1、第二章第二章 临床血液学检测临床血液学检测第四节 血型鉴定与交叉配血试验2 各种血液成分包括红细胞、白细胞、血小板及某种血浆蛋白在个体之间均具有抗原成分的差异，受独特的遗传基因控制。血型是各种血液成分的遗传多态性标记。血型系统：由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系。1983年，已发现20多个人类红细胞血型系统，400多种血型抗原。“免疫血液学”重点讲述与输血工作有密切联系的红细胞血型系统。3血型系统血型系统 红细胞血型系统 ABO血型系统，1900年，Landsteiner发现 Rh血型系统，1940年，Landsteiner和Weiner发现 其他血型系统 白细胞抗原系统 血小板抗原及抗
2、体 血清蛋白成分的抗原特异性4（一）ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体根据红细胞表面是否具有A或B抗原，血清中是否存在抗A或抗B抗体，ABO血型系统可分为四型：ABO三个基因组成六种基因型：AA、AO、BB、BO、AB、OO；A、B为显性基因，O为隐性基因，所以只有四种表现型A、B、O、AB。一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统血型血型红细胞上抗原红细胞上抗原血清中抗体血清中抗体基因型基因型A AA A抗抗B BAAAA或或AOAOB BB B抗抗A A BBBB或或BOBOO O无无抗抗A A，抗，抗B BABABABABA A、B B无无OOOO5一、红细胞血一、红细胞血型系统型
3、系统（一）ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体A或B抗原在胚胎期及出生时便能检出，但敏感性较低，到20岁左右时才达高峰。抗原性终身不变，但到老年敏感性有所下降。A和B血型物质除存在于红细胞和其他组织细胞表面外，还广泛存在于体液和分泌液中，以唾液中含量最丰富，脑脊液中无。案例一案例一6（一）ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体人在出生前尚未产生抗体，出生后3-6个月才开始出现，至青春期达高峰。产生抗体的功能可延续终身，但其效价随着年龄增长而逐渐降低。天然抗体：无明确的抗原刺激而天然存在的抗体，主要是IgM。环境中广泛存在的微生物、花粉、粉尘等与A或B血型抗原相似，通过隐性刺激产生
4、血型抗体。免疫性抗体：由已知抗原刺激产生的抗体，主要是IgG。一般通过输血、妊娠、注射三种途径接触同种异体抗原。一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统7天然抗体和免天然抗体和免疫性抗体的区疫性抗体的区别别8（一）ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体抗A、抗B抗体：抗A与抗B主要是IgM，也有少量的IgG和IgA类抗体。分泌液和体液中多为IgA类抗体。抗A、B抗体：O型人血清中，以IgG为主。不是抗A和抗B的混合物。识别A抗原和B抗原的共同表位。一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统9（一）ABO血型系统2、ABO血型的亚型（1）A亚型 A1亚型红细胞上有A1和A抗原，其血清中含有抗B抗体。
5、A2亚型红细胞上只有A抗原，血清中含有抗B抗体和少量抗A1抗体。AX亚型红细胞与B型血清不发生凝集或凝集反应甚弱，但却能与O型血清发生凝集。血型鉴定时，应加O型血清，以防将AX型误定为O型。（2）B亚型 亚型不多见，临床意义不大。一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统10ABO血型的亚型11（一）ABO血型系统3、ABO血型鉴定和交叉配血试验（1）ABO血型鉴定：ABO血型抗体能在生理盐水中与相应红细胞抗原结合而发生凝集反应。由于血液持续存在ABO抗体，所以血型鉴定必须正反定型。直接试验（正定型、细胞定型）：用标准的抗A及抗B血清以鉴定被检者红细胞上的抗原。反转试验（反定型、血清定型）：用标准的
