《医学实验动物学》03-第三章-微生物与寄生虫质量控制-课件.ppt

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1、Page 2 Page 3Page 4传染源传染源传播途径传播途径易感动物易感动物一、实验动物传染病流行的基本环节一、实验动物传染病流行的基本环节 Page 5传染源(1)人源性)人源性(2)动物源性)动物源性引起传染的条件引起传染的条件(1)要有病原性和一定的毒力)要有病原性和一定的毒力(2)侵入体内的病原体要)侵入体内的病原体要达到达到一定的数量一定的数量(3)病原体要有适当的侵入门户病原体要有适当的侵入门户Page 6传播途径切断传播途径是控制传染病的主要措施。(1)、直接传染:健康动物与患病动物(包括携带病原体)、直接传染:健康动物与患病动物(包括携带病原体动物)直接接触而感染。如狂犬

2、病病毒、猴动物)直接接触而感染。如狂犬病病毒、猴B病毒、艾滋病病病毒、艾滋病病毒等。毒等。水平传播:实验动物群体中互相的传播。传播途径包括水平传播:实验动物群体中互相的传播。传播途径包括消化道、呼吸道或皮肤粘膜创伤等。如沙门氏菌常经消化道感消化道、呼吸道或皮肤粘膜创伤等。如沙门氏菌常经消化道感染;仙台病毒常经呼吸道;布氏杆菌病常由配种直接感染等。染;仙台病毒常经呼吸道;布氏杆菌病常由配种直接感染等。垂直传播:由母体通过胎盘将病原体传给胎儿,例如支垂直传播:由母体通过胎盘将病原体传给胎儿,例如支原体、细小病毒等。原体、细小病毒等。Page 7间接传播间接传播(一)(一)非生物性传播非生物性传播:

3、a、经空气飞沫、尘埃传播;、经空气飞沫、尘埃传播;b、以饲料、以饲料、垫料传播;垫料传播;c、经饮水和饮水用具传播;、经饮水和饮水用具传播;d、经笼器具传播。、经笼器具传播。(二)(二)生物性传播:生物性传播:a、节肢动物:苍蝇、蚊子、蟑螂、蚤、虱、蜱、螨等。、节肢动物:苍蝇、蚊子、蟑螂、蚤、虱、蜱、螨等。b、野生动物:、野生动物:野生啮齿类动物野生啮齿类动物,常携带各种病原体,例如携带,常携带各种病原体,例如携带流行性出血热病毒的野鼠的尿污染实验动物的垫料、饲料。流行性出血热病毒的野鼠的尿污染实验动物的垫料、饲料。c、实验动物:从外部新购入的实验动物,未经严格检疫和隔离。、实验动物:从外部新

4、购入的实验动物,未经严格检疫和隔离。d、饲养、实验人员不注意卫生防疫传染病原体;有些人兽共患、饲养、实验人员不注意卫生防疫传染病原体;有些人兽共患病,也可经人传播给实验动物,例如结核、布氏杆菌病等。病,也可经人传播给实验动物,例如结核、布氏杆菌病等。Page 8易感动物1)种类(品种)种类(品种)2)年龄)年龄 3)营养状况)营养状况 4)机体的抵抗力)机体的抵抗力5)机体防御器官状况)机体防御器官状况Page 9 在医学和兽医学研究领域,疫苗接种和药物治疗在医学和兽医学研究领域,疫苗接种和药物治疗是预防传染病的有效手段。是预防传染病的有效手段。但是但是实验动物一般不采取实验动物一般不采取疫苗

