.磺基水杨酸法:与白、球蛋白等均起反应,为筛选试验之首选,但易出现假阳性。敏感性:0.050.1g/L3.干化学试带法:简便快速,适用于人群普查,用于尿液分析仪,以减少目测误差。【报告方式】蛋白定性:(-)或(+)评价:与白、球蛋白均起反应,敏感性低。尿蛋白可疑或阳性的确证试验。敏感度:为0.15g/L医学全在线网站医学全在线网站med126 12 临床意义临床意义 1 1 病理性蛋白尿:病理性蛋白尿:肾前性蛋白尿:本周蛋白尿、血红蛋白尿,肌红蛋白尿、溶菌酶尿等。肾性蛋白尿:见于肾小球或肾小管疾病,可因炎症、血管病(高血压病)、中毒等原因引起。肾后性蛋白:见于肾盂、
7、输尿管、膀胱、尿道的 炎症、肿瘤、结石。动态观察尿蛋白结果对上述疾病的诊断、病情观察、判断疗效和 及时了解是否出现药物副作用等均有一定意义。132 2蛋白尿的分类:蛋白尿的分类:按尿中含蛋白量的多少分类 轻度的蛋白尿:量:尿蛋白含量0.5g/24h,见于:肾小管及肾小球病变的非活动期、肾盂肾炎、体位性蛋白尿等;中度蛋白尿:量:尿蛋白含量为在0.5-4g/24h,见于:除肾炎外,见于高血压肾动脉硬化、MM等;14重度蛋白尿:量:4g/24h,见于:急、慢性肾小球肾炎及红斑狼疮性肾炎、肾病综合征等。15第三节 尿糖检查一、定义一、定义尿糖定性试验呈阳性的尿液称糖尿尿糖定性试验呈阳性的尿液称糖尿16
8、二二.糖尿原因及形成机制:血中的葡萄糖浓度。肾血流量:1200ml 肾糖阈:正常人空腹血糖浓度3.9.mmol 当血中葡萄糖浓度大于8.8mmol/L时,即出现糖尿临床上把尿中出现葡萄糖时的血浆葡萄糖浓度水平,称肾糖域。17班氏尿糖定性试验:班氏尿糖定性试验:G+Cu2+Cu+热碱溶液CuOH(黄色)Cu2O(红色)原理原理三三.检测检测18结果结果()仍呈透明蓝色()蓝绿色半透明,冷却后见少量黄绿色沉淀。()翠绿色不透明,有少量黄绿色沉淀(以绿为主)(2(2)黄绿色混浊,有较多黄绿色沉淀(以黄为主)(3(3)土黄色混浊,煮沸15s,有大量土黄色沉淀(4(4)开始煮沸时见红棕色或砖红色沉淀。医
9、学全在线网站医学全在线网站med126 19注意事项:尿标本要新鲜。试剂与尿比例应为10:1。尿中如含大量尿酸盐,煮沸后浑浊略带绿色,但沉淀是蓝灰色的。非糖还原物质在尿中浓度过高时可呈阳性反应。如链霉素、青霉素、水扬酸、VitC等。大量蛋白质和黄疸对结果有影响20 定性:正常阴性(-)定量:浓度为0.1-0.8mmol/L(1-15mg/dl)五五.参考值参考值 四四.方法学评价方法学评价 葡萄糖氧化酶试带法:特异性强、灵敏度高、简便、快速、并可用于尿化学分析仪。班氏尿糖定性试验:测定尿中葡萄糖的非特异试验。21六六.临床意义临床意义 1血糖增高性糖尿病(1)摄入性糖尿:因短时间摄入大量糖类而
10、引起。(2)应激性糖尿:(3)代谢性糖尿:清晨空腹尿中尿糖呈持续阳性,最常见于因胰岛素绝对或相对不 足所致糖尿病(diabetes mellitus)临床表现:三多一少(4)内分泌性糖尿:甲状腺功能亢进、肢端肥症、嗜铬细胞瘤、库欣综合征等222.血糖正常性糖尿(肾性糖尿):肾小管重吸收减低,肾糖阈减低(1)家簇性肾性糖尿:fanconi综合症(2)新生儿糖尿(3)后天获得性糖尿:(4)妊娠期或哺乳期妇女:鉴别要点:肾性糖尿时空腹血糖及糖耐量 试验结果均正常.3.其它:乳糖、半乳糖、果糖、戊糖等.23酮体(ketones,KET)组成:乙酰乙酸、羟丁酸、丙酮一、概述:第四节第四节 尿酮体检查尿酮