6、A型及B型红细胞鉴定被检者血清中的抗体。只有抗原鉴定和抗体鉴定完全相符才能肯定其血型类别。一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统12患者在生病进行治疗的过程中，身体状况不是始终保持一致的，当血型抗原有一方表达减弱，有可能AB型就成了A型，或者B型就变异成了O型。因此，也许三家医院存在验错血型的可能，也可能三家医院都没有验错，而是病人血型出现了变异。某些病人特别是肿瘤病人在生病治疗时可能发生血型变异。案例二案例二13加入加入O型血清：型血清：检出抗原性较弱的检出抗原性较弱的AX亚型红细胞。亚型红细胞。加入加入O型红细胞：型红细胞：检出被检者血清中是否含有与检出被检者血清中是否含有与ABO血型系统无
7、关的血型系统无关的红细胞异常抗体。红细胞异常抗体。14血型鉴定方法血型鉴定方法-玻片法玻片法15血型鉴定方法血型鉴定方法-微柱凝胶法微柱凝胶法 凝胶为填充物，只允许游离红细胞通过 抗A管、抗B管、抗D管：含抗体的凝胶，用于红细胞上A、B及D抗原检测 A细胞、B细胞及Ctl管：不含血型抗体凝胶 A细胞、B细胞用于检测血浆中的抗体 Ctl管用于自身对照ABO/D血型正反定型卡血型正反定型卡16一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统（一）ABO血型系统3、ABO血型鉴定和交叉配血试验（2）交叉配血试验 输血前必须进行交叉配血实验。分别将供血者的RBC与受血者的血清及供血者的血清与受血者的RBC进行的配
8、合试验。交叉配血试验的意义（1）检验血型鉴定是否有误。（2）检验血清中是否有不规则抗体。17案例三案例三18凝集凝集凝集凝集不凝集不凝集不凝集不凝集交叉配血试验交叉配血试验交叉配血的主侧交叉配血的主侧:供血者红细胞供血者红细胞+受血者血清受血者血清交叉配血的次侧交叉配血的次侧:供血者血清供血者血清+受血者红细胞受血者红细胞 配血不合配血不合,不能输血不能输血配血相合配血相合,可以输血可以输血紧急情况少量缓慢输血紧急情况少量缓慢输血,密切密切观察观察,如有输血反应如有输血反应,立即停止立即停止不凝集不凝集19一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统（一）ABO血型系统3、ABO血型鉴定和交叉配血试验
9、（2）交叉配血试验 配血方法1、生理盐水法：无输血史及妊娠史2、间接抗人球蛋白法：有反复输血史及妊娠史，尤其是有输血反应史、生育过新生儿溶血病婴儿的妇女、大量输血时须同时做供血者之间的交叉配血实验。3、卡式微柱凝胶法20一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统（一）ABO血型系统4、ABO血型系统的临床意义(1)输血：坚持同型输血。(2)新生儿同种免疫溶血病：母亲与胎儿血型不合引起血型抗原免疫所致的一种溶血疾病。主要见于O型母亲、A或B型胎儿，可发生在第一胎。(3)ABO血型与器官移植(4)亲缘鉴定、法医鉴定、疾病相关性调查等案例四案例四案例七案例七案例八、九案例八、九案例五、六案例五、六21案例
10、四案例四22案例五案例五孕妇陈某，24岁，血型O型RhD阳性；丈夫A型RhD阳性，预产期日入院。次日孕妇肝功能检查异常：ALT:369 U/L,TBIL:54mol/L。剖腹生1子。3h后 婴儿皮肤、巩膜黄染明显。肝功能检查：ALT:41 U/L，TBIL:298mol/L。用蓝光照射及白蛋白注射治疗黄疸进行性加深，全身重度黄染，送上级医院，已错过换血治疗的最佳时间，婴儿病情进展成核黄疸，大脑运动中枢受损。实验室检查见下表。盐水法盐水法木瓜酶法木瓜酶法抗人球蛋白试验抗人球蛋白试验抗体放散试验抗体放散试验直接法直接法间接法间接法患儿患儿-+/放散出放散出IgG-AIgG-A抗体抗体产妇产妇-+/
