1、安捷伦气相色谱基础培训第1页，共91页。安捷伦气相色谱基础培训第1 页，共9 1 页。1.1 概 述色谱法是一种分离方法，它利用物质在两相中分配系数的微小差异进行分离。当两相做相对移动时，使被测物质在两相之间进行多次分配，这样原来的微小差异产生了很大的效果，使各组分分离，以达到分离分析及测定一些物理化学常数的目的。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第2页，共91页。1.1 概 述色谱法是一种分离方法，它利用物质在两相中分 理解色谱法(Gas Chromatography)主要有2点：一是要 有两相，二是要有差异。两相：固定相和流动相 具体到气相色谱：固定相就是色谱柱(column)，
2、流动相就是气体或者称为载气(carrier gas)。差异就是指分配系数的差异。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第3页，共91页。理解色谱法(G a s C h r o m a t o g r a p h y )兰州制造 色谱过程示意图兰州制造中心实验室 待分离组分 ，和 载气ABCD2022年9月29日星期四第4页，共91页。色谱过程示意图兰州制造中心实验室 分离的过程示意图 2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室 样品 流动相 固定相GCTECH 2-04Analytical Training Center第5页，共91页。分离的过程示意图 1.2 气相色谱法的定义和分类
3、定义：用气体作为流动相的色谱法称为气相色谱法。分类：根据固定相的状态不同，气固色谱(GSC)（吸附原理）、气液色谱(GLC)（分配原理）气固色谱可用活性炭，硅胶，分子筛，高分子多孔小球等作为固定相，分离的主要对象是一些永久性的气体和低沸点的化合物。吸附-脱附 气液色谱多用固定液涂渍在惰性载体上作为固定相，一般只要高沸点的有机化合物，蒸汽压低（在450以下有1.5KPa-10KPa的蒸汽压）且热稳定性好的有机化合物作为固定液。由于在气液色谱中可供选择的固定液种类很多，容易得到好的选择性，所以气液色谱有广泛的实用价值。溶解-挥发兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第6页，共91页。1.2
4、气相色谱法的定义和分类定义：用气体作为流动相的色谱6 气相色谱基本流路图10 十一月 202110 十一月 2021外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓度相接近，以利于定量分析的准确性。选择型：对特定物质有高灵敏响应，如ECD、FPD、NPD。点火困难时，适当增大氢气流速，减小空气流速，点着后再调回原来的比例。10 十一月 2021则：R参R2=R测R1温度高，分析时间短，但分离效果差10 十一月 2021首先试用手边现有的柱子根据极性来选择适合的固定相，从来选择适当的色谱柱。25%Cyanopropyl根据极性来选择适合的固定相，从来选择适当的色谱
5、柱。Analytical Training Center即组分的信号，离子流经高阻放大、记录即得色谱峰。1.3 气相色谱法的特点“三高”“一快”“一广”1.高效能：一般填充柱的理论塔板数可达数千，毛细管柱可达一百多万。2.高选择性：可以使一些分配系数很接近的以及极为复杂、难以分离的物质，获得满意的分离。3.高灵敏度：可以检测物质，适合于痕量分析4.分析速度快：一个试样的分析可在几分钟到几十分钟内完成。5.应用广泛：可以分析气体试样，也可分析易挥发或可衍生转化为易挥发的液体和固体。分析的有机物，约占全部有机物(约300万种)的20%。6.不足之处：对被分离组分的定性能力较差。兰州制造中心实验室2
6、022年9月29日星期四第7页，共91页。6 气相色谱基本流路图1.3 气相色谱法的特点“三高”从载气带着组分进入色谱柱起就用检测器检测流出柱后的气体，并用记录器记录信号随时间变化的曲线，此曲线就叫色谱流出曲线，当待测组分流出色谱柱时，检测器就可检测到其组分的浓度，在流出曲线上表现为峰状，叫色谱峰。色谱图:试样中各组分经色谱柱分离后,在柱的末端收集各组分,经检测器转换为电信号,用纪录仪将各组分浓度记录下来,得到色谱图。1.4 色谱图及有关术语兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第8页，共91页。从载气带着组分进入色谱柱起就用检测器检测流出柱后的气体，并用 如图所示为一色谱流出曲线：1）
