1、治疗用生物制品技术评审原则治疗用生物制品技术评审原则生物制品非临床评价主要考虑 生物制品安全性担忧的性质和来源 受试物质量要求 相关动物种属/模型的选择 动物数量/给药剂量确定 免疫原性2021/4/272生物制品安全性担忧的性质和来源 药理作用的放大或延伸 免疫毒性，包括免疫原性、免疫抑制和刺激反应及过敏反应 杂质或污染物所致的相关毒性2021/4/273安全性担忧来源 生物制品本身生物制品本身 活性成分和产品相关蛋白 杂质杂质 工艺相关 产品相关 环境污染*理化性质和生物活性与产品本身相似，可作为产品相关蛋白而不是杂质来对待2021/4/274杂质明细杂质明细 工艺相关：工艺相关：宿主细胞
2、蛋白、DNA，培养物（诱导剂、抗生素或其他培养基成分等）纯 化等工艺产生的杂质（酶、化学试剂、无机盐、溶剂、载体、抗体等）产品相关杂质：产品相关杂质：产品肽链的截短或延长形式、修饰形式（去酰胺化、异构体、二硫键错配、糖基化、磷酸化等）、聚合体、多聚体等 环境污染杂质：环境污染杂质：细菌内毒素、可能携带的病毒和有害微生物等 宿主细胞宿主细胞（如细菌、酵母、昆虫、植物和哺乳动物细胞）的污染2021/4/275受试物质量要求 杂质处理杂质处理：通过纯化过程去除（质控解决），不是为其质量控制建立一套非临床的试验方案 以下情况须证明与受试物可比性以下情况须证明与受试物可比性 1.采用新工艺 2.改进制备
3、工艺 3.产品及其处方出现重大改变时，证明可比性证明可比性-1.基于生化和生物学特征(如鉴别、纯度、稳定性和效价)，2.特殊情况需要增加其它试验(如药代动力学、药效学和/或安全性试验)来阐明所用方法的科学合理性2021/4/276相关动物种属/模型的选择 相关动物种属 不能按标准毒性试验采用常规动物(如大鼠和犬)受试物在此类动物上受体或抗原表位有表达,能够产生药理活性 对生物制品的生物学反应能模拟人体反应2021/4/277相关动物种属确定 免疫化学 功能试验 种属间的药理活性：体外亲合力试验、传统的竞争结合试验或细胞功能试验2021/4/278 用于单克隆抗体试验的相关动物要求：1.应能表达
4、所预期的抗原表位 2.并能证明其与人体组织具有类似的组织交叉反应性 注：若能满足第二条，即使不表达相应抗原表位，也可以用于毒性评价 目的：评价其与抗原决定族结合能力 与非预期组织交叉反应所致毒性的能力2021/4/279动物种属选择 一般应包括两种相关动物相关动物种属 尽量避免不相关动物种属的毒性试验 特例1（一种相关动物）：1.只能确定一种相关动物种属 2.该生物制品的生物学活性已十分了解 3.两种动物的短期毒性试验结果类似时，随后的长期毒性试验可能仍有理由使用一种动物 特例2（无相关动物种属）：2021/4/2710 1.使用表达人源受体的相关转基因动物或使用同系蛋白进行安全性研究 2.如
5、不能应用转基因动物模型或同系蛋白时，可考虑采用一种动物进行有限的毒性试验如包括心血管和呼吸等重要功能指标的长期毒性试验（也称重复给药毒性试验）2021/4/2711动物数量/给药剂量确定动物数量：一定动物数量 1.少观察不到相应毒性 2.灵长类-增加观察的次数和延长观察时间给药途径：与临床相同若受到生物利用度、给药途径、动物大小或生理状态等限制，采用与临床不同的给药途径也可被接受剂量设置：反映剂量-毒性反应关系 一些毒性很小产品：提供剂量选择以及与预计人体暴露量倍数（安全范围）的合理性2021/4/2712免疫原性 长期毒性试验,给药期间应检测抗体 检出抗体（即使是中和抗体）不能单独作为提前终