11、+23案例六案例六孕妇华某，28岁，血型O型RhD阳性，3年前曾因IgG-抗A抗体效价1:256致死胎。丈夫血型A型，基因型AA型，RhD阳性。怀孕前数月口服甘草、黄芩、茵陈、大茵等中药。怀孕1个月，测IgG-抗A效价1:8，继续服中药，每半个月复查，孕期IgG-抗A抗体效价控制在1:32内。孕8个月剖腹产。婴儿出生后肝功能检查见表。ALT(U/L)TBil(mol/L)治疗治疗出生时出生时1010观察观察2d1215观察观察5d2637蓝光照蓝光照10d2245蓝光照蓝光照20d3220观察观察30d128出院出院正常值正常值4010案例七案例七25案例八案例八父 母子 子ABOABO26案
12、例九案例九 父母O型 孩子B型？27一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统（二）Rh血型系统 1、Rh血型系统的抗原和抗体抗原 主要有5种。抗原性强弱依次为D、E、C、c、e，以D抗原性最强。粗略地称含D抗原的红细胞为Rh阳性，不含D抗原的为Rh阴性。我国Rh阴性者甚为少见。Rh抗体主要是不完全抗体 抗D抗体最常见 主要为免疫性抗体，Rh阴性者接受Rh阳性血后通过免疫产生。绝大多数为IgG抗体28一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统（二）Rh血型系统 1、Rh血型系统的抗原和抗体Rh血型的亚型弱D最有临床意义。弱D是D抗原的变异体，其免疫原性较弱。不能与所有的抗D血清发生反应，易被误定为Rh阴性
13、。做为供血者，弱D是Rh阳性。如果将弱D血输给Rh阴性受血者时，仍有产生抗D抗体的可能性，因此不能将弱D输给Rh阴性的受血者。做为受血者，弱D是Rh阴性。当弱D型人接受输血时应是Rh阴性血，否则可能产生抗D。29一、红细胞血型系统一、红细胞血型系统（二）Rh血型系统 2、Rh血型系统的鉴定仅用抗D血清进行鉴定，粗略地分为Rh阳性和阴性两类。鉴定方法 完全抗体：生理盐水凝集试验 不完全抗体：胶体介质法、木瓜酶法、抗人球蛋白法、微柱凝胶法等30一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统（二）Rh血型系统 3、Rh血型系统的临床意义（1）Rh血型系统所致的溶血性输血反应：Rh血型系统一般不存在天然抗体，故
14、在第一次输血时，不会发现Rh血型不合，Rh阴性的受血者接受了Rh阳性血液输入后便可产生免疫性抗Rh抗体，再次输入Rh阳性血液时，发生溶血性输血反应。第一次输血不必考虑Rh血型，第二次输血需考虑Rh血型是否相同。31谢小榕AB型Rh阴性1997年5月30日，车祸。天津医院抢救时未做Rh血型鉴定，输入了AB型Rh阳性的血。第二次取钢板的手术不能再输AB型Rh阳性血。以后存在生育障碍。2002年9月3日，二审判决要求天津医院对谢小榕因输血引起的损害后果承担60%的责任，肇事司机承担40%的责任。但判决也同时要求谢小容有防止损害结果发生的注意义务。即尽量注意保护自身安全，防止各种危险情况发生，避免各种
15、医学文献上记载的损害结果出现。案例十案例十32案例十一案例十一33（二）Rh血型系统 3、Rh血型系统的临床意义（2）新生儿Rh溶血病母亲为RhD阴性，胎儿RhD阳性Rh溶血病一般不发生在第一胎 由于自然界无Rh血型物质 第一次孕儿为Rh+，胎儿的RBC因某种原因(如胎盘绒毛脱落)进入母体，或分娩时进行胎盘剥离过程中血液挤入母体,孕妇体内产生抗Rh的抗体。第二次妊娠时,孕妇体内的抗Rh的抗体，通过胎盘导致胎儿溶血 Rh阴性母亲输过Rh阳性血、有流产或人工流产史，也可发生在第一胎一、红细胞血一、红细胞血型系统型系统3435案例十二案例十二孕妇王某，25岁，孕7个月后死胎。病史：10岁时因贫血曾输
