1、资料仅供参考,不当之处,请联系改正。叶蝉叶蝉水稻水稻普通矮缩病普通矮缩病 Rice dwarf 小麦黄矮病小麦黄矮病 Wheat yellow dwarf资料仅供参考,不当之处,请联系改正。水稻黄萎病水稻黄萎病 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。玉米黑条矮缩病玉米黑条矮缩病灰稻虱灰稻虱资料仅供参考,不当之处,请联系改正。番茄病毒病(卷叶)番茄病毒病(卷叶)豇豆病毒病豇豆病毒病西瓜病毒病西瓜病毒病马铃薯病毒病马铃薯病毒病白菜病毒病白菜病毒病资料仅供参考,不当之处,请联系改正。植植 物物 病病 毒毒 经济作用:经济作用:绿菊花、郁金香、日本卫矛绿菊花、郁金香、日本卫矛 增增 产产 菊芋潜病毒菊芋
2、潜病毒 莴苣巨脉病毒莴苣巨脉病毒 樱属环斑病毒樱属环斑病毒资料仅供参考,不当之处,请联系改正。植物病毒的特殊性:植物病毒的特殊性:亚显微性亚显微性病毒粒子微小病毒粒子微小隐蔽性隐蔽性一般无肉眼可见的病症一般无肉眼可见的病症潜伏性潜伏性有隐症现象有隐症现象微量性微量性病株体内病毒浓度低,病株体内病毒浓度低,且分布不均且分布不均资料仅供参考,不当之处,请联系改正。第八章第八章 植植 物物 病病 毒毒一、植物病毒病的症状一、植物病毒病的症状二、植物病毒的生态学二、植物病毒的生态学三、植物病毒的传播三、植物病毒的传播四、植物抗病毒防卫反应的原理四、植物抗病毒防卫反应的原理五、植物病毒病的防治五、植物病
3、毒病的防治六、植物抗病毒基因工程六、植物抗病毒基因工程 七、七、植物病毒的检测植物病毒的检测八、植物病毒的纯化、提纯与八、植物病毒的纯化、提纯与保藏保藏 本章要点本章要点 植物病毒病的症状及其特点植物病毒病的症状及其特点 植物病毒传播植物病毒传播 病害防治原理与方法病害防治原理与方法资料仅供参考,不当之处,请联系改正。一、植物病毒病的症状一、植物病毒病的症状 症状有诊断价值,区别生理性病害、遗传病害、症状有诊断价值,区别生理性病害、遗传病害、病毒病害病毒病害 病毒性病害病毒性病害(1)田间发病一般)田间发病一般分散分散,少数土传的可小片发生,少数土传的可小片发生,但极少普遍发生但极少普遍发生与
4、昆虫介体、接触传播有关与昆虫介体、接触传播有关(2)可)可传染性传染性,借助介体或其它传染方式传播,借助介体或其它传染方式传播 植物病毒病研究中,一般进行生物学测定、传染植物病毒病研究中,一般进行生物学测定、传染试验,再做电镜观察试验,再做电镜观察资料仅供参考,不当之处,请联系改正。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。一、植物病毒病的症状一、植物病毒病的症状 1、宏观症状、宏观症状macroscopic symptom 生长减缩生长减缩(Reduction of growth)变变 色色discoloration:叶、花、茎、果实及种子叶、花、茎、果实及种子 坏死坏死necrosis 畸形生长
5、畸形生长malformation 失水失水2、微观症状、微观症状microscopic symptom类型:症状类型:症状symptom与病象与病象syndrome(多种症状的总称)多种症状的总称)资料仅供参考,不当之处,请联系改正。一、植物病毒病的症状一、植物病毒病的症状 1、宏观症状、宏观症状macroscopic symptom(1)生长减缩生长减缩(Reduction of growth):矮缩:矮缩dwarfing、矮化、矮化 stunting、小实、小实small fruit、小叶、小叶 little leaf、缩根、缩根 root reduction大蒜病毒病大蒜病毒病 矮化矮化
6、Stunting矮缩矮缩Dwarfing资料仅供参考,不当之处,请联系改正。一、植物病毒病的症状一、植物病毒病的症状 1、宏观症状、宏观症状macroscopic symptom(2)变变 色色discoloration 叶变色叶变色 褪绿褪绿 chlorosis、白化、白化 blanching、紫紫/红红/黄化黄化 purpling/reddening/yellowing、褐褐/黑黑/古铜化古铜化 browning/blackening/bronzing 脉明症脉明症vein-clearing、杂色、杂色variegation、花叶花叶mosaic、斑驳斑驳mottling、斑点、斑点spo