7、基线：在实验条件下，色谱柱后仅有纯流动相进入检测器时的流出曲线称为基线。基线在稳定的条件下应是一条水平的直线。它的平直与否可反应出实验条件的稳定情况。2）峰高（h）和峰面积：色谱峰顶点与基线的距离叫峰高。色谱峰与峰底基线所围成区域的面积叫峰面积。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第9页，共91页。如图所示为一色谱流出曲线：1）基线：在实验条件下，色谱柱后仅3）保留值 a.死时间(tM)：不与固定相作用的物质从进样到出现峰极大值时的时间，它与色谱柱的空隙体积成正比。由于该物质不与固定相作用，因此，其流速与流动相的流速相近。据 tM可求出流动相平均流速b.保留时间tr：试样从进样到出现峰
8、极大值时的时间。它包括组份随流动相通过柱子的时间t0和组份在固定相中滞留的时间。c.调整保留时间tr：某组份的保留时间扣除死时间后的保留时间，它是组份在固定相中的滞留时间。即 tr=tr tM4）色谱峰底宽W：由色谱峰的两边拐点做切线，与基线交点的距离。5）半峰高宽度W ：色谱峰高一半处的峰宽。也称为色谱峰半高宽度。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第10页，共91页。3）保留值兰州制造中心实验室2 4 九月 2 0 2 2 第1 0 页，共1.5 气相色谱构成示意图兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第11页，共91页。1.5 气相色谱构成示意图兰州制造中心实验室2 4 九
9、月 21.6 气相色谱基本流路图500次更换进样垫100次更换一般为1:10吸咐不被气化的物质N2尾吹兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第12页，共91页。1.6 气相色谱基本流路图5 0 0 次更换进样垫1 0 0 次更换一第二部分载气兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第13页，共91页。第二部分载气兰州制造中心实验室2 4 九月 2 0 2 2 第1 3 页典型的气相色谱色谱柱流量控制器稳压器空气氢气载气分子筛脱水管固定进样口检测器电子部件PC限流器气气 源源兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第14页，共91页。典型的气相色谱色谱柱流量稳压器空气氢气载气分子筛
10、脱水管固定进气源与载气种类兰州制造中心实验室 对载气的要求如下：1、惰性（不与样品或固定相反应）2、气体扩散小，以提高柱效率3、容易得到并易纯化 4、价格便宜5、满足检测器要求 常用载气：N2 H2 He Ar TCD 用氢气、氦气比较好，灵敏度高，FID 用氮气 辅助气：氧气或空气2022年9月29日星期四第15页，共91页。气源与载气种类兰州制造中心实验室 对载气的要求如下：2 4 九1、气体不纯的不良影响2、气体的净化方法 3、常用的净化物质的使用与老化兰州制造中心实验室1)样品失真或消失2)柱失效3)对固定液保留特性的影响4)对检测器的影响气体的净化气体的净化2022年9月29日星期四
11、第16页，共91页。兰州制造中心实验室1)样品失真或消失气体的净化2 4 九氧气捕集器兰州制造中心实验室微量的氧气会破坏色谱柱，特别是对毛细管柱。氧气也会降低ECD检测器的功能。氧气捕集器(P/N 3150-0414)应连接在分子筛干燥器和仪器安装设备的进样口之间。管路:使用GC专用铜管,使用前先用溶剂冲洗，载气吹干。分子筛干燥器2022年9月29日星期四第17页，共91页。氧气捕集器兰州制造中心实验室微量的氧气会破坏色谱柱，特别是对气流调节阀 通常在减压阀输出气体的管线中还要串联稳压阀，通常在减压阀输出气体的管线中还要串联稳压阀，用以稳定载气（或燃气）的压力用以稳定载气（或燃气）的压力 当用
12、程序升温进行色谱分析时，由于色谱柱柱温当用程序升温进行色谱分析时，由于色谱柱柱温不断升高引起色谱柱阻力不断增加，也会使载气流量不断升高引起色谱柱阻力不断增加，也会使载气流量发生变化。为了在气体阻力发生变化时，也能维持载发生变化。为了在气体阻力发生变化时，也能维持载气流速的稳定，需要使用稳流阀来自动控制载气的稳气流速的稳定，需要使用稳流阀来自动控制载气的稳定流速。定流速。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第18页，共91页。气流调节阀 兰州制造中心实验室2 4 九月 2 0 2 2 第1 8 页，第三部分进样系统及技术兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第19页，共91页。第三
13、部分进样系统及技术兰州制造中心实验室2 4 九月 2 0 2 阀进样2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室 气体进样第20页，共91页。阀进样2 4 九月 2 0 2 2 兰州制造中心实验室 气体进样第2 液体进样阀2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室WSPC排出口样品入口限流器载气色谱柱WSPC载气色谱柱取样状态取样状态进样状态进样状态第21页，共91页。液体进样阀2 4 九月 2 0 2 2 兰州制造中心实验室WS P C 排 样品上方取样进样法（顶空分析）顶空的概念 样品 顶空 恒温箱 气密型进样器1.样品放置在一个恒温箱中（或炉中），从而可以达温度平衡。2.利用一个气密型
