1、骨髓细胞学检测骨髓细胞学检测温州医科大学检验医学院温州医科大学检验医学院温州医科大学附属一医医学检验中心温州医科大学附属一医医学检验中心 林晓梅林晓梅上上 课课 内内 容容（P266-279P266-279）n骨髓细胞学检测的临床应用骨髓细胞学检测的临床应用n骨髓细胞学检测骨髓细胞学检测n血细胞的生成、发育规律及形态特点血细胞的生成、发育规律及形态特点n血细胞化学染色血细胞化学染色n细胞免疫分型细胞免疫分型n细胞遗传学分析细胞遗传学分析一、骨髓细胞学检测的临床应用一、骨髓细胞学检测的临床应用n 临床作用临床作用n 适应症适应症n 禁忌症禁忌症1 1、骨检的临床作用、骨检的临床作用n 疾病诊断疾
2、病诊断 肯定性诊断肯定性诊断 符合性诊断符合性诊断 怀疑性诊断怀疑性诊断 排除性诊断排除性诊断 形态学描述形态学描述 稀释骨髓象稀释骨髓象n 观察疗效观察疗效 缓解缓解 改善改善 退步退步 复发复发 2 2、骨检的适应证、骨检的适应证n不明原因外周血细胞计数或和分类异常不明原因外周血细胞计数或和分类异常n不明原因的发烧、肝、脾、淋巴结肿大不明原因的发烧、肝、脾、淋巴结肿大n黄疸、骨痛、骨质破坏、蛋白尿、肾功黄疸、骨痛、骨质破坏、蛋白尿、肾功能异常、血沉明显增加等能异常、血沉明显增加等2 2、骨检的适应证、骨检的适应证n血液病的定期复查和疗效观察血液病的定期复查和疗效观察n了解骨髓造血功能了解骨
3、髓造血功能n其它检查其它检查 ：骨髓活检骨髓活检 细胞免疫学分型细胞免疫学分型 染色体核型检查染色体核型检查 分析病原学检查分析病原学检查 造血祖细胞培养造血祖细胞培养 3 3、骨检的禁忌证、骨检的禁忌证 n 严重出血的疾病禁用严重出血的疾病禁用n 晚期妊娠的孕妇慎用晚期妊娠的孕妇慎用 n骨髓片的选择骨髓片的选择n低倍镜检查低倍镜检查n油镜检查油镜检查n骨髓象的分析与报告骨髓象的分析与报告二、骨髓细胞学检测的方法和内容二、骨髓细胞学检测的方法和内容 1）涂片（肉眼观察）涂片（肉眼观察）1 1、骨髓片的选择、骨髓片的选择厚薄均匀厚薄均匀头体尾分明头体尾分明两边留有空隙两边留有空隙尾呈锯齿状尾呈锯
4、齿状头部要留有约头部要留有约2 2cmcm的空间的空间2 2）取材）取材n抽吸骨髓液时有特殊的疼痛感抽吸骨髓液时有特殊的疼痛感n抽出的骨髓液中有抽出的骨髓液中有黄色小粒黄色小粒（骨髓小粒）（骨髓小粒）n显微镜下有显微镜下有骨髓特有的细胞骨髓特有的细胞：幼红、幼粒、巨核细胞、浆细胞等幼红、幼粒、巨核细胞、浆细胞等n骨髓杆骨髓杆/分叶、有核细胞数大于外周血分叶、有核细胞数大于外周血1 1、骨髓片的选择、骨髓片的选择3 3）染色）染色 细胞核、质颜色分明，颗粒清楚，没细胞核、质颜色分明，颗粒清楚，没有染料沉渣有染料沉渣1 1、骨髓片的选择、骨髓片的选择1 1）确定取材、涂片和染色是否满意）确定取材、
5、涂片和染色是否满意2 2）估计骨髓有核细胞增生程度）估计骨髓有核细胞增生程度3 3）巨核细胞计数）巨核细胞计数4 4）观察有无异常细胞）观察有无异常细胞2 2、低倍镜下检查、低倍镜下检查骨髓有核细胞增生程度骨髓有核细胞增生程度增生程度增生程度成熟红细胞：成熟红细胞：有核细胞有核细胞有核细胞均数有核细胞均数/高倍镜视野高倍镜视野常见病例常见病例增生极度活跃增生极度活跃1：1100各类型白血病各类型白血病增生明显活跃增生明显活跃10：150100各类型白血病、增生各类型白血病、增生性贫血、性贫血、ITP增生活跃增生活跃20：12050正常骨髓象、增生性正常骨髓象、增生性贫血贫血增生减低增生减低50
