实验动物设施与管理饲料与营养课件.ppt

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1、 实验动物设施与管理实验动物设施与管理实验动物的饲料与营养实验动物的饲料与营养四要素:四要素:建筑物、设备、运行、管理。建筑物、设备、运行、管理。实验动物设施及环境实验动物设施及环境硬件条件硬件条件是影响实验动物质是影响实验动物质量和动物实验结果的重要因素。量和动物实验结果的重要因素。实验动物设施及环境实验动物设施及环境运行管理运行管理是实验动物工作者是实验动物工作者的重要工作内容。的重要工作内容。简要介绍实验动物设施及环境相关基础知识、建简要介绍实验动物设施及环境相关基础知识、建设标准和运行管理概要。设标准和运行管理概要。一、实验动物设施分类一、实验动物设施分类(一)根据功能、使用目的分类:

2、(一)根据功能、使用目的分类:1.1.实验动物繁育、生产设施:实验动物繁育、生产设施:用于动物生产的建筑物、用于动物生产的建筑物、设备、运行管理的总称。包括:动物生产区、辅助设备、运行管理的总称。包括:动物生产区、辅助生产区、辅助区。生产区、辅助区。2.2.动物实验设施:动物实验设施:进行动物实验的建筑物、设备、运进行动物实验的建筑物、设备、运行管理的总称。包括:动物实验区、辅助实验区、行管理的总称。包括:动物实验区、辅助实验区、辅助区。辅助区。(二)按照空气净化的控制程度,实验动物环境及(二)按照空气净化的控制程度,实验动物环境及设施国家标准(设施国家标准(GB149252001GB1492

3、52001),分三类:),分三类:1 1、普通环境:传染因子不完全控制,普通级动物。、普通环境:传染因子不完全控制,普通级动物。2 2、屏障环境:严格控制传染因子,、屏障环境:严格控制传染因子,SPFSPF级动物。级动物。3 3、隔离环境:绝对隔离传染因子,悉生及无菌动物。、隔离环境:绝对隔离传染因子,悉生及无菌动物。附:实验动物环境设施分类附:实验动物环境设施分类(国标(国标GB50447-2008GB50447-2008)环境设施分类环境设施分类使用功能使用功能适用动物等级适用动物等级普通环境普通环境实验动物生产、动物实验、实验动物生产、动物实验、检疫检疫基础动物(普通级)基础动物(普通级

4、)屏障环境屏障环境 正压正压 负压负压实验动物生产、动物实验、实验动物生产、动物实验、检疫检疫 清洁动物,清洁动物,SPFSPF动物动物 动物实验,检疫动物实验,检疫 清洁动物,清洁动物,SPFSPF动物动物 隔离环境隔离环境 正压正压 负压负压实验动物生产、动物实验、实验动物生产、动物实验、检疫检疫 无菌动物,悉生动物,无菌动物,悉生动物,SPFSPF动物动物 动物实验,检疫动物实验,检疫 无菌动物,悉生动物,无菌动物,悉生动物,SPFSPF动物动物 二、环境和实验动物的关系二、环境和实验动物的关系1.1.温度:温度:环境温度高,动物食欲减退,摄食量减少,雄性环境温度高,动物食欲减退,摄食量

5、减少,雄性动物精子生成能力下降,甚至出现睾丸萎缩,繁殖功能下;动物精子生成能力下降,甚至出现睾丸萎缩,繁殖功能下;环境温度低导致动物冻伤、感冒、支气管炎和肺炎等疾病。环境温度低导致动物冻伤、感冒、支气管炎和肺炎等疾病。2.2.湿度:湿度:高温、高湿表现闷热;低温、高湿动物的感觉是阴高温、高湿表现闷热;低温、高湿动物的感觉是阴冷(兔的腹泻等)冷(兔的腹泻等);低湿时空气过分干燥,动物表现为躁;低湿时空气过分干燥,动物表现为躁动不安及反常现象(哺乳母鼠不让仔鼠哺乳,甚至吃鼠;大动不安及反常现象(哺乳母鼠不让仔鼠哺乳,甚至吃鼠;大小鼠表现有环尾病特征性症);小鼠表现有环尾病特征性症);北方加湿南方减

6、湿北方加湿南方减湿。3.3.噪声:噪声:噪声可妨碍动物的怀孕、受精卵的着床,或者导致噪声可妨碍动物的怀孕、受精卵的着床,或者导致流产,甚至出现食仔现象,泌乳量减少,离乳率下降,动物流产,甚至出现食仔现象,泌乳量减少,离乳率下降,动物间的咬杀率升高;强噪声可间的咬杀率升高;强噪声可100100引起引起DBA/2DBA/2小鼠的听源性癫小鼠的听源性癫痫,痫,ICRICR小鼠也有小鼠也有68688080的发作率,的发作率,SDSD大鼠肾小球毛细大鼠肾小球毛细血管充血血管充血 ,KMKM小鼠胸腺重量明显减轻,脾脏重量明显增加,小鼠胸腺重量明显减轻,脾脏重量明显增加,抗体形成细胞分泌抗体的能力均显著降低

