1、体外诊断试剂产品简介体外诊断试剂产品简介医学医学二部二部 李子李子颖颖 April 20132 体外诊断试剂的概念主要内容主要内容 体外诊断试剂的分类介绍 化学发光产品行业情况 Q&A 1 2 3 4 3第一部分第一部分 体外诊断试剂的概念4体外诊断试剂的概念、特点、用途体外诊断试剂的概念、特点、用途体外诊断试剂：是指采用免疫学、微生物学、体外诊断试剂：是指采用免疫学、微生物学、分子生物学等原理或方法制备的、在体外通过分子生物学等原理或方法制备的、在体外通过检测取自机体的某一部分（如血清、体液等）检测取自机体的某一部分（如血清、体液等）用于对人类疾病的诊断、检测及流行病学调查用于对人类疾病的诊
2、断、检测及流行病学调查等的诊断试剂。等的诊断试剂。特点：体外诊断技术具有“便捷、快速、准确、无痛”等特点，是目前诊断、检测疾病的主要诊断技术。应用领域：体外诊断试剂目前主要应用于各类医疗机构，而未来家庭用诊断试剂将会得到蓬勃发展。5体外诊断试剂的分类体外诊断试剂的分类临床生化试剂临床生化试剂免疫诊断试剂免疫诊断试剂分子诊断试剂分子诊断试剂用途用途检测检测方式方式优优点点缺点缺点测定测定“酶类、糖类、脂类、蛋白和酶类、糖类、脂类、蛋白和非蛋白氮类、无机元素类、肝功能非蛋白氮类、无机元素类、肝功能、临床化学控制血清等几大类产品、临床化学控制血清等几大类产品主要通过测定主要通过测定“酶类、蛋白类酶类
3、、蛋白类”元素，元素，对对“病毒类疾病、传染性疾病、内分泌病毒类疾病、传染性疾病、内分泌、肿瘤、药物检测、血型鉴定、肿瘤、药物检测、血型鉴定”等进行等进行诊断诊断主要通过主要通过“核酸和基因芯片核酸和基因芯片”等技术，等技术，从基因角度对肝炎、性病、肺感染性疾从基因角度对肝炎、性病、肺感染性疾病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等遗病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等遗传病进行检测传病进行检测可用普通半自动和一般生化可用普通半自动和一般生化分析仪进行检测，对检测设分析仪进行检测，对检测设备要求较低备要求较低一般情况下需要精度高的专业一般情况下需要精度高的专业全自动检测设备检测，对检测全自动检测设备检测，
4、对检测设备要求较高设备要求较高最高的体外诊断技术，需要专业最高的体外诊断技术，需要专业的基因类检测设备，检测技术难的基因类检测设备，检测技术难度大度大技术成熟，检测成本低，目技术成熟，检测成本低，目前是非蛋白类元素检测的理前是非蛋白类元素检测的理想试剂（如：糖、脂类）想试剂（如：糖、脂类）应用广泛，检测精度高，技术应用广泛，检测精度高，技术成熟，检测成本适中，是蛋白成熟，检测成本适中，是蛋白类元素检测理想的试剂类元素检测理想的试剂检测范围广，检测类别多，检测检测范围广，检测类别多，检测精度最高，可从基因层面诊断疾精度最高，可从基因层面诊断疾病病检测范围有限（如：病毒类、检测范围有限（如：病毒类
5、、性病、艾滋等），精度低，无性病、艾滋等），精度低，无法检测基因类遗传疾病法检测基因类遗传疾病存在检测死角（如无法检测存在检测死角（如无法检测非酶类、蛋白类元素引起的非酶类、蛋白类元素引起的疾病，糖尿病等），无法检疾病，糖尿病等），无法检测到基因类遗传疾病测到基因类遗传疾病技术成熟度相对较低，技术成熟度相对较低，检测成本高，不适合规检测成本高，不适合规模化推广模化推广6我国体外诊断试剂的产品结构我国体外诊断试剂的产品结构7第二部分第二部分 分类产品介绍（原理、应用）8体外诊断试剂体外诊断试剂-介绍内容介绍内容免疫诊断免疫诊断 放射免疫分析 酶联免疫分析 化学发光免疫分析 胶体金免疫层析试纸 蛋