7、ting/doting、线纹、线纹line pattern、环纹环纹ring stripe、条纹、条纹stripe、环斑、环斑ring spot、条斑、条斑streak 沿脉变色沿脉变色vein-blanding、脉间花叶、脉间花叶interveinal mosaic叶绿素、胡萝卜素、花青素(叶绿素、胡萝卜素、花青素(红红到到紫紫)资料仅供参考,不当之处,请联系改正。TobamovirusMosaic symptoms on tobacco caused by TMV斑驳斑驳Mottle资料仅供参考,不当之处,请联系改正。TMV transmission by an Apis sp.A sev
8、ere mosaic symptom on tomato leaf(TMV)腿色斑腿色斑Chlorotic spoting黄化黄化Yellowing资料仅供参考,不当之处,请联系改正。斑驳斑驳Mottle脉明症脉明症Vein-clearing条斑条斑Leaf streak资料仅供参考,不当之处,请联系改正。腿色斑驳腿色斑驳Chlorotic mottle viroidyellow dwarfseed coat mottling 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。郁郁金金香香碎碎锦锦花花叶叶病病 花变色花变色碎色症碎色症color breaking、花瓣变绿、花瓣变绿virescence杂色花
9、郁金香、香石竹、紫罗杂色花郁金香、香石竹、紫罗兰兰、虞美人、唐菖蒲、虞美人、唐菖蒲 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。枯斑枯斑necrotic spot、线条坏死、线条坏死streak necrosis、死顶、死顶top necrosis、蚀纹、蚀纹etch(不规则的线纹不规则的线纹)一、植物病毒病的症状一、植物病毒病的症状 辣椒辣椒病毒病病毒病马铃薯病毒病马铃薯病毒病资料仅供参考,不当之处,请联系改正。necrosis symptoms on tomato caused by TMVLocal lesions in tobacco one week after inoculation wi
10、th TMV 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。一、植物病毒病的症状一、植物病毒病的症状 耳突耳突enation溃疡性肿瘤溃疡性肿瘤cankerous肿枝肿枝shoot swelling扁枝症扁枝症branch flattening蕨叶症蕨叶症fern leaf线叶症线叶症leaf narrowing皱缩皱缩crinkling曲叶曲叶leaf curl花束症花束症boguet束顶症束顶症bunchy top叶片偏上性叶片偏上性epinasty卷叶卷叶leaf rolling丛枝症丛枝症witchs broom拐节症拐节症zigzag growth花器变态花器变态antholysis绿花绿花v
11、irescence变叶变叶phyllody缩节缩节apostasis不孕性不孕性sterility资料仅供参考,不当之处,请联系改正。卷叶卷叶Leaf rolling芹菜芹菜耳突耳突Enation资料仅供参考,不当之处,请联系改正。脉明症脉明症vein-clearing茎瘤茎瘤Healthy(left)and naturally mop-top affected(right)plants of potato资料仅供参考,不当之处,请联系改正。蕨叶症蕨叶症fern leaf资料仅供参考,不当之处,请联系改正。丛枝症丛枝症 拐节症拐节症witchs broom zigzag growthPeach
12、 leaf distortion 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。萎蔫萎蔫wilting萎蔫萎蔫wilting 过量蒸腾过量蒸腾overtranspiration 病毒本身阻塞导管、胶质、病毒本身阻塞导管、胶质、形成侵填体堵塞导管形成侵填体堵塞导管一、植物病毒病的症状一、植物病毒病的症状 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。2、微观症状、微观症状microscopic symptom组织病变:组织病变:callose、侵填体、侵填体tylose、流胶、流胶gummosis 正常组织增生正常组织增生hyperplasia 增大增大hypertrophy 可
