1、新生儿溶血病血清学检查新生儿溶血病血清学检查通过血清学检查可了解:通过血清学检查可了解:母婴血型是母婴血型是否不合否不合、母亲血清是否存在与患儿红细胞母亲血清是否存在与患儿红细胞相对应的相对应的IgG性质的抗体性质的抗体、患儿红细胞是否患儿红细胞是否被来自母亲的被来自母亲的IgG抗体所致敏抗体所致敏,从而对新生,从而对新生儿溶血病进行预防诊断和治疗。儿溶血病进行预防诊断和治疗。血型血清学检查对新生儿溶血病的诊断血型血清学检查对新生儿溶血病的诊断有重要意义有重要意义新生儿溶血病血清学检查通过血清学检查可了解:母婴血型是否不合母婴母婴ABO血型不合溶血病的血清学检查血型不合溶血病的血清学检查孕妇血
2、样本检查孕妇血样本检查(产前检查产前检查)是孕妇血液常规是孕妇血液常规进行产前检查,用以鉴定这些孕妇妊娠患新生儿进行产前检查,用以鉴定这些孕妇妊娠患新生儿溶血病胎儿的危险,一旦被鉴定有此危险时,定溶血病胎儿的危险,一旦被鉴定有此危险时,定期过筛试验可用于确定影响的程度。期过筛试验可用于确定影响的程度。有关试验包括有关试验包括血型鉴定血型鉴定、血清血清IgG抗抗A(B)抗体检查抗体检查、不规则抗体筛选不规则抗体筛选和和鉴定鉴定母婴A B O 血型不合溶血病的血清学检查孕妇血样本检查(产前检查孕妇血样本检查孕妇血样本检查血型鉴定血型鉴定:包括夫妇的:包括夫妇的ABO、Rh血型血型以及以及夫妇血型是
3、否配合。夫妇血型是否配合。孕妇血样本检查血型鉴定:包括夫妇的A B O、R h 血型以及夫妇血孕妇血样本检查孕妇血样本检查血清中血清中IgG抗抗A(B)抗体检查)抗体检查:ABO系系HDN由由IgG抗抗A(B)引起,检测母引起,检测母亲亲血清中有无血清中有无IgG性质的抗性质的抗A(B)抗体及效价,即可抗体及效价,即可预预ABO系系HDN发生的可能性。发生的可能性。用用2-巯基乙醇(巯基乙醇(2-Me)处理孕妇血清,)处理孕妇血清,然然后进行倍比稀释,加入相应红细胞,用间接抗球后进行倍比稀释,加入相应红细胞,用间接抗球蛋白法检测;抗体效价大于蛋白法检测;抗体效价大于64时,其血型不合时,其血型
4、不合的的孕妇血样本检查血清中I g G 抗A(B)抗体检查:A B O 系H D N孕妇血样本检查孕妇血样本检查抗体筛选和鉴定抗体筛选和鉴定取母亲血清与筛选红细胞作取母亲血清与筛选红细胞作 盐水试验盐水试验、抗球抗球蛋白试验蛋白试验、聚凝胺试验聚凝胺试验。如果该试验阳性,应进一步用配组谱细胞作如果该试验阳性,应进一步用配组谱细胞作抗体鉴定,以确定抗体的特异性。当检出某一抗抗体鉴定,以确定抗体的特异性。当检出某一抗体后,需进一步鉴定双亲的相关红细胞抗原。体后,需进一步鉴定双亲的相关红细胞抗原。孕妇血样本检查抗体筛选和鉴定取母亲血清与筛选红细胞作盐水试验ABO-HDN患儿血样本检查患儿血样本检查患
5、儿血样本检查是诊断患儿血样本检查是诊断ABO系系HDN的最有的最有利证据,证实患儿红细胞是否被来自母体的利证据,证实患儿红细胞是否被来自母体的IgG抗抗A(B)抗体所致敏。)抗体所致敏。试验包括试验包括红细胞直接抗球蛋白试验红细胞直接抗球蛋白试验、游离游离抗体试验抗体试验、抗体放散试验抗体放散试验、血清胆红素测定血清胆红素测定。A B O-H D N 患儿血样本检查患儿血样本检查是诊断A B O 系H DABO-HDN患儿血样本检查患儿血样本检查红细胞直接抗球蛋白红细胞直接抗球蛋白如果新生儿红细胞被如果新生儿红细胞被IgG抗抗A(B)所致敏,所致敏,直接抗球蛋白试验能得到阳性结果。由于直接抗球
6、蛋白试验能得到阳性结果。由于新生儿的新生儿的A(B)抗原密度比成人低,所以被抗原密度比成人低,所以被结合的抗体亦很少,呈弱阳性的混合视野结合的抗体亦很少,呈弱阳性的混合视野外观。外观。A B O-H D N 患儿血样本检查红细胞直接抗球蛋白如果新生儿红细新生儿溶血病检查p p t 课件ABO-HDN患儿血样本检查患儿血样本检查游离抗体试验游离抗体试验新生儿血清中的新生儿血清中的IgG抗抗A(B)抗体来自母亲,抗体来自母亲,如果患儿血清中发现有与其红细胞不配合的如果患儿血清中发现有与其红细胞不配合的IgG抗抗A(B)时,应将其血清与时,应将其血清与A、B、O试剂红细胞试剂红细胞用间接抗球蛋白试验
