1、发酵工程青霉素的制备医学知识青霉素简介青霉素简介2发酵工程青霉素的制备医学知识青霉素的发现青霉素的发现 19291929年英国学者年英国学者弗莱明首先在抗弗莱明首先在抗生素中发现了青生素中发现了青霉素，英国谢菲霉素，英国谢菲尔德大学病理学尔德大学病理学家弗洛里实现对家弗洛里实现对青霉素的分离与青霉素的分离与纯化。纯化。3发酵工程青霉素的制备医学知识青霉素的化学结构青霉素的化学结构 青霉素是含有青霉素母核的多种化青霉素是含有青霉素母核的多种化合物的总称，青霉素发酵液中至少含有合物的总称，青霉素发酵液中至少含有5 5种以上的不同的青霉素：青霉素种以上的不同的青霉素：青霉素F F、青、青霉素霉素X
2、X、青霉素、青霉素K K及二氢青霉素及二氢青霉素F F等。等。青霉素分子结构球棍模型青霉素分子结构球棍模型4发酵工程青霉素的制备医学知识噻唑环噻唑环-内酰胺环内酰胺环6-氨基青霉烷酸氨基青霉烷酸5发酵工程青霉素的制备医学知识青霉素的理化性质青霉素的理化性质青霉素本身为一元酸，可与钾、钠、镁、钙、铝和青霉素本身为一元酸，可与钾、钠、镁、钙、铝和铵等化合成盐类。铵等化合成盐类。易溶于水，游离酸易溶于醇、酮、醚、酯等一般有易溶于水，游离酸易溶于醇、酮、醚、酯等一般有机溶剂。机溶剂。游离酸或盐类的水溶液均不稳定，极易失去抗菌效游离酸或盐类的水溶液均不稳定，极易失去抗菌效力。力。不耐热，一般保存于冰箱中
3、，但青霉素盐的结晶纯不耐热，一般保存于冰箱中，但青霉素盐的结晶纯品，在干燥条件下可于室温保存数年。品，在干燥条件下可于室温保存数年。青霉素的抗菌效力与其分子中的青霉素的抗菌效力与其分子中的-内酰胺环有关内酰胺环有关。6发酵工程青霉素的制备医学知识抗菌作用和临床应用抗菌作用和临床应用青霉素主要抑制革兰氏阳性细菌，但对某青霉素主要抑制革兰氏阳性细菌，但对某些革兰氏阴性细菌，螺旋体及放线菌也有些革兰氏阴性细菌，螺旋体及放线菌也有强大的抗菌作用，青霉素的抗菌作用与抑强大的抗菌作用，青霉素的抗菌作用与抑制细胞壁的合成有关。制细胞壁的合成有关。青霉素临床上用于治疗葡萄球菌传染症如青霉素临床上用于治疗葡萄球
4、菌传染症如脑膜炎、化脓炎、骨髓炎等，溶血性链球脑膜炎、化脓炎、骨髓炎等，溶血性链球菌传染症如腹膜炎、产褥热，以及肺炎、菌传染症如腹膜炎、产褥热，以及肺炎、淋病、梅毒和炭疽等。淋病、梅毒和炭疽等。7发酵工程青霉素的制备医学知识青霉素的生物合成青霉素的生物合成9发酵工程青霉素的制备医学知识青霉素合成的调控青霉素合成的调控10发酵工程青霉素的制备医学知识青霉素的生物合成与赖氨酸的反馈调节青霉素的生物合成与赖氨酸的反馈调节 用产黄霉菌生产青霉素要受到赖氨酸的阻用产黄霉菌生产青霉素要受到赖氨酸的阻遏，这是由于其赖氨酸生物合成途径的初始酶遏，这是由于其赖氨酸生物合成途径的初始酶高柠檬酸合成酶受到了赖氨酸反
5、馈阻遏。高柠檬酸合成酶受到了赖氨酸反馈阻遏。在赖氨酸生物合成途径中，从氨基己二酸在赖氨酸生物合成途径中，从氨基己二酸分支而产生青霉素，这种赖氨酸阻遏是初级代分支而产生青霉素，这种赖氨酸阻遏是初级代谢调节的效果用到次级代谢上的最好的例子。谢调节的效果用到次级代谢上的最好的例子。11发酵工程青霉素的制备医学知识青霉素的生物合成与糖分解代谢青霉素的生物合成与糖分解代谢的关系的关系 青霉素的生物合成受糖分解代谢产物青霉素的生物合成受糖分解代谢产物的阻遏，如合成青霉素的酰基转移酶就会的阻遏，如合成青霉素的酰基转移酶就会被阻遏。在青霉素发酵过程中，发现能被被阻遏。在青霉素发酵过程中，发现能被青霉素迅速利用
6、的葡萄糖有利于菌体生长青霉素迅速利用的葡萄糖有利于菌体生长，但抑制青霉素的合成，而被缓慢利用的，但抑制青霉素的合成，而被缓慢利用的乳糖，却是生产青霉素的最好碳源。乳糖，却是生产青霉素的最好碳源。12发酵工程青霉素的制备医学知识 乳糖比葡萄糖优越的主要原因乳糖比葡萄糖优越的主要原因是乳糖是乳糖被水解成单糖的速度正好符合青霉素生产被水解成单糖的速度正好符合青霉素生产期合成青霉素的需要，而又不会产生高浓期合成青霉素的需要，而又不会产生高浓度的分解产物来抑制青霉素的合成，因此度的分解产物来抑制青霉素的合成，因此，碳源多用葡萄糖加乳糖或利用某些非糖，碳源多用葡萄糖加乳糖或利用某些非糖原料如植物油等。但由
