1、 教学目的教学目的掌握掌握 乳糖发酵试验乳糖发酵试验共同特性共同特性1 1、相似的形态染色、相似的形态染色 中等大小，中等大小，G G 杆菌，无芽胞，多数有动力杆菌，无芽胞，多数有动力 有鞭毛、菌毛有鞭毛、菌毛 少数有荚膜少数有荚膜2 2、简单的培养条件、简单的培养条件3 3、活泼的生化反应、活泼的生化反应初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌肠道致病菌肠道致病菌肠道非致病菌肠道非致病菌不发酵不发酵乳糖乳糖 发酵发酵乳糖乳糖肠杆菌科细菌革兰染色肠杆菌科细菌革兰染色4 4、抗原构造复杂、抗原构造复杂鞭毛抗原（H）菌体抗原（O）K或Vi抗原5 5、抵抗力抵抗力不强不强6
2、6、易变异易变异溶源性转换溶源性转换生化反应性变异生化反应性变异通过通过引起引起耐药性变异耐药性变异毒力性变异毒力性变异转导转导接合接合案例案例n4岁男孩在随母亲旅游中，进食小店卖岁男孩在随母亲旅游中，进食小店卖的水果沙拉，回家的水果沙拉，回家2天后，出现严重腹天后，出现严重腹部疼痛，腹泻次数不断增加，且多次便部疼痛，腹泻次数不断增加，且多次便血，伴发热、呕吐，到医院急诊，检查血，伴发热、呕吐，到医院急诊，检查有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿毒综合症。毒综合症。n思考题：思考题：n1.最可能的病原菌是什么？最可能的病原菌是什么？n2.针对该病例应做哪些微生物
3、学检查？针对该病例应做哪些微生物学检查？n形态染色形态染色n0.4-0.7 0.4-0.7 m m 1-31-3m m n短杆菌短杆菌n革兰染色阴性革兰染色阴性n有鞭毛有鞭毛n有菌毛有菌毛n有包膜有包膜n培养特性与生化反应培养特性与生化反应n兼性厌氧兼性厌氧n营养要求不高营养要求不高n生化反应活泼，发酵多种糖类生化反应活泼，发酵多种糖类n绝大多数发酵乳糖绝大多数发酵乳糖n吲哚、甲基红、吲哚、甲基红、VPVP、枸橼酸盐、枸橼酸盐（IMViCIMViC）试验结果为试验结果为+-+-抗原结构抗原结构 血清学分型血清学分型O O抗原抗原：菌体抗原，：菌体抗原，170170多种多种 H H抗原抗原：鞭毛
4、抗原，：鞭毛抗原，5656种以上种以上K K抗原抗原：荚膜抗原，：荚膜抗原，100100种以上种以上 L A BL A BO111O111：K58K58：H2H2n肠产毒素型大肠埃希菌肠产毒素型大肠埃希菌 e enteronterot toxigenicoxigenic E.coliE.coli ETECETECn肠侵袭型大肠埃希菌肠侵袭型大肠埃希菌 e enteronteroi invasivenvasive E.coliE.coli EIECEIECn肠致病型大肠埃希菌肠致病型大肠埃希菌 e enteronterop pathogenic athogenic E.coliE.coli EP
5、ECEPECn肠出血型大肠埃希菌肠出血型大肠埃希菌 e enteronteroh hemorrhagicemorrhagic E.coliE.coli EHECEHECn肠集聚型大肠埃希菌肠集聚型大肠埃希菌 e enteronteroaggaggregativeregative E.coliE.coli EAggECEAggEC菌株菌株作用部位作用部位疾病与症状疾病与症状致病机制致病机制ETECETEC小肠小肠旅行者腹泻；婴幼儿腹泻；水样旅行者腹泻；婴幼儿腹泻；水样便，恶心，呕吐，腹痛，低热便，恶心，呕吐，腹痛，低热质粒介导质粒介导LTLT和和STST肠毒素，大量分泌液肠毒素，大量分泌液体和电