13、染色检查可染色检查抑制木质素形成抑制木质素形成(inhibition of lignin formation)内含体内含体 inclusion:柱状、风轮状柱状、风轮状pinwheel、卷筒状卷筒状scroll、晶状等、晶状等局部症状局部症状local symptom系统症状系统症状systemic symptom资料仅供参考,不当之处,请联系改正。外表症状的隐潜外表症状的隐潜masking:无症侵染无症侵染symptomless infection 高温隐潜高温隐潜high temperature masking 获得免疫获得免疫acquired immunity hypersensitiv
14、e response HR 砧木的作用砧木的作用 Stock effect一、植物病毒病的症状一、植物病毒病的症状 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。Virus pathoecosystem资料仅供参考,不当之处,请联系改正。(一一)、生物因素、生物因素1、病毒及其寄主植物、病毒及其寄主植物 栽培植物的种及品种改变 野生植物及杂草是病毒的贮源2、传播介体与病毒的扩展、传播介体与病毒的扩展3、人和动物的传播、人和动物的传播4、栽培措施与病毒病的关系、栽培措施与病毒病的关系资料仅供参考,不当之处,请联系改正。u生态系统中,各种因素相互制约,维系着生态系统中,各种因素相互制约,维系着平衡状态,不要
15、随意打破。平衡状态,不要随意打破。澳大利亚包心莴苣坏死黄化病毒,其毒澳大利亚包心莴苣坏死黄化病毒,其毒源植物是野生的苦苣菜源植物是野生的苦苣菜(sonchus)野兔多,引进粘液瘤病毒控制野兔野兔多,引进粘液瘤病毒控制野兔苦苣菜过多苦苣菜过多包心莴苣坏死黄化病毒包心莴苣坏死黄化病毒毒源多毒源多莴苣病毒病大发生莴苣病毒病大发生资料仅供参考,不当之处,请联系改正。:N、P、K含量与比例、土壤温含量与比例、土壤温度、湿度、土壤类型度、湿度、土壤类型:降雨、气温、风等影响气传和:降雨、气温、风等影响气传和土传病毒介体的繁殖、传播速度等土传病毒介体的繁殖、传播速度等 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。三
16、、植物病毒的传播三、植物病毒的传播 transmission(between plants)资料仅供参考,不当之处,请联系改正。三、植物病毒的传播三、植物病毒的传播资料仅供参考,不当之处,请联系改正。非介体传播:非介体传播:植物病毒从寄主体上,由于伤植物病毒从寄主体上,由于伤残或分泌而达到体外,与另一寄主体通过微残或分泌而达到体外,与另一寄主体通过微伤口接触而传染,或通过寄主细胞间的有机伤口接触而传染,或通过寄主细胞间的有机结合而传染。结合而传染。介体传播:介体传播:病毒依附在其它生物体上,借其病毒依附在其它生物体上,借其它生物体的活动而进行传播、感染。它生物体的活动而进行传播、感染。资料仅供
17、参考,不当之处,请联系改正。1、机械或汁液擦伤传染、机械或汁液擦伤传染2、种子传染、种子传染 (1/10)3、无性繁殖材料、无性繁殖材料4、土壤传播、土壤传播5、菟丝子、菟丝子(Cuscuta)传染传染6、嫁接传染、嫁接传染资料仅供参考,不当之处,请联系改正。2、种子传染、种子传染 (1/10)病毒在种子中病毒在种子中 的分布:的分布:(1)病毒不能进入胚,在胚外,种子污染;)病毒不能进入胚,在胚外,种子污染;(2)病毒可进入胚,但进入后是否被寄主)病毒可进入胚,但进入后是否被寄主 消消 灭决定是否种传灭决定是否种传 病毒能否进入胚受病毒基因控制病毒能否进入胚受病毒基因控制病毒种传机理:病毒种
18、传机理:(1)由带毒母体直接侵入种胚)由带毒母体直接侵入种胚(2)间接从生长点、茎尖侵入胚)间接从生长点、茎尖侵入胚(3)通过异花授粉使带毒花粉从外部经柱头)通过异花授粉使带毒花粉从外部经柱头 侵入健株的胚侵入健株的胚在胚外在胚外outside the embryo,传播率低:传播率低:种子成熟经过脱水、收获、贮藏;有些接触不到幼苗;种子成熟经过脱水、收获、贮藏;有些接触不到幼苗;有些存在于胚乳内。有些存在于胚乳内。在胚内在胚内within the embryo:真正意义上的种传:真正意义上的种传资料仅供参考,不当之处,请联系改正。2、种子传染、种子传染seed-transmission(1)
19、早期提供)早期提供毒源毒源,引起病毒病流行,引起病毒病流行 种子带毒后,直接使幼苗发病,种子带毒后,直接使幼苗发病,为大田侵染提供了初侵染源为大田侵染提供了初侵染源(2)远程传播远程传播 通过种子进出口、种子通过种子进出口、种子 调拨使病区扩大调拨使病区扩大资料仅供参考,不当之处,请联系改正。3、土壤传播、土壤传播soil-transmission(1)病残体带入)病残体带入(2)病株根部渗入土壤)病株根部渗入土壤(1)病害开始往往局限于小块发病中心)病害开始往往局限于小块发病中心(2)传播速度慢)传播速度慢(3)土壤传染性可长期保持)土壤传染性可长期保持(4)干燥丧失传染性)干燥丧失传染性-