7、。抗体形成细胞分泌抗体的能力均显著降低。4.4.氨:氨:和环境中的微生物相互作用后会诱发动物呼吸器官疾病如和环境中的微生物相互作用后会诱发动物呼吸器官疾病如肺水肿、肺炎等(肺水肿、肺炎等(250mg/L250mg/L下豚鼠下豚鼠4 49d9d,死亡率达,死亡率达80%80%,2525250mg/L250mg/L的氨环境中的氨环境中4 4周周6 6周时,可发生严重鼻炎、中耳炎、周时,可发生严重鼻炎、中耳炎、支气管炎和支原体性肺炎);支气管炎和支原体性肺炎);5.5.照度:照度:影响动物的发情、繁殖以及视网膜障碍等。大鼠在影响动物的发情、繁殖以及视网膜障碍等。大鼠在15Lx15Lx条条件下,不发情

8、个体增加。产仔数在件下,不发情个体增加。产仔数在250Lx250Lx条件下最多,白化大条件下最多,白化大鼠在鼠在20000Lx20000Lx下下12h12h后就出现视网膜障碍;在后就出现视网膜障碍;在200Lx200Lx时时,雌鼠阴雌鼠阴道开口比道开口比30Lx30Lx时要早时要早3d3d。小鼠的发情周期在。小鼠的发情周期在20Lx20Lx的光照下有的光照下有规律地呈规律地呈4d4d周期,比在周期,比在5Lx5Lx或或200Lx200Lx条件下稳定)。条件下稳定)。6.6.动物在动物在IVCIVC环境环境:生长发育优于开放环境生长发育优于开放环境,昆明种小鼠、近交系昆明种小鼠、近交系BALB/

9、cBALB/c小鼠、小鼠、SDSD大鼠体重有显著差异大鼠体重有显著差异(P0.05(P0.05或或P0.01)P0.01),生长发育曲线也,生长发育曲线也表明清洁级昆明种小鼠在表明清洁级昆明种小鼠在IVCIVC的生长发育明显优于开放环境;的生长发育明显优于开放环境;肺炎的发生率明显减少、炎症程度明显减轻)肺炎的发生率明显减少、炎症程度明显减轻)三、我国实验动物与动物实验设施标准三、我国实验动物与动物实验设施标准(一)设施建筑要求(一)设施建筑要求1.1.选址:选址:u 避开自然疫源地,选择空气质量及自然环境较好的区域;避开自然疫源地,选择空气质量及自然环境较好的区域;u 远离铁路,码头,飞机场

10、,交通要道及工厂,贮仓等污染,噪声干扰的区域;远离铁路,码头,飞机场,交通要道及工厂,贮仓等污染,噪声干扰的区域;u 如不能远离,则应布置在当地夏季最小频率风向的下风侧;如不能远离,则应布置在当地夏季最小频率风向的下风侧;u 与生活区保持与生活区保持50m50m的距离。的距离。2.2.建筑卫生要求:建筑卫生要求:p 材料应无毒,无放射性;材料应无毒,无放射性;p 内墙表面应光滑平整,墙面采用不易脱落,内墙表面应光滑平整,墙面采用不易脱落,耐腐蚀、无反光、耐冲击的材料;耐腐蚀、无反光、耐冲击的材料;p 阴阳角均为圆弧形,易于清洗、消毒;阴阳角均为圆弧形,易于清洗、消毒;p 地面应防滑、耐磨、无渗

11、漏;地面应防滑、耐磨、无渗漏;p 天花板应耐水、耐腐蚀;天花板应耐水、耐腐蚀;3.3.建筑设施要求:建筑设施要求:门窗良好的密封性门窗良好的密封性 走廊宽度不小于走廊宽度不小于1.5m1.5m,门宽度不小于,门宽度不小于1m1m 通风空调系统合理的设置通风空调系统合理的设置 电源应备有应急电源电源应备有应急电源(二)设施区域设置要求(二)设施区域设置要求1.1.前区设置:前区设置:n 办公室办公室 n 维修室维修室n 库房库房n 饲料间饲料间n 外走廊(参观、通道)外走廊(参观、通道)2.2.饲育区饲育区辅助区设置:辅助区设置:仓库仓库 洗刷间洗刷间 废气物品存放处理间废气物品存放处理间 动物

12、尸体冷藏存放间(冰箱)动物尸体冷藏存放间(冰箱)机械设备室(机房)机械设备室(机房)沐浴间沐浴间 更衣,休息室等更衣,休息室等2.2.饲育区设置:饲育区设置:繁育、生产区繁育、生产区动物实验区动物实验区隔离检疫室隔离检疫室独立动物实验室,应配有接受,检疫室独立动物实验室,应配有接受,检疫室缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间育种室(保种室)育种室(保种室)实验饲育室实验饲育室扩大群饲育室扩大群饲育室实验操作间(手术室、热源室等)实验操作间(手术室、热源室等)生产群饲育室生产群饲育室待发室待发室清洁物品贮藏室清洁物品贮藏室清洁物品贮藏室清洁物品贮藏室清洁走廊清洁走廊清洁走廊清洁走廊污染走廊污染走廊污染走廊污