6、：1510再障、粒缺或粒细胞再障、粒缺或粒细胞减少症减少症增生极度减低增生极度减低200：15再障再障增增 生生 极极 度度 活活 跃跃增增 生生 明明 显显 活活 跃跃增增 生生 活活 跃跃增增 生生 减减 低低增增 生生 极极 度度 减减 低低n有核细胞分类计数：有核细胞分类计数：200200 500500个细胞，按个细胞，按细胞的不同系列和不同发育阶段分别计数，计细胞的不同系列和不同发育阶段分别计数，计算各阶段细胞所占百分比。算各阶段细胞所占百分比。n观察细胞形态：观察细胞形态：分类计数同时观察细胞形态分类计数同时观察细胞形态是否正常，有无异常细胞、寄生虫等。是否正常，有无异常细胞、寄生
7、虫等。3 3、油镜检查、油镜检查1 1）病人的基本信息）病人的基本信息2 2）骨髓的取材、涂片、染色情况）骨髓的取材、涂片、染色情况3 3）骨髓增生程度、粒红比值和骨髓各期细）骨髓增生程度、粒红比值和骨髓各期细 胞结果胞结果4 4）骨髓象特征的描述）骨髓象特征的描述5 5）血象特征）血象特征6 6）细胞化学染色特征）细胞化学染色特征4 4、骨髓象的分析和报告、骨髓象的分析和报告 血细胞的生成血细胞的生成 血细胞的发育规律血细胞的发育规律 各系血细胞的形态特点各系血细胞的形态特点 三、血细胞的生成、发育规律三、血细胞的生成、发育规律及形态特点及形态特点 造血干细胞造血干细胞 祖细胞祖细胞原始细胞
8、原始细胞 幼稚细胞幼稚细胞 成熟细胞成熟细胞1.1.血血 细细 胞胞 的的 生生 成成早幼早幼C C 中幼中幼C C 晚幼晚幼C C骨髓骨髓：是人体最大器官之一，主是人体最大器官之一，主要生理是进行造血活动，骨髓细要生理是进行造血活动，骨髓细胞主要是发育过程中的血细胞。胞主要是发育过程中的血细胞。n胞体胞体大小大小 大大 小小n胞核胞核 大小大小 大大 小小 核仁核仁 有有 无无 染色质染色质 细致细致 粗粗 核膜核膜 不明显不明显 明显明显 核形核形 圆形圆形 椭圆形椭圆形 肾形肾形 杆状杆状 分叶分叶2.2.血血 细细 胞胞 的的 发发 育育 规规 律律n胞浆胞浆 量量 少少 多多 嗜碱性
9、嗜碱性 强强 弱、消失弱、消失 颗粒颗粒 无无 有有 (非特异性非特异性 特异性特异性)n核浆比例核浆比例 大大 小小 2.2.血血 细细 胞胞 的的 发发 育育 规规 律律粒粒 细细 胞胞 系系 列列原粒原粒 早幼粒早幼粒 中幼粒中幼粒 晚幼粒晚幼粒 杆状核粒杆状核粒 分叶核粒分叶核粒原始细胞形态学共同特点n胞浆嗜碱性胞浆嗜碱性n胞浆常无颗粒胞浆常无颗粒n核染色质细致核染色质细致n核仁有、清楚核仁有、清楚n高核浆比高核浆比n 红细胞系列红细胞系列n 粒细胞系列粒细胞系列n 淋巴细胞系列淋巴细胞系列n 浆细胞系列浆细胞系列n 单核细胞系列单核细胞系列n 巨核细胞系列巨核细胞系列3.3.血细胞的
10、正常形态学特征血细胞的正常形态学特征正常细胞形态正常细胞形态观察内容：观察内容：1.1.大小、形态。大小、形态。3.3.核：位置、大小、形态、染色质。核：位置、大小、形态、染色质。2.2.胞浆：量、着色、包含物。胞浆：量、着色、包含物。4.4.核仁：大小、多少、清晰度。核仁：大小、多少、清晰度。正常细胞形态正常细胞形态观察内容：观察内容：1.1.大小、形态。大小、形态。3.3.核：位置、大小、形态、染色质。核：位置、大小、形态、染色质。2.2.胞浆：量、着色、包含物。胞浆：量、着色、包含物。4.4.核仁：大小、多少、清晰度。核仁：大小、多少、清晰度。红细胞系列红细胞系列n 胞体、胞核圆形胞体、
11、胞核圆形n 胞浆有明显的变化规律胞浆有明显的变化规律n 胞浆中无颗粒胞浆中无颗粒粒细胞系列粒细胞系列n胞体圆形胞体圆形n颗粒和胞核有颗粒和胞核有明显的变化规明显的变化规律律淋巴细胞系列淋巴细胞系列n 胞体、胞核小胞体、胞核小n 胞浆量少胞浆量少浆细胞系列浆细胞系列 n胞核圆形、偏位胞核圆形、偏位n胞浆丰富、深兰色、胞浆丰富、深兰色、核旁淡染区、泡沫浆核旁淡染区、泡沫浆单核细胞系列单核细胞系列n胞体、胞核较大且不规则胞体、胞核较大且不规则n胞浆较丰富、灰兰色胞浆较丰富、灰兰色n胞核染色质疏松胞核染色质疏松巨核细胞系列巨核细胞系列n胞体、胞核巨大且不规则胞体、胞核巨大且不规则n胞浆量、颗粒极丰富胞
