1、禽流感和禽流感和SARSSARS免疫免疫应答和致病机理应答和致病机理提纲n呼吸道病毒疾病n禽流感nSARSnHIU的研究成果2禽流感和SARS免疫应答和致病机理呼吸道病毒疾病 n普通的，比如感冒，在成人和儿童中均可出现n在全部急性呼吸系统感染中的比例超过90%n大多数都比较轻微，呈自限性并且只局限在上呼吸道（URT）。但是在婴儿和儿童中，上呼吸道感染可能会传染到下呼吸道（LRT)，并且造成更为严重的感染，甚至死亡。n病毒能够通过相对密切的接触，以鼻和嘴呼吸道小滴的形式传播。在流行期（通常是季节性的），病毒具有较强的传染性，别并且能够在整个社会中传播3禽流感和SARS免疫应答和致病机理呼吸道病毒
2、疾病n流感n冠状病毒（SARS)n腺病毒n副流感病毒n呼吸道合孢病毒n鼻病毒n其他（柯萨奇病毒，型疱疹，EBV,CMV）4禽流感和SARS免疫应答和致病机理流感病毒有8个RNA节段A、B、C三型：NP、M1蛋白亚型：HA或NA蛋白5禽流感和SARS免疫应答和致病机理A型流感病毒亚型根据表面糖蛋白（HA、NA）对流感病毒进行分型6禽流感和SARS免疫应答和致病机理流感病毒在自然界的循环7禽流感和SARS免疫应答和致病机理流感病毒的抗原性变异n抗原漂移 病毒长时间微小改变的积累会导致不能被人体免疫系统识别的新毒株出现。这就是为什么我们每年都要开展新的研究以紧跟流感病毒循环毒株的改变。n抗原转换 A
3、性流感病毒突然出现大的改变导致能感染人类的新HA蛋白和（或）新的HA和NA蛋白出现，即一种新亚型的出现。当抗原转换发生的时候，大多数人对新毒株都只有较少的或者完全没有免疫力。抗原转换发生几率较小。8禽流感和SARS免疫应答和致病机理A型流感病毒在人类中的传播9禽流感和SARS免疫应答和致病机理H5N1n是A性流感病毒的一种亚型，能导致乃哦雷出现呼吸道疾病和全身疾病n高致病性H5N1也能够感染人类和哺乳动物n人类感染H5N1的死亡率很高（60%）n与被感染的禽类接触是一个重要的危险因素n传播途径（吸入、口腔、环境）目前还不是很清楚n潜在大流行10禽流感和SARS免疫应答和致病机理H5N1临床特点
4、n潜伏期：从起病开始14天n传染期：从起病开始13天n症状：发烧、下呼吸道疾病、淋巴细胞减少、肺炎以及进展为急性呼吸窘迫综合症（ARDS)n其他并发症包括腹泻、肾病和心脏衰竭11禽流感和SARS免疫应答和致病机理H5N1感染中的病毒载量12禽流感和SARS免疫应答和致病机理H5N1流行病学n季节性趋势（冬季到春季）n发生：散发nH5N1侵袭年轻的人群n年龄的中位数：20岁（3个月到70岁）n男性：女性（0.9）13禽流感和SARS免疫应答和致病机理H5N1流行病学n死亡率：56%n高危组：年轻人群n从骑兵到死亡的时间：平均为9天n危险因素：暴露于禽类 WHO WER 200614禽流感和SAR
5、S免疫应答和致病机理H5N1的实验室诊断n病毒分离（MDCK细胞，鸡胚）n抗原检测：血凝反应（HA）n抗体检测：血凝抑制实验（HI)、ELISA、免疫荧光法、微量中和实验n核酸检测：RT-PCR real-time PCRn核苷酸测序15禽流感和SARS免疫应答和致病机理诊断标准（WHO指导意见）n符合一是病理和可能病例标准以及在一个H5N1实验结果能够被WHO承认的国家、地区或全球流感实验室得到下列阳性结果之一A.分离到H5N1病毒；B.使用两种不同的PCR引物（例如甲型流感病毒通用引物和H5特意的引物）检测，均得到H5的阳性结果；C.病例恢复期血清较急性期血清（发病后7天或7天内）H5N1
6、中和抗体滴度呈4倍或以上增高，同事恢复期中和抗体滴度必须为1:80或以上；D.在发病后14天或以后采集的单份血清，MN实验检测H5N1中和抗体滴度为1:80或以上，同事使用不同的血清学检测方法也出现阳性结果，例如马血球HI实验抗体滴度为1:160或以上，或者H5特异性蛋白印迹实验阳性。16禽流感和SARS免疫应答和致病机理免疫特性和发病机理n病毒复制增高，时间延长n细胞激素风暴（1997：IL6、TNF-、IFN-、soluble IL-2R；2004-6：IP-10、MIG、MCP-1、IL-6、IL-8)n抗体应答：在幸存者起病10 14天后检测到中和抗体nT细胞：还不清楚17禽流感和SA
7、RS免疫应答和致病机理18禽流感和SARS免疫应答和致病机理H5N1病毒HA蛋白的结构19禽流感和SARS免疫应答和致病机理流感大流行n出现新HA或者NAn人群中缺乏基础免疫n有效的人传人传播机制20禽流感和SARS免疫应答和致病机理预防和控制n控制禽类中的H5N1传染源n健康教育、个人卫生习惯n隔离和检疫n大流行准备（WHO指导意见）nH5N1疫苗n治疗措施：奥司他韦（达菲）（起病后48小时以内）21禽流感和SARS免疫应答和致病机理H5N1疫苗试验n灭活疫苗（rgA/VN/1203/2004xA/PR8/34)2剂次90 g能被接受并且可以在50%的接种者（n=450，Age：18-64）