11、体检查酮体主要是脂肪酸分解代谢过程中的中间产物。肝中产生,肝外组织利用。主要用于氧化供能。酮尿的形成:正常情况下:肝产生的酮体 肝外组织 氧化供能 血液 异常情况下:当糖类代谢发生障碍时,脂肪 代谢会代尝性增加,肝内产生酮体 肝外利用血中酮体增加 超过肾阈值尿中出现酮体(酮尿)。P134241.酮体为酸性物质,可引起人体全身乏力,不适。2.呼吸中有酮体的烂水果味。3.恶心、呕吐。4.酮体长期存在引起酸中毒,昏迷、危及生命。医学全在线网站医学全在线网站med126 25二二.检测方法检测方法 亚硝基铁氰化钠试管法或粉剂检查法、干化学试带法.原理原理酮体亚硝基铁氰化钠生成紫红色化合物碱性注:注:乙
12、酰乙酸的灵敏度最高,羟丁酸不反应。26三三.临床意义:临床意义:常规定性法是阴性()1.糖尿病酮症酸中毒:早期诊断。并能与低血糖、心脑疾病 乳酸中毒和高血糖高渗性糖尿病昏迷 区别。2.非糖尿病性酮症者:长期禁食的病人、妊娠中毒等 3.中毒:如氯仿、磷中毒等也可造成酮体增加 4.服用双胍类降糖药:降糖灵等一些药物27第六节第六节 尿液胆色素检查尿液胆色素检查 胆红素:bilirubin BIL尿胆原:urobilinogen URO尿胆素:urobilin URO俗称尿“尿三胆”一、尿中胆色素成分:一、尿中胆色素成分:P13528二、来源及正常代谢途径:二、来源及正常代谢途径:1.胆色素来源有三
13、:衰老红细胞的Hb分解后形成的;骨髓中少量原位溶血的幼红细胞分解形成的;其它非Hb性含铁卟啉物质分解而来的;29各种黄疸形成机制图待补2 2、代谢途经、代谢途经未结合胆红素未结合胆红素被肝细胞摄取被肝细胞摄取结合胆红素结合胆红素随胆汁排随胆汁排入肠道,入肠道,尿胆原尿胆原粪便排粪便排出体外出体外少部分少部分随血经随血经肾由尿肾由尿排出排出肝肠肝肠循环循环被重吸收被重吸收进入血液进入血液30三、临床意义:主要用来鉴别三种类型的黄疸:溶血性黄疸、阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸。31胆红素(胆红素(-)尿胆原(尿胆原(+)粪胆原、粪胆素均增多粪胆原、粪胆素均增多医学全在线网站医学全在线网站med126 3
14、2胆红素(胆红素(+)尿胆原(尿胆原(+)反流入血反流入血不能全部转化不能全部转化直接胆红素直接胆红素直接胆红素直接胆红素33粪胆原、粪胆素均粪胆原、粪胆素均减少或消失减少或消失胆红素(胆红素(+)尿胆原(尿胆原(-)34尿液检查结果尿液检查结果黄疸类型黄疸类型尿胆原尿胆原尿胆素尿胆素尿胆红素尿胆红素正常人或或溶血性黄疸强强肝细胞性黄疸阻塞性黄疸35 四、检测方法:四、检测方法:胆红素检测:重氮法与氧化法两大类。用钡盐吸附尿中胆红素吸附物含 氯化高铁及三氯醋酸试剂作用胆红素 被氧化胆青素或胆绿素或胆黄素复合物。尿胆原检测:Ehrilich醛反应尿胆原对二甲氨基苯甲醛 樱红色化合物。酸性尿胆素检