20、线虫传,否则真菌传线虫传,否则真菌传资料仅供参考,不当之处,请联系改正。4、菟丝子传染、菟丝子传染Cuscuta可将复合感染的病毒分开可将复合感染的病毒分开5、嫁接传染、嫁接传染顶接、侧接、靠接、套接顶接、侧接、靠接、套接受接穗和砧木亲和力影响受接穗和砧木亲和力影响会将病株中其它病毒也同时传播会将病株中其它病毒也同时传播资料仅供参考,不当之处,请联系改正。1、虫毒为害和真正的病毒病害的区别:、虫毒为害和真正的病毒病害的区别:虫虫 毒毒 病毒病害病毒病害 0 1、昆虫分泌的对植物有毒物质、昆虫分泌的对植物有毒物质 病毒所致病毒所致2、毒素在植物体内不能增殖毒素在植物体内不能增殖 病毒可在植物体内
21、增殖病毒可在植物体内增殖3、中毒植物在一定情况下可恢复、中毒植物在一定情况下可恢复 极少能恢复极少能恢复4、受害程度与昆虫饲食时间虫数受害程度与昆虫饲食时间虫数 不成正比不成正比5、产毒能力有遗传性、产毒能力有遗传性 只有少数能通过卵传只有少数能通过卵传6、无性繁殖材料或嫁接不传无性繁殖材料或嫁接不传 可嫁接、无性繁殖材料传可嫁接、无性繁殖材料传7、防治与控制昆虫效果成正比、防治与控制昆虫效果成正比 常不成比例常不成比例资料仅供参考,不当之处,请联系改正。主要介体有:主要介体有:昆虫、真菌、螨类、线虫类昆虫、真菌、螨类、线虫类昆虫介体有:昆虫介体有:蚜虫、叶蝉、飞虱、甲虫、蓟马、粉蚧、蝽象等蚜
22、虫、叶蝉、飞虱、甲虫、蓟马、粉蚧、蝽象等昆虫的传毒过程分为:昆虫的传毒过程分为:获毒、潜育、传毒获毒、潜育、传毒三个时期三个时期获毒饲育期(获毒饲育期(acquisition feeding period)指无毒昆虫开始取食指无毒昆虫开始取食至已获得传毒能力所需的时间至已获得传毒能力所需的时间接毒饲育期(接毒饲育期(inoculation feeding period)指带毒昆虫在健康指带毒昆虫在健康植株上引起发病的取食时间。植株上引起发病的取食时间。潜育期(潜育期(latent feeding period)指昆虫从获得病毒起到能传指昆虫从获得病毒起到能传播给植物所需的时间。播给植物所需的时
23、间。(二二)介体介体vectors传播传播资料仅供参考,不当之处,请联系改正。按昆虫获毒后能保持传毒的时间可分为按昆虫获毒后能保持传毒的时间可分为:非持久性传播非持久性传播(nonpersistent):口针传播,病口针传播,病毒在体内短期存在,几秒毒在体内短期存在,几秒几分钟即可获毒几分钟即可获毒并立即传毒,也易丧失传毒能力并立即传毒,也易丧失传毒能力持久性传播持久性传播(persistent):昆虫保持相对较长的昆虫保持相对较长的传毒时间,数周传毒时间,数周数月,其病毒可分为:数月,其病毒可分为:循回病毒循回病毒circulative virus 增殖病毒增殖病毒propagative v
24、irus半持久性传播(半持久性传播(semipersistent)资料仅供参考,不当之处,请联系改正。蚜虫传播(蚜虫传播(aphid transmission)在测定过的传病毒的在测定过的传病毒的242种昆虫介体中,已种昆虫介体中,已证明的介体有证明的介体有192种,其中蚜虫占种,其中蚜虫占173种。种。自然条件下多。可传自然条件下多。可传CMV的有的有75种,桃蚜种,桃蚜能传能传100多种病毒多种病毒 为害农作物,难防治。蚜虫传有:为害农作物,难防治。蚜虫传有:花叶、斑驳症状花叶、斑驳症状 口针被动的机械污染口针被动的机械污染 主动吸食和回吐病毒主动吸食和回吐病毒 病毒多在韧皮部增殖,不能经
25、汁病毒多在韧皮部增殖,不能经汁液摩擦接种液摩擦接种资料仅供参考,不当之处,请联系改正。aphid transmissionApterous(wingless)lettuce aphid An alate(winged)green peach aphid 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。Whitefly Trialeurodes abutilonea 粉虱粉虱 Presence of bean leaf beetles can indicate virus risk 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。Leafhoppers 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。nematode transm