7、加以证实。用间接抗球蛋白试验加以证实。A B O-H D N 患儿血样本检查游离抗体试验新生儿血清中的I g GABO-HDN患儿血样本检查患儿血样本检查抗体放散试验抗体放散试验用加热放散法提取致敏于红细胞表面的抗体用加热放散法提取致敏于红细胞表面的抗体将抗体放散于盐水溶液中,然后加入将抗体放散于盐水溶液中,然后加入 经酶处理经酶处理的的A、B、O红细胞,作红细胞,作间接抗球蛋白试验间接抗球蛋白试验,此法,此法甚为敏感,即使是直接抗球蛋白试验阴性的患儿,甚为敏感,即使是直接抗球蛋白试验阴性的患儿,一旦本试验出现阳性结果,即可明确诊断。本试一旦本试验出现阳性结果,即可明确诊断。本试验是新验是新
8、生儿溶血病三项试验中最具价值的一项试生儿溶血病三项试验中最具价值的一项试验。验。A B O-H D N 患儿血样本检查抗体放散试验用加热放散法提取致敏ABO-HDN患儿血样本检查患儿血样本检查放散试验注意事项放散试验注意事项:?洗出尽量多的红细胞进行放散洗出尽量多的红细胞进行放散?注意放散液的温度不可超过注意放散液的温度不可超过56,以防,以防溶血溶血?天冷时放散液离心注意保温天冷时放散液离心注意保温?将尽可能多的放散液吸出将尽可能多的放散液吸出?注意除去放散液中残留的红细胞注意除去放散液中残留的红细胞A B O-H D N 患儿血样本检查放散试验注意事项:?洗出尽量多的在放散试验的结果观察中
9、,会遇到在放散试验的结果观察中,会遇到一种交一种交叉反应性抗叉反应性抗-AB抗体,它针对的特异性是抗体,它针对的特异性是 A和和B抗抗原所共有的,因而它能凝集原所共有的,因而它能凝集 A型和型和B型红细胞,抗型红细胞,抗-AB同样可引起同样可引起ABO溶血病。溶血病。在放散试验的结果观察中,会遇到一种交叉反应性抗-A B 抗体,它ABO-HDN患儿血样本检查患儿血样本检查血清胆红素测定血清胆红素测定:采用采用Lathe-Ruthven氏改良法,较适合于新氏改良法,较适合于新生儿高胆红素血症的检查。生理性黄疸一般不超生儿高胆红素血症的检查。生理性黄疸一般不超过过150mol/L(8.8mg/dl
10、),ABO新生儿黄疸常可新生儿黄疸常可达达200mol/L(11.7mg/dl)以上。脐血胆红素值高以上。脐血胆红素值高于于68mol/L(4mg/dl),24小时后血清胆红素值小时后血清胆红素值达达340mol/L(20mg/dl)以上者以上者,应给予换血治疗。应给予换血治疗。A B O-H D N 患儿血样本检查血清胆红素测定:采用L a t h e-ABO-HDN游离、释放试验阳性和阴性的判定,以出游离、释放试验阳性和阴性的判定,以出现可以致敏新生儿红细胞的血型抗体为阳性。如:现可以致敏新生儿红细胞的血型抗体为阳性。如:新生儿血型 A细胞 B细胞 O细胞 结果 A型 0 0 0 0 0
11、0 0 阳性 阳性 阳性(ABO 以外抗体引起溶血病)阴性 A B O-H D N 游离、释放试验阳性和阴性的判定,以出现可以致敏通过直抗、游离、释放试验确定通过直抗、游离、释放试验确定 ABO-HDN直抗试验 游离试验 释放试验 阴性:阳性 阴性 阴性 阳性 阳性 阴性 阳性 结论 不能证实为由血型免疫抗体引起的新生儿溶血病 可疑为新生儿溶血病 可疑为新生儿溶血病 可以证实为ABO 新生儿溶血病 可以证实为ABO 新生儿溶血病 可以证实为ABO 新生儿溶血病 可以证实为ABO 新生儿溶血病 可以证实为ABO 新生儿溶血病 阴性 阴性 阳性 阴性 阴性 阳性 阳性 阳性 阴性 阴性 阴性 阳性
12、 阳性 阴性 阳性 阳性 通过直抗、游离、释放试验确定A B O-H D N 直抗试验 游离试验ABO新生儿溶血病判读中可能遇到的问题新生儿溶血病判读中可能遇到的问题直抗阳性而释放试验阴直抗阳性而释放试验阴可能是试验误差或抗可能是试验误差或抗 C3阳性造成或是药物阳性造成或是药物引起新生儿溶血病引起新生儿溶血病在在A(B)细胞的释放液中检出抗细胞的释放液中检出抗-B(A)在释放试验的结果观察中,会遇到交叉反在释放试验的结果观察中,会遇到交叉反应性抗应性抗-AB抗体,如果在抗体,如果在A(B)细胞的释放液中仅细胞的释放液中仅仅检出抗仅检出抗B(A),却未检出抗却未检出抗A(B)时,仍认为是阴时,仍认为是阴性。性。A B O 新生儿溶血病判读中可能遇到的问题直抗阳性而释放试验阴可