13、染走廊(三)实验动物与动物实验环境国家标准(三)实验动物与动物实验环境国家标准1 1.实验动物环境及设施国家标准(实验动物环境及设施国家标准(GB149252001GB149252001)该标准规定了实验动物设施的环境要求。该标准规定了实验动物设施的环境要求。2.2.实验动物设施建筑技术规范国家标准实验动物设施建筑技术规范国家标准 GB50447-2008 GB50447-2008 该规范是解决如何建设实验动物设施,以满足实验该规范是解决如何建设实验动物设施,以满足实验动物设施的环境要求,包括建筑、结构、空调净化、消防、动物设施的环境要求,包括建筑、结构、空调净化、消防、给排水、电气、工程检测

14、与验收等。给排水、电气、工程检测与验收等。繁殖、生产实验动物设施国标规定指标(生产许可证)繁殖、生产实验动物设施国标规定指标(生产许可证)项目项目动物种属动物种属普通环境普通环境屏障环境屏障环境隔离环境隔离环境温度温度大小鼠、豚鼠、地鼠大小鼠、豚鼠、地鼠18-2918-2920-2620-2620-2620-26犬、猴、猫、兔、小型猪犬、猴、猫、兔、小型猪16-2816-2820-2620-2620-2620-26鸡鸡16-2816-28日温差日温差大小鼠、豚鼠、地鼠大小鼠、豚鼠、地鼠4 44 4犬、猴、猫、兔、小型猪犬、猴、猫、兔、小型猪4 44 4鸡鸡4 4相对湿度相对湿度所有实验动物所有

15、实验动物40-7040-70换气次数换气次数同上(鸡除外)同上(鸡除外)8-108-1010-2010-2020-5020-50压差强度压差强度同上(鸡除外)同上(鸡除外)20-5020-50100-150100-150空气洁净度空气洁净度所有实验动物所有实验动物万级万级百级百级落菌数落菌数所有实验动物所有实验动物30303 3无检出无检出氨浓度氨浓度所有实验动物所有实验动物1414噪声噪声所有实验动物所有实验动物6060工作照度工作照度所有实验动物所有实验动物150-300150-300动物照度动物照度大小鼠、豚鼠、地鼠大小鼠、豚鼠、地鼠15-2015-20犬、猴、猫、兔、小型猪犬、猴、猫、

16、兔、小型猪100-200100-200鸡鸡5-105-10昼夜交替昼夜交替所有实验动物所有实验动物12/1212/12或或10/1410/14项目项目动物种属动物种属普通环境普通环境屏障环境屏障环境隔离环境隔离环境温度温度大小鼠、豚鼠、地鼠大小鼠、豚鼠、地鼠19-2619-2620-20-252520-20-2525犬、猴、猫、兔、小型猪犬、猴、猫、兔、小型猪16-16-262618-2218-2218-2218-22鸡鸡16-16-2626日温差日温差大小鼠、豚鼠、地鼠大小鼠、豚鼠、地鼠4 43 33 3犬、猴、猫、兔、小型猪犬、猴、猫、兔、小型猪4 43 33 3鸡鸡3 3相对湿度相对湿度

17、所有实验动物所有实验动物40-7040-70换气次数换气次数同上(鸡除外)同上(鸡除外)8-108-1010-2010-2020-5020-50压差强度压差强度同上(鸡除外)同上(鸡除外)20-5020-50100-150100-150空气洁净度空气洁净度所有实验动物所有实验动物万级万级百级百级落菌数落菌数所有实验动物所有实验动物30303 3无检出无检出氨浓度氨浓度所有实验动物所有实验动物1414噪声噪声所有实验动物所有实验动物6060工作照度工作照度所有实验动物所有实验动物150-300150-300动物照度动物照度大小鼠、豚鼠、地鼠大小鼠、豚鼠、地鼠15-2015-20犬、猴、猫、兔、小

18、型猪犬、猴、猫、兔、小型猪100-200100-200鸡鸡5-105-10昼夜交替昼夜交替所有实验动物所有实验动物12/1212/12或或10/1410/14动物实验设施国标规定指标(使用许可证)动物实验设施国标规定指标(使用许可证)每平方米动物饲养密度每平方米动物饲养密度动物种属动物种属体重标准体重标准最大饲养只数最大饲养只数动物种属动物种属体重标准体重标准最大饲养只数最大饲养只数小鼠小鼠20g20g150150猫猫2.5kg20g20g1001002.5kg2.5kg2 2大鼠大鼠150g150g6666犬犬10kg150g150g404010-20kg10-20kg1 1豚鼠豚鼠350g

19、350g3333猴猴4kg350g350g15154kg4kg1 1地鼠地鼠100g100g100100小型猪小型猪20kg100g100g8383兔兔2.5kg2.5kg5 5鸡鸡2kg2.5kg2.5kg2 22kg2kg6 6屏障级设施和普通级设施屏障级设施和普通级设施 生科院中药与海洋药物实验室生科院中药与海洋药物实验室SPFSPF级设施级设施20042004年取得使用许可证年取得使用许可证SPFSPF级饲养员级饲养员罗秀兰(罗秀兰(8 8年)年)普通级设施普通级设施2004年取得使用许可证年取得使用许可证SPFSPF级饲养员级饲养员宗国巧(宗国巧(1818年)年)人员一更室淋浴室二更