15、测:尿胆原氧化后加饱和乙酸锌溶液观察绿色荧光。36三、本周蛋白尿检查一.定义:是指免疫球蛋白轻链或其聚全体从尿中排出。特性:PH在4.55.5加热56凝固,100絮状沉淀 消失或减退,冷却又可凝固,称凝溶蛋白。二.检查:热沉淀-溶解法化学法:对-甲苯磺酸法,磺基水杨酸法蛋白电泳法:SDS-PAGE电泳,免疫电泳,免疫固定电泳 免疫速度散射浊度法医学全在线网站医学全在线网站med126 37质量保证质量保证1.新鲜尿液标本新鲜尿液标本2.蛋白尿应先出去蛋白蛋白尿应先出去蛋白3.凝容法应该严格控制凝容法应该严格控制PH,PH:4.9+-0.14.注意多种位于注意多种位于M区带蛋白的鉴别区带蛋白的鉴
16、别38三.临床意义:本周氏蛋白尿(+)见于:MM:巨球蛋白血症(16%25%):原发性淀粉样变性:恶性淋巴瘤、慢淋、转移癌、慢性肾炎、肾盂肾炎等可偶见(+)39一一定义和成分:定义和成分:尿液中混有淋巴液而呈稀牛奶状称乳糜尿。尿液中出现脂肪小滴则称脂肪尿 血性乳糜尿混有血液。乳糜脓尿合并泌尿道感染。乳糜尿成分:卵磷脂、胆固醇、脂酸盐及 少量纤维蛋白原、白蛋白。乳糜尿和脂肪尿检查乳糜尿和脂肪尿检查P145Chyluria andlipiduria40二二 乳糜尿的检测:乳糜尿的检测:典型的乳糜尿的特征 餐后2小时尿,静置时间较长可分上中下三层:上 乳酪样薄层。中 乳糜样或粉红色液体、并有小的凝
17、块浮于其中 下 少量红色沉淀物可见RBC和WBC 可查丝虫的微丝幼41检测方法 1、乙醚萃取法:2、苏丹III染色法:3、离心法:离心后观察上清和取沉渣镜检 与脓尿和严重结晶尿的鉴别参考值 阴性42三、临床意义:三、临床意义:1.临床累及淋巴循环疾病的辅助诊断:腹内结核、肿瘤、胸腹部创伤或手术,先天性淋巴管畸形。2.丝虫病诊断:特特别是慢性丝虫病3.过度疲劳、妊娠与分娩后、糖尿病脂血症、肾盂肾炎、包虫病、疟疾等可偶见乳糜尿。43微量清蛋白微量清蛋白无尿路感染和心衰的情况下,有少无尿路感染和心衰的情况下,有少量浓度处于量浓度处于20200ug/min亚临床范亚临床范围的清蛋白存在的尿液。常规定性
18、围的清蛋白存在的尿液。常规定性阴性,定量:阴性,定量:30300mg/24h。早期。早期糖尿病的特点糖尿病的特点44检测原理检测原理放射免疫法(放射免疫法(RIA):灵敏度、特异性、):灵敏度、特异性、精密度、准确性高精密度、准确性高 是定量的适宜方法是定量的适宜方法酶联免疫法(酶联免疫法(ELISA):灵敏度、特异性):灵敏度、特异性 高,稳定无危害高,稳定无危害免疫比浊法:免疫比浊法:操作简便、灵敏度高、操作简便、灵敏度高、精确度高、稳定精确度高、稳定 性好,可用性好,可用 仪器自动分析仪器自动分析45质量保证质量保证1.脂血影响结果,假性增高脂血影响结果,假性增高2.剧烈运动排出量增高剧烈运动排出量增高3.试剂盒的质量试剂盒的质量4.定时留尿法:单位时间内的排出率定时留尿法:单位时间内的排出率 随机尿:肌酐比值报告排出率随机尿:肌酐比值报告排出率 晨尿:报告每升尿排出量晨尿:报告每升尿排出量医学全在线网站医学全在线网站med126 46参考值:参考值:成人成人(1.27+-0.78)mg/mmolCr (11.21+-6.93)mg/gCr 临床意义:临床意义:1.糖尿病肾病的早期诊断与检测糖尿病肾病的早期诊断与检测2.微量清蛋白尿是高血压患者并发肾脏损伤微量清蛋白尿是高血压患者并发肾脏损伤的指征。的指征。医学全在线网站医学全在线网站med126