7、于乳糖价格较贵，原料如植物油等。但由于乳糖价格较贵，成本较高，故在生产实践中常通过间隙或成本较高，故在生产实践中常通过间隙或滴加葡萄糖的方法控制培养液中糖的含量滴加葡萄糖的方法控制培养液中糖的含量，以符合菌体生长和青霉素生物合成的需，以符合菌体生长和青霉素生物合成的需要。这样，可以降低成本，提高产量。要。这样，可以降低成本，提高产量。13发酵工程青霉素的制备医学知识青霉素发酵生产工艺青霉素发酵生产工艺14发酵工程青霉素的制备医学知识抗生素制备的一般流程图抗生素制备的一般流程图菌种菌种孢子制备孢子制备种子制备种子制备发酵发酵发酵液预处理及种子加滤发酵液预处理及种子加滤提取及精制提取及精制成品检验
8、成品检验成品包装成品包装前体前体发酵阶段发酵阶段提取阶段提取阶段15发酵工程青霉素的制备医学知识菌种菌种 目前国内青霉素生产菌按其在深层培目前国内青霉素生产菌按其在深层培养中菌丝的形态分为丝状菌和球状菌两种养中菌丝的形态分为丝状菌和球状菌两种，根据丝状菌产生孢子的颜色又分为黄孢，根据丝状菌产生孢子的颜色又分为黄孢子丝状菌和绿孢子丝状菌，常用菌种为绿子丝状菌和绿孢子丝状菌，常用菌种为绿孢子丝状菌，如产黄青霉素。孢子丝状菌，如产黄青霉素。16发酵工程青霉素的制备医学知识发酵工艺流程发酵工艺流程17发酵工程青霉素的制备医学知识培养基培养基碳源青霉菌能利用多种碳源如乳糖、蔗糖、葡萄碳源青霉菌能利用多种
9、碳源如乳糖、蔗糖、葡萄糖等。目前采用淀粉水解糖，糖化液进行流加。糖等。目前采用淀粉水解糖，糖化液进行流加。氮源可采用玉米浆、花生饼粉、精制棉籽饼粉或氮源可采用玉米浆、花生饼粉、精制棉籽饼粉或麸皮粉等有机氮源，及氯化氨、硫酸氨、硝酸氨麸皮粉等有机氮源，及氯化氨、硫酸氨、硝酸氨等无机氮源。等无机氮源。前体为生物合成含有苄基基团的青霉素前体为生物合成含有苄基基团的青霉素G，需要，需要在发酵中加入前体如苯乙酸或苯乙酰胺。由于它在发酵中加入前体如苯乙酸或苯乙酰胺。由于它们对青霉素有一定毒性，故一次加入量不能大于们对青霉素有一定毒性，故一次加入量不能大于0.1%，并采用多次加入方式。，并采用多次加入方式。
10、无机盐包括硫、磷、钙、镁、钾等盐类。铁离子无机盐包括硫、磷、钙、镁、钾等盐类。铁离子对青霉素有毒害作用，应严格控制发酵液中铁含对青霉素有毒害作用，应严格控制发酵液中铁含量在量在30ug/mL以下。以下。18发酵工程青霉素的制备医学知识发酵培养控制发酵培养控制菌体生长过程控制。菌体生长过程控制。6 6个阶段个阶段加糖控制。残糖降至加糖控制。残糖降至0.6%0.6%，pHpH上升时加糖上升时加糖补氮及加前体。补氮：硫酸铵、氨、尿素，使发补氮及加前体。补氮：硫酸铵、氨、尿素，使发酵液氨氮量控制在酵液氨氮量控制在0.01%0.05%0.01%0.05%。前体：发酵液中。前体：发酵液中残存乙酰胺浓度为残
11、存乙酰胺浓度为0.05%0.08%0.05%0.08%。pHpH控制。控制。6.66.46.66.4温度。前期温度。前期2525 2626，后期，后期2323。溶解氧。不低于饱和溶解氧的溶解氧。不低于饱和溶解氧的30%30%。泡沫的控制。泡沫的控制。19发酵工程青霉素的制备医学知识青霉素产生菌的生长过程青霉素产生菌的生长过程分生孢子发芽期分生孢子发芽期菌丝繁殖期菌丝繁殖期脂肪粒形成期脂肪粒形成期脂肪粒减少，小空孢脂肪粒减少，小空孢大空孢大空孢自溶自溶菌丝生长期菌丝生长期青霉素分泌期青霉素分泌期菌丝自溶期菌丝自溶期20发酵工程青霉素的制备医学知识下游操作下游操作过滤过滤萃取萃取脱色脱色精制精制溶媒回收溶媒回收21发酵工程青霉素的制备医学知识谢谢！谢谢！22发酵工程青霉素的制备医学知识