8、中导致Nab（1:40)(Treaner et al.、NEJM、2006）.n加氢氧化铝佐剂的灭活疫苗（rgA/VN/1194/2004xA/PR8/34)2剂次10g能被接受并且可以在78%的接种者（n=120、Age：18-60）中导致Nab（1:40）(Lin et al.、Lancet、2006）.n加氢氧化铝佐剂的灭活疫苗（rgA/VN/1194/2004xA/PR8/34)2剂次30g能被接受并且可以在68%的接种者（n=300、Age：18-40）出现HI血清转化现象(Bressan et al.、Lancet、2006）.如果剂量较小，佐剂不会改善免疫应答。氢氧化铝是长期使用
9、的一种佐剂，通过强化刺激Th2型免疫反应从而加强免疫应答。(Concern over macorphagic myofasciitis.Lancet、2006)23禽流感和SARS免疫应答和致病机理SARSn严重急性呼吸道综合征n新发现的一种由冠状病毒（SARS-CoV)导致的传染性疾病n症状：类似于流感、38的发热、呼吸急促、肺炎、非增殖性感染、咳嗽、腹泻、进展为ARDS.n在2002/2003出现爆发，波及29个国家，病例数8000，死亡率为10%n潜伏期：210天n传染期：起病后7天n通过人和人的密切接触和呼吸道小滴传播。传播效率与情况严重和病情快速恶化的病人相关24禽流感和SARS免疫
10、应答和致病机理微生物形态25禽流感和SARS免疫应答和致病机理SARS感染的结局暴露于SARS病毒发烧、肺实变反复发烧出现腹泻血氧饱和度下降肺部阴影增加对治疗措施的反应ARDS第1阶段(第1周）第2阶段（第2周）第3阶段(第3周）没有证据显示存在无症状的感染26禽流感和SARS免疫应答和致病机理快速诊断n重要性：潜伏期（平均为56天）不具有传染性。再被感染的早期（潜伏期）进行诊断能够有效的防止继发传染n方法：n病毒检测：PT-PCR和Real-time PCRn病毒分离(Vero E6或者FRhk-4细胞）n抗体检测：在第10天出现血清转化现象。间接的免疫荧光法和病毒中和实验。27禽流感和SA
11、RS免疫应答和致病机理SARA诊断起病后天数起病后天数目标目标方法方法标本标本早期5天到10天抗原、IgM、IgG、Nab、病毒核酸PCR、ELISA、IFA、NT血清、鼻咽分泌物、粪便28禽流感和SARS免疫应答和致病机理中国SARS病历的分布29禽流感和SARS免疫应答和致病机理SARS的流行病学n全球流行（2002年11月2003年6月）n26个国家向WHO报告了8096例可能病例n53%为女性，21%为医务人员n被感染的年龄组（0 100岁，年龄的中位数为42岁）n病死率为9.6%（根据年龄组和地区的不同，变化范围为0 50%）nSARS相关死亡率提示器危险因素可能包括：年龄60岁、乳
12、酸脱氢酶活力增高、患有糖尿病或者心脏病30禽流感和SARS免疫应答和致病机理2003年SARS在中国的爆发广州BJ01、BJ02、BJO3、BJ04北京初始爆发继发爆发GZ50、ZSA、ZSB、ZSCG21、HKU-43849FebMarAprilMay200331禽流感和SARS免疫应答和致病机理病理学弥漫性肺泡损伤（DAD）：肺泡出血炎性细胞渗透、水肿、透明膜形成32禽流感和SARS免疫应答和致病机理SARS感染后的免疫应答先天免疫n病人中出现趋化激素（IL-B、MVP-1和IP-10）和炎性细胞因子（IL-1、IL-6和IL-12）增高n感染后最初10天病毒载量逐渐降低提示先天免疫的逃避
13、。这一点也被1型干扰素的低水平所证实（Cheung et al.JV 05）适应性免疫n在SARS急性感染中，随着CD4和CD8 T细胞的急剧减少出现的淋巴细胞减少是很常见的，并且与“不良结局”相关。对于恢复期的患者，能观察到T细胞的快速修复（Wong et al.BMJ 03;Li et al.JID 04)n用spike蛋白和核壳体蛋白作为抗原中和抗体33禽流感和SARS免疫应答和致病机理n免疫病理学：我们的经验34禽流感和SARS免疫应答和致病机理SARS疫苗研究进展抗原基因实验动物中和抗体CTL减少保护作用文献灭活SARS-CoV小鼠/兔子YESTang et al(04).He et
14、 al(04)DNA小鼠YESYESYESHe et al(04)DNA小鼠YESYESYESWang et al(04)重组细胞（MVA）小鼠YESYESYESBisht et al(04)重组细胞（MVA）小鼠/兔子YESYESChen et al(04)副流感病毒仓鼠YESYESBchoholz et al(04)副流感病毒猴子YESYESBchoholz et al(04)腺病毒大鼠YESLiu et al(05)腺病毒小鼠YESYESYESZakhartchouk et al(05)35禽流感和SARS免疫应答和致病机理SARS疫苗的安全性1.接种表达spike蛋白全长的重组细胞（MVA）的受感染雪貂，其肝脏损伤加重（Weingartl et al.J.Virol.04);2.对一种毒株有效的中和抗体对别的毒株无效。此外，默写毒株（来自于果子狸）的感染还会被抗体增强（Yang et al.PNAS 05).36禽流感和SARS免疫应答和致病机理预防和控制n缺乏有效的处理方式或者SARS疫苗n预防措施 1.传染源（围堵控制呗感染的野生动物、实验室的生物安全）2.传播方式（监测、个人卫生、社区控制）3.高危人群（在医院采取严格的感染控制措施）n控制：密切追踪和检疫37禽流感和SARS免疫应答和致病机理