6、白质芯片临床生化临床生化 全自动生化分析分子诊断分子诊断 核酸检测91 1 临床生化试剂临床生化试剂临床生化试剂主要有测定酶类、糖类、脂类、临床生化试剂主要有测定酶类、糖类、脂类、蛋白和非蛋白氮类、无机元素类、肝功能、临蛋白和非蛋白氮类、无机元素类、肝功能、临床化学控制血清等几大类产品，主是用于配合床化学控制血清等几大类产品，主是用于配合手工、半自动和一般全自动生化分析仪等仪器手工、半自动和一般全自动生化分析仪等仪器检测。检测。作为医疗检测的基本组成部分，凭借其花费低、作为医疗检测的基本组成部分，凭借其花费低、速度快的优势，临床生化试剂将保持较大份额，速度快的优势，临床生化试剂将保持较大份额，
7、并在相当长一段时间内很难被取代。并在相当长一段时间内很难被取代。101 1 临床生化试剂临床生化试剂临临床生化床生化试剂试剂病人病人样样本本诊断试剂诊断试剂 （酶）融合融合诊断仪诊断仪器器诊断结诊断结果果采用比色法采用比色法检测检测生化指生化指标标，对对蛋白蛋白类检测类检测精度精度相相对较对较低低111 1 临床生化试剂临床生化试剂全自动生化仪全自动生化仪分析原理：分光光度测定法和电势测定法分析原理：分光光度测定法和电势测定法分析类型：终点法、速率法、固定时间法和间接离子选择电极法分析类型：终点法、速率法、固定时间法和间接离子选择电极法(ISE)(ISE)分析方法：比色法、比浊法、乳胶凝集法、
8、均项酶免疫分析法、分析方法：比色法、比浊法、乳胶凝集法、均项酶免疫分析法、间接离子选择电极法间接离子选择电极法(ISE)(ISE)121 1 临床生化试剂临床生化试剂全自动生化仪的检查项目全自动生化仪的检查项目 肝功：谷丙转氨酶（ALT/GPT）、谷草转氨酶（AST/GOT）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（T.BIL）、直接胆红素（D.BIL）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）肾功：尿素氮（BUN）、肌酐（Cre）、二氧化碳结合力（CO2）、尿酸（UA）血脂：总胆固醇（CHO）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）血糖：葡萄糖（GLU）心肌酶：
9、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、a-羟丁酸脱氢酶（a-HBDH）、谷氨酰转肽酶（r-GT）离子：钙（Ca）、磷（P）、镁（Mg）、钾（K）、钠（Na）、氯（CL）等mg-mg-gg（1010-3-3-1010-6-6 g g）132 2 免疫诊断试剂免疫诊断试剂免疫诊断试剂是利用抗原与抗体互相结合的特免疫诊断试剂是利用抗原与抗体互相结合的特异性反应来进行定性或定量的诊断，无论是技异性反应来进行定性或定量的诊断，无论是技术还是市场，此类试剂在目前所有诊断试剂产术还是市场，此类试剂在目前所有诊断试剂产品中的发展都是最快的。品中的发展都是最快的。免疫诊断试剂在诊
10、断试剂盒中品种最多，根据免疫诊断试剂在诊断试剂盒中品种最多，根据诊断类别，可分为传染性疾病、内分泌、肿瘤、诊断类别，可分为传染性疾病、内分泌、肿瘤、药物检测、血型鉴定等。药物检测、血型鉴定等。14免疫诊断免疫诊断-放射免疫分析放射免疫分析19591959年由年由YalowYalow和和BersonBerson首先用于糖尿病首先用于糖尿病 患者血浆胰岛素含量的测定，从而开创了患者血浆胰岛素含量的测定，从而开创了 放射免疫分析。放射免疫分析。基本原理（1）竞争结合分析：Ag+Ab AgAb *Ag+Ab *AgAb（2）IRMA（免疫放射分析）：常用标记核素：（1）125I：射线，半衰期 60 天
11、（2）3H：射线，半衰期 12.3 年 测量仪器（1）计数仪（2）液闪仪152 2 免疫诊断试剂免疫诊断试剂免疫免疫类诊断试剂类诊断试剂诊断技术酶联免疫技术化学发光胶体金1、原理：、原理：将医用酶同样本反映，根据反应物颜色的变化程度分析各类指标，确定诊断结果2、优优点：点：技术成熟，成本最低3、缺点：、缺点：操作复杂，耗时长，反应试剂残留存在放射性污染4、发发展方向：展方向：目前是国内主流技术，但未来逐步被化学发光替代1、原理：、原理：将抗原抗体同样本结合，然后由磁珠捕捉形成的反应物，再加入发光促进剂，加速反应物自发光速度和强度，用发光信号测量仪测量光子数量，据此诊断2、优优点：点：精确度高，
