1、医学微生物真菌的基本性状医学微生物真菌的基本性状概概 念念n真菌(真菌(fungi)是一类真核细胞型)是一类真核细胞型微生物。有典型的细胞核和完善微生物。有典型的细胞核和完善的细胞器。的细胞器。n真菌广泛分布于自然界,种类繁真菌广泛分布于自然界,种类繁多,有多,有10余万种。大多对人无害,余万种。大多对人无害,只有少数可引起人类疾病。只有少数可引起人类疾病。n真菌不是植物,不含叶绿素,无真菌不是植物,不含叶绿素,无根、茎、叶的分化。根、茎、叶的分化。10/15/20222Includes 4 phylanZygomycotina(接合菌亚门接合菌亚门),如毛菌、根霉。,如毛菌、根霉。n Asc
2、omycotina(子囊菌亚门子囊菌亚门),如酵母菌属。,如酵母菌属。nBasidiomycotina(担子菌亚门担子菌亚门),如新生隐球菌。,如新生隐球菌。nImperfect Fungi(半知菌亚门半知菌亚门),白假丝酵母菌,白假丝酵母菌10/15/20223接合菌(接合菌(Zygomycotina)10/15/20224子囊菌亚门(子囊菌亚门(Ascomycotina)10/15/20225担子菌(担子菌(Basidiomycotina)10/15/20226半知菌(半知菌(Deutemycotina)10/15/20227第一节第一节 真菌的生物学性真菌的生物学性状状一、形态与结构一、
3、形态与结构(一)单细胞真菌(一)单细胞真菌 形态呈圆形或椭圆形,常见于酵母菌形态呈圆形或椭圆形,常见于酵母菌或类酵母菌。它们以芽生方式繁殖产或类酵母菌。它们以芽生方式繁殖产生子代。生子代。1.1.酵母型真菌酵母型真菌 2.2.类酵母型真菌类酵母型真菌 10/15/20228新生隐球菌新生隐球菌 Cryptococcus neoformans10/15/20229白假丝酵母菌白假丝酵母菌Candida albicans10/15/202210酵母菌芽酵母菌芽生生新生隐球菌繁新生隐球菌繁殖殖10/15/202211(二)多细胞真菌(二)多细胞真菌 菌丝菌丝+孢子孢子 交织成团交织成团菌丝体(霉菌)
4、菌丝体(霉菌)真菌细胞壁缺乏构成细菌胞壁的肽聚糖,其真菌细胞壁缺乏构成细菌胞壁的肽聚糖,其坚韧性,主要依赖于多聚坚韧性,主要依赖于多聚N-N-乙酰基葡萄糖构成乙酰基葡萄糖构成的几丁质的几丁质 。有的含葡聚糖,甘露聚糖及蛋白。有的含葡聚糖,甘露聚糖及蛋白质,某些酵母菌还含类脂。质,某些酵母菌还含类脂。10/15/202212多细胞真菌多细胞真菌菌丝菌丝(hypha)孢子孢子(Spore)10/15/2022131.菌丝菌丝 hypha2.在环境适宜情况下由孢子长出芽管,逐渐延长在环境适宜情况下由孢子长出芽管,逐渐延长呈丝状。呈丝状。菌丝形态有助于鉴别。菌丝形态有助于鉴别。有隔菌丝:有隔菌丝:无隔
5、菌丝无隔菌丝营养菌丝:菌丝伸入培养基中。营养菌丝:菌丝伸入培养基中。气生菌丝:菌丝在培养基表面。气生菌丝:菌丝在培养基表面。生殖菌丝;具有不同孢子的气生菌丝。生殖菌丝;具有不同孢子的气生菌丝。10/15/20221410/15/2022152.孢子孢子(Spore)是真菌的繁殖结构,是真菌的繁殖结构,由生殖菌丝产生。由生殖菌丝产生。不同的真菌不同的真菌 都有其特有的孢子。都有其特有的孢子。根据繁殖方式,孢子可分为有性孢子和无性孢子。根据繁殖方式,孢子可分为有性孢子和无性孢子。一般致病性真菌多为无性孢子。一般致病性真菌多为无性孢子。10/15/202216 有性孢子:同一菌体或不同菌体上的有性孢
6、子:同一菌体或不同菌体上的2个细个细胞融合经胞融合经 减数分裂形成。减数分裂形成。无性孢子:菌丝上的细胞分化或出芽生成。无性孢子:菌丝上的细胞分化或出芽生成。分生孢子分生孢子叶状孢子叶状孢子孢子囊孢子孢子囊孢子大分生孢子大分生孢子 大小、大小、细胞数和颜色细胞数和颜色 是鉴定是鉴定的重要依据的重要依据 小分生孢子小分生孢子 真菌都能产生真菌都能产生芽生孢子芽生孢子 假菌丝假菌丝 厚膜孢子厚膜孢子 关节孢子关节孢子 无无性性孢孢子子10/15/20221710/15/202218(1)叶状孢子(叶状孢子(thallospore)菌丝内细胞直接形成。菌丝内细胞直接形成。(2)分生孢子(分生孢子(c
7、onidium)由生殖菌)由生殖菌 丝末端的细胞分裂或收缩形成。丝末端的细胞分裂或收缩形成。(3)孢子囊孢子(孢子囊孢子(sporangiospore10/15/202219A大分生孢子(小孢子菌)大分生孢子(小孢子菌)B芽生孢子和假菌丝(假丝酵母菌)芽生孢子和假菌丝(假丝酵母菌)C厚膜孢子(假丝酵母菌)厚膜孢子(假丝酵母菌)D关节孢子(球孢子菌)关节孢子(球孢子菌)E孢子囊孢子(毛霉)孢子囊孢子(毛霉)F小分生孢子(曲霉)小分生孢子(曲霉)10/15/202220二、真菌的繁殖与培养二、真菌的繁殖与培养常用培养基常用培养基:沙保:沙保(Sabourauds medium)培养基培养基 pH值