14、的进样器或其它合适的手段取出样品上方的相同的顶空气体。3.再使用一般的GC仪器来分析样品的顶空气体。2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第22页，共91页。样品上方取样进样法（顶空分析）顶空的概念 样品 顶空 恒 顶空相关问题顶空相关问题 适于分析这样的挥发物：适于分析这样的挥发物：-不纯样品。不纯样品。-固体样品。固体样品。-含有某些不做分析的高沸点含有某些不做分析的高沸点组组 分样品。分样品。-含水量较高的样品。含水量较高的样品。2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第23页，共91页。顶空相关问题 适于分析这样的挥发物：-不纯样品。2 应用1.氯代甲烷2.二氯甲烷3.三氯甲
15、烷4.四氯化碳123415 min柱：HP-1(Cross-Linked Methyl Silicone)30 m x 0.53 mm x 2.65(HP Part No.19095Z-123)载气：Helium,5.2 psi 炉温：40 C 进样口：1cc,不分流 检测器：FID柱：HP-1(Cross-Linked Methyl Silicone)30 m x 0.53 mm x 2.65(HP Part No.19095Z-123)载气：Helium,5.2 psi 炉温：60 C 进样口：1 cc,分流比 5:1 检测器：FID1.苯2.甲苯10 min12 水中氯化烃 顶空分析 水
16、中芳烃 顶空分析2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第24页，共91页。应用1.氯代甲烷2.二氯甲烷3.三氯甲烷药品中溶剂残留:USP 4672022年9月29日星期四兰州制造中心实验室246810123451 二氯甲烷(25 ppm)2 氯仿(12 ppm)3 苯(25 ppm)4 三氯乙烯 (25 ppm)5 二噁环(25 ppm)第25页，共91页。药品中溶剂残留:U S P 4 6 7 2 4 九月 2 0 2 2 兰州制造进样垫固定螺母2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室 进样垫 石墨垫柱 载气 玻璃填充物 齿形螺母 衬管 填充柱进样口示意图第26页，共91页。进样垫
17、固定螺母2 4 九月 2 0 2 2 兰州制造中心实验室 进样垫 毛细管柱进样口 分流方式是特为毛细管柱GC设计的样品引入方式 可与熔融石英，玻璃，金属柱相接 脉冲分流 允许更大进样量 脉冲不分流 允许更大进样量分流方式用于 含量较高组分分析 不分流方式用于 痕量组分分析2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第27页，共91页。毛细管柱进样口 分流方式是特为毛细管柱G C 设计的样品引入分流/不分流流路系统2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第28页，共91页。分流/不分流流路系统2 4 九月 2 0 2 2 兰州制造中心实验室第不分流流路示意图n进样过程中分流放空阀关闭（没有分
18、流出口流量）n在进样后的某指定时间，分流阀打开，将剩下的蒸汽清除出进样口。2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第29页，共91页。不分流流路示意图2 4 九月 2 0 2 2 兰州制造中心实验室第2 9 堵塞 温度不正确 污染 泄漏2、操作条件的选择1)汽化室温度的选择2)进样垫的材料与处理3)进样量进样口操作 1、进样口常见问题2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第30页，共91页。堵塞 温度不正确 污染 泄漏2、操作条件的选择进样口操作 注意事项进样口温度过低，将导致高分子量化合物气化不完全，并且不能有效转移到色谱柱中。(样品气化不完全)进样口温度过高，导致热稳定性差的化合
19、物分解。(样品分解)样品从进样针注入时，不同组分的气化程度不同，高沸点组分残留量比例高。一般情况下进样速度必须很快，因为当进样时间太长时，试样原始宽度将变大，色谱峰半峰宽随之变宽，有时甚至使峰变形。一般地，进样时间应在1s以内。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第31页，共91页。注意事项进样口温度过低，将导致高分子量化合物气化不完全第四部分色谱柱兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第32页，共91页。第四部分色谱柱兰州制造中心实验室2 4 九月 2 0 2 2 第3 2气相色谱柱有多种类型。从不同的角度出发，可按色谱柱的材料、形状、柱内径的大小和长度、固定液的化学性能等进行
