1、坐骨神经腓肠肌标本的科学制备步骤步骤 1毁脑脊髓毁脑脊髓 取牛蛙一只，用左手握住，以示指压其头部前端使其尽量前俯，右手持探针自枕骨大孔处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使逐渐刺入整个椎管内，捣毁脊髓。此时牛蛙下颌呼吸运动应消失，四肢松软，即成为一毁脑脊髓的牛蛙）。否则须按上法再行捣毁。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备2坐骨神经腓肠肌标本的科学制备3 2剪除躯干上部及内脏剪除躯干上部及内脏 用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱。左手握住蟾蜍脊柱，右手将粗剪刀沿两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂。剪除全部躯
2、干上部及内脏组织，弃于垃圾袋中。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备4坐骨神经腓肠肌标本的科学制备5坐骨神经腓肠肌标本的科学制备6坐骨神经腓肠肌标本的科学制备7 3剥皮剥皮 避开神经，用左手持圆头镊子夹住脊柱，右手捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。拉至大腿时，如阻力较大，可先剥下一侧，再剥另一侧。将全部皮肤剥除后，将标本置于盛有任氏液的培养皿中。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备8坐骨神经腓肠肌标本的科学制备9 4、分离两腿、分离两腿：避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左右两半，再从耻骨联合中央剪开（为保证两侧坐骨神经完整，应避免剪时偏向一侧）。将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿
3、中。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备10坐骨神经腓肠肌标本的科学制备11坐骨神经腓肠肌标本的科学制备12 5、游离坐骨神经：、游离坐骨神经：取腿一条，先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后用大头针将标本背位固定于干净蛙板上。再用玻璃分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分，直至分离至腘窝胫神经分叉处。然后剪断股二头肌腱、半腱肌和半膜肌肌腱，并绕至前方剪断股四头肌腱。自上向下剪断所有坐骨神经分支。将连着34节椎骨的坐骨神经分离出来。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备13坐骨神经腓肠肌标本的科学制备14 6、完成坐骨神经腓肠肌标本：、完成坐骨神经腓肠肌标本：将已游离的坐骨
4、神经搭在腓肠肌上。用粗剪刀自膝关节周围向上剪除并刮净所有大腿肌肉，在距膝关节约1cm处剪断股骨。弃去上段股骨，保留部分即为坐骨神经腓肠肌标本 坐骨神经腓肠肌标本的科学制备15坐骨神经腓肠肌标本的科学制备16坐骨神经腓肠肌标本的科学制备17【实验目的实验目的】1观察不同刺激强度对肌肉收缩的影响；理解阈刺激、阈上刺激和最大刺激的概念；理解收缩张力对刺激强度曲线形成的机理。2观察不同刺激频率对肌肉收缩的影响，理解强直收缩的机理。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备19【实验原理实验原理1】一条坐骨神经干是由许多兴奋性不同的神经纤维所组成的。保持足够的刺激时间不变，刚能引起其中兴奋性较高的神经纤维产生兴奋，表
5、现为受这些神经纤维支配的肌纤维发生收缩，此时的刺激强度即为这些神经纤维阈强度，具有此强度的刺激叫阈刺激。随着刺激强度的不断增加，有较多的神经纤维兴奋，肌肉的收缩反应也相应逐步增大，强度超过阈值的刺激叫阈上刺激。当阈上刺激强度增大到某一值时，神经中所有纤维均产生兴奋，此时肌肉做最大的收缩。再继续增强刺激强度，肌肉收缩反应不再继续增大。将引起肌肉最大收缩的最小刺激强度称为最适刺激强度。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备20【实验原理实验原理2】刺激频率较低，每次刺激的时间间隔超过肌肉单次收缩的持续时间，则肌肉的反应表现为一连串的单收缩。若刺激频率逐渐增加，刺激间隔逐渐缩短，肌肉收缩的反应可以融合，肌肉的
6、开始表现为不完全强直收缩，以后成为完全强直收缩。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备21【实验对象实验对象】牛蛙坐骨神经腓肠肌标本的科学制备22【实验器材实验器材】蛙类解剖手术器械、蛙板、任氏液、铁支架、微调固定器、张力换能器、计算机、生物信号采集处理系统。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备23【方法和步骤方法和步骤】1制备在体坐骨神经腓肠肌标本 2实验装置（如图）3仪器设置坐骨神经腓肠肌标本的科学制备24坐骨神经腓肠肌标本的科学制备25（1）不同刺激强度对腓肠肌收缩的影响 逐渐增大刺激强度，找出刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度（阈强度）。继续增强刺激强度，观察肌肉收缩反应是否也相应增大。继续增强刺激强度
7、，直至肌肉收缩曲线不能继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现最大收缩的最小的刺激强度，即最适刺激强度。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备26坐骨神经腓肠肌标本的科学制备27 选用最大刺激强度刺激，使刺激频率按1Hz、2Hz、4Hz、6Hz、8Hz、12Hz、16Hz逐渐增加，分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不同频率刺激时的肌肉收缩（曲线）变化，从而引导出单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩。（2）不同刺激频率对腓肠肌收缩的影响坐骨神经腓肠肌标本的科学制备28坐骨神经腓肠肌标本的科学制备291记录下不同的刺激强度值对肌肉收缩的幅度值，绘制不同刺激强度与腓肠肌收缩张力的关系曲线。2分别记录下引起肌肉单收缩，不完全强直收缩和完全强直收缩时的刺激频率和收缩幅度（张力）。实验结果记录坐骨神经腓肠肌标本的科学制备30注意事项注意事项 1在制备离体神经肌肉标本以及实验操作过程中，要适时滴加任氏液，以防标本干燥而丧失正常生理活性。2操作过程中应避免强力牵拉和手捏神经或夹伤神经肌肉。3每次刺激之后必须让肌肉有一定的休息时间，特别是在观察刺激频率的影响时。4找准最大刺激强度，不能刺激过强而损伤神经。5实验过程中保持换能器与标本连线的张力不变。坐骨神经腓肠肌标本的科学制备31思考题思考题 1为什么在一定范围内增加刺激强度，骨骼肌收缩力增加？2何谓标本的最适刺激强度？坐骨神经腓肠肌标本的科学制备32