20、室缓冲一洁净走廊检疫间饲养室次洁净走廊缓冲二走廊贮物间实验室饲养室次洁净走廊缓冲二洗消间生科院中药与海洋药物实验室生科院中药与海洋药物实验室SPFSPF动物设施动物设施人员流动路线人员流动路线生科院中药与海洋药物实验室生科院中药与海洋药物实验室SPFSPF级动物设施级动物设施物品流动路线物品流动路线生科院中药与海洋药物实验室生科院中药与海洋药物实验室SPF级设施级设施动物流动路线动物流动路线接收走廊接收走廊缓冲间缓冲间消毒剂擦拭外包装消毒剂擦拭外包装检疫间检疫间紫外照射紫外照射30min30min饲养室饲养室检疫检疫3-53-5天天第二节第二节 实验动物设施的运行管理实验动物设施的运行管理动物

21、设施正常运行离不开管理动物设施正常运行离不开管理管理的管理的核心内容核心内容是:管人、管物、管设备是:管人、管物、管设备管理的管理的方式方式是:规章制度和操作规程(是:规章制度和操作规程(SOP)管理管理效果验证效果验证:环境检测结果(动物质量检测):环境检测结果(动物质量检测)管理的理想模式:员工道德价值观的建立管理的理想模式:员工道德价值观的建立一、人员配置及管理一、人员配置及管理设施负责人:负责、协调、跟踪、落实设施负责人:负责、协调、跟踪、落实后勤保障人:设施、设备运行、记录、维护。后勤保障人:设施、设备运行、记录、维护。一般由设施内、外辅助人员担任。一般由设施内、外辅助人员担任。质量

22、监督人:设施内外操作、记录监督。质量监督人:设施内外操作、记录监督。罗秀兰实验动物技术培训资格证罗秀兰实验动物技术培训资格证二、屏障设施、设备运行维护重点二、屏障设施、设备运行维护重点新设施运行前准备:调试、检测、入设备、卫生、消毒、新设施运行前准备:调试、检测、入设备、卫生、消毒、再检测再检测配电系统:备用电源,电管家配电系统:备用电源,电管家空调系统:温湿度。专业公司,定期维护。备用空调空调系统:温湿度。专业公司,定期维护。备用空调风机、风管:风量。报警,检漏。备用风机风机、风管:风量。报警,检漏。备用风机过滤器:定期更换过滤器:定期更换灭菌器:安检,持证上岗。灭菌器:安检,持证上岗。净化

23、水设备:净化水设备:设施内外:环境卫生,维持性消毒。渡槽液更换设施内外:环境卫生,维持性消毒。渡槽液更换环境监测:定期环境监测:定期三三.规章制度和操作规程规章制度和操作规程1.1.设施设备运行、使用、维护方面。设施设备运行、使用、维护方面。如:空调、电、水、风机、灭菌炉、传递窗、渡槽等。如:空调、电、水、风机、灭菌炉、传递窗、渡槽等。2.2.过滤器安装、使用、清洁、更换。过滤器安装、使用、清洁、更换。3.3.设施内外卫生、维持性消毒。设施内外卫生、维持性消毒。4.4.人员、物品、动物的管理及进出设施的管理。人员、物品、动物的管理及进出设施的管理。5.5.设施内饲养人员和设施内饲养人员和实验人

24、员操作实验人员操作及管理。及管理。6.6.安全值班检查安全值班检查7.7.环境检测环境检测举例举例实验动物编号标记标准操作规程实验动物编号标记标准操作规程 (SG-016 SG-016)1 1目的:为了规范实验动物编号标记方法,对分组后的实验动物进行标记编号,目的:为了规范实验动物编号标记方法,对分组后的实验动物进行标记编号,制定本程序。制定本程序。2 2范围:适用于实验动物编号标记的活动。范围:适用于实验动物编号标记的活动。3 3职责:所有实验人员应遵守本规程,动物实验室负责人负责监督和管理。职责:所有实验人员应遵守本规程,动物实验室负责人负责监督和管理。4 4工作程序:工作程序:4.14.

25、1良好的标记方法应满足标号清晰、耐久,简便、适用、无明显损伤、无毒和良好的标记方法应满足标号清晰、耐久,简便、适用、无明显损伤、无毒和易辨认等要求。常用的标记方法有染色法、耳缘剪孔法、烙印法、挂号牌法、易辨认等要求。常用的标记方法有染色法、耳缘剪孔法、烙印法、挂号牌法、挂环法等。挂环法等。4.24.2染色法:染色法是用化学剂在动物身体明显部位如被毛、四肢等处进行涂染,染色法:染色法是用化学剂在动物身体明显部位如被毛、四肢等处进行涂染,或用不同颜色等代表一定的编号,来区别各组动物,是实验室最常用、最容或用不同颜色等代表一定的编号,来区别各组动物,是实验室最常用、最容易掌握的方法。易掌握的方法。4