12、浆量、颗粒极丰富 是一种以细胞形态学为基础，结合运用化学反是一种以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理，对血细胞内的各种化学物质，作定性、应的原理，对血细胞内的各种化学物质，作定性、定位、半定量分析的方法定位、半定量分析的方法四、血四、血 细细 胞胞 化化 学学 染染 色色 血细胞化学染色的定义血细胞化学染色的定义 辅助辅助疾病的诊断疾病的诊断和和细胞系列细胞系列的判断的判断n不同细胞系列，其所含的化学物质各有不同不同细胞系列，其所含的化学物质各有不同n血细胞在病理情况下，其化学物质成分及含血细胞在病理情况下，其化学物质成分及含 量会发生改变量会发生改变 血细胞化学染色的作用血细胞化学染色
13、的作用 四、血四、血 细细 胞胞 化化 学学 染染 色色n过氧化物酶染色（过氧化物酶染色（POXPOX）n中性粒细胞碱性磷酸酶染色（中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAPNAP）n酯酶染色酯酶染色n铁染色铁染色四、血四、血 细细 胞胞 化化 学学 染染 色色 血细胞化学染色的方法血细胞化学染色的方法 粒细胞及部分的单核细胞质内的颗粒含有粒细胞及部分的单核细胞质内的颗粒含有过氧化酶，此染色用于急性白血病类型的鉴别过氧化酶，此染色用于急性白血病类型的鉴别诊断诊断(急粒和急淋急粒和急淋)n 急粒急粒强阳性强阳性n 急单急单阴性、弱阳性阴性、弱阳性n 急淋急淋阴性阴性1.1.过氧化物酶（过氧化物酶（POXP
14、OX）染色）染色n NAPNAP主要存在于成熟阶段的中性粒细胞主要存在于成熟阶段的中性粒细胞 报告形式为阳性率及积分报告形式为阳性率及积分n增加增加：细菌性感染、类白血病反应、再障、：细菌性感染、类白血病反应、再障、急淋、淋巴瘤急淋、淋巴瘤n减少减少：慢粒、阵发性睡眠性血红蛋白尿、：慢粒、阵发性睡眠性血红蛋白尿、急粒、恶组急粒、恶组2.2.中性粒细胞碱性磷酸酶中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)(NAP)染色染色 辅助鉴别急性白血病细胞类型（辅助鉴别急性白血病细胞类型（急粒和急单急粒和急单）n氯化醋酸氯化醋酸AS-DAS-D萘酚酯酶（萘酚酯酶（ASAS-D NCED NCE）:特异性酯酶（特异性酯酶
15、（SESE）急粒呈阳性（急粒呈阳性（M3M3强阳性）强阳性）n-醋酸萘酚酯酶（醋酸萘酚酯酶（-NAENAE）：）：非特异性酯酶非特异性酯酶(NSE)(NSE)急单呈阳性或强阳性，加急单呈阳性或强阳性，加NaFNaF抑制抑制 急粒呈阴性或弱阳性，加急粒呈阴性或弱阳性，加NaFNaF不抑制不抑制 急淋呈阴性急淋呈阴性3.3.酯酯 酶酶 染染 色色M5n 骨髓铁分为细胞外铁、内铁骨髓铁分为细胞外铁、内铁n减少：减少：缺铁性贫血缺铁性贫血n增加：增加：铁粒幼红细胞性贫血铁粒幼红细胞性贫血4.4.铁铁 染染 色色骨髓外铁染色骨髓内铁染色骨髓内铁染色急性白血病常见细胞化学染色急性白血病常见细胞化学染色 急淋急淋 急粒急粒 急单急单POX -+-POX -+-+NAP NAP SE -+SE -+-+-+NSE -NSE -+NSE+NaF -NSE+NaF -+总总 结结n掌握掌握：血细胞的生成发育规律、常用血细胞化学：血细胞的生成发育规律、常用血细胞化学染色在不同血液系统疾病中的鉴别诊断意义染色在不同血液系统疾病中的鉴别诊断意义n熟悉熟悉：骨髓穿刺的适应证和禁忌证、骨髓增生程：骨髓穿刺的适应证和禁忌证、骨髓增生程度、骨髓象的分析与报告度、骨髓象的分析与报告n了解了解：骨髓细胞学检测的临床应用、血细胞的生：骨髓细胞学检测的临床应用、血细胞的生成和形态学特征成和形态学特征