12、无污染，检测速度快，技术日益成熟3、缺点：、缺点：成本相对高，技术成熟度在国内相对弱4、发发展方向：展方向：代表了免疫诊断的发展方向1、原理：、原理：胶体性质胶体金颗粒大小多在1100nm，微小金颗粒稳定地、均匀地、呈单一分散状态悬浮在液体中，成为胶体金溶液。胶体金因而具有胶体的多种特性，特别是对电解质的敏感性。2、优优点：点：快速、便捷3、缺点：、缺点：成本高，灵敏度低、精确度低4、发发展方向：展方向：急诊领域病人病人样样本本融合融合诊断仪诊断仪器器诊断结诊断结果果试剂试剂（抗（抗原抗体）原抗体）162.1 2.1 酶免疫分析酶免疫分析19661966年，年，NakaneNakane和和Av
13、rameasAvrameas等分别报道用酶代等分别报道用酶代替荧光素标记抗体，建立了酶标抗体技术替荧光素标记抗体，建立了酶标抗体技术（enzyme-labelled antibodytechniqueenzyme-labelled antibodytechnique），），用于生物组织中抗原的定位和鉴定。用于生物组织中抗原的定位和鉴定。19711971年，年，Engvall Engvall，Van Weemen Van Weemen 等报道了酶等报道了酶联免疫吸附试验，从而建立了酶标抗体的定量联免疫吸附试验，从而建立了酶标抗体的定量检测技术。检测技术。目前，免疫酶标记技术已成为免疫诊断、检测目
14、前，免疫酶标记技术已成为免疫诊断、检测和分子生物学研究中应用最广泛的免疫学方法和分子生物学研究中应用最广泛的免疫学方法之一。之一。172.1 2.1 酶免疫分析酶免疫分析1.1.均相酶免疫测定法（均相酶免疫测定法（EIAEIA）：）：主要用于测小分子抗原。酶标抗原与待测抗原竞主要用于测小分子抗原。酶标抗原与待测抗原竞争结合定量抗体争结合定量抗体2.2.酶联免疫吸附试验（酶联免疫吸附试验（ELISAELISA）：）：为固相、非均相酶免疫测定法，目前应用为固相、非均相酶免疫测定法，目前应用最广泛最广泛的定性标记免疫分析技术，也可用于定量分析。的定性标记免疫分析技术，也可用于定量分析。1971 19
15、71 年年 van Weeman van Weeman（荷）等发明（荷）等发明3.3.生物素生物素-亲和素系统免疫检测法亲和素系统免疫检测法 生物素标记一抗或二抗，酶标记亲和素生物素标记一抗或二抗，酶标记亲和素182.1 2.1 酶联免疫吸附分析（酶联免疫吸附分析（ELISAELISA）ELISAELISA中有三个必要的试剂：免疫吸附剂、结合物和中有三个必要的试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物。酶的底物。（1 1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；（2 2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；酶标记的抗原或抗体（结合物）；（3 3）酶的底物；酶的底物
16、；（4 4）阴性对照品和阳性对照品，参考标准品；）阴性对照品和阳性对照品，参考标准品；（5 5）结合物及标本的稀释液；）结合物及标本的稀释液；（6 6）洗涤液；）洗涤液；（7 7）酶反应终止液；）酶反应终止液；192.1 2.1 酶联免疫吸附分析（酶联免疫吸附分析（ELISAELISA）包被载体包被载体-96-96孔板孔板在在ELISAELISA中中常用的标记物为常用的标记物为辣根过氧化物酶（辣根过氧化物酶（HRPHRP）、）、碱性磷酸酶（碱性磷酸酶（APAP）。）。底物底物 HRP：邻苯二胺(OPD)、四甲基联苯胺(TMB)和ABTS。常用的TMB经HRP作用后共产物显蓝色，终止反应后呈黄色