26、.2.14.2.1常用染色剂:黄色:常用染色剂:黄色:3 35 5苦味酸溶液苦味酸溶液 红色:红色:0.50.5中性红或碱性品红溶液中性红或碱性品红溶液 咖啡色:咖啡色:2 2硝酸银溶液(涂后需光照硝酸银溶液(涂后需光照1010分钟)分钟)黑色:煤焦油的酒精溶液黑色:煤焦油的酒精溶液4.2.2 4.2.2 编号的原则:如动物数在编号的原则:如动物数在1010只以下,只以下,在左前腿上为在左前腿上为 1 1,左腰部为,左腰部为2 2,左后腿为左后腿为3 3,头部为,头部为4 4,背部为,背部为5 5,尾基部为尾基部为6 6,右前腿为,右前腿为7 7,右腰部为,右腰部为8 8,右后腿为右后腿为9

27、9。如果动物编号超过如果动物编号超过1010,需要编需要编1010100100号码时,号码时,可采用在上述动物的不同部位,可采用在上述动物的不同部位,再涂染另一种涂染剂再涂染另一种涂染剂(如如0.50.5中性红或品红溶液中性红或品红溶液)斑点,斑点,即表示相应的十位数,即表示相应的十位数,即左前腿上为即左前腿上为1010,左腰部为,左腰部为2020。如在左前腿上标记红色和黄色斑点,如在左前腿上标记红色和黄色斑点,表示为表示为1111,如果红色标记在左前腿上,如果红色标记在左前腿上,而黄色标记在左腰部,是而黄色标记在左腰部,是1212,以此类推。如图。以此类推。如图。本设施大小鼠采用染色法编号标

28、记本设施大小鼠采用染色法编号标记。4.3 4.3 烙印法:用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的烙印法:用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的墨黑在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。墨黑在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。4.4 4.4 号牌法:用金属制号牌固定于实验动物的耳上或系颈上。本设施狗采用号牌法:用金属制号牌固定于实验动物的耳上或系颈上。本设施狗采用此法编号标记。此法编号标记。4.54.5鼠尾标记编号鼠尾标记编号 用苦味酸溶液涂擦在鼠尾部用苦味酸溶液涂擦在鼠尾部(图图)。4.6 4.6 孔法或剪口法:孔法或剪口法:耳

29、孔法耳孔法是用打孔机直接在实验动物的耳朵上打孔编号,根据打在动物是用打孔机直接在实验动物的耳朵上打孔编号,根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少,来区分实验动物的方法。用打孔机在耳朵打耳朵上的部位和孔的多少,来区分实验动物的方法。用打孔机在耳朵打孔后,必须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部,以免伤口愈合过程中将耳孔后,必须用消毒过的滑石粉抹在打孔局部,以免伤口愈合过程中将耳孔闭合。耳孔法可标记三位数之内的号码。另一种耳孔法是用剪刀在实孔闭合。耳孔法可标记三位数之内的号码。另一种耳孔法是用剪刀在实验动物的耳边上剪缺口的方法,作为区分实验动物的标记。本设施内裸验动物的耳边上剪缺口的方法,作为区分实验动物的标

30、记。本设施内裸鼠采用剪耳法进行编号标记。鼠采用剪耳法进行编号标记。四四.近年来中山大学和生科院的新规定等近年来中山大学和生科院的新规定等1.1.中山大学:生物安全管理实施细则的颁布中山大学:生物安全管理实施细则的颁布 突发事件的紧急预案突发事件的紧急预案 实验动物管理委员会实验动物管理委员会2.2.生命科学学院:伦理委员会生命科学学院:伦理委员会 动物福利与伦理审查表动物福利与伦理审查表 动物尸体无害化处理动物尸体无害化处理3.3.生科院中药与海洋药物实验室动物实验流程图生科院中药与海洋药物实验室动物实验流程图20072007年年1212月月1212日通过中山大学实验室生物安全管理实施细则日通

31、过中山大学实验室生物安全管理实施细则 2008 2008年年1212月中山大学生命科学学院成立实验动物伦理委员会。月中山大学生命科学学院成立实验动物伦理委员会。广东生活环境无害处理中心集中上门收集动物尸体和其他废广东生活环境无害处理中心集中上门收集动物尸体和其他废弃物。操作是实验处死的动物先低温冷冻保存,待冰箱填满弃物。操作是实验处死的动物先低温冷冻保存,待冰箱填满后通知中心前来收取。后通知中心前来收取。实验动物质量合格证明(生产许可证单位提供)实验动物质量合格证明(生产许可证单位提供)动物实验设施使用证明(使用许可证单位提供)动物实验设施使用证明(使用许可证单位提供)第三节第三节 特殊要求的

32、动物实验室特殊要求的动物实验室一一.生物危险因素设施(生物危险因素设施(Bio-hazard)1.实验动物所产生的危害:抓伤实验动物所产生的危害:抓伤/咬伤;吸入气溶胶;动物尸体污染。咬伤;吸入气溶胶;动物尸体污染。2.以脊椎动物为媒介和宿主的微生物病等病原体危害:微生物的致病性;以脊椎动物为媒介和宿主的微生物病等病原体危害:微生物的致病性;微生物的生态变异和免疫学特征;疾病的临床症状和预后;预防治疗和微生物的生态变异和免疫学特征;疾病的临床症状和预后;预防治疗和诊断的难度;疾病的生态分布。诊断的难度;疾病的生态分布。3.转基因、克隆、重组基因等的危害:由转基因、克隆、重组基因等的危害:由DN

