1、临床检验实验室临床检验实验室基本技术与管理基本技术与管理主要内容主要内容临床实验室管理概论临床实验室管理概论检验前质量保证检验前质量保证检验（中）质量控制检验（中）质量控制检验后质量保证检验后质量保证检验质量控制检验质量控制临床检验方法临床检验方法的选择与评价的选择与评价临床检验室内质控临床检验室内质控与室间质评与室间质评第一节第一节:临床实验室概论临床实验室概论 临床实验室定义临床实验室定义 临床实验室作用临床实验室作用 临床实验室功能临床实验室功能 临床实验室工作准则临床实验室工作准则 为诊断、预防、治疗人体疾病为诊断、预防、治疗人体疾病或评估人体健康提供信息为目或评估人体健康提供信息为目
2、的，对来自人体的材料进行生的，对来自人体的材料进行生物学、微生物学、免疫学、化物学、微生物学、免疫学、化学、血液学、生物物理学、细学、血液学、生物物理学、细胞学、病理学或其他检验的实胞学、病理学或其他检验的实验室称为临床实验室（或医学验室称为临床实验室（或医学实验室）。实验室）。ISO医学实验室质量和能力认医学实验室质量和能力认可准则可准则临床实验室临床实验室:我国临床实验室包括：我国临床实验室包括：医疗机构医疗机构 采供血机构采供血机构 疾病预防与控制中心疾病预防与控制中心 卫生检疫部门卫生检疫部门 计划生育指导站计划生育指导站 所属实验室所属实验室临床实验室的作用：临床实验室的作用：利用必
3、要的实验室技术对疾病的诊断、筛利用必要的实验室技术对疾病的诊断、筛查、监测疾病的发展过程和观察患者对治查、监测疾病的发展过程和观察患者对治疗的反应等方面提供信息。疗的反应等方面提供信息。临床实验室功能临床实验室功能:在在受控受控的情况下，以的情况下，以科学科学的方式收集、的方式收集、处理和分析血液、体液和其他组织标处理和分析血液、体液和其他组织标本并将结果提供给申请者，以便其采本并将结果提供给申请者，以便其采取进一步的措施，实验室同时应提供取进一步的措施，实验室同时应提供对诊断和治疗有益的对诊断和治疗有益的参考信息参考信息。样品采集物错误样品采集物错误患者样品错误患者样品错误样品储存样品储存参
4、考区间不当参考区间不当进入实验室进入实验室错误操作错误操作分析错误分析错误输出错误报告输出错误报告检验过程示意图检验过程示意图临床医生经常遇到的检验问题临床医生经常遇到的检验问题问题问题1：结果与临床不符合：结果与临床不符合问题问题2：同一病人多个结果：同一病人多个结果问题问题3：同一血样结果不同：同一血样结果不同问题问题4：临床误解的回报结果：临床误解的回报结果问题问题6：参考范围不同：参考范围不同问题问题7：没有参考范围：没有参考范围问题问题8：不了解病人的情况：不了解病人的情况临床实验室工作准则：临床实验室工作准则：安全安全准确准确及时及时有效有效经济经济保护患者隐私。保护患者隐私。临床
5、实验室质量管临床实验室质量管理的基本要素理的基本要素检验前质量保证检验前质量保证设设 备备校校 准准室内质量控制室内质量控制检验后质量保证检验后质量保证人人 员员设施与环境设施与环境标准操作程序标准操作程序室间质量评价室间质量评价记记 录录第二节第二节:检验前质量保证检验前质量保证检验前质量保证的基本内容与重要性检验前质量保证的基本内容与重要性生物变异和患者状态对检验结果的影响生物变异和患者状态对检验结果的影响检验申请检验申请标本采集标本采集建立检验前质量保证措施建立检验前质量保证措施一：检验前质量保证的基本内容一：检验前质量保证的基本内容及重要性及重要性检验过程质量保证包括：检验过程质量保证
6、包括：检验前、检验检验前、检验中和检验后中和检验后质量保证。质量保证。检验前质量保证包括：检验申请、患者检验前质量保证包括：检验申请、患者准备、标本采集准备、标本采集/运输等。运输等。重要性：研究报道：检验误差有重要性：研究报道：检验误差有45%-70%是来自于检验前质量的不合格。是来自于检验前质量的不合格。检验申请检验申请标本收集标本收集标本运送标本运送标本接收标本接收标本处理标本处理分析分析检验前流程检验前流程选择实验项目选择实验项目填写申请单填写申请单安排标本采集安排标本采集人员人员标记急诊、平标记急诊、平诊诊采集器械准备采集器械准备患者准备患者准备标本采集标本采集病床前病床前医生办公室