17、，吸收峰在450nm AP：底物为磷酸酯酶，一般采用对硝基苯磷酸酯作为底物。产物为黄色的对硝基酚，在405nm波长处有吸收峰。202.1 2.1 酶联免疫分析酶联免疫分析-仪器仪器212.1 2.1 酶联免疫吸附分析（酶联免疫吸附分析（ELISAELISA）-双抗夹心双抗夹心固相载体抗体抗原酶抗体酶标记抗体1.将抗体包被在固相载体上。2.如样品中含有抗原，则结合为抗原抗体复合物。3.再加入酶标记抗体，则结合为抗体-抗原-酶标记抗体复合物。4.酶催化底物并显色。222.1 2.1 酶联免疫吸附分析酶联免疫吸附分析-酶标抗原竞争法酶标抗原竞争法固相载体抗体抗原酶酶标记抗原1.将抗体包被在固相载体上
18、。2.如样品中含有抗原，则优先竞争结合抗体，结合为抗原抗体复合物。3.同时加入酶标记抗原，抗原没有结合的位点酶标记抗原去占据，则结合为酶标记抗原-抗体复合物。4.酶催化底物并显色。抗原232.2 2.2 化学发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光免疫分析（Chemiluminescence ImmunoassayChemiluminescence Immunoassay，CLIACLIA）是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有疫分析。它具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物
19、稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点速、标记物稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者，是它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者，是免疫分析重要的发展方向。免疫分析重要的发展方向。CLIACLIA发展迅猛，已占各种发展迅猛，已占各种免疫分析的首位。免疫分析的首位。242.2 2.2 化学发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光是一种特异的化学反应，化学发光是一种特异的化学反应，有机分子吸收化学能后有机分子吸收化学能后发生能级跃迁，产生一种高能级的电子激发态不稳定的中发生能级跃迁，产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体，当其返回到基态而发出光子，即为化学
20、发光间体，当其返回到基态而发出光子，即为化学发光。将化。将化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析技术，即为化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析技术，即为化学发光免疫分析。学发光免疫分析。化学发光的发光类型通常分为化学发光的发光类型通常分为闪光型（闪光型（flash typeflash type）和辉）和辉光型光型（glow typeglow type）两种。闪光型发光时间很短，只有零点）两种。闪光型发光时间很短，只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型，发光时间从几分钟到几几秒到几秒。辉光型又称持续型，发光时间从几分钟到几十分钟，或几小时至更久。闪光型的样品必须立即测量，十分钟，或几小时至更