26、ission长针线虫属长针线虫属 Longidorus剑针线虫属剑针线虫属 Xiphenema毛刺针线虫属毛刺针线虫属 Trichodorus拟毛刺针线虫属拟毛刺针线虫属 Paratrichodorus有十多种病毒可线虫传,有十多种病毒可线虫传,有:有:番茄环斑病毒、雀麦花叶病毒、葡萄扇叶番茄环斑病毒、雀麦花叶病毒、葡萄扇叶病毒、烟草环斑病毒、烟草脆裂病毒等病毒、烟草环斑病毒、烟草脆裂病毒等一般都可经种子传一般都可经种子传线虫与病毒的特殊关系由线虫食道线虫与病毒的特殊关系由线虫食道表皮膜蛋白表皮膜蛋白与与病毒的病毒的外壳蛋白外壳蛋白之间的亲和性决定之间的亲和性决定资料仅供参考,不当之处,请联系
27、改正。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。3、真菌传播、真菌传播fungi transmission低等真菌:壶菌、根肿菌低等真菌:壶菌、根肿菌二种方式:二种方式:(1)病毒粒子附着在游动孢子周身,鞭毛病毒粒子附着在游动孢子周身,鞭毛(2)病毒在休眠孢子中与休眠孢子共存病毒在休眠孢子中与休眠孢子共存 但都无证据表明病毒在菌体内增殖但都无证据表明病毒在菌体内增殖禾谷多粘菌禾谷多粘菌Polymyxa graminis资料仅供参考,不当之处,请联系改正。Light micrograph showing resting spores of Olpidium brassicae资料仅供参考,不当之处,请
28、联系改正。transmissionVirus transportMovement in plant 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。四、植物抗病毒防卫反应的原理四、植物抗病毒防卫反应的原理(一)、防卫过程(一)、防卫过程植物对病原微生物的抗性反应大致分为:植物对病原微生物的抗性反应大致分为:如表皮角质层、气孔大小等如表皮角质层、气孔大小等根据寄主和病毒的相互作用,可将防卫反根据寄主和病毒的相互作用,可将防卫反应分为三个阶段:应分为三个阶段:侵染识别侵染识别 防卫反应基因活化表达防卫反应基因活化表达 枯斑产生枯斑产生资料仅供参考,不当之处,请联系改正。hypersensitive react
29、ion (HR)systematic acquired resistance(SAR)广谱抗病性(可抗病毒、真菌、细菌等)广谱抗病性(可抗病毒、真菌、细菌等)Inducing inoculation 诱发接种诱发接种challenge inoculation 挑战接种挑战接种四、植物抗病毒防卫反应的原理四、植物抗病毒防卫反应的原理资料仅供参考,不当之处,请联系改正。1、免疫、免疫immune非寄主抗病性(非寄主抗病性(non-host resistance)利用利用远缘杂交远缘杂交2、侵染性、侵染性infectible局部坏死反应,同时诱发非专化寄主防局部坏死反应,同时诱发非专化寄主防卫反应、
30、产生卫反应、产生PR蛋白,之后寄主表现局蛋白,之后寄主表现局部或系统获得抗病性部或系统获得抗病性资料仅供参考,不当之处,请联系改正。1、2、植物次生代谢产物:、植物次生代谢产物:酚类、类黄酮、生物碱、抗生素类酚类、类黄酮、生物碱、抗生素类3、植保素、植保素(phytoalexin,PA)广谱性、非特异性,异黄酮类广谱性、非特异性,异黄酮类isoflavonoid4、5、其它寄主蛋白和酶活性变化、其它寄主蛋白和酶活性变化 过氧化物酶、多酚氧化酶、核糖核酸酶过氧化物酶、多酚氧化酶、核糖核酸酶等等资料仅供参考,不当之处,请联系改正。PR蛋白蛋白病程相关蛋白病程相关蛋白(pathogenesis-re
31、lated proteins)1、低分子量(、低分子量(1245KD)2、抗蛋白酶水解、抗蛋白酶水解3、酸溶性、酸溶性4、局部分布、局部分布5、诱导产生、诱导产生大多数属于水解酶类,如大多数属于水解酶类,如chitinase,-1,3-glucanase等等返回资料仅供参考,不当之处,请联系改正。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。两类植物基因在起作用:两类植物基因在起作用:植物抗病基因植物抗病基因决定预先形成的抗病能力或使病决定预先形成的抗病能力或使病毒失活的蛋白质、酶等多种因子毒失活的蛋白质、酶等多种因子植物防卫反应基因植物防卫反应基因植物抗病基因产物与病毒基植物抗病基因产物与病毒基因产物