33、A载体的不同,特别应重视因载体的不同,特别应重视因致病性、产生毒素的能力、寄生性、定着性、致癌性、耐药性、产生变致病性、产生毒素的能力、寄生性、定着性、致癌性、耐药性、产生变态反应、产生扰乱物质代谢和扰乱生态体系等,造成生物危害。态反应、产生扰乱物质代谢和扰乱生态体系等,造成生物危害。二二.放(辐)射污染设施(放(辐)射污染设施(Radio-hazard)1.GB4792-84放射卫生防护基本标准和放射卫生防护基本标准和GB8703-88辐射防护规定辐射防护规定2.GB11928低、中水平放射性固体废物暂时贮存规定低、中水平放射性固体废物暂时贮存规定3.GB14925-2001实验动物环境及设

34、施实验动物环境及设施 三三.生物危害程度分级生物危害程度分级级级:不会致病的危害(枯草杆菌、丝状虫类)不会致病的危害(枯草杆菌、丝状虫类)级级:个体危害不严重、群体传播风险及危害有限个体危害不严重、群体传播风险及危害有限(流行性感冒等)流行性感冒等)级:个体危害严重、群体传播风险及危害低等(霍乱、结核等)级:个体危害严重、群体传播风险及危害低等(霍乱、结核等)级:个体危害严重、群体传播风险及危害高等级:个体危害严重、群体传播风险及危害高等(出血热等)出血热等)四四.生物危害程度分级生物危害程度分级 生物安全水平分级:对应相应的生物危害程度分为生物安全水平分级:对应相应的生物危害程度分为4 4级

35、;级;实验室:实验室:BSL-1 BSL-2 BSL-3 BSL-4BSL-1 BSL-2 BSL-3 BSL-4 动物实验室:动物实验室:ABSL-1 ABSL-2 ABSL-3 ABSL-4ABSL-1 ABSL-2 ABSL-3 ABSL-4BSL-1 BSL-1 实验室实验室可从事一般具有活性但对健康成人不致病、对人员和环境可能有微弱伤害可从事一般具有活性但对健康成人不致病、对人员和环境可能有微弱伤害的微生物;的微生物;建筑防护:无需特殊选址;防止节肢和啮齿动物进入;每个实验室应建筑防护:无需特殊选址;防止节肢和啮齿动物进入;每个实验室应 设洗手池;台面防水、耐磨蚀;应有适当的消毒设备

36、等;设洗手池;台面防水、耐磨蚀;应有适当的消毒设备等;人员防护:穿实验室外衣;手皮肤破损需要戴乳胶手套操作;必要时人员防护:穿实验室外衣;手皮肤破损需要戴乳胶手套操作;必要时 佩戴眼睛或防护面罩;培养物、菌种管等抛弃前进行适当佩戴眼睛或防护面罩;培养物、菌种管等抛弃前进行适当 消毒;消毒;BSL-2 BSL-2 实验室实验室适合从事某些带有传染性或潜在传染性,但在标准操作时对工作人员不构适合从事某些带有传染性或潜在传染性,但在标准操作时对工作人员不构成伤害的微生物工作;成伤害的微生物工作;建筑防护:满足建筑防护:满足BSL-1BSL-1的要求;建筑内应配备有高压蒸气灭菌器;配备生的要求;建筑内

37、应配备有高压蒸气灭菌器;配备生 物安全柜;配备应急喷淋及洗眼设备;可以使用自然通风等;物安全柜;配备应急喷淋及洗眼设备;可以使用自然通风等;人员防护:感染危险(免疫力下降、使用免疫抑制剂或措施)人员不准人员防护:感染危险(免疫力下降、使用免疫抑制剂或措施)人员不准 进入;在生物安全柜中进行操作(易产生气溶胶等的实验);进入;在生物安全柜中进行操作(易产生气溶胶等的实验);高度警惕锐器伤及动物咬伤;穿防护衣、佩戴目镜、口罩等;高度警惕锐器伤及动物咬伤;穿防护衣、佩戴目镜、口罩等;处理感染动物戴双层手套等;处理感染动物戴双层手套等;BSL-3 BSL-3 实验室实验室适用于适用于或或类危害,使之对

38、人或环境不产生危害;类危害,使之对人或环境不产生危害;建筑防护:建筑防护:满足满足BSL-2BSL-2的要求;独立建筑物或单元;要有淋浴;进出实验的要求;独立建筑物或单元;要有淋浴;进出实验 室要有气锁门;负压通风,保证气流从外进入,不倒流不能室要有气锁门;负压通风,保证气流从外进入,不倒流不能 在实验室内部循环;至少经一道在实验室内部循环;至少经一道HEPEHEPE过滤方可排放;安全柜过滤方可排放;安全柜 必须一年检定一次;实验室出口处设置脚动、肘动或自动洗必须一年检定一次;实验室出口处设置脚动、肘动或自动洗 手池;手池;8 8级抗震设计;设立压力报警装置;级抗震设计;设立压力报警装置;人员