7、医生办公室采样中心采样中心标记或条形码标记或条形码采样器械处置采样器械处置区分优先次序区分优先次序标本运送至实标本运送至实验室验室真空运输真空运输自动运输自动运输人工运输人工运输邮寄邮寄验证标记验证标记产生条形码产生条形码确定急诊、平确定急诊、平诊诊标本质量鉴定标本质量鉴定离心离心分杯分杯预处理预处理标本送至标本送至实验室实验室二：生物变异和患者状态对检验结二：生物变异和患者状态对检验结果的影响果的影响生物变异生物变异:年龄年龄 性别性别 昼夜节律昼夜节律 季节变化与海拔高度季节变化与海拔高度 月经月经 妊娠妊娠患者状态患者状态 饮食及生活习惯饮食及生活习惯 运动运动 压力压力 体位体位 药物
8、药物 内源性干扰因素内源性干扰因素几种常用抗生素对部分检验结果的影响几种常用抗生素对部分检验结果的影响青霉素青霉素头孢头孢氯霉素氯霉素红霉素红霉素利福平利福平WBCWBCALTALTASTASTALPALPBUNBUNK KBilBilNaNa三三:检验申请检验申请申请单申请单:包括信息包括信息:患者标志检验授权者标患者标志检验授权者标志原始标本类型申请的检验项目患者相志原始标本类型申请的检验项目患者相关临床资料标本采集日期与时间实验室收关临床资料标本采集日期与时间实验室收到标本日期时间到标本日期时间检验项目的申请检验项目的申请:遵循遵循”真实性、可靠性、真实性、可靠性、实用性实用性“原则原则
9、患者的识别：患者的识别：四：标本采集四：标本采集注意以下几个方面：注意以下几个方面：患者准备患者准备标本处理与运送标本处理与运送标本离心标本离心标本保存标本保存（一）患者准备：（一）患者准备：要点：要点：运动方面：处于平静、休息状态或正常活运动方面：处于平静、休息状态或正常活动动饮食方面：禁食空腹；饮食方面：禁食空腹；4小时前勿喝茶、咖小时前勿喝茶、咖啡、勿吸烟饮酒；了解患者饮食服药等习啡、勿吸烟饮酒；了解患者饮食服药等习惯。惯。药物：药物：标本采集时间：标本采集时间：生化检验：一般清晨空腹生化检验：一般清晨空腹6-12小时后。小时后。血培养：发病期，使用抗生素前。血培养：发病期，使用抗生素前
10、。心肌损伤标志物：根据不同物质出现高峰期而定。心肌损伤标志物：根据不同物质出现高峰期而定。血药浓度监测：根据药物峰值效应。血药浓度监测：根据药物峰值效应。糖耐量试验：分别在空腹、餐后糖耐量试验：分别在空腹、餐后1小时、小时、2小时采小时采血。血。尿液标本：取决于检测成分。尿液标本：取决于检测成分。输液患者标本：输液后一段时间。输液患者标本：输液后一段时间。心肌梗死后血中主要心脏标志的动态变化心肌梗死后血中主要心脏标志的动态变化 Mb 临床生化实验血标本可从静临床生化实验血标本可从静脉、动脉和毛细血管采取。脉、动脉和毛细血管采取。静脉采血成人：肘前静脉；婴幼静脉采血成人：肘前静脉；婴幼儿：颈静脉
11、；儿：颈静脉；动脉采血成人：动脉、肱动脉或动脉采血成人：动脉、肱动脉或股动脉；股动脉；毛细血管采血成人多用手指或耳毛细血管采血成人多用手指或耳垂。垂。（二）标本处理和运送（二）标本处理和运送常见检验项目标本转送要求：常见检验项目标本转送要求：采样后立即送检的常规项目：血氨、血沉、血气分析、采样后立即送检的常规项目：血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养，特别是厌氧菌酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养，特别是厌氧菌培养。培养。采样后采样后0.5小时内送检的常规项目：血糖、电解质、小时内送检的常规项目：血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、血液细胞学、凝血试验、
12、体液细胞学、涂片找细菌、真菌等。真菌等。采样后采样后1-2小时内送检的常规项目：各种蛋白质类、小时内送检的常规项目：各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。采集后立即冰冻的检测项目：采集后立即冰冻的检测项目：ACTH、ACE、丙酮、丙酮、血氨、乳酸、肾素等血氨、乳酸、肾素等需避光的检测项目：胆红素、红细胞原卟啉。需避光的检测项目：胆红素、红细胞原卟啉。（三）标本离心（三）标本离心全血标本全血标本2小时内分离血清或血浆。小时内分离血清或血浆。血清标本常用于生化、免疫等检验。血清标本常用于生化、免疫等检验。未加抗凝剂的血液在未加抗凝