16、血多次。实验室枪查：孕妇血型为O型RhD阴性，抗D强阳性，滴度1:128。脐血检查见表。谱细胞谱细胞Rh-hr盐水法盐水法抗人球蛋抗人球蛋白试验白试验DCEce1+0+-+2+00+-+3+00+-+4+0+-+5+0+-+6+0+-+7+0-+80+0+-900+-10000+-36二、其他血型二、其他血型系统系统1白细胞抗原系统（1）白细胞抗原有两类：第一类为白细胞上特有的抗原，如中性粒细胞上的NA、NB、ND等系统的抗原；第二类为其他血液成分共有的HLA抗原红细胞血型抗原，即ABO等系统中含有的各种抗原。37二、其他血型二、其他血型系统系统1白细胞抗原系统（2）HLA检测临床意义 HLA
17、与移植 HLA与输血 HLA与临床：反复流产、胎儿血小板减少性紫瘢、粒细胞减少症、早产、畸胎前期等可能与母胎的HLA系统相容有关。法医：应用HLA分型技术，排除亲子或证实亲子关系，可靠性可达95%以上。38二、其他血型二、其他血型系统系统2血小板血型系统（1）人类血小板上的抗原主要可分为两大类：一类为非特异性抗原；另一类为特异性抗原，即血小板上所特有的，不存在于其它组织、细胞上的抗原，主要为HPA-1（旧称Zw系统）、HPA-2(旧称Ko系统)等。（2）临床意义血小板输注无效输血后紫癜（PTP）新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜39 3血清蛋白抗原 血清蛋白抗原按其性质，可分为免疫球蛋白、血清酶
18、、血清蛋白及补体等几类，这些蛋白有型的差异，具有抗原性和刺激同种不同个体产生抗体的特性，通常与输血反应有关的血清蛋白抗原主要是免疫球蛋白。二、其他血型二、其他血型系统系统40思考题思考题1.ABO血型系统的分类？2.ABO血型系统的临床意义？3.输血前为什么要进行交叉配血试验？4.交叉配血试验的结果判断？5.输血的原则？6.配血方法的选择？7.名词解释 血型；交叉配血；直接试验；反转试验41测试题测试题1.与O型血易混淆的A亚型是 A.A1B.A2C.A3 D.Am E.Ax2.A亚型之间输血可能引起输血反应的是：A.A1与A2B.A1与A3C.A1与AmD.A1与AxE.A2与A342测试题
19、测试题3.ABO血型鉴定采用的试验为：A、抗人球蛋白试验 B、盐水介质法 C、木瓜酶法 D、蛋白酶法 E、胶体介质法4.交叉配血的次侧为：A、受者红细胞供者血清B、受者血清 C、供者红细胞受者血清D、供者血清 E、受者红细胞5.ABO血型中能通过胎盘的抗体主要是：A、IgAB、IgM C、IgG D、IgE E、IgD 43测试题测试题6.最主要的红细胞血型系统是：A、ABO血型系统B、Rh血型系统 C、P血型系统 D、Lewis血型系统 E、Li血型系统7.ABO血型系统最重要的亚型是：A、A型B、B型 C、O型 D、AB型 E、Ax44测试题测试题8、Rh血型系统的抗原中抗原性最强、临床意
20、义最重要的是：A、C B、E C、D D、c E、e9、Rh血型系统是指：A、红细胞抗原 B、白细胞抗原 C、血小板抗原 D、血清蛋白抗原 E、细菌抗原45测试题测试题10、保证输血安全的关键措施为：A、ABO血型鉴定 B、同型输血 C、交叉配血 D、输入O型血 E、盐水介质凝血试验11、ABO血型鉴定：抗A和抗B血清中受检者红细胞均凝集，A型 B型红细胞加入受检者血清均不凝集，其血型为：A、A型B、B型 C、O型 D、AB型 E、Ax46测试题测试题12.患儿出生2周，有明显贫血伴皮肤、巩膜黄染、血红蛋白 60g/L，网织红细胞10%，CB/TB：20/80 mol/L，母亲曾有流产史，为第一胎。最可能是那一种疾病？A、新生儿Rh溶血病 B、新生儿ABO溶血病 C、新生儿自身免疫性溶血性贫血 D、遗传学球形红细胞增多症 E、珠蛋白生成障碍性贫血 47测试题测试题 CB/TB（结合/总）：20%为溶黄，20-50%为肝黄，50%为阻黄。最可能产生的是哪一种并发症：A、胆红素脑病 B、休克 C、心功能不全 D、肾功能不全 E、肝功能不全 哪种诊断最有价值？A、抗人球蛋白试验B、酸溶血试验 C、血红蛋白电泳 D、Rh血型检测 E、ABO血型检测48