39、防护:人员防护:满足满足BSL-2BSL-2的要求;实验室里必须穿背开衣或连裤衣;不能在的要求;实验室里必须穿背开衣或连裤衣;不能在 安全柜操作时严格佩戴防护面具;有感染动物实验时戴防毒安全柜操作时严格佩戴防护面具;有感染动物实验时戴防毒 面具更安全;面具更安全;BSL-4 BSL-4 实验室实验室从事对工作人员有极大危害和产生烈性传染病流行的微生物工作;不同于从事对工作人员有极大危害和产生烈性传染病流行的微生物工作;不同于BSL-3BSL-3的特点是次级防护性能更加严密;防止传染因子外溢环境更加可靠;的特点是次级防护性能更加严密;防止传染因子外溢环境更加可靠;建筑防护:满足建筑防护:满足BS

40、L-3BSL-3的要求;独立建筑或完全隔离区域;设置双屝高压的要求;独立建筑或完全隔离区域;设置双屝高压 灭菌器;两级污水排放消毒池;灭菌器;两级污水排放消毒池;2 2次以上高压过滤排出;配次以上高压过滤排出;配 备备3 3级生物安全柜、正压服;设置观察室;级生物安全柜、正压服;设置观察室;人员防护:满足人员防护:满足BSL-3BSL-3的要求;进入离开均需淋浴;所有进入器材均经双的要求;进入离开均需淋浴;所有进入器材均经双 屝高压灭菌器或熏蒸消毒柜或气锁传入,传入时两门不能同屝高压灭菌器或熏蒸消毒柜或气锁传入,传入时两门不能同 时开启;传出的活体或材料经时开启;传出的活体或材料经2 2级包装

41、、表面消毒,能高压级包装、表面消毒,能高压 的均需高压灭菌传出;每次实验完成后均彻底消毒、检察和维护;的均需高压灭菌传出;每次实验完成后均彻底消毒、检察和维护;第二部分第二部分实验动物饲料与营养实验动物饲料与营养主主 要要 内内 容容 实验动物实验动物所需的营养素所需的营养素 实验动物的营养需要实验动物的营养需要 实验动物饲料的分类及配制实验动物饲料的分类及配制水水 分分无氮浸无氮浸出出 物物饲料中营养成分组成饲料中营养成分组成 饲饲料料 干物质干物质无机物(粗灰分或矿物质)无机物(粗灰分或矿物质)有机物有机物含氮化合物(含氮化合物(粗蛋白质粗蛋白质)无氮化合物无氮化合物乙醚浸出物(乙醚浸出物

42、(粗脂肪粗脂肪)碳水化合物碳水化合物粗纤维粗纤维第一节第一节 实验动物营养需要与营养标准实验动物营养需要与营养标准 营养素(营养素(nutritionnutrition)指生物体为了维持生命而从外界以食指生物体为了维持生命而从外界以食物形式摄入的必需物质。物形式摄入的必需物质。实验动物所需营养素的种类:实验动物所需营养素的种类:到目前为止已知动物机体所需的各种营养物质达到目前为止已知动物机体所需的各种营养物质达5050余种,余种,其中最主要的可划归六大类,即:其中最主要的可划归六大类,即:蛋白质、脂类、碳水化合物、矿物质、维生素、水。蛋白质、脂类、碳水化合物、矿物质、维生素、水。作为能量来源:

43、脂肪、碳水化合物、蛋白质;作为能量来源:脂肪、碳水化合物、蛋白质;作为身体构成成分:蛋白质、矿物质;作为身体构成成分:蛋白质、矿物质;调节身体功能:维生素、矿物质。调节身体功能:维生素、矿物质。合理搭配这合理搭配这6 6类类5050余种营养物质,可以满足实验动物的各余种营养物质,可以满足实验动物的各种生理需要。种生理需要。一、实验动物所需营养素的种类一、实验动物所需营养素的种类指指 标标配合维持饲料配合维持饲料国标值国标值水份,水份,%8.18.11010粗蛋白,粗蛋白,%20.8320.831818粗脂肪,粗脂肪,%5.665.6644粗纤维,粗纤维,%2.922.9255粗灰分,粗灰分,%

44、5.595.5988附:本设施配合维持饲料成品常规营养成分指标附:本设施配合维持饲料成品常规营养成分指标表表1 1 常规营养成分指标常规营养成分指标(一)蛋白质(一)蛋白质(Protein)1、营养学作用:、营养学作用:是动物维持生命、生长发育、繁殖不可缺少的是动物维持生命、生长发育、繁殖不可缺少的营养物质。营养物质。构成体组织、体细胞的基本原料构成体组织、体细胞的基本原料(如肌肉、神经、内脏器官、皮如肌肉、神经、内脏器官、皮肤、血液等肤、血液等);维持动物生命、生长、繁殖不可缺少的物质维持动物生命、生长、繁殖不可缺少的物质(新陈代谢新陈代谢);组成生命活性物质的原料组成生命活性物质的原料(如