20、分类。色谱柱使用的材料通常有玻璃、石英玻璃、不锈钢和聚四氟乙烯等，根据所使用的材质分别称之为玻璃柱、石英玻璃柱、不锈钢柱和聚四氟乙烯管柱等。在毛细管色谱中目前普遍使用的是玻璃和石英玻璃柱，后者应用范围最广。对于填充柱色谱,大多数情况下使用不锈钢柱，其形状有U型的和螺旋型的，使用U型柱时柱效较高。按照色谱柱内径的大小和长度，又可分为填充柱和毛细管柱。前者的内径在24mm，长度为110m左右；后者内径在0.20.5mm，长度一般在25100m。在满足分离度的情况下，为提高分离速度，现在也有人使用高柱效、薄液膜的10m短柱。2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第33页，共91页。气相色谱柱有
21、多种类型。从不同的角度出发，可按色谱柱的材料、形根据固定液的化学性能，色谱柱可分为非极性、极性与手性色谱分离柱等。固定液的种类繁多，极性各不相同。色谱柱对混合样品的分离能力，往往取决于固定液的极性。常用的固定液有烃类、聚硅氧烷类、醇类、醚类、酯类以及腈和腈醚类等。新近发展的手性色谱柱使用的是手性固定液，主要有手性氨基酸衍生物、手性金属配合物、冠醚、杯芳烃和环糊精衍生物等。其中以环糊精及其衍生物为色谱固定液的手性色谱柱，用于分离各种对映体十分有效，是近年来发展极为迅速且应用前景相当广阔的一种手性色谱柱。在进行气相色谱分析时，色谱柱的选择是至关重要的。不仅要考虑被测组分的性质，实验条件例如柱温、柱
22、压的高低，还应注意和检测器的性能相匹配。有关内容我们将在以后章节中加以详细讨论。2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第34页，共91页。根据固定液的化学性能，色谱柱可分为非极性、极性与手性色谱分离“极性”一词常用来描述或评价固定液的性质。气相色谱中的所谓极性，是指含有不同功能团的固定液与分析物质的功能团和亚甲基之间相互作用的程度。如果一种固定液保留某种化合物的能力大于另一类，则认为这种固定液对于前一类化合物有较高的选择性。人们最初用来描述和区别固定液分离特性的方法是罗胥耐德(Rohrschneider)于1959年提出的相对极性方法。他首先规定固定液,-氧二丙腈的相对极性为100，角鲨
23、烷为零，选用正丁烯与正丁烷或环已烷与苯作为物质对，然后分别测定物质对在氧二丙腈、角鲨烷以及被测固定液柱上的相对调整保留值并取对数。对于罗氏所建议的方法，有些人仍认为不够完善。1970年麦克雷诺(McReynolds)对这一方法提出改进方案。他采用丁醇、2-戊酮和硝基丙烷分别取代罗氏所用的乙醇、甲乙酮和硝基甲烷，实验温度改为120。为了与罗氏常数相区别，相应的麦氏常数用X，Y，Z，U，S表示。2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第35页，共91页。“极性”一词常用来描述或评价固定液的性质。气相色谱中的所谓极许多色谱手册都列有这两种常数，但罗氏常数现在人们已经不太常用，使用比较广泛的是麦氏
24、常数。固定相的评价是一个比较复杂的问题。不论是罗氏常数还是麦氏常数，许多人认为都还有不少缺点。为了寻求比较完美的表征方法，近年来Abraham等人提出了一种“溶剂化参数模型”（solvation parameter model）。这一模型将溶质分子从气相溶解到固定相的过程分为三个阶段：(1)在固定相中形成一定大小的空穴。这一过程要打破溶剂-溶剂分子间的“键”，是一个吸收能量的过程。溶质分子越大，需要打破的溶剂-溶剂分子间的“键”越多，吸收的能量也越多。如果仅考虑这一阶段，溶质分子越大，其保留值越小；(2)孔穴周围的溶剂分子重新排列。这一过程虽然与熵及焓有关，但对Gibbs自由能的贡献不大；(3
25、)溶质进入孔穴。这一过程产生溶质和溶剂之间的各种作用力。所有作用力都会导致释放能量，有利于溶质的溶解。2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第36页，共91页。许多色谱手册都列有这两种常数，但罗氏常数现在人们已经不太常用色谱柱2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室 填充柱 毛细管柱 普通填充柱 微填充柱分析填充柱制备填充柱壁涂毛细管柱(WCOT)多孔层毛细管柱(SCOT或 PLOT)填充毛细管柱弹性石英毛细管柱(FSOT)壁处理毛细管柱分配型吸附型分配型吸附型普通弹性石英毛细管柱键合相弹性石英毛细管柱 色谱柱分类第37页，共91页。色谱柱2 4 九月 2 0 2 2 兰州制造中心实