6、解质；黏附素体和电解质；黏附素EIECEIEC大肠大肠水样便，继以少量血便，腹痛，水样便，继以少量血便，腹痛，发热发热质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞胞EPECEPEC小肠小肠婴儿腹泻；水样便，恶心，呕吐，婴儿腹泻；水样便，恶心，呕吐，发热发热质粒介导质粒介导A/EA/E组织病理变化，伴上皮组织病理变化，伴上皮细胞绒毛结构破坏，导致吸收受损和细胞绒毛结构破坏，导致吸收受损和腹泻腹泻EHECEHEC大肠大肠水样便，继以大量出血，剧烈腹水样便，继以大量出血，剧烈腹痛，低热或无，可并发痛，低热或无，可并发HUSHUS、血、血小板减少性紫癜小板减少性紫癜溶原性噬菌体编
7、码溶原性噬菌体编码Stx-IStx-I或或Stx-IIStx-II，中断蛋白质合成中断蛋白质合成;A/E;A/E损伤，伴小肠损伤，伴小肠绒毛结构破坏，导致吸收受损绒毛结构破坏，导致吸收受损EAECEAEC小肠小肠婴儿腹泻；持续性水样便，呕吐，婴儿腹泻；持续性水样便，呕吐，脱水，低热脱水，低热质粒介导集聚性粘附上皮细胞，伴绒质粒介导集聚性粘附上皮细胞，伴绒毛变短，单核细胞浸润和出血，液体毛变短，单核细胞浸润和出血，液体吸收下降吸收下降n肠产毒素型大肠埃希菌肠产毒素型大肠埃希菌（ETECETEC）n致病物质致病物质n肠毒素肠毒素n菌毛粘附素菌毛粘附素n内毒素内毒素nK K抗原抗原n所致疾病所致疾病
8、n5 5岁以下婴幼儿腹泻岁以下婴幼儿腹泻n旅游者腹泻旅游者腹泻n水样便，恶心、呕吐，腹痛，低热水样便，恶心、呕吐，腹痛，低热n肠侵袭型大肠埃希菌肠侵袭型大肠埃希菌（EIECEIEC）n致病物质致病物质n不产生肠毒素不产生肠毒素n侵袭结肠粘膜上皮细胞并在其中生长侵袭结肠粘膜上皮细胞并在其中生长繁殖繁殖n所致疾病所致疾病n主要侵犯较大儿童和成人主要侵犯较大儿童和成人n腹泻呈脓血便，有里急后重腹泻呈脓血便，有里急后重n致病类似菌痢，较少见致病类似菌痢，较少见n肠致病型大肠埃希菌肠致病型大肠埃希菌（EPECEPEC）n致病物质致病物质n不产生肠毒素及其他外毒素不产生肠毒素及其他外毒素n无侵袭力无侵袭力
9、n在十二指肠在十二指肠 空肠回肠空肠回肠 微绒毛萎缩微绒毛萎缩 上皮细胞排列紊乱上皮细胞排列紊乱n所致疾病所致疾病n婴幼儿腹泻婴幼儿腹泻n肠出血型大肠埃希菌肠出血型大肠埃希菌（EHECEHEC）亦称为亦称为verovero毒素大肠埃希菌毒素大肠埃希菌 n致病物质致病物质n菌毛：粘附作用菌毛：粘附作用n毒素：毒素：verovero毒素毒素nO O157157H H7 7n所致疾病所致疾病n污染的牛排污染的牛排 肉肉 牛奶牛奶 果汁果汁 蔬菜蔬菜 水果水果n出血性结肠炎出血性结肠炎n溶血性尿毒综合征溶血性尿毒综合征n肠集聚型大肠埃希菌肠集聚型大肠埃希菌（EAggECEAggEC）n致病物质致病物质