32、互作,诱导防卫基因表达因产物互作,诱导防卫基因表达植物抗病基因的克隆、抗病基因产物及其作植物抗病基因的克隆、抗病基因产物及其作用方式、植物防卫反应表达的调控等问题是用方式、植物防卫反应表达的调控等问题是当前植物抗病性分子生物学研究的热点当前植物抗病性分子生物学研究的热点资料仅供参考,不当之处,请联系改正。病毒的外壳蛋白病毒的外壳蛋白(CP)被认为是诱导寄主被认为是诱导寄主HR反应的反应的激发激发子子(elicitor)植物病原细菌的毒性基因主要有植物病原细菌的毒性基因主要有hrp和和dsp基因基因 hrp(hypersensitive reaction and pathogenicity ge
33、ne)控制在非寄主植物上诱导过敏性反应和在寄主植物上控制在非寄主植物上诱导过敏性反应和在寄主植物上决定致病的基因,决定致病的基因,hrp基因编码的产物基因编码的产物harpin可诱导非可诱导非寄主植物产生寄主植物产生HR,也是一类激发子。,也是一类激发子。其它的激发子有:寡糖、多肽、水杨酸、茉莉酮酸等其它的激发子有:寡糖、多肽、水杨酸、茉莉酮酸等dsp(disease specific gene)只与致病性有关的基因只与致病性有关的基因资料仅供参考,不当之处,请联系改正。五、植物病毒病的防治五、植物病毒病的防治病害三角:病害三角:1、消灭侵染来源和传染介体、消灭侵染来源和传染介体2、改进植物品
34、种的抗病及耐病性、改进植物品种的抗病及耐病性3、对已得病的作物寻找理化治疗方法、对已得病的作物寻找理化治疗方法PathogenEnvironmentHost原原 理理资料仅供参考,不当之处,请联系改正。(一)、清除传染来源(一)、清除传染来源种子:种子:豆科、葫芦科、菊科等、留健种豆科、葫芦科、菊科等、留健种繁殖材料:繁殖材料:苗木、接穗、砧木、块根等苗木、接穗、砧木、块根等杂草、桥梁寄主杂草、桥梁寄主污染病毒的土壤、病残体污染病毒的土壤、病残体(如如TNV,TMV)(二)、防止病毒传播(二)、防止病毒传播 1 1、治虫:治虫:测报、大田诱杀、物理避虫、隔测报、大田诱杀、物理避虫、隔离栽培、调
35、节播期、杀虫剂等离栽培、调节播期、杀虫剂等五、植物病毒病的防治五、植物病毒病的防治资料仅供参考,不当之处,请联系改正。(二二)、防止病毒传播、防止病毒传播2、预防接触传播:预防接触传播:农事操作、工具等农事操作、工具等3、根靠接根靠接(果树果树)、花粉传播预防、花粉传播预防(三三)、选用脱毒种苗或无病毒种苗、选用脱毒种苗或无病毒种苗1、繁殖材料检验的、繁殖材料检验的索引法索引法(indexing)2、病毒在植株体内的分布和组织培养、病毒在植株体内的分布和组织培养(四四)、化学防治、化学防治(五五)、交叉保护:、交叉保护:弱毒株、弱毒株、卫星卫星RNA等等(六六)、热处理、热处理(七七)、抗病品
36、种、抗病品种五、植物病毒病的防治五、植物病毒病的防治资料仅供参考,不当之处,请联系改正。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。1、一旦相应病毒侵入,其卫星、一旦相应病毒侵入,其卫星RNA就被激活、放大,植物细就被激活、放大,植物细胞中只要有低浓度的胞中只要有低浓度的RNA转录就行;转录就行;2、卫星、卫星RNA给植物的抗性不会因为病毒接种量而克服;给植物的抗性不会因为病毒接种量而克服;3、抗性的获得不产生新的异源蛋白,提高了转基因植物的生、抗性的获得不产生新的异源蛋白,提高了转基因植物的生物安全性。物安全性。1、只有少数病毒具有卫星、只有少数病毒具有卫星RNA,大大限制了其应用范围;,大大限制了
37、其应用范围;2、卫星、卫星RNA有可能被自然的病毒载体包装并释放到环境中;有可能被自然的病毒载体包装并释放到环境中;3、有些卫星、有些卫星RNA可能突变增强病毒致病力或者和植物可能突变增强病毒致病力或者和植物RNA重组,产生难以预料的病症,限制该技术路线的运用。重组,产生难以预料的病症,限制该技术路线的运用。返回资料仅供参考,不当之处,请联系改正。确定选育对象确定选育对象 品种抗性测定(与病毒株系分化结合)品种抗性测定(与病毒株系分化结合)根据本地品种和分离物的研究收集外地根据本地品种和分离物的研究收集外地品种和病毒的分离物,比较反应差异品种和病毒的分离物,比较反应差异 引进该病毒国外所用的鉴
38、别品种引进该病毒国外所用的鉴别品种资料仅供参考,不当之处,请联系改正。(四)、化学防治(四)、化学防治 金属盐类金属盐类:ZnSO4 CaCl2 有机酸类有机酸类:类黄酮、水杨酸、清洁剂(类黄酮、水杨酸、清洁剂(Tw80、Triton-100)嘌呤嘧啶类:嘌呤嘧啶类:三嗪类、三嗪类、8-偶氮鸟嘌呤偶氮鸟嘌呤 维生素类:维生素类:VB2 ;植物激素类:赤霉素、激动素;植物激素类:赤霉素、激动素 蛋白质类蛋白质类 氨基酸类氨基酸类:牛奶、原亮氨基酸牛奶、原亮氨基酸 多糖类多糖类 蛋白质类蛋白质类 糖蛋白类糖蛋白类 蛋白多糖类蛋白多糖类 返回返回抑制病毒侵染、病毒蛋白的合成抑制病毒侵染、病毒蛋白的合