13、剂的血液在30-60分钟内凝固。分钟内凝固。急诊血：加促凝剂采血管，急诊血：加促凝剂采血管，5分钟内析出血分钟内析出血浆。浆。离心速度及时间：（离心速度及时间：（1000-1200）g,10-15分钟。分钟。（四）标本保存（四）标本保存全血细胞计数所用抗凝血可在室温下保存全血细胞计数所用抗凝血可在室温下保存24小时。小时。APTT、PT检测的枸橼酸抗凝血浆可在室检测的枸橼酸抗凝血浆可在室温下保存温下保存8小时，但必须在小时，但必须在4-8。血浆蛋白：血浆蛋白：4-8可保存一周。可保存一周。激素和肿瘤标志物：激素和肿瘤标志物：-20 保存。保存。临床生物化学实验方临床生物化学实验方 法的选择与评
14、价法的选择与评价 室内质量控制室内质量控制 室间质量评价室间质量评价第三节第三节 检验质量控制检验质量控制一一:临床生物化学实验方法的临床生物化学实验方法的选择与评价选择与评价方法选择方法选择方法评价方法评价常规分析前的准备常规分析前的准备常规分析后的补充常规分析后的补充提供样品提供样品常规分析常规分析方法发展方法发展预防措施预防措施统计质控统计质控报告结果报告结果一、实验方法的选择一、实验方法的选择 (1)(1)决定性方法决定性方法（definitive methoddefinitive method）：）：是指准确度最高，系统误差最小，经过详是指准确度最高，系统误差最小，经过详细的研究，没
15、有发现产生误差的原因或在某些细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法。方面不够明确的方法。用于发展及评价参考方法和一级标准品。用于发展及评价参考方法和一级标准品。主要方法：主要方法：重量分析法、中子活化法、重量分析法、中子活化法、同位素稀释同位素稀释-质谱分析法（质谱分析法（ID-ID-MSMS）(2)(2)参考方法（参考方法（reference methodreference method）是指准确度与精密度已经充分证实的分析是指准确度与精密度已经充分证实的分析方法，干扰因素少，系统误差与重复测定的随方法，干扰因素少，系统误差与重复测定的随机误差相比可以忽略不计，有适当的灵
16、敏度、机误差相比可以忽略不计，有适当的灵敏度、特异性及较宽的分析范围。特异性及较宽的分析范围。这类方法在条件许可的实验室中应经常使这类方法在条件许可的实验室中应经常使用。用于评价常规方法和试剂盒，鉴定二级标用。用于评价常规方法和试剂盒，鉴定二级标准品。准品。主要方法：主要方法：原子吸收分光光度法、火焰光原子吸收分光光度法、火焰光度法、免疫化学法、离子交换层析法等度法、免疫化学法、离子交换层析法等 (3)(3)常规方法（常规方法（routine methodroutine method）指性能指标符合临床或其他目的的需要，有足指性能指标符合临床或其他目的的需要，有足够的精密度、准确度、特异性和适
17、当的分析范围，够的精密度、准确度、特异性和适当的分析范围，而且经济实用。而且经济实用。主要方法：主要方法：溴甲酚绿法、双缩脲法等。溴甲酚绿法、双缩脲法等。应用：应用：临床临床常规检验常规检验使用，常规方法在作出使用，常规方法在作出评定以后，经有关学术组织认可，可以作为推荐方评定以后，经有关学术组织认可，可以作为推荐方法（法（recommended method recommended method）。项目项目决定性方法决定性方法参考方法参考方法常规方法常规方法钙钙ID-MS原子吸收分光光度原子吸收分光光度法法邻甲酚酞络合酮法邻甲酚酞络合酮法氯氯ID-MS，中子活化，中子活化法法电流滴定法电流滴
18、定法硫氰酸汞法、硫氰酸汞法、ISE钾钾ID-MS，中子活化，中子活化法法火焰光度法火焰光度法火焰光度法，火焰光度法，ISE钠钠ID-MS火焰光度法火焰光度法火焰光度法，火焰光度法，ISE清蛋白清蛋白免疫化学法免疫化学法溴甲酚氯法溴甲酚氯法总蛋白总蛋白凯氏定氮法凯氏定氮法双缩脲法双缩脲法肌酐肌酐ID-MS离子交换层析法离子交换层析法苦味酸比色法苦味酸比色法胆红素胆红素重氮反应法重氮反应法J-G法法葡萄糖葡萄糖ID-MS已糖激酶法已糖激酶法葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法临床生化检验项目的决定性方法、参考方法和常规方法临床生化检验项目的决定性方法、参考方法和常规方法 项目项目决定性方法决定性方法参考方
19、法参考方法常规方法常规方法胆固醇胆固醇ID-MSAbell-kendall法法L-B反应直接法、酶法反应直接法、酶法三酰甘油三酰甘油ID-MS酶法酶法氯仿提取变色酸显色法氯仿提取变色酸显色法ASTMDH-NADH法法赖氏法赖氏法ALTLDH-NADH法法赖氏法赖氏法转肽酶转肽酶动力学连续监测动力学连续监测法法比色法比色法肌酸激酶肌酸激酶NAD偶联法偶联法比色法比色法临床生化检验项目的决定性方法、参考方法和常规方法临床生化检验项目的决定性方法、参考方法和常规方法 2 2、标准品的分级、标准品的分级 (1)(1)一级标准品（原级参考物）一级标准品（原级参考物）是一种稳定而均一的物质，它的数值已由决