10、n毒素：肠集聚耐热毒素（毒素：肠集聚耐热毒素（EASTEAST）n粘附素粘附素n所致疾病所致疾病n引起婴儿持续性腹泻，脱水，引起婴儿持续性腹泻，脱水，偶有血便偶有血便n肠道外感染肠道外感染n涂片染色检查涂片染色检查 n分离培养分离培养 n鉴定鉴定 IMVIC IMVIC n尿细菌计数尿细菌计数1010万万/ml/ml n肠道内感染肠道内感染 汽水果汁汽水果汁5 5个个n 案例案例n4岁男孩在随母亲旅游中，进食小店卖岁男孩在随母亲旅游中，进食小店卖的水果沙拉，回家的水果沙拉，回家2天后，出现严重腹天后，出现严重腹部疼痛，腹泻次数不断增加，且多次便部疼痛，腹泻次数不断增加，且多次便血，伴发热、呕吐
11、，到医院急诊，检查血，伴发热、呕吐，到医院急诊，检查有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿毒综合症。毒综合症。n思考题：思考题：n1.最可能的病原菌是什么？最可能的病原菌是什么？n2.针对该病例应做哪些微生物学检查？针对该病例应做哪些微生物学检查？提示提示n4岁患儿有进食水果沙拉病史，岁患儿有进食水果沙拉病史，2天后出现天后出现严重腹痛，大便次数不断增加，且多次便严重腹痛，大便次数不断增加，且多次便血，伴发热、呕吐，检查有溶血性贫血及血，伴发热、呕吐，检查有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿毒综合症。以上症血小板减少等溶血性尿毒综合症。以上症状提示最可能的病原菌是大
12、肠埃希菌状提示最可能的病原菌是大肠埃希菌O157:H7。n针对该可疑病例应及时对肠道内大肠埃针对该可疑病例应及时对肠道内大肠埃希菌感染进行常规微生物学检查，并快希菌感染进行常规微生物学检查，并快速进行毒力和血清型等特征鉴定，已确速进行毒力和血清型等特征鉴定，已确定防治措施。定防治措施。复习复习n1.大肠埃希菌最常见的肠道外感染有哪些？大肠埃希菌最常见的肠道外感染有哪些？n2.2.大肠埃希菌最常见的血清型有哪些？大肠埃希菌最常见的血清型有哪些？第二节第二节 志贺菌属志贺菌属案例案例n 患者，男，患者，男，23岁。急性腹痛岁。急性腹痛2天，每天脓天，每天脓血便血便10次左右，有明显里急后重感，肠鸣
13、次左右，有明显里急后重感，肠鸣音亢进，体温音亢进，体温38，血压正常，白细胞增，血压正常，白细胞增高，未见阿米巴原虫。高，未见阿米巴原虫。n思考题思考题n可初步诊断为哪种疾病？可初步诊断为哪种疾病？n采用哪种方法能进行快速诊断采用哪种方法能进行快速诊断？n形态染色形态染色 n G G-杆菌杆菌n0.5-0.70.5-0.7m m 2-3 2-3m mn无鞭毛无鞭毛，无荚膜，无荚膜n有菌毛有菌毛n培养及生化反应培养及生化反应n营养要求不高营养要求不高n不分解乳糖不分解乳糖nssss选择培养基选择培养基 无色菌落无色菌落n克氏双糖管克氏双糖管 底层底层 上层上层n抗原构造及分类抗原构造及分类n由由
14、O O和和K K抗原组成抗原组成n分类：分类：n n菌种菌种 群群 型型 亚型亚型n痢疾志贺菌痢疾志贺菌 A 1A 110 8a10 8a、8b8b、8 8c cn福氏志贺菌福氏志贺菌 B 1B 16 6、1a 1a、1b1b、2a 2a、2b2b、x x y y变型变型 3a3a、3b3b、3c3c、4a4a、4b4bn鲍氏志贺菌鲍氏志贺菌 C 1C 118 18 n宋内志贺菌宋内志贺菌 D 1D 1抵抗力抵抗力比其他肠道杆菌弱比其他肠道杆菌弱 60106010分分对酸和一般消毒剂敏感对酸和一般消毒剂敏感n侵袭力侵袭力n菌毛粘附于回肠末端菌毛粘附于回肠末端 结肠粘膜上皮细胞结肠粘膜上皮细胞