39、成 分子量在分子量在1000055000Da从微生物代谢产物中提取抗病毒抑制剂从微生物代谢产物中提取抗病毒抑制剂资料仅供参考,不当之处,请联系改正。六六 植物抗病毒基因工程植物抗病毒基因工程 复制酶介导的保护作用(Replicase Mediated Protection,RPMP)外壳蛋白介导的保护作用(Coat Protein Mediated Protection,CPMP)移动蛋白介导的保护作用(Movement Protein Mediated Protection,MPMP)病毒基因相关的其它序列介导的抗性 非病毒来源的基因介导的抗性 P315-319资料仅供参考,不当之处,请联系
40、改正。(一一)、复制酶介导的保护作用、复制酶介导的保护作用(Replicase Mediated Protection,RPMP)复制酶复制酶(RP)是指由病毒编码的,能特异合成病毒是指由病毒编码的,能特异合成病毒+RNA、-RNA的的RNA聚合酶聚合酶,其核心功能是合成全,其核心功能是合成全长的病毒基因组长的病毒基因组RNA。1988年年Van an等开始尝试等开始尝试将病毒的将病毒的RP基因转入基因转入植物植物,目前,目前RPMP已在至少已在至少13种病毒种病毒(分属分属10个植个植物病毒属物病毒属)中进行研究。中进行研究。1)若产生抗性,能使转基因植物若产生抗性,能使转基因植物产生免疫或
41、高抗。产生免疫或高抗。2)一般一般RPMP呈现持续抗性。呈现持续抗性。六六 植物抗病毒基因工程植物抗病毒基因工程 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。3)RPMP一般对提供一般对提供RP基因的亲本基因的亲本病毒株系有抗性,而对那些与亲本株系显示一定序病毒株系有抗性,而对那些与亲本株系显示一定序列差别的同种不同株病毒不表现抗性。列差别的同种不同株病毒不表现抗性。4)组成型表达的组成型表达的RP基因介导的抗性绝基因介导的抗性绝大多数是预先建立的,一旦接种病毒就会表现。但大多数是预先建立的,一旦接种病毒就会表现。但也有些表现为可诱导的抗性。也有些表现为可诱导的抗性。5)表现表现RPMP的转基因植株的
42、原生质体的转基因植株的原生质体均表现抗性,这种单细胞水平的抗性说明均表现抗性,这种单细胞水平的抗性说明RPMP抑抑制了病毒在宿主细胞中的制了病毒在宿主细胞中的复制复制。有些限制病毒在细。有些限制病毒在细胞间的胞间的移动移动或通过维管束系统或通过维管束系统长距离迁移长距离迁移。六六 植物抗病毒基因工程植物抗病毒基因工程 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。RPMP的抗性机理:的抗性机理:(推测的机理推测的机理)依赖于基因沉默依赖于基因沉默(gene silencing)的抗性机制的抗性机制 位置效应、转录水平的基因沉默和转录后水平的基因沉默位置效应、转录水平的基因沉默和转录后水平的基因沉默 蛋白
43、质介导的抗性蛋白质介导的抗性:转基因表达的转基因表达的RP干扰了病毒复制和移动干扰了病毒复制和移动 形成形成RNA-RNA抑制双体抑制双体:转基因转录产物和接种的病毒转基因转录产物和接种的病毒RNA间形成间形成RNA-RNA复合体,影响了病毒复合体,影响了病毒RNA与各种蛋白与各种蛋白间的互作,从而干扰病毒侵染。间的互作,从而干扰病毒侵染。转基因产物复制酶作为激发子引发宿主的防御系统反应转基因产物复制酶作为激发子引发宿主的防御系统反应 情况可能更复杂,涉及多种抗性机理同时起作用情况可能更复杂,涉及多种抗性机理同时起作用六六 植物抗病毒基因工程植物抗病毒基因工程 资料仅供参考,不当之处,请联系改
44、正。(二二)、外壳蛋白介导的保护作用外壳蛋白介导的保护作用(Coat Protein Mediated Protection,CPMP)研究最早、应用最多的植物抗病毒基因工程策略研究最早、应用最多的植物抗病毒基因工程策略自自1986年成功获得年成功获得TMV CP介导的抗介导的抗TMV的烟草,到目前为的烟草,到目前为止,已针对止,已针对10多个属多个属 30余种病毒进行了余种病毒进行了CPMP试验,转基因试验,转基因受体植物多达十几种,其中大多数转入受体植物多达十几种,其中大多数转入CP基因的植株对同源基因的植株对同源性较高的同属大多数病毒有一定程度的抗病性,表现为性较高的同属大多数病毒有一定