20、是一种稳定而均一的物质，它的数值已由决定性方法确定，或由高度准确的若干方法确定，定性方法确定，或由高度准确的若干方法确定，所含杂质也已经定量，且有证书；用于校正决定所含杂质也已经定量，且有证书；用于校正决定性方法，评价及校正参考方法以及为二级标准品性方法，评价及校正参考方法以及为二级标准品定值。定值。另：用二级标准品和常规方法测定，然后定值经另：用二级标准品和常规方法测定，然后定值经过修正后得到校准品。过修正后得到校准品。决定性方法决定性方法 一级标准品一级标准品 参考方法参考方法 二级标准品二级标准品 常规方法常规方法 控制物控制物1 1、总原则、总原则：从实际出发，根据实验室的条件和检测要
21、求确定从实际出发，根据实验室的条件和检测要求确定适当的方法。适当的方法。条件优越的实验室：参考方法条件优越的实验室：参考方法一般临床化学实验室：常规方法一般临床化学实验室：常规方法 或使用方便的参考方法或使用方便的参考方法 尽量选用国内外通用方法或推荐方法，便于方法尽量选用国内外通用方法或推荐方法，便于方法的规范化和质量控制，重点考虑的规范化和质量控制，重点考虑实用性和可靠性实用性和可靠性。常规方法选择时的原则：常规方法选择时的原则：（1 1）实用性）实用性微量快速、微量快速、方法简便、方法简便、安全可靠、安全可靠、成本低廉成本低廉（2 2）可靠性）可靠性 所选方法具有较高的精密度、准确度和较
22、所选方法具有较高的精密度、准确度和较大的检测能力，保证测定结果的准确性能满足大的检测能力，保证测定结果的准确性能满足方法允许误差限度的要求。方法允许误差限度的要求。标本标本ll、试剂试剂mlml二、实验方法的评价二、实验方法的评价（初步试验初步试验判断符合实验要求判断符合实验要求系统评价系统评价决定该方法是否可接受决定该方法是否可接受分析评价试验测得结果和分析评价试验测得结果和比较方法性能判断的标准比较方法性能判断的标准实验方法系统评价的过程实验方法系统评价的过程:对实验误差的测定对实验误差的测定1 1、实验误差、实验误差定义定义:指量值的指量值的给出值给出值与其客观与其客观真值真值之差之差.
23、(一一)实验误差的分类实验误差的分类:依据来源性质依据来源性质实验误差实验误差系统误差系统误差 SESE随机误差随机误差 RERE恒定系统误差恒定系统误差 CECE比例系统误差比例系统误差 PEPE概念概念2 2、系统误差（、系统误差（systematic errorsystematic error，SESE）定义定义:指一系列测定值对真值存在同一倾向的偏差指一系列测定值对真值存在同一倾向的偏差。特点特点:具有单向性具有单向性，而没有随机性，常有一定的大小和，而没有随机性，常有一定的大小和方向；方向；一般由恒定的因素引起，并在一定条件下多次测一般由恒定的因素引起，并在一定条件下多次测定中重复出
24、现；定中重复出现；当找到引起误差的原因，采取一定措施即可纠正，当找到引起误差的原因，采取一定措施即可纠正，消除系统误差能提高测定的准确度。消除系统误差能提高测定的准确度。分类分类:恒定误差恒定误差：指由：指由干扰物干扰物引起的使测定值与真值引起的使测定值与真值存在存在恒定恒定大小的误差，误差大小与被测物浓度无关，大小的误差，误差大小与被测物浓度无关，而与干扰物浓度相关。而与干扰物浓度相关。比例误差比例误差：指相对于被测物浓度有相同的百分：指相对于被测物浓度有相同的百分比误差，误差的绝对量与被测物浓度成正比。比误差，误差的绝对量与被测物浓度成正比。引起误差的原因：引起误差的原因：方法误差：方法误
25、差：最严重，最难避免；最严重，最难避免；仪器和试剂误差：仪器和试剂误差：可以采取措施避免。可以采取措施避免。3 3、随机误差（、随机误差（random errorrandom error，RERE）特点特点:误差没有一定的大小和方向，可正可负，数据呈误差没有一定的大小和方向，可正可负，数据呈正态分布；正态分布；具有不可预测性，不可避免，但可控制在一定范具有不可预测性，不可避免，但可控制在一定范围内；围内；当分析步骤越多，造成这种误差的机会越多；当分析步骤越多，造成这种误差的机会越多；随测定次数增加，其算术均数就越接近于真值。随测定次数增加，其算术均数就越接近于真值。定义定义:指在实际工作中指在