15、诱导细胞内吞诱导细胞内吞n内毒素内毒素n破坏肠粘膜破坏肠粘膜 n肠壁通透性肠壁通透性n肠壁植物神经肠壁植物神经外毒素外毒素肠毒素活性肠毒素活性细胞毒活性细胞毒活性神经毒活性神经毒活性n内毒素内毒素-肠壁肠壁-通透性通透性 -毒素吸收毒素吸收-毒血毒血症症状症症状-发热、神志障碍、中毒性休克发热、神志障碍、中毒性休克n内毒素内毒素-肠粘膜上皮肠粘膜上皮-粘膜下层炎症粘膜下层炎症-毛毛细血管血栓形成细血管血栓形成-坏死、脱落坏死、脱落-溃疡溃疡-粘液脓血便粘液脓血便n内毒素内毒素-肠壁植物神经肠壁植物神经-肠蠕动失调、痉肠蠕动失调、痉挛挛-腹痛、腹泻、里急后重腹痛、腹泻、里急后重n菌痢菌痢n患者和
16、带菌者患者和带菌者n粪粪-口（口（10-15010-150个个 10103 3）n表现表现：n潜伏期数小时至潜伏期数小时至7d 7d n发热、腹痛、腹泻、里急后重、发热、腹痛、腹泻、里急后重、粘液脓血便粘液脓血便n临床表现临床表现：急性菌痢急性菌痢 症状典型，预后较好症状典型，预后较好慢性菌痢慢性菌痢 治疗不彻底者易转成慢性治疗不彻底者易转成慢性 （病程（病程2 2个月以上），症状不典型个月以上），症状不典型 慢性带菌者是重要传染源慢性带菌者是重要传染源中毒性菌痢中毒性菌痢 小儿多见，可无消化道症状小儿多见，可无消化道症状 表现为中毒性休克，死亡率高表现为中毒性休克，死亡率高 病后免疫力不牢固
17、病后免疫力不牢固 n隔离患者、彻底治疗隔离患者、彻底治疗n切断传播途径切断传播途径 n试用的口服菌苗：试用的口服菌苗：n链霉素依赖株重组活菌苗链霉素依赖株重组活菌苗n磺胺药、痢特灵等均有效磺胺药、痢特灵等均有效n亦可选用环丙沙星、菌必治等亦可选用环丙沙星、菌必治等案例案例n 患者，男，患者，男，23岁。急性腹痛岁。急性腹痛2天，每天脓天，每天脓血便血便10次左右，有明显里急后重感，肠鸣次左右，有明显里急后重感，肠鸣音亢进，体温音亢进，体温38，血压正常，白细胞增，血压正常，白细胞增高，未见阿米巴原虫。高，未见阿米巴原虫。n思考题思考题n可初步诊断为哪种疾病？可初步诊断为哪种疾病？n采用哪种方法
18、能进行快速诊断采用哪种方法能进行快速诊断 提示提示1n急性腹痛急性腹痛2天，每天天，每天10次左右脓血便，有次左右脓血便，有明显里急后重感，肠鸣音亢进、低热等明显里急后重感，肠鸣音亢进、低热等临床表现，初步诊断为急性细菌性痢疾临床表现，初步诊断为急性细菌性痢疾提示提示2n急性细菌性痢疾起病急，病情进展快，急性细菌性痢疾起病急，病情进展快，进行快速诊断显得特别重要。此案例可进行快速诊断显得特别重要。此案例可根据各医院开展的根据各医院开展的 ，诊断方法进行诊断方法进行快速诊断。快速诊断。第三节第三节沙门菌属沙门菌属案例案例1n患者，女，患者，女，25岁。发热岁。发热6天入院，食欲不振、天入院，食欲