8、值 5.5(4.06.0)培养温度:浅部真菌培养温度:浅部真菌 2228C;深部真菌;深部真菌37。生长速度:生长速度:14W 菌落类型:酵母型菌落菌落类型:酵母型菌落 类酵母型菌落类酵母型菌落 丝状菌落丝状菌落10/15/202221酵母型酵母型菌菌落落C.albicans菌菌落落(类酵母类酵母型型)10/15/202222曲霉属曲霉属青霉菌青霉菌落落10/15/202223多细胞真菌菌落多细胞真菌菌落10/15/202224 有些真菌在不同寄生环境和培养条件有些真菌在不同寄生环境和培养条件下出现两种形态,称下出现两种形态,称二相性真菌二相性真菌(dimorphic fungi),即在机体内
9、或含血培养中,即在机体内或含血培养中37孵育,孵育,呈现酵母型菌落,而在沙保培养基上室温呈现酵母型菌落,而在沙保培养基上室温孵育,则形成丝状菌落。如荚膜组织胞浆孵育,则形成丝状菌落。如荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌等。菌、皮炎芽生菌等。10/15/202225n对干燥、阳光、紫外线及常用消毒剂有强抵抗力对干燥、阳光、紫外线及常用消毒剂有强抵抗力n不耐热,菌丝与孢子不耐热,菌丝与孢子60 1小时均可杀死小时均可杀死n2石炭酸、石炭酸、10%甲醛、甲醛、0.1%升汞、升汞、2.5%碘酊敏感碘酊敏感n抗真菌药物:灰黄霉素、制霉菌素抗真菌药物:灰黄霉素、制霉菌素B、二性霉素二性霉素 B、氟康唑和酮康唑、氟
10、康唑和酮康唑n对抗生素不敏感对抗生素不敏感n染色:乳酚棉蓝染色法染色:乳酚棉蓝染色法10/15/202226第二节第二节 真菌性感染致病性真菌性感染致病性n致病物质:细胞壁糖蛋白致病物质:细胞壁糖蛋白(有内毒素样活性有内毒素样活性),毒,毒 素,荚膜等。素,荚膜等。n致病方式(五种):致病方式(五种):1.浅表真菌感染浅表真菌感染(主要是外源性真菌、癣主要是外源性真菌、癣)2.真菌机会感染真菌机会感染(主要是内源性真菌主要是内源性真菌)3.深部真菌感染深部真菌感染(新生隐球菌导致神经系统感染新生隐球菌导致神经系统感染)4.真菌毒素致病真菌毒素致病(急慢性中毒急慢性中毒)真菌毒素与肿瘤的关系真菌
11、毒素与肿瘤的关系(黄曲霉毒素等黄曲霉毒素等)5.超敏反应超敏反应(皮炎、哮喘等皮炎、哮喘等)10/15/202227抗真菌抗真菌免疫免疫1、非特异性免疫非特异性免疫皮肤粘膜屏障皮肤粘膜屏障 机械阻挡;机械阻挡;皮脂腺,汗腺,分泌酸性物质皮脂腺,汗腺,分泌酸性物质 (儿童易患头癣,成人易患手足癣)(儿童易患头癣,成人易患手足癣)正常菌群拮抗正常菌群拮抗 吞噬细胞:中型粒细胞、巨噬细胞。吞噬细胞:中型粒细胞、巨噬细胞。体液抗菌物质体液抗菌物质2、特异性免疫:真菌感染的恢复主要依靠细胞免疫。、特异性免疫:真菌感染的恢复主要依靠细胞免疫。深部真菌感染可能引起体液免疫。深部真菌感染可能引起体液免疫。10
12、/15/202228第三节第三节 真菌学诊断真菌学诊断Laboratory Diagnosis for Fungal infection Direct microscopic CultureSerological Nucleic acids10/15/202229Microscopic ObservationnSamplesnSputum,skin scrapings,nail,hair,lung biopsy,etc.nMethodnTreated with 10%KOH to dissolve tissue material,leaving the alkali-resistant fun
13、gi intact,or stained with special fungal stains,then observe by microscopynObservationnCharacteristic spores and hyphaenThe wide capsule of Cryptococcus neoformans in India ink preparation of spinal fluid10/15/202230n标本标本 浅部感染真菌浅部感染真菌 毛发、皮屑、指甲毛发、皮屑、指甲 深部感染真菌深部感染真菌 痰、血液、脑脊液等痰、血液、脑脊液等n直接镜检:直接镜检:n浅部标本浅
14、部标本-KOH处理后镜检处理后镜检n假丝酵母菌假丝酵母菌-革兰染色(假菌丝、厚膜孢子)革兰染色(假菌丝、厚膜孢子)n隐球菌隐球菌-墨汁负染(厚荚膜)墨汁负染(厚荚膜)n其他多细胞真菌其他多细胞真菌-特殊染色镜检特殊染色镜检n分离培养分离培养10/15/202231新生隐球菌脑脊液涂片新生隐球菌脑脊液涂片10/15/202232检查直接镜检直接镜检假菌丝和厚膜孢子可帮助诊断假菌丝和厚膜孢子可帮助诊断假菌丝厚膜孢子10/15/202233CulturenSabourauds agarnpH5.6,not suitable for bacterial growthnWith additions of antibiotics,eg,penicillin,stretomycin,etcn25oC 28oC for days and weeks10/15/202234nSerological nNucleic acidsnPCRnProbe and hybridization10/15/202235