26、实际工作中，多次重复测定多次重复测定某一物质时某一物质时引起的误差。引起的误差。由测定仪器、试剂、环境等由测定仪器、试剂、环境等实验条件的改变实验条件的改变以以及分析人员操作习惯等因素的变化而引起。及分析人员操作习惯等因素的变化而引起。系统误差系统误差 随机误差随机误差引起误差的原因引起误差的原因引起引起随机随机误差误差的原因：的原因：4 4、精密度、精密度（PrecisionPrecision）定义定义:表示测定结果中表示测定结果中随机误差大小随机误差大小程度的指标。它程度的指标。它表示表示同一标本同一标本在一定条件下在一定条件下多次重复测定多次重复测定所得到的所得到的一系列单次测定值的符合
27、程度一系列单次测定值的符合程度。p表示方法表示方法:自身无量度指标，常用自身无量度指标，常用标准差（标准差（S S）或或变异系数（变异系数（CVCV）表示。表示。CV=S X1005 5、准确度、准确度：p定义定义:指指测定结果与真值接近测定结果与真值接近的程度，一般用的程度，一般用偏差和偏差和偏差系数偏差系数表示表示。p表表示方法示方法:偏差为重复测定均值偏差为重复测定均值（X X）与真值之差与真值之差。偏差系数偏差系数（CB）=100。真值真值-X真值真值定量的标准品定量的标准品确认的标准方法确认的标准方法或或p影响因素：影响因素：系统误差、随机误差系统误差、随机误差表示已定系统误差的综合
28、表示已定系统误差的综合。A=+（不确定度不确定度）不确定度（不确定度（uncertaintyuncertainty）是表达测定结果的一个是表达测定结果的一个组成部分，它表明被测标本中真值存在的范围组成部分，它表明被测标本中真值存在的范围（二）、方法评价的基本内容和步骤（二）、方法评价的基本内容和步骤1 1、方法评价的基本内容、方法评价的基本内容p基本内容基本内容:通过实验途径，测定并评价法的精密度通过实验途径，测定并评价法的精密度和准确度和准确度。p评价试验的过程评价试验的过程:就是对就是对误差误差的测定。的测定。精密度和准确度精密度和准确度误差误差方法评价试验方法评价试验2 2、方法评价步骤
29、、方法评价步骤评价前实验评价前实验:研究候选方法的最适条件。研究候选方法的最适条件。初步评价初步评价:批内和日内重复性试验、回收试验、干扰试验批内和日内重复性试验、回收试验、干扰试验 最后评价最后评价:依顺序作依顺序作日间重复性试验日间重复性试验，方法比较试验方法比较试验和总体和总体判断方法是否可接受判断方法是否可接受 。评价后实验评价后实验:如方法可接受，则进行临床相关研究。如方法可接受，则进行临床相关研究。方法应用方法应用:建立质控系统，培训操作者，引人常规工作等建立质控系统，培训操作者，引人常规工作等。（三）方法评价试验（三）方法评价试验 评价试验包括：评价试验包括：重复性试验重复性试验
30、 回收试验回收试验 干扰试验干扰试验 方法比较试验方法比较试验 目的在于考察候选方法的目的在于考察候选方法的偶然误差偶然误差 方法是对同一试验样品，进行多次分析测定方法是对同一试验样品，进行多次分析测定 ，一般为一般为2020次。次。、S与CV能反能反映实映实际工际工作作作重复性试验的样品，用作重复性试验的样品，用标准液标准液、控制物溶控制物溶液、病人标本或混合血清液、病人标本或混合血清均可，视其用途而定。均可，视其用途而定。（3 3）分析物浓度的选择）分析物浓度的选择 进行重复性试验时被测物浓度，宜选择在进行重复性试验时被测物浓度，宜选择在医医学上具有决定性意义的浓度学上具有决定性意义的浓度
31、进行试验，因为这种进行试验，因为这种浓度在临床分析实验结果时最有用处浓度在临床分析实验结果时最有用处 。回收试验回收试验 所谓所谓回收回收即即分析方法正确测定加入常规分分析方法正确测定加入常规分析样品中的纯分析物的能力析样品中的纯分析物的能力。目的是测定。目的是测定比例比例系统误差系统误差，以衡量候选方法的，以衡量候选方法的准确度准确度。（1 1）方法）方法 将将被分析的纯品标准液被分析的纯品标准液加入样品中，成为加入样品中，成为分析样分析样品品，原样品加入相同量的无分析物的溶液作，原样品加入相同量的无分析物的溶液作基础样品基础样品，然后用实验方法分析，两者测定结果的差值为然后用实验方法分析，