26、验室 填充柱 毛细管 色谱柱类型2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室 填充柱 开管柱（毛细管柱）常规型小球填充柱多孔层小球填充柱 常规填充柱及微填充柱多孔层开管柱壁涂开管柱长度(meters)内径(mm)流量(ml/min)压力梯度(psi)样品负荷量.5-102-410-6010-90100 ng/峰5-100.5304-301-205-100.3-.751-301-40100 ng/峰5-100.1-.255-9050 ng/峰PACKEDSERIES 530WCOT(wide)WCOT(narrow)第38页，共91页。色谱柱类型2 4 九月 2 0 2 2 兰州制造中心实验室
27、填充柱 气固色谱(GSC)吸附型 填充柱 吸附填充(GSC)多孔具有大的表面积毛细管柱-Porous Layer Open Tubular(PLOT)载气 载气2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第39页，共91页。气固色谱(G S C)吸附型 填充柱 吸附填充(G S C 气液色谱(GLC)2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室 分配型 填充柱 毛细管柱Wall Coated OpenTubular(WCOT)液体相 固体支撑物 非常多的孔具有极大的表面积 载气液体相第40页，共91页。气液色谱(G L C)2 4 九月 2 0 2 2 兰州制造中心实验室 气液色谱(GLC)2
28、022年9月29日星期四兰州制造中心实验室 通过样品在固定相中不同的溶解度来实现分离 根据极性的不同分离组分 通常情况下“相似相溶 或 同极性互相作用 例如：醇类是极性化合物 聚乙二醇(Carbowax)是极性化合物第41页，共91页。气液色谱(G L C)2 4 九月 2 0 2 2 兰州制造中心实验室 3、分离度R：柱将两个峰彼此分开的能力。1、柱效：柱生成尖锐峰的能力。2、选择性：柱将两个具有相似的化学和/或物理性质的 物质进行选择性分离的能力。优差优差 分离指标4、柱效，选择因子和分离度之间的关系。r2,1=tR2tR1=VR2VR1=Vg2Vg1 选择因子：分离度分离度柱效柱效202
29、2年9月29日星期四兰州制造中心实验室第42页，共91页。3、分离度R：柱将两个峰彼此分开的能力。1、柱效：柱生成尖锐 毛 细 管 柱 色 谱 条 件 的 选 择1、柱 效2、液 膜 厚 度（d）f3、柱 内 径4、载 气 线 速 及 载 气 种 类5、柱 温 的 选 择6、进 样 量 及 进 样 技 术2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第43页，共91页。毛 细 管 柱 色 谱 条 件 的 选 择1、柱 效2 柱 选 择 常用的柱选择方法：首先试用手边现有的柱子 向同事请教 从文献中查到相近应用的方法 如不是太清楚，先使用一个非极性柱如 HP-1或 HP-52022年9月29日星期
30、四兰州制造中心实验室第44页，共91页。柱 选 择 常用的柱选择方法：首先试用手边现有的柱子 向固定相选择的基本原则：相似相溶原理，选用非极性的固定相分析非极性化合物 如果化合物可以用不同极性的固定相分析，选用极性最小 的固定相。非极性固定相的使用寿命长于极性固定相。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第45页，共91页。固定相选择的基本原则：兰州制造中心实验室2 4 九月 2 0 2 2根据极性来选择适合的固定相，从来选择适当的色谱柱。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第46页，共91页。根据极性来选择适合的固定相，从来选择适当的色谱柱。兰州制造中气相色谱毛细管柱常用固定相
31、兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第47页，共91页。气相色谱毛细管柱常用固定相兰州制造中心实验室2 4 九月 2 0 固固 定定 液液 的的 选选 用用气 相 色 谱 固 定 相SameSame100%MethylSilicone Gum100%MethylSilicone Gum99%Methyl1%Vinyl Gum100%MethylSilicone Fluid100%MethylSilicone Fluid100%MethylSilicone Fluid5%PhenylCarboraneMethyl Silicone50%PhenylMethyl Silicone75%Ph