45、酶、部分激素和抗体等如酶、部分激素和抗体等)。一般来讲,实验动物体内蛋白质一般来讲,实验动物体内蛋白质约占体重的约占体重的15151818。蛋白质蛋白质缺乏可导致动物消化机能减退、缺乏可导致动物消化机能减退、生长发育受阻、繁殖性能下降等生长发育受阻、繁殖性能下降等现象。因此,在设计动物饲料配现象。因此,在设计动物饲料配方时,就必须充分考虑蛋白质的方时,就必须充分考虑蛋白质的供给量。供给量。2、消化与吸收:、消化与吸收:3、必需氨基酸与非必需氨基酸、必需氨基酸与非必需氨基酸 蛋白质由氨基酸组成,饲料中的蛋白质必须分解成氨基酸,才能被吸蛋白质由氨基酸组成,饲料中的蛋白质必须分解成氨基酸,才能被吸收

46、。氨基酸又分为以下收。氨基酸又分为以下2 2种:种:必需氨基酸:动物体内不能合成或合成数量满足必需氨基酸:动物体内不能合成或合成数量满足不了动物的需要,必须由不了动物的需要,必须由饲料供给的氨基酸,称之为饲料供给的氨基酸,称之为essential amino acidessential amino acid。非必需氨基酸:动物体内能够合成,不依赖饲料供给的氨基酸非必需氨基酸:动物体内能够合成,不依赖饲料供给的氨基酸,称之称之nonessential amino acidnonessential amino acid。4、氨基酸平衡与氨基酸失衡氨基酸平衡与氨基酸失衡 氨基酸平衡:是指日粮氨基酸组

47、分之间的相对含量与动物机体氨基酸需要氨基酸平衡:是指日粮氨基酸组分之间的相对含量与动物机体氨基酸需要量之间比值较为一致的相互关系量之间比值较为一致的相互关系,其利用率越高,营养价值也越高。其利用率越高,营养价值也越高。氨基酸失衡:一种或几种必需氨基酸过多或过少,相互间的比例与动物的氨基酸失衡:一种或几种必需氨基酸过多或过少,相互间的比例与动物的需要不一致,从而造成饲料利用率降低、生长迟缓、繁殖力下降的现象。需要不一致,从而造成饲料利用率降低、生长迟缓、繁殖力下降的现象。5、中药与海洋药物实验室的氨基酸成分、中药与海洋药物实验室的氨基酸成分 表表2 2 氨酸酸指标氨酸酸指标指指 标标配合维持饲料

48、配合维持饲料国标值国标值赖氨酸,赖氨酸,%1.011.010.820.82蛋氨酸蛋氨酸+胱氨酸,胱氨酸,%0.640.640.530.53精氨酸,精氨酸,%1.141.140.990.99组氨酸,组氨酸,%0.500.500.400.40色氨酸,色氨酸,%0.260.260.190.19苯丙氨酸苯丙氨酸+酪氨酸,酪氨酸,%1.491.491.101.10苏氨酸,苏氨酸,%0.680.680.650.65亮氨酸,亮氨酸,%1.391.390.440.44异亮氨酸,异亮氨酸,%0.720.720.700.70缬氨酸,缬氨酸,%0.870.870.840.84 (二)脂类(二)脂类(LipidsLi

49、pids)脂类是脂肪和类脂的总称。脂类是脂肪和类脂的总称。1 1、脂肪:、脂肪:是动物体内的储备脂类,又称甘油三酯,是由是动物体内的储备脂类,又称甘油三酯,是由1 1分子脂分子脂肪酸肪酸3 3分子甘油结合而成。构成脂肪的脂肪酸分为:分子甘油结合而成。构成脂肪的脂肪酸分为:饱和脂肪酸:脂肪酸碳链中碳原子以饱和脂肪酸:脂肪酸碳链中碳原子以碳碳-碳单键碳单键相连。相连。如猪、羊、如猪、羊、奶油等动物脂肪多为饱和脂肪酸,常温下多为固态。奶油等动物脂肪多为饱和脂肪酸,常温下多为固态。不饱和脂肪酸:脂肪酸碳链中部分不饱和脂肪酸:脂肪酸碳链中部分碳原子互相以双键碳原子互相以双键相连,如:相连,如:亚油酸、亚

50、麻酸和花生四烯酸亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸(又称必需脂肪酸:动物不能合(又称必需脂肪酸:动物不能合成,但又是生长必需的)。成,但又是生长必需的)。如植物油脂中的芝麻、花生、菜籽如植物油脂中的芝麻、花生、菜籽油主要成分是不饱和脂肪酸,常温下多为液态。油主要成分是不饱和脂肪酸,常温下多为液态。必需脂肪酸缺必需脂肪酸缺乏引起生长发育缓慢停止、生殖能力下降、泌乳量减少、脱毛。乏引起生长发育缓慢停止、生殖能力下降、泌乳量减少、脱毛。有研究认为:饱和脂肪酸可促进动脉粥样硬化的发生有研究认为:饱和脂肪酸可促进动脉粥样硬化的发生(动物油动物油脂脂);不饱和脂肪酸可预防动脉粥样硬化的发生;不饱和脂肪酸可预防动脉

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