32、两者测定结果的差值为回收量。回收量。（2 2）回收率计算）回收率计算 回收率回收率(%)(%)回收浓度回收浓度/加入浓度加入浓度100%100%回收浓度分析样品测得浓度回收浓度分析样品测得浓度-基础样品测得浓度基础样品测得浓度准确吸量。准确吸量。样品中加入标准液后，总的浓度必须在测定方法的分析范围样品中加入标准液后，总的浓度必须在测定方法的分析范围内，加入高、中、低不同浓度，计算平均回收率。内，加入高、中、低不同浓度，计算平均回收率。加入标准液后，浓度达到医学上具有决定意义的浓度。加入标准液后，浓度达到医学上具有决定意义的浓度。加入标准液的体积在整个样品中要少，一般加入标准液的体积在整个样品中
33、要少，一般10%10%。加入的标准液量（加入的标准液量（ml)加入浓度加入浓度 标准液浓度标准液浓度 患者样本量（患者样本量（ml)+标准液量（标准液量（ml)回收实验举例回收实验举例（1）样本制备：取正常人血清一份，将其一分为三，每份2 ml，一号样本为基础样本；二号样本和三号样本为分析样本。按照下列要求制备样本：基础样本：混合血清基础样本：混合血清2 ml+蒸馏水蒸馏水0.1 ml分析样本分析样本:混合血清混合血清2 ml+4mmol/L钙标准液钙标准液0.1 ml分析样本分析样本:混合血清混合血清2 ml+25mmol/L钙标准液钙标准液0.1 ml(2)样本检测:用被评价的检测系统对上
34、面三个样本分别进行四次重复检测,将相关结果填入表.测得平均浓度测得平均浓度 加入浓度加入浓度 回收浓度回收浓度 回收率回收率 (mmol/L)(mmol/L)(mmol/L)(%)基础样本基础样本 1.60 -分析样本分析样本1 1.78 0.19 0.18 95分析样本分析样本2 2.75 1.19 1.15 97 (平均平均)96 结论结论:两个样本回收率分别为两个样本回收率分别为95%95%和和97%,97%,平平均回收率为均回收率为96%,96%,比例系统误差比例系统误差4%,4%,大于大于CLIACLIA88规定的总允许误差标准规定的总允许误差标准,因此该方法因此该方法的准确度性能不
35、可接受的准确度性能不可接受.美国疾病控制和预防中心（美国疾病控制和预防中心（CDCCDC）和医疗保和医疗保险服务中心（险服务中心（CMSCMS）发表的发表的CLIA88CLIA88实验室实验室法规（临床实验室修正法规法规（临床实验室修正法规19881988）.干扰试验干扰试验 干扰试验干扰试验的目的也是用来衡量候选方法的的目的也是用来衡量候选方法的准确度准确度的。在的。在加入一定浓度的干扰物的条件下，形成的是加入一定浓度的干扰物的条件下，形成的是恒定系统恒定系统误差误差。干扰物浓度不同，形成的恒定误差大小也不同。干扰物浓度不同，形成的恒定误差大小也不同。方法方法 11基本与回收试验一样，但是加
36、入的是基本与回收试验一样，但是加入的是疑有干扰疑有干扰或非特异性反应或非特异性反应的物质。的物质。2 2 实验样本制备实验样本制备:收集正常人混合血清或标准品一份收集正常人混合血清或标准品一份,一分为二一分为二,其中一份加入一定量的可疑干扰物作为干扰样本其中一份加入一定量的可疑干扰物作为干扰样本;另一份加入同另一份加入同等量的不含任何干扰物的溶剂作为基础样本等量的不含任何干扰物的溶剂作为基础样本.33样本检测样本检测:用被评价的方法或被评价的检测系统对每份样本重用被评价的方法或被评价的检测系统对每份样本重复测定复测定2-32-3次次,计算干扰值计算干扰值.干扰物浓度干扰物浓度=干扰样本测得值干
37、扰样本测得值-基础样基础样本测得值本测得值.44判断标准判断标准:引起系统误差的大小与引起系统误差的大小与CLIA88规定的可接受性能进规定的可接受性能进行比较行比较.举例举例:评价尿酸对评价尿酸对GOD-POD法测定血糖的干扰法测定血糖的干扰(1)样本制备样本制备:取正常人血清一份取正常人血清一份,一分为二一分为二.1号样本号样本 为基础为基础样本样本,2号样本为干扰样本号样本为干扰样本.基础样本基础样本:混合血清混合血清0.9 ml+蒸馏水蒸馏水0.1 ml干扰样本干扰样本:混合血清混合血清0.9 ml+8.84mmol/L尿酸标准液尿酸标准液0.1 ml(2)测定样本测定样本:用用GOD
38、-POD法对上述两个样本中葡萄糖进行检测法对上述两个样本中葡萄糖进行检测,检测结果如下检测结果如下:干扰实验检测结果干扰实验检测结果 葡萄糖测定平均值葡萄糖测定平均值 加入尿酸浓度加入尿酸浓度 干扰物浓度干扰物浓度 mmol/L mmol/L mmol/L 基础样本基础样本 6.56 _ _干扰样本干扰样本 7.18 0.88 0.62(3)结论结论:0.88mmol/L尿酸对血糖测定所产生的干扰值为尿酸对血糖测定所产生的干扰值为0.62mmol/L.小于小于CLIACLIA88规定允许误差规定允许误差,判断其可接受判断其可接受.对比试验用于检测候选方法的对比试验用于检测候选方法的系统分析误系