5、接种和药物治疗疫苗接种和药物治疗,主要由于实验动物的特殊性:,主要由于实验动物的特殊性:1、应用疫苗或治疗制剂可能干扰实验结果。、应用疫苗或治疗制剂可能干扰实验结果。2、经过治疗或免疫的动物,外表健康,但可能、经过治疗或免疫的动物,外表健康,但可能 是带菌或带毒者,可能成为潜在的传染源。是带菌或带毒者,可能成为潜在的传染源。3、对于小型实验动物,治疗措施可能在经济上、对于小型实验动物,治疗措施可能在经济上 不合算不合算Page 10实验动物卫生防疫主要包括以下几个方面的内容:实验动物卫生防疫主要包括以下几个方面的内容:1、平时的预防措施、平时的预防措施 2、发生疫病时的扑灭措施、发生疫病时的扑

6、灭措施 3、消毒措施、消毒措施 4、隔离措施、隔离措施Page 11Page 12Page 13 饲育在饲育在开放环境开放环境里里,使用的垫料和使用的垫料和饲料饲料,只消毒不灭菌只消毒不灭菌;其饮水须符合城市其饮水须符合城市饮用水标准。饮用水标准。普通动物只能用于普通动物只能用于教学实验教学实验和某些科和某些科研工作的研工作的预实验预实验。Page 14 Clean animal(CN),亦称最少疾病动物亦称最少疾病动物 ,Minimal DiseaseMinimal Disease animal(MDanimal(MD)。必须是不携带。必须是不携带主要人兽共患病原体和动物烈性传染病的病原主要

7、人兽共患病原体和动物烈性传染病的病原体,体,又又不携带不携带对动物危害大和对科学研究干扰对动物危害大和对科学研究干扰大大的病原体的病原体。Page 15 清洁动物通常来自屏障环境的清洁动物通常来自屏障环境的SPFSPF动物的后代或降级;饲育在屏障环境动物的后代或降级;饲育在屏障环境中;饲育所用的垫料,饲料,饮水和中;饲育所用的垫料,饲料,饮水和用具等均应经过用具等均应经过高压蒸汽消毒高压蒸汽消毒。工作。工作人员需穿人员需穿无菌服装无菌服装才能进行饲育或实才能进行饲育或实验操作。验操作。Page 16三、无特定病原体动物三、无特定病原体动物SPFSPF Page 17 SPFSPF动物的饲育通常

8、是动物的饲育通常是:先培育出先培育出无菌动物或悉生动无菌动物或悉生动物物;然后然后,再将其后代转移到再将其后代转移到屏屏障环境障环境内饲育繁殖建群。内饲育繁殖建群。Page 18 四、四、germ free animal(GF)germ free animal(GF)Page 19无菌动物的取得和饲育环境无菌动物的取得和饲育环境子宫摘除术(剖腹产)子宫摘除术(剖腹产)饲育在隔离环境(隔离器内)饲育在隔离环境(隔离器内)一切用品经过严格包装、严格灭菌后,通一切用品经过严格包装、严格灭菌后,通过传递仓送入隔离器过传递仓送入隔离器通过手套进行间接实验操作通过手套进行间接实验操作Page 20 动物体

9、内外所携带的生命体是动物体内外所携带的生命体是Page 21隔离环境隔离环境GFGF动物动物GNGN动物动物GFGF动物动物 植入屏障环境屏障环境SPFSPF动物动物Page 22实验动物微生物学分类模拟图实验动物微生物学分类模拟图人兽共患病原体动物传染病原体影响实验微生物所有微生物已知微生物 普通级动物普通级动物 清洁级动物清洁级动物 SPF级动物级动物无菌动物无菌动物 悉生动物悉生动物Page 23实验动物微生物学标准实验动物微生物学标准实验动物微生物学标准实验动物微生物学标准Page 26 Page 27 Page 28排出体外,发育成熟,具感染性口,鼻,咽,呼吸道粘膜,眼结膜和皮肤机

10、体有免 适疫 宜 发 育宿主体内无性繁殖,引起发病急性力 条无 件症 下 终宿主 受 精 宿主产生 状 免疫力 感 染 肠绒毛上皮 细胞内发育合 子经猫消化道侵入肠上皮细胞发育繁殖Page 29 。Page 30Page 31Page 32 Page 33 Page 34Page 35 Page 36 Page 37Page 38 Page 39 Page 40 Page 41 Page 42 Page 43 Page 44Page 45 Page 46该菌可导致远交群小鼠该菌可导致远交群小鼠(Swiss-(Swiss-Webster)Webster)和近交系小鼠和近交系小鼠(C3H)(C3H