32、enylMethyl SiliconeSame50%3,3,3-Trifluropropyl25%2-Cyanoethyl25%CyanopropylPolyethylene GlycolPolyethylene Glycol(Modified withTeraphthalic Acid)50%CyanopropylPhenyl SiliconeFree fatty acid phasePolyethylene GlycolDiethylene GlycolSuccinate1,2,3-Trie(2-Cyano-ethoxy)propaneSameSameSameSqualaneApiazon
33、 LSE-30OV-1UCW-982DC-200OV-101SP-2100SE-52(or SE-54)Dexall 300OV-17OV-25Polyphenyl Ether(5 ring)QF-1OV-210XE-60OV-225Carbowax 20MCarbowax 20MTPASilar 5CPFFAP50%3,3,3-TrifluropropylCarbowax 1500DEQSSilar 10CEGS100%CyanopropylSiliconeEthylene GlycolSuccinateTCEPSebaconitrileBis-(2-Methoxyethyl)Adipate
34、Bis-(2-Cyanoethyl)FormalmideOV-1SE-30OV-101,SP2100DC-200,SP2100OV-101,DC-200OV-73PS-300SP-2250,DC-710SP-2401,OV-202QF-210OV-225,AN-600E-60,AN-600SP-2300,CS-5SP-1000,OV-351SP-2340,CS-10SP-2401,OV-202QF-120/10050/30050/300100/3500/3000/2500/3500/35050/30050/4500/3750/3500/2000/2500/2500/26560/22560/25
35、00/25050/25040/20020/2000/1250/1250/7520/1000/2750/250100/2000321516161616173247119178176144204228322321319340347499593690Information not availableInformation not available14852353702253555557575772801582042272333815365385374955806077518579912387577870154444454545456510316220822435534033835836744639
36、7418593752853358659643032646566666767148243305306483493492572573637602626840102811104589429420424142424343439896202280283305367386510520531627589850915100031080188901432172222242272292292574748841175121615001785181323082318242825482587354341454644152036823759ABCDEMcReynolds ConstantsTemp LimitMin/Ma
37、x CEquivalentPhasesDescriptionTrade namesIncreasing Polarity(A)Benzene,(B)n-Butanol,(C)2-Pentanone,(D)Nitropropane,(E)Pyridine2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第48页，共91页。固 定 液 的 选 用S a m e S a m e 1 0 0%Me t h12345678912346987 液 相 选 择5%苯甲基硅氧烷1113141.C2.4-氯酚3.癸胺4.C5.甲基癸酯6.C7.苊8.1-十二烷醇9.C1550%苯甲基硅氧烷2022年9月29日星期四兰
38、州制造中心实验室第49页，共91页。1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 6 9 8 7 液 相 选 择5%苯10 十一月 202110 十一月 202110 十一月 202110 十一月 2021内标物必须准确添加入所有未知样品中。Information not available20%液相在50 C下分析应用广泛：可以分析气体试样，也可分析易挥发或可衍生转化为易挥发的液体和固体。测量臂：需要携带被分离组分的载气流过，则连接在紧靠近分离柱出口处。载气：Helium,5.曲线最低点是最小板高（或最大每米塔板数）的位置。4 三氯乙烯 (25 ppm)压力梯度(psi)12121 2