39、统分析误差差，包括，包括比例比例和和恒定恒定两种系统误差在内。两种系统误差在内。方法比较试验方法比较试验（1 1）方法）方法用用候选方法候选方法和和对比方法对比方法同时进行对病人标本进同时进行对病人标本进行测定，最后观察两者之间的差异。行测定，最后观察两者之间的差异。（2 2）比较方法的选择）比较方法的选择方法学评价实验小结方法学评价实验小结重复性试验：重复性试验：测定候选方法的偶然误差，衡量精密测定候选方法的偶然误差，衡量精密度。度。回收试验：回收试验：测定比例系统误差，衡量准确度测定比例系统误差，衡量准确度。干扰试验：干扰试验：测定恒定系统误差，衡量准确度测定恒定系统误差，衡量准确度。方法
40、对比试验：方法对比试验：检测候选方法的系统分析误差检测候选方法的系统分析误差。候选方法候选方法评价后试验评价后试验应用阶段应用阶段评价试验评价试验放弃放弃质控质控改进改进（四）参考值与医学决定水平（四）参考值与医学决定水平参考值与参考范围的概念：从按若干标准规定的参考值与参考范围的概念：从按若干标准规定的参考人群中选定一定数量的参考个体，通过检测参考人群中选定一定数量的参考个体，通过检测所得的结果，经统计学处理求得均值（所得的结果，经统计学处理求得均值（)和标准和标准差（差（s)s)，均值即为参考区间，而上述结果的，均值即为参考区间，而上述结果的95%95%的的分布区间（分布区间（2s ）即为
41、参考范围。）即为参考范围。XX参考值与参考范围的确定参考值与参考范围的确定 参考值与参考范围的确定参考值与参考范围的确定2 2、医学决定水平的确定、医学决定水平的确定所谓医学决定水平，就是所谓医学决定水平，就是对临床对临床诊治疾病具有决诊治疾病具有决定性作用定性作用的的被分析物质的浓度被分析物质的浓度，是临床按照不同是临床按照不同病情给予不同处理的病情给予不同处理的指标阀值指标阀值。2 2、医学决定水平的确定、医学决定水平的确定提示需进一步检查的阈值（相当于待诊值）提示需进一步检查的阈值（相当于待诊值）提示需采取治疗措施的界值（相当于确诊值提示需采取治疗措施的界值（相当于确诊值提示预后或需紧急
42、处理的界值提示预后或需紧急处理的界值 临床生化检验指标的医学决定水平临床生化检验指标的医学决定水平成分成分 参考范围参考范围 医学决定水平医学决定水平 水平水平1 水平水平2 水平水平3钠(mmol/L)138-146 115 135 150钾(mmol/L)3.7-5.1 3.0 5.8 7.5胆固醇(mmol/L)3.90-4.50 2.3 6.20 6.7葡萄糖(mmol/L)3.30-5.30 2.5 6.7 10.0清蛋白(g/L)35-50 20 35 52总蛋白(g/L)60-80 45 60 80ALT(U/L)5-40 20 60 300AST(U/L)8-40 20 60
43、30CK(U/L)10-180 100 240 1800癌胚抗原(ug/L)25 25 100 2001 1、葡萄糖、葡萄糖 参考值参考值 3.616.11mmol/L 决定水平决定水平 临床意义及措施临床意义及措施 2.8mmol/L 禁食后禁食后12小时血糖测定值低于此值，则小时血糖测定值低于此值，则为低血糖症，可出现焦虑、出汗、颤抖和虚弱等症为低血糖症，可出现焦虑、出汗、颤抖和虚弱等症状，若反应发生较慢，且以易怒、嗜睡、头痛为主状，若反应发生较慢，且以易怒、嗜睡、头痛为主要症状，则应作其他试验，以查找原因。要症状，则应作其他试验，以查找原因。7mmol/L 空腹血糖达到或超过此值，可考虑
44、糖尿病空腹血糖达到或超过此值，可考虑糖尿病的诊断，但应加作糖耐量试验。的诊断，但应加作糖耐量试验。10mmol/L 饭后饭后1小时测得此值或高于此值，则可高小时测得此值或高于此值，则可高度怀疑为糖尿病。度怀疑为糖尿病。2 2、丙氨酸氨基转移酶（、丙氨酸氨基转移酶（ALTALT）参考值参考值540U/L（37）20U/L此水平在参考范围以内，低于此值可排除此水平在参考范围以内，低于此值可排除许多与许多与ALT升高有关的病种，而考虑其他诊断。升高有关的病种，而考虑其他诊断。此值可以作为病人自身的此值可以作为病人自身的ALT的对照，与过去和的对照，与过去和（或）将来的值进行比较。（或）将来的值进行比