19、不振、乏力、腹胀。查体：体温乏力、腹胀。查体：体温40，相对缓脉，相对缓脉，肝脾略肿大，腹部见玫瑰疹。血细胞无变肝脾略肿大，腹部见玫瑰疹。血细胞无变化。便中查到少量脓球和白细胞，但化。便中查到少量脓球和白细胞，但2次血次血和粪便培养均未发现致病菌。两次取血做和粪便培养均未发现致病菌。两次取血做肥达试验，其结果如下：入院时肥达试验，其结果如下：入院时TH1:80，TO：1:80 nPA：1:40 PB:1:40;入院入院 12天天TH1:320，TO：1:320 PA：1:40 PB:1:20n思考题思考题n1.根据此结果可初步诊断为什么疾病？根据此结果可初步诊断为什么疾病？n2.为进一步确诊，
20、应首先做什么检查？为进一步确诊，应首先做什么检查？n是一群革兰阴性杆菌是一群革兰阴性杆菌n菌种繁多，血清型超过菌种繁多，血清型超过20002000个个n多对动物致病多对动物致病n对人类致病的占少数对人类致病的占少数n伤寒沙门菌伤寒沙门菌n甲型副伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌n肖氏伤寒沙门菌肖氏伤寒沙门菌n希氏伤寒沙门菌希氏伤寒沙门菌n动物沙门菌也可对人致病动物沙门菌也可对人致病 n肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌n形态染色形态染色nG G-杆菌杆菌 n0.6-1.00.6-1.0m m 2-4 2-4m mn周身周身鞭毛鞭毛，有菌毛，有菌毛 n培养和生化
21、反应培养和生化反应n兼性厌氧兼性厌氧n营养要求不高营养要求不高n不分解乳糖不分解乳糖抗原构造与分类抗原构造与分类成分成分抵抗力抵抗力产生产生抗体抗体制备制备组成组成O O抗抗 原原LPSLPS耐湿热耐湿热IgMIgM酒精处理酒精处理或加热或加热分组依据：分组依据：引起人类沙门菌病引起人类沙门菌病的多属的多属A-EA-E组组H H抗抗 原原蛋白蛋白质质不耐热不耐热IgGIgG甲醛固定甲醛固定后使后使O O抗原抗原被遮盖被遮盖有两种：有两种：第第1 1相为特异相相为特异相第第2 2相非特异相相非特异相 n抵抗力抵抗力n较差较差 n耐受胆盐、煌绿及其他染料耐受胆盐、煌绿及其他染料n对热耐力差对热耐力
22、差 n5 5石炭酸石炭酸5min5min杀死杀死n侵袭力侵袭力 n菌毛、菌毛、O O和和ViVi抗原抗吞噬抗原抗吞噬n内毒素内毒素n肠毒素肠毒素n肠热症肠热症n伤寒、副伤寒伤寒、副伤寒n伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起n胃肠炎（食物中毒）胃肠炎（食物中毒）n鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌败血症败血症鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌乱沙门菌、希氏沙门菌无症状带菌者无症状带菌者伤寒沙门菌伤寒沙门菌 副伤寒沙门菌副伤寒沙门菌肠系膜淋巴结肠系膜淋巴结（潜伏期）潜伏期
23、）肝、脾、肾肝、脾、肾及胆囊等及胆囊等吞噬细胞吞噬吞噬细胞吞噬胆囊胆囊粪便粪便进入肠壁淋巴组织进入肠壁淋巴组织孤立和集合淋孤立和集合淋巴结坏死溃疡巴结坏死溃疡肾脏肾脏尿尿伤寒n伤寒表现：伤寒表现：n持续高热持续高热n伤寒病容伤寒病容n玫瑰疹玫瑰疹n肝脾肿大肝脾肿大n相对缓脉相对缓脉Thomsons theories on typhoid,a major killer,were derided.H H与与O O抗体的性质及其消长意义抗体的性质及其消长意义抗体类抗体类型型体内出现体内出现情况情况体内出现情况体内出现情况O O抗体抗体IgMIgM出现较早，出现较早，维持时间短维持时间短高高高高低低H