39、121 2保留时间与填充量oB.20%液相在50 C下分析C.10%液相在50 C下分析oA.30%液相在50 C下分析D.5%液相在50 C下分析ooE.1%液相在50 C下分析o2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第50页，共91页。1 0 十一月 2 0 2 1 1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 保留时间与填充量o内径内径选择的基本原则：0.10mm口径柱适用于快速气相色谱分析。0.25mm口径柱具有较高的柱效，用于标准的 GC/MS应用和分流/不分流分析。0.32mm口径柱中等柱效，多用于不分流进样。0.53mm口径柱，可以替代填充柱，适合于痕量分析。增加色谱柱的内径，可
40、以增加分离的样品量，但由于纵向扩散路径的增加，会使柱效降低。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第51页，共91页。内径内径选择的基本原则：兰州制造中心实验室2 4 九月 2 0 2内径对分离度的影响 较小的内径可以获得更好的分离度，或者在更短的时间内获得同样的分离度兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第52页，共91页。内径对分离度的影响 较小的内径可以获得更好的分离度 膜厚 膜厚选择的基本原则：增加膜厚可以提高分离度和加强保留，厚些的液膜可以有效降低过载拖尾峰和其他化合物的共流出。如果样品的浓度范围很宽，就需要更厚的液膜，反之，如果目标组分的分离足够，并且没有共流出的问题，
41、就可以使用比较薄的液膜，对于挥发性有机物来说，厚液膜更为合适。液膜厚度的改变将直接影响化合物的流出温度。膜越厚，保留越强，流出温度相应也越高。标准膜厚(0.250.5m)：最广泛的应用，对于流出达到300的大多数样品分析效果良好。薄液膜(0.10.2m)：适合石化分析，甘油三酯等高沸点的物质。厚液膜(15m)：适合于流出温度在100200之间的低沸点化合物兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第53页，共91页。膜厚 膜厚选择的基本原则：兰州制造中心实验室2 4 九月 2 膜厚对分离度的影响兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第54页，共91页。膜厚对分离度的影响兰州制造中心实验
42、室2 4 九月 2 0 2 2 长度 长度选择的基本原则：色谱柱越长，柱效越高。选择可以满足分离度要求的最短的柱子。如果即使是最长规格的色谱柱依然无法满足分离度的要求，请考虑更换固定相或膜厚。分离度和柱长的平方根成正比，两倍的柱长只能增加40的分离度。标准柱(2530m)：标准柱长，满足大部分应用。短柱(515m)：通常用于10个组份以下简单样品的快速分析。长柱(50m以上)：复杂样品分析。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第55页，共91页。长度 长度选择的基本原则：兰州制造中心实验室2 4 九月 柱长对分析时间的影响 恒温分析：保留时间由柱长决定，柱长加倍分析时间也加倍。程升分析
43、：保留时间主要取决于柱温，分离度的提升和恒温分析类似，但分析时间只是略有增加。由于分离度正比于柱长的平方根，所以增加柱长对分离是有利的。但增加柱长会使各组分的保留时间增加，延长分析时间。因此，在满足一定分离度的条件下，应尽可能使用较短的柱子。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第56页，共91页。柱长对分析时间的影响 恒温分析：保留时间由柱长决定，柱长 载 气 及 流 速 的 选 择1、载 气 种 类2、载 气 流 速2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第57页，共91页。载 气 及 流 速 的 选 择1、载 气 种 类2、HETP=A+B+CHETPC RESISTANCE
44、TO MASS TRANSFERA EDDY DIFFUSIONMOLECULARDIFFUSIONB optmmm mm m 柱效与载气线速度 柱效受载气线速度和流量控制。曲线最低点是最小板高（或最大每米塔板数）的位置。因此柱效也最好。2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第58页，共91页。H E T P =A +B+C H E T P C R E S I S T A 柱 温 的 选 择1、对 柱 效 的 影 响2、对 分 离 度 的 影 响3、对 保 留 时 间 的 影 响4、与 样 品 性 质 的 关 系2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第59页，共91页。柱 温 的