45、较。60U/L高于此值时，对可引起高于此值时，对可引起ALT增高的各种疾增高的各种疾病均应考虑，并应进行其他检查以求确诊。病均应考虑，并应进行其他检查以求确诊。300U/L高于此值通常与急性肝细胞损伤有关，如高于此值通常与急性肝细胞损伤有关，如病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝性休克等，而酒精病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝性休克等，而酒精性肝炎的性肝炎的ALT往往低于此值，其他如传染性单核往往低于此值，其他如传染性单核细胞增多症、多肌炎等也都往往低于此值。细胞增多症、多肌炎等也都往往低于此值。3 3、天门冬氨酸氨基转移酶（、天门冬氨酸氨基转移酶（ASTAST）参考值参考值840U/L（37）20U/L此为
46、排除值，低于此水平时可排除多种与此为排除值，低于此水平时可排除多种与AST增高有关的疾病。因此应考虑其他的诊断。这增高有关的疾病。因此应考虑其他的诊断。这个参考范围内的值还可作为病人自身对照，可与过个参考范围内的值还可作为病人自身对照，可与过去和（或）将来的测定值进行比较。去和（或）将来的测定值进行比较。60U/L此值高于参考范围上限，当此值高于参考范围上限，当AST测定值超过测定值超过此水平时，多种与此水平时，多种与AST增高有关的疾病均应加以考增高有关的疾病均应加以考虑，如肝细胞损伤、心肌梗塞、肌肉与骨骼疾患，虑，如肝细胞损伤、心肌梗塞、肌肉与骨骼疾患，肝后胆道阻塞等，此时同时测定肝后胆道
47、阻塞等，此时同时测定ALT、ALP、Bili、CK等鉴别是肝脏疾病还是心肌疾患有重要意义。等鉴别是肝脏疾病还是心肌疾患有重要意义。300U/L高于此值通常为急性肝细胞损伤，如病毒性高于此值通常为急性肝细胞损伤，如病毒性肝炎、中毒性肝炎等，而一般酒精性肝炎、心肌梗肝炎、中毒性肝炎等，而一般酒精性肝炎、心肌梗塞、进行性肌营养不良等测定值均在此水平以下。塞、进行性肌营养不良等测定值均在此水平以下。医学决定水平与参考值的根本区别在于：参考值参考值来源于大量的正常人群中有关实验来源于大量的正常人群中有关实验测定数据，并根据正常人群中不同年龄、测定数据，并根据正常人群中不同年龄、性别分别进行统计分析，得到
48、了绝大多数性别分别进行统计分析，得到了绝大多数人群中数据的分布范围，并以此确定参考人群中数据的分布范围，并以此确定参考值范围。值范围。医学决定水平医学决定水平不不仅对健康人的数值进行研仅对健康人的数值进行研究，以决定健康人的数值区间，同时还对究，以决定健康人的数值区间，同时还对有关疾病的不同病情的数据进行研究，以有关疾病的不同病情的数据进行研究，以定出不同的决定性限值。可提示及引导医定出不同的决定性限值。可提示及引导医师采取不同的临床措施。师采取不同的临床措施。二二:室内质量控制室内质量控制 质量控制或质量管理质量控制或质量管理(quality control(quality control，
49、QCQC)：是利用现代科学管理的方法和技术检：是利用现代科学管理的方法和技术检测分析过程中的误差，控制与分析有关的各测分析过程中的误差，控制与分析有关的各个环节，确保实验结果的准确、可靠性，也个环节，确保实验结果的准确、可靠性，也称实验室质量保证。称实验室质量保证。影响检验结果质量的检验过程的影响检验结果质量的检验过程的五大因素：五大因素：人、机、料、法、环人、机、料、法、环（一）分析前的质量控制内容（一）分析前的质量控制内容（二）分析中的质量控制内容（二）分析中的质量控制内容（三）分析后的质量控制内容（三）分析后的质量控制内容二、室内质量控制二、室内质量控制lnternallnternal
50、quality control,IQC)quality control,IQC)旨在检测和控制常规工作中的精密度和准确度，提旨在检测和控制常规工作中的精密度和准确度，提高常规工作中天内和天间标本检测的一致性。高常规工作中天内和天间标本检测的一致性。（一）控制物（一）控制物(或质控物或质控物)的种类和使用的种类和使用1 1、常用控制物有：常用控制物有：、质控品应具有的特征：质控品应具有的特征：基质：尽量保证与患者相同。基质：尽量保证与患者相同。稳定性好：有效期应在一年以上。稳定性好：有效期应在一年以上。瓶间差：保证重复性，瓶间差：保证重复性，CV控制在控制在0.5%以内以内.定值，非定值的质控品