45、程度的抗病性,表现为,或症状限于接种叶片,或症状限于接种叶片到新生叶片,到新生叶片,病毒含量低或测不到。病毒含量低或测不到。CPMP一般只是推迟发病一般只是推迟发病,抗性主要表现,抗性主要表现在病毒侵染早期,一旦提高病毒接种量或重复接种在病毒侵染早期,一旦提高病毒接种量或重复接种则抗性破坏。则抗性破坏。目前倾向于把目前倾向于把CPMP与其它抗性基因策略相结合。与其它抗性基因策略相结合。六六 植物抗病毒基因工程植物抗病毒基因工程 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。(二二)、外壳蛋白介导的保护作用外壳蛋白介导的保护作用(Coat Protein Mediated Protection,CPMP)
46、以前认为是以前认为是CP干扰了病毒粒子侵染早期的脱衣壳过程,干扰了病毒粒子侵染早期的脱衣壳过程,使其无法暴露出内部核酸,进而抑制在宿主体内的复制和使其无法暴露出内部核酸,进而抑制在宿主体内的复制和增殖,故增殖,故CPMP对接种病毒对接种病毒RNA无效。无效。但越来越多的实验结果使情况变得复杂,发现但越来越多的实验结果使情况变得复杂,发现CP可以影可以影响病毒通过响病毒通过胞间连丝胞间连丝的移动,可能参与抑制病毒的长距离的移动,可能参与抑制病毒的长距离迁移,迁移,抑制病毒复制抑制病毒复制或作为激发子识别宿主抗性基因,引或作为激发子识别宿主抗性基因,引发发HR(Hypersensitive Res
47、ponse)。六六 植物抗病毒基因工程植物抗病毒基因工程 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。(三)、移动蛋白介导的保护作用(Movement Protein Mediated Protection,MPMP)MP由病毒基因编码,负责参与病毒在寄主细胞之由病毒基因编码,负责参与病毒在寄主细胞之间传递和通过植物维管组织长距离迁移,从而导致间传递和通过植物维管组织长距离迁移,从而导致寄主整体发病。寄主整体发病。只有当转基因植物只有当转基因植物表达的是失去功能的表达的是失去功能的MP时,才时,才能显示出抗性。而当转基因表达有功能的能显示出抗性。而当转基因表达有功能的MP时,时,或者对病毒侵染无影响,
48、或者反而提高植物感病性。或者对病毒侵染无影响,或者反而提高植物感病性。用有运动缺陷的同源或异源病毒接种这种转基因植用有运动缺陷的同源或异源病毒接种这种转基因植物,病毒能恢复正常的胞间转运甚至能在植物内长物,病毒能恢复正常的胞间转运甚至能在植物内长距离迁移,从而导致距离迁移,从而导致。它突出的优点在于它突出的优点在于。六六 植物抗病毒基因工程植物抗病毒基因工程 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。(三)、移动蛋白介导的保护作用(Movement Protein Mediated Protection,MPMP)MPMP机理属于属于蛋白质水平蛋白质水平介导的抗性介导的抗性转基因表达的失去功能的转基
49、因表达的失去功能的MP与接种病毒的野生型与接种病毒的野生型MP竞竞争胞间连丝上的结合位点争胞间连丝上的结合位点许多不同病毒的许多不同病毒的MP可能与相同的胞间连丝成分起作用可能与相同的胞间连丝成分起作用(广谱抗性的例子暗示广谱抗性的例子暗示)也可能涉及病毒编码的蛋白、病毒基因组和寄主因子间也可能涉及病毒编码的蛋白、病毒基因组和寄主因子间的的相互作用相互作用 六六 植物抗病毒基因工程植物抗病毒基因工程 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。六六 植物抗病毒基因工程植物抗病毒基因工程(四四)、病毒基因相关的其它序列介导的抗性病毒基因相关的其它序列介导的抗性 核酶核酶(Ribozyme,Rz)和反义基
50、因和反义基因核酶是一种能特异切割核酶是一种能特异切割RNA的的RNA,依据已知的病毒基因组的,依据已知的病毒基因组的特定区域序列设计特定区域序列设计Rz,使它能特异地识别、切割病毒的特定区使它能特异地识别、切割病毒的特定区域,从而切断病毒基因组,破坏其生物功能。域,从而切断病毒基因组,破坏其生物功能。蛋白酶基因蛋白酶基因马铃薯马铃薯Y病毒属的病毒编码的病毒属的病毒编码的NIa(Nuclear Inclusiona)具蛋白酶具蛋白酶性质,表达烟草脉斑驳病毒性质,表达烟草脉斑驳病毒(TVMV)NIa的烟草能抗的烟草能抗TVMV;表达表达PVY NIa的烟草能抗的烟草能抗PVY。卫星卫星RNA和缺损