11、)斜颈和转圈斜颈和转圈症状症状,被看作是小鼠疾患的主要细菌病原。被看作是小鼠疾患的主要细菌病原。对免疫环境遭受损害或抑制的宿主,绿脓对免疫环境遭受损害或抑制的宿主,绿脓杆菌可穿过局部淋巴环境和血管环境,导杆菌可穿过局部淋巴环境和血管环境,导致致致死性败血症。致死性败血症。Page 47。Page 48 Page 49Page 50 Page 51 Page 52 Page 53 人和动物的肠道常在菌,是与人和动人和动物的肠道常在菌,是与人和动物泌尿,呼吸道感染有关的条件性致病物泌尿,呼吸道感染有关的条件性致病菌菌。小鼠自发爆发的疾病临床症状是:食小鼠自发爆发的疾病临床症状是:食欲不振,弓背,被

12、毛粗乱,打喷嚏及欲不振,弓背,被毛粗乱,打喷嚏及呼吸深快。呼吸深快。Page 54 Page 55第五节第五节 实验动物微生物学和实验动物微生物学和寄生虫学质量检测寄生虫学质量检测一一.检测目的检测目的二二.检测方法检测方法三三.检测规则检测规则Page 56Page 571.1.排除人兽共患病,确排除人兽共患病,确保从事实验动物生产的保从事实验动物生产的饲养饲养人员人员和动物实验的和动物实验的科研或教学科研或教学人员身体健人员身体健康。康。Page 581 1对新引进的普通级动物进行检疫,防止人兽对新引进的普通级动物进行检疫,防止人兽共患病原体或动物烈性传染病带入实验动物种群,共患病原体或动

13、物烈性传染病带入实验动物种群,或传播给实验人员。或传播给实验人员。2 2定期对生产繁殖的实验动物种群进行抽样检定期对生产繁殖的实验动物种群进行抽样检测,及时了解实验动物生产群体中微生物学和寄测,及时了解实验动物生产群体中微生物学和寄生虫学质量;必要时作出淘汰或降级处理。生虫学质量;必要时作出淘汰或降级处理。3 3当实验动物种群发生传染病流行时,检出感当实验动物种群发生传染病流行时,检出感染途径,提出控制或预防措施。染途径,提出控制或预防措施。4 4对实验动物生产或实验设施进行静态和动态对实验动物生产或实验设施进行静态和动态检测,及时掌握实验动物环境条件,了解是否检测,及时掌握实验动物环境条件,

14、了解是否符合实验动物国家标准。符合实验动物国家标准。Page 61 3.3.研究确定实验动物微生物学和研究确定实验动物微生物学和寄生虫学等级标准的划分,和不寄生虫学等级标准的划分,和不同等级实验动物的微生物学和寄同等级实验动物的微生物学和寄生虫学质量指标。生虫学质量指标。4.4.确保使用实验动物的确保使用实验动物的药品药品和生物制品的质量和生物制品的质量,保证进,保证进行动物实验的科学研究成果行动物实验的科学研究成果和各种动物试验和各种动物试验结果的可靠结果的可靠性、准确性和重复性。性、准确性和重复性。方法要求:方法要求:1.1.国内外通用国内外通用,比较成熟比较成熟,便于交流。便于交流。2.