6、止非临床安全试验或改变试验设定观察期限的标准（除非免疫反应中和或消除了生物制品的药理和/或毒理作用）在动物中诱导了抗体形成（豚鼠过敏）并不能预示在人体可能产生抗体 1.人体可能产生抗人源蛋白的血清抗体，但往往出现抗体后仍存在治疗作用 2.人体很少发生对重组蛋白的严重过敏反应 非人灵长类作为一个良好的模型可预示多种重组蛋白在人体的相关免疫原性2021/4/2713非临床安全评价的主要内容和具体要求 生物活性测定/药效学试验-体外测定法测定受体结合、受体亲和力和/或药理作用单克隆抗体-抗体的免疫学性质（抗原特异性、补体结合、交叉反应和/或对人非靶组织的毒性）一般药理学试验潜在、非预期的药理作用心血
7、管、呼吸、肾脏和中枢神经系统可以单独进行，也可以结合其它毒性试验同时进行动物模型：合适动物模型、离体器官、其它非整体动物的试验系统2021/4/2714 急性毒性试验剂量与全身和/或局部毒性之间的剂量反应关系可结合在一般药理学或模型动物药效学试验中进行 长期毒性试验 给药途径和方案：充分考虑临床拟用途径或用药暴露情况设计恢复期：1.毒性可逆性、潜在的药理/毒性反应加剧、潜在的延迟毒性 2.药理/毒理作用持续时间较长，恢复期的观察期限应延长长毒期限：临床疗程和适应症情况2021/4/2715 1.大多数生物制品的动物给药期限为1-3个月 2.对于计划短期使用(如7 天以内)以及治疗紧急危及生命疾
8、病的生物制品，一个月重复给药试验可以支持其临床试验以及上市批准 3.对拟用于慢性适应症的生物制品，一般给药期限为6 个月 免疫原性/毒性试验 怎么做？1.常规的阶梯式试验方法或标准试验组合并不被推荐用于生物制品的 免疫毒性评价 2.免疫抑制和免疫刺激反应是值得关注的免疫毒性 3.免疫指标，包括血液学（含白细胞分类）、详细的免疫器官组织病理学检查和淋巴器官称重2021/4/2716 生殖毒性试验 1.某些涉及潜在发育免疫毒性的担忧时（某些有长效免疫作用的单克隆抗体），应对试验设计进行修改，以评价对新生动物免疫功能的影响 2.某些特殊类型的化合物(如干扰素，其唯一相关动物种属为非人灵长类动物)的潜
9、在生殖毒性可能已有大量的文献资料-无必要进行正规的生殖毒性试验 遗传毒性试验不需要进行这些试验(这类物质一般不会直接与DNA或其他染色体物质发生相互作用)某些可能致癌生物制品-此时可能需要开发替代的体内或外模型来评价该相关毒性2021/4/2717 致癌性试验 标准致癌性试验一般不适用于生物制品评价 明显致癌性担忧（如有促进细胞异常增生的倾向）如下：1）生物活性与天然物质明显不同；2）与天然物质比较显示修饰后结构发生明显改变 3）药物的暴露量超过了血液或组织中的正常水平。2021/4/2718 局部耐受性试验 应对拟上市制剂进行局部耐受性试验 在某些已证明合理的情况下，对具有代表性的处方制剂进行试验是可行的 急性或长期毒性试验中进行评价2021/4/2719 药代动力学/毒代动力学试验 试图评价物料平衡的常规试验的价值不大 应注意中和抗体的存在（重复给药或单剂量给药时动力学参数特征的改变）当使用放射性标记蛋白时，要显示放射标记的受试物质仍保持了与非标记受试物相当的活性和生物学性质2021/4/2720 生物制品代谢的预期结果是降解成为小肽和各种氨酸（已有了解）一般不需要进行经典的生物转化试验，应了解生物制品在生物基质(如血浆、血清、脑脊髓液)中的行为以及其与结合蛋白的可能影响2021/4/2721