45、选 择1、对 柱 效 的 影 响2、对 D.60 C.C.50 C.B.40 C.A.30 C.1212121 2oooo柱温对保留时间的影响保留时间与炉温2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第60页，共91页。D.6 0 C.C.5 0 C.B.4 0 C.A.3 0 IsothermalTemperature Programmed恒温色谱法和程序升温色谱法主要特点主要特点1、恒温色谱法2、程序升温色谱法2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第61页，共91页。I s o t h e r m a l T e m p e r a t u r e P r o g r a m m 程
46、序升温运行特点当组分和较宽的沸程（100度）时使用。减少分析时间 可产生尖锐峰产生更好的定量准确性，特别是对于后流出的组分 增加柱流失，产生上漂的基线2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第62页，共91页。程序升温运行特点当组分和较宽的沸程（1 0 0 度）时使用。汽化温度和检测温度1、汽化温度（使样品汽化，一般比柱温高几十度）2、检测温度（通常比柱温高至少20度以上）2022年9月29日星期四兰州制造中心实验室第63页，共91页。汽化温度和检测温度1、汽化温度（使样品汽化，一般比柱温高几恒温：恒温：4545o oC C程序升温：程序升温：3018030180o oC C恒温：恒温：1
47、45145o oC C温度低，分离效果较好，但分析时间长温度低，分离效果较好，但分析时间长程序升温，分离效果好，且分析时间短程序升温，分离效果好，且分析时间短温度高，分析时间短，但分离效温度高，分析时间短，但分离效果差果差兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第64页，共91页。恒温：4 5 o C 程序升温：3 0 1 8 0 o C 恒温：1 4 5 o C 温度为什么必须进行色谱柱老化？新色谱柱含有溶剂和高沸点物质，所以基线不稳，出现鬼峰和噪声；旧柱长时间未用，也存在同样问题。一般采用升温老化，即从室温程序升温到最高温度，并在高温段保持数小时。新柱老化时，最好不要连接检测器。每天都
48、要进行老化吗？视仪器基线情况，确定是否需要老化以及老化时间。兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第65页，共91页。为什么必须进行色谱柱老化？兰州制造中心实验室2 4 九月 2 0第五部分检测器兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第66页，共91页。第五部分检测器兰州制造中心实验室2 4 九月 2 0 2 2 第6 6检测器：是将流出色谱柱的被测组分的浓度转变为检测器：是将流出色谱柱的被测组分的浓度转变为电信号的装置，电信号的装置，是色谱仪的眼睛。是色谱仪的眼睛。通常由检测元件、放大器、数模转换器三部分组成通常由检测元件、放大器、数模转换器三部分组成.被色谱柱分离后的组分依次进
49、入检测器，按其浓度或质量随时间的被色谱柱分离后的组分依次进入检测器，按其浓度或质量随时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示，给出色谱图；变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示，给出色谱图；常用的检测器：热导检测器、氢火焰离子化检测器、电子捕常用的检测器：热导检测器、氢火焰离子化检测器、电子捕获检测器、火焰光度检测器、氮磷检测器。获检测器、火焰光度检测器、氮磷检测器。检测器定义兰州制造中心实验室2022年9月29日星期四第67页，共91页。检测器：是将流出色谱柱的被测组分的浓度转变为 电信号的装 检测器分类 根据检测器的响应原理，可将其分为浓度型和质量型检测器。根据检测器的响应原理
50、，可将其分为浓度型和质量型检测器。浓度型：检测的是载气中组分浓度的瞬间变化，即响应值与浓度成正比。浓度型：检测的是载气中组分浓度的瞬间变化，即响应值与浓度成正比。如如TCD、ECD。质量型：检测的是载气中组分进入检测器中速度变化，即响应值与单位时间质量型：检测的是载气中组分进入检测器中速度变化，即响应值与单位时间进入检测器的质量成正比。如进入检测器的质量成正比。如FID、FPD。根据应用范围，分为通用型检测器和选择型检测器根据应用范围，分为通用型检测器和选择型检测器通用型：对所有物质有响应，如通用型：对所有物质有响应，如TCD、FID。选择型：对特定物质有高灵敏响应，如选择型：对特定物质有高灵