15、2.可操作性强,检测结果易判断,检可操作性强,检测结果易判断,检测率较高。测率较高。3.3.易实现标准化和规范化,便于推广。易实现标准化和规范化,便于推广。Page 65实验动物微生物学检测方法实验动物微生物学检测方法1 14 4GB/T14926.1GB/T14926.114926.6414926.6420012001实验动物寄生虫学检测方法实验动物寄生虫学检测方法GB/T18448.1GB/T18448.118448.1018448.1020012001 Page 66目前我国对实验动物病毒学检测通目前我国对实验动物病毒学检测通常使用血清学方法,包括:常使用血清学方法,包括:1.1.酶联免

16、疫吸附试验(酶联免疫吸附试验(ELISA ELISA)2.2.免疫荧光试验(免疫荧光试验(IFAIFA)3.3.免疫酶染色试验(免疫酶染色试验(IEA IEA)4.4.血球凝集(血球凝集(HAHA)和血球凝集抑制)和血球凝集抑制(HIHI)试验试验Page 67 通常采用细菌分离和培养方法。通常采用细菌分离和培养方法。根据培养基上菌落特征,将分离根据培养基上菌落特征,将分离到的可疑菌落作生化鉴定。到的可疑菌落作生化鉴定。Page 68 检测人员的实际工作经验,直接影响检测人员的实际工作经验,直接影响到其对检测结果的判断准确性。到其对检测结果的判断准确性。对部分对部分细菌,如沙门氏菌,支原体等已

17、开展血细菌,如沙门氏菌,支原体等已开展血清学方法检测。泰泽氏病原体不能在人清学方法检测。泰泽氏病原体不能在人工培养基上生长,目前还以病变组织压工培养基上生长,目前还以病变组织压片镜检进行检测,并结合病理学检查结片镜检进行检测,并结合病理学检查结果作出判断。果作出判断。Page 69 通常在光学显微镜下查找寄生通常在光学显微镜下查找寄生虫的虫体、虫卵或孢子。对人兽虫的虫体、虫卵或孢子。对人兽共患的弓形虫,则采用各种血清共患的弓形虫,则采用各种血清学的方法进行检测学的方法进行检测。拟以间隔拟以间隔2 2 3 3个月为宜。在实个月为宜。在实验动物的国家标准中,即规定验动物的国家标准中,即规定:每:每

18、3 3个月至少检测个月至少检测1 1次。次。Page 71病原体刚侵入实验动物群体时病原体刚侵入实验动物群体时,较易分较易分离到病原体离到病原体;而当流行趋于平静可能分离而当流行趋于平静可能分离不到病原体不到病原体,但特异性抗体的检出率上升。但特异性抗体的检出率上升。通常在通常在2 2 3 3个月内,抗体检出率不会下降个月内,抗体检出率不会下降太大太大。随着时间的推移,某些个体的抗随着时间的推移,某些个体的抗体效价水平会下降,以及新生的非感染体效价水平会下降,以及新生的非感染动物增加,使抗体阳性动物的检出大量动物增加,使抗体阳性动物的检出大量减少。减少。Page 72Page 73Page 7

19、4Page 75Page 76对实验动物的活体取样未作规定。对实验动物的活体取样未作规定。无特殊要求时,对鸡、兔、犬和无特殊要求时,对鸡、兔、犬和猴的活体取样,可在生产繁殖设施猴的活体取样,可在生产繁殖设施内进行。内进行。Page 77Page 78 Page 79(1)(1)人类的健康与安全人类的健康与安全;(2)(2)人类赖以生存的人类赖以生存的农业生物的安全农业生物的安全;(3)(3)与人类生存息息相关的生物多样性,与人类生存息息相关的生物多样性,即即环境生物安全环境生物安全。Page 801.野生动物所感染的各种微生物 2.不合格实验动物所携带的各种人兽共患病的病原体Page 81Pa

20、ge 82Page 83 5.随意使用来源不清,质量不明的动物进随意使用来源不清,质量不明的动物进行实验;行实验;6.生物垃圾与生活垃圾混淆一起处理;生物垃圾与生活垃圾混淆一起处理;7.坚持使用传统的超净工作台,不添置生坚持使用传统的超净工作台,不添置生物安全柜;物安全柜;Page 85Page 861.1.感染性微生物的致病程度。感染性微生物的致病程度。2.2.病原体的传播方式和宿主的范围,包括人群中的免疫病原体的传播方式和宿主的范围,包括人群中的免疫现状,人口密度与流动、传播媒介与环境卫生水平等现状,人口密度与流动、传播媒介与环境卫生水平等实际情况。实际情况。3.3.当地对传染病的预防措施