21、久。闪光型的样品必须立即测量，必须配以全自动化的加样及测量仪。测量辉光型的样品可必须配以全自动化的加样及测量仪。测量辉光型的样品可以使用通用型仪器，也可以配全自动化仪器。以使用通用型仪器，也可以配全自动化仪器。252.2 2.2 化学发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光免疫分析的类型化学发光免疫分析的类型 1、直接化学发光免疫分析1.吖啶酯 2、化学发光酶免疫分析1鲁米诺及其衍生物 2AMPPD 3、电化学发光免疫分析1.三联吡啶钌262.2 2.2 直接化学发光机理直接化学发光机理-夹心法夹心法发发光光Y YY磁微粒磁微粒被测抗原被测抗原+抗体抗体+带丫啶酯带丫啶酯标记物抗标记物抗体体YYY
22、YYYYYYYY冲洗后冲洗后（1 1）加入加入H H2 2O O2 2（pH10）272.2 HRP2.2 HRP标记化学发光免疫分析示意图标记化学发光免疫分析示意图282.2 2.2 电化学发光免疫分析示意图电化学发光免疫分析示意图292.2 2.2 化学发光免疫分析化学发光免疫分析-仪器仪器302.3 2.3 胶体金免疫层析试纸条胶体金免疫层析试纸条312.3 2.3 胶体金免疫层析试纸条胶体金免疫层析试纸条层析法技术优势层析法技术优势:简单简单 现场现场 快速快速1.打开包装取出试纸条2.直接插入待测样品中322.3 2.3 胶体金免疫层析试纸条胶体金免疫层析试纸条-与常规诊断相比与常规
23、诊断相比优点优点缺点缺点快速：全部检测过程仅需快速：全部检测过程仅需 3-103-10分钟。分钟。简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无简便：不需其它任何仪器设备，操作也极其简单，无需专业人员，携带方便，可随时随地进行。需专业人员，携带方便，可随时随地进行。廉价：单个测试条成本极低廉价：单个测试条成本极低可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可单份检测：对标本既能成批检测，又可单份检测，可立刻拿到结果，不必等待。可立刻拿到结果，不必等待。稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。稳定性好：金标试剂稳定，可长期保存。检测标本种类多：既可用于查血，又可用于检尿或唾检测标本种类多：既可用于
24、查血，又可用于检尿或唾液，因而适合各种检查液，因而适合各种检查定量问题定量问题灵敏度问题灵敏度问题332.3 2.3 胶体金免疫层析试纸条胶体金免疫层析试纸条-试纸条的组成试纸条的组成测试线测试线 （T线）线）控制线（控制线（C线）线）胶体金垫胶体金垫样品垫样品垫NC膜（硝酸纤维素膜）膜（硝酸纤维素膜）层析方向层析方向PVC底板底板有有4 4个组分：个组分：、吸水纸（样品垫）。、吸水纸（样品垫）。、玻璃纤维膜、玻璃纤维膜（胶体金垫胶体金垫）。）。膜上吸附膜上吸附着干燥的金标抗体（流动带）。着干燥的金标抗体（流动带）。、硝酸纤维素膜，膜上包被着抗原或抗体条、硝酸纤维素膜，膜上包被着抗原或抗体条带
25、和能与标记物直接起反应的质控物条带（检测带）。带和能与标记物直接起反应的质控物条带（检测带）。、吸水纸。以上各组、吸水纸。以上各组份首尾互相衔接。份首尾互相衔接。342.3 2.3 胶体金免疫层析试纸条胶体金免疫层析试纸条-检测原理检测原理基本原理是将已知的特异性基本原理是将已知的特异性抗原或抗体固定抗原或抗体固定于硝于硝酸纤维素膜上某一区带作为酸纤维素膜上某一区带作为检测带检测带在样品区滴加样品后，借助毛细作用，在样品区滴加样品后，借助毛细作用，样品样品泳动泳动至玻璃纤维膜，至玻璃纤维膜，金标复合物金标复合物溶解，并与样品进行溶解，并与样品进行抗原抗体反应，形成复合物，继续抗原抗体反应，形成