24、 H抗体抗体IgGIgG出现较晚，维出现较晚，维持时间长持时间长高高低低高高患肠热症可患肠热症可能性大能性大感染早期、感染早期、其他沙门菌其他沙门菌引起的交叉引起的交叉反应反应预防接种；预防接种；非特异性回非特异性回忆反应忆反应n加强水源和食品卫生管理加强水源和食品卫生管理n疫苗疫苗n伤寒、甲及乙型副伤寒伤寒、甲及乙型副伤寒3 3联菌苗（死菌苗）联菌苗（死菌苗）nTy2laTy2la伤寒沙门菌口服活菌苗伤寒沙门菌口服活菌苗n伤寒伤寒ViVi荚膜多糖疫苗荚膜多糖疫苗n治疗治疗n氯霉素效果较好（过去）氯霉素效果较好（过去）n氨苄青霉素氨苄青霉素 复方三甲氧烯胺复方三甲氧烯胺n环丙沙星环丙沙星案例案
25、例1n患者，女，患者，女，25岁。发热岁。发热6天入院，食欲不振、天入院，食欲不振、乏力、腹胀。查体：体温乏力、腹胀。查体：体温40，相对缓脉，相对缓脉，肝脾略肿大，腹部见玫瑰疹。血细胞无变肝脾略肿大，腹部见玫瑰疹。血细胞无变化。便中查到少量脓球和白细胞，但化。便中查到少量脓球和白细胞，但2次血次血和粪便培养均未发现致病菌。两次取血做和粪便培养均未发现致病菌。两次取血做肥达试验，其结果如下：入院时肥达试验，其结果如下：入院时TH1:80，TO：1:80 nPA：1:40 PB:1:40;入院入院 12天天TH1:320，TO：1:320 PA：1:40 PB:1:20n思考题思考题n1.根据此
26、结果可初步诊断为什么疾病？根据此结果可初步诊断为什么疾病？n2.为进一步确诊，应首先做什么检查？为进一步确诊，应首先做什么检查？提示提示1n患者持续发热患者持续发热6天，食欲不振、乏力、腹天，食欲不振、乏力、腹胀。体检体温胀。体检体温40，相对缓脉，肝脾略，相对缓脉，肝脾略肿大，腹部见玫瑰疹。可初步诊断为肠肿大，腹部见玫瑰疹。可初步诊断为肠热症。热症。提示提示2n对患者进行两次取血做肥达试验，其结果对患者进行两次取血做肥达试验，其结果如下：入院时如下：入院时TH1:80，TO：1:80 PA：1:40 PB:1:40;入院入院 12天天TH1:320，TO：1:320 PA：1:40 PB:1
27、:20。TH、TO第二第二次结果较第一次高次结果较第一次高4倍，考虑伤寒可能性较倍，考虑伤寒可能性较大。患者的大。患者的2次血和粪便中未检出细菌，为次血和粪便中未检出细菌，为进一步确诊，应及时对患者进行骨髓伤寒进一步确诊，应及时对患者进行骨髓伤寒沙门菌的分离培养和鉴定。沙门菌的分离培养和鉴定。p 经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量p Study Constantly,And You Will Know Everything.The More You Know,The More Powerful You Will Be写在最后谢谢大家荣幸这一路，与你同行ItSAnHonorToWalkWithYouAllTheWay演讲人：XXXXXX时间：XX年XX月XX日