21、,包括:预防免疫和抗血清当地对传染病的预防措施,包括:预防免疫和抗血清的使用;卫生措施包括:食品和的使用;卫生措施包括:食品和 饮用水的卫生,控制饮用水的卫生,控制动物宿主及昆虫媒介,对进口动物及其产品的监控等动物宿主及昆虫媒介,对进口动物及其产品的监控等等。等。4.4.当地对传染病的有效治疗措施,包括被动免疫,采用当地对传染病的有效治疗措施,包括被动免疫,采用的抗菌素和相应的药物治疗等。不可忽视耐药菌株出的抗菌素和相应的药物治疗等。不可忽视耐药菌株出现的可能性。现的可能性。Page 87第第1 1类类病原体病原体实验室感染机会多,感染后发病的可能性大,症状重并实验室感染机会多,感染后发病的可

22、能性大,症状重并可危及人员生命,缺乏有效的预防措施;传染性强,对可危及人员生命,缺乏有效的预防措施;传染性强,对人群危害性大的烈性传染病,包括国内未发现的或虽已人群危害性大的烈性传染病,包括国内未发现的或虽已发现,但无有效防治的传染病病原体发现,但无有效防治的传染病病原体实验室感染机会多,感染后症状较重,可危及人员生命,发病后不易治疗,对人群危害较大的传染病的病原体。具一般危害性,能引起实验室感染机会较少,在一般微具一般危害性,能引起实验室感染机会较少,在一般微生物学实验室中采用一般措施能控制感染和传播,或有生物学实验室中采用一般措施能控制感染和传播,或有对之有效的免疫预防的病原体。对之有效的

23、免疫预防的病原体。可用于制造生物制品的各种减毒、弱毒及不属于第可用于制造生物制品的各种减毒、弱毒及不属于第1 1、第第2 2和第和第3 3类的各种低致病微生物。类的各种低致病微生物。Page 88生物安全实验操作的要求生物安全实验操作的要求生物安生物安全水平全水平实验操作实验操作安全设备安全设备设施设施1常规微生物学操作常规微生物学操作无特殊需要无特殊需要基础实验室基础实验室2执行上述操作外,还需要:执行上述操作外,还需要:穿实验服,戴手套口罩穿实验服,戴手套口罩全部污染废弃物均需灭菌全部污染废弃物均需灭菌标注生物危害标志标注生物危害标志 易产生气溶胶的实验操作需易产生气溶胶的实验操作需使用使

24、用级或级或级生物超净工级生物超净工作台。作台。基础实验室基础实验室制定进入实制定进入实验室规章制验室规章制度。度。3执行上述操作外,还需要:执行上述操作外,还需要:穿着专用实验服穿着专用实验服加强出入管理加强出入管理感染性材料的实验室操作必感染性材料的实验室操作必须在须在级或级或级生物超净工级生物超净工作台内进行作台内进行密封性能较密封性能较好的安全实好的安全实验设施验设施4执行上述操作外,还需要:执行上述操作外,还需要:经过更衣室更换专用实验服经过更衣室更换专用实验服后进室;离室时须经淋浴。后进室;离室时须经淋浴。全部废弃物彻底灭菌后排出。全部废弃物彻底灭菌后排出。全部操作在全部操作在级生物超净工级生物超净工作台内进行。或穿着供氧的作台内进行。或穿着供氧的正压太空服,在正压太空服,在级或级或级级生物超净工作台内进行。生物超净工作台内进行。能彻底密闭能彻底密闭的高度安全的高度安全实验设施。实验设施。Page 89

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