26、复合物，继续泳动泳动至硝酸纤至硝酸纤维素膜的维素膜的检测区检测区，带有金标记的复合物被检测区，带有金标记的复合物被检测区抗原或抗体捕获抗原或抗体捕获，呈现，呈现红色红色条带。如样品中没有条带。如样品中没有待测抗原或抗体，则不发生结合，即不显色待测抗原或抗体，则不发生结合，即不显色在硝酸纤维素膜检测区附近一般再固定上针对金在硝酸纤维素膜检测区附近一般再固定上针对金标结合物相应的抗原或抗体作为标结合物相应的抗原或抗体作为质控带质控带，无论样无论样品中有无待测物，质控线都应显示品中有无待测物，质控线都应显示，如无，则检，如无，则检测失败。整个过程一般在测失败。整个过程一般在1515分钟内完成，操作简
27、分钟内完成，操作简单、快速，且不需任何仪器。单、快速，且不需任何仪器。352.3 2.3 胶体金免疫层析法胶体金免疫层析法-举例举例（以HCG检测为例）HCG-HCG-亚基抗体亚基抗体Y2Y2，羊抗鼠二抗固定于硝酸纤维素膜上，金标，羊抗鼠二抗固定于硝酸纤维素膜上，金标HCG-HCG-亚亚基单抗基单抗Y1Y1固定于玻璃纤维素膜上。固定于玻璃纤维素膜上。362.4 2.4 蛋白芯片蛋白芯片372.4 2.4 蛋白芯片蛋白芯片蛋白质芯片是指固定于支持介质上的蛋白质构蛋白质芯片是指固定于支持介质上的蛋白质构成的微阵列。成的微阵列。生生物物芯芯片片基因芯片基因芯片蛋白蛋白质质芯片芯片微流控芯片微流控芯片
28、382.4 2.4 蛋白芯片蛋白芯片-检测原理检测原理蛋白芯片技术的基本原理蛋白芯片技术的基本原理:将各种蛋白质有序地固定将各种蛋白质有序地固定于滴定板、滤膜和载玻片等各种载体上，然后，用标于滴定板、滤膜和载玻片等各种载体上，然后，用标记了特定荧光的蛋白质或其他成分与芯片作用，经漂记了特定荧光的蛋白质或其他成分与芯片作用，经漂将未能与芯片上的蛋白质互补结合的成分洗去，再利将未能与芯片上的蛋白质互补结合的成分洗去，再利用荧光扫描仪或激光共聚焦扫描技术，测定芯片上各用荧光扫描仪或激光共聚焦扫描技术，测定芯片上各点的荧光强度，通过荧光强度分析蛋白质与蛋白质之点的荧光强度，通过荧光强度分析蛋白质与蛋白
29、质之间相互作用的关系，由此达到测定各种蛋白质功能的间相互作用的关系，由此达到测定各种蛋白质功能的目的。目的。固定在芯片上的蛋白可以是：抗原、抗体、小肽、受固定在芯片上的蛋白可以是：抗原、抗体、小肽、受体和配体、蛋白质体和配体、蛋白质-DNA-DNA和蛋白质和蛋白质-RNA-RNA复合物等。复合物等。392.4 2.4 蛋白芯片蛋白芯片优势优势蛋白芯片较之传统分析方法主要有以下优点蛋白芯片较之传统分析方法主要有以下优点1、蛋白芯片上可以实现成千上万个蛋白质样、蛋白芯片上可以实现成千上万个蛋白质样品的高通品的高通 量平行分析量平行分析,一次实验可提供大量数一次实验可提供大量数据据-高通量高通量2、
30、有高的信噪比、有高的信噪比-高准确性、高灵敏度高准确性、高灵敏度3、所需样品量极少、所需样品量极少-微量化微量化4、在整个基因组和蛋白质组水平将序、在整个基因组和蛋白质组水平将序列信息与蛋白质产物列信息与蛋白质产物直接联系直接联系起来起来5、快速、微型化和自动化快速、微型化和自动化。402.4 2.4 蛋白芯片的检测蛋白芯片的检测探针标记检测法探针标记检测法无探针标记检测法无探针标记检测法p表面增强激光解吸离子化技表面增强激光解吸离子化技术术(Surface enhanced laser desorption/ionization,SELDI)p表面等离子体共振表面等离子体共振检测检测技技术术
31、（surface plasmon resonance,SPR）p原子力原子力显显微微镜检测镜检测技技术术（atomic force microscope,AFM）p同位素同位素标记检测标记检测p荧荧光光标记检测标记检测p化化学发学发光光检测检测p酶免疫酶免疫标记检测标记检测p胶胶体金体金标记检测标记检测412.4 2.4 蛋白芯片的应用和问题蛋白芯片的应用和问题u疾病诊断和预警疾病诊断和预警u药物开发药物开发u蛋白质组学蛋白质组学 n成本过高成本过高,需一系列昂贵需一系列昂贵的尖端仪器的尖端仪器n芯片的标准化问题芯片的标准化问题 n提高芯片的特异性、简化提高芯片的特异性、简化样品制备和标记操作
32、程序、样品制备和标记操作程序、增加信号检测的灵敏度和增加信号检测的灵敏度和消除芯片背景对于结果分消除芯片背景对于结果分析的影响等等析的影响等等423 3 核酸检测核酸检测核酸检测核酸检测（nucleic acid testingnucleic acid testing，NATNAT）是）是直接检测病原体核酸的一系列技术的总称，可直接检测病原体核酸的一系列技术的总称，可在尚未检测到抗原或抗体前，先检测到病毒核在尚未检测到抗原或抗体前，先检测到病毒核酸。酸。其基本步骤包括其基本步骤包括核酸提取、扩增和检测核酸提取、扩增和检测。也就。也就是常说的基因检测，是通过血液、其他体液或是常说的基因检测，是通
33、过血液、其他体液或细胞对细胞对DNADNA进行检测的技术，可以进行检测的技术，可以诊断疾病诊断疾病，也可以用于也可以用于疾病风险的预测疾病风险的预测。433 3 核酸检测的特点核酸检测的特点显著缩短窗口期显著缩短窗口期:HIV:HIV窗口期缩短窗口期缩短45%45%，HCVHCV缩短缩短89%89%，HBVHBV缩短缩短50%50%。提提 高高 灵灵 敏敏 度度:理论上扩增体系中单拷贝模理论上扩增体系中单拷贝模板也能被检测出。板也能被检测出。特特 异异 性性 好好:使用荧光探针技术的使用荧光探针技术的PCRPCR检测，检测，几乎没有方法学的假阳性。几乎没有方法学的假阳性。直接揭示病原体的存在直
34、接揭示病原体的存在 对操作者及检测环境的要求较高对操作者及检测环境的要求较高检测成本相对较高检测成本相对较高443 3 核酸检测的一般流程核酸检测的一般流程核酸样品的制备：核酸样品的制备：从血液、体液、组织中提取或从血液、体液、组织中提取或PCRPCR扩增扩增样品的检测：样品的检测：核酸杂交核酸杂交、PCRPCR、荧光定量荧光定量PCRPCR、PCR-ELISAPCR-ELISA等等 结果判读：结果判读：电泳、膜、荧光定量电泳、膜、荧光定量PCRPCR仪等仪等453 3 核酸检测在临床诊断中的应用核酸检测在临床诊断中的应用定性诊断定性诊断 血液筛查 病原体筛查诊断 SNP和耐药突变诊断 基因型
35、分型 遗传病诊断 个体用药诊断 基因鉴定和配型 定量检测定量检测 病情的评估和预后判断 抗病毒药物疗效的观察 新药验证 癌基因表达差异 463 3 核酸检测的仪器核酸检测的仪器47第三部分第三部分 化学发光产品行业情况48全自动化学发光全自动化学发光主要的国外产品有主要的国外产品有 罗氏（电化学发光）雅培（吖啶酯）贝克曼（AMPPB）西门子（吖啶酯）索灵（异鲁米诺）东曹（酶促）主要的国内产品有主要的国内产品有 新产业 四川迈克 威海威高 郑州安图 达成生物 科美东亚 利德曼49罗氏罗氏-cobas e601-cobas e601排名排名企业企业国家国家0909年诊断试剂销年诊断试剂销售额（亿美
36、金）售额（亿美金）市场占有市场占有率率1 1罗氏罗氏瑞士瑞士676722%22%2 2雅培雅培美国美国383813%13%3 3Bechman CoulterBechman Coulter美国美国24248%8%50雅培雅培-ABBOTTi2000sr-ABBOTTi2000sr51贝克曼贝克曼-UniCel DxI800-UniCel DxI80052新产业新产业-MAGLUMI20002000 测试速度180个/小时 17分钟快速获得第一个结果，以后每分钟出3个结果；真正的24小时待机，标本随到随测；一次可装载25个试剂位，144个样本，可连续装载；53我部代理我部代理-ZT480-ZT480测试速度：测试速度：480480个测个测试试/小时小时样本量：一次性可装样本量：一次性可装载载120120个样本并可随个样本并可随时添加时添加反应杯：一次性可装反应杯：一次性可装载载360360个反应杯并可个反应杯并可随时添加随时添加试剂位：可同时放置试剂位：可同时放置4040个试剂位个试剂位T h a n k y o uQ&A
