1、沧州医学高等专科学校沧州医学高等专科学校药学系药学系吴爽吴爽中药制剂分析中药制剂分析中药制剂分析中药制剂分析一、概述一、概述（一）中药制剂定义（一）中药制剂定义 中药制剂（中成药）中药制剂（中成药）：以单味或多味中：以单味或多味中药为原料，经特定的工艺制成的药物制剂。药为原料，经特定的工艺制成的药物制剂。(二）中药及其制剂的质量标准二）中药及其制剂的质量标准 现状：中国药典（现状：中国药典（20052005年版一部）年版一部）已收载中药品种已收载中药品种11461146种，新增种，新增154154种。中种。中药及其制剂的质量控制主要包括鉴别、药及其制剂的质量控制主要包括鉴别、检查和含量测定。检
2、查和含量测定。（三）中药制剂的分类与质量分析要点（三）中药制剂的分类与质量分析要点 1 1分类分类 液体制剂液体制剂：合剂与口服液、酒剂和酊剂、：合剂与口服液、酒剂和酊剂、注射剂注射剂 半固体制剂半固体制剂：煎膏剂、浸膏剂和流浸膏剂：煎膏剂、浸膏剂和流浸膏剂 固体制剂固体制剂：丸剂、散剂、颗粒剂、片剂、：丸剂、散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂胶囊剂2 2质量分析质量分析要点要点注射剂：为了确保中药注射剂的质量稳定、可注射剂：为了确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采控，中药注射剂在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制订中药材、有效部位或中收期的前提下，需制订中药材
3、、有效部位或中间体、注射剂的间体、注射剂的指纹图谱指纹图谱。中药指纹图谱包括。中药指纹图谱包括色谱指纹图谱（色谱指纹图谱（HPLCHPLC、GCGC、TLCTLC等），光谱指纹等），光谱指纹图谱及脱氧核糖核酸指纹图谱。图谱及脱氧核糖核酸指纹图谱。（四）中药制剂分析的特点（四）中药制剂分析的特点 1.中药制剂分析的样品一般需要经过提取、中药制剂分析的样品一般需要经过提取、纯化等预处理过程，以排除干扰组分的干扰。纯化等预处理过程，以排除干扰组分的干扰。2.中药制剂中有效成分的含量一般较低，因中药制剂中有效成分的含量一般较低，因此要求方法有较高的灵敏度。此要求方法有较高的灵敏度。3.鉴别主要采用鉴别
4、主要采用TLC法和显微鉴别。法和显微鉴别。4.控制有毒杂质，如重金属，砷盐，残留农控制有毒杂质，如重金属，砷盐，残留农药药二、中药制剂分析中待测成分的提取分离二、中药制剂分析中待测成分的提取分离 与纯化方法与纯化方法（一）提取方法（一）提取方法1 1萃取法萃取法:利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度的不同，利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度的不同，使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组分提取出使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组分提取出来的方法。单一溶剂、分段、液液、固液萃取法。来的方法。单一溶剂、分段、液液、固液萃取法。2 2冷浸法：样品置溶剂里，室温下浸泡一段时间的提取方冷
5、浸法：样品置溶剂里，室温下浸泡一段时间的提取方法。法。适宜易溶出的组分适宜易溶出的组分适宜遇热不稳定的药物适宜遇热不稳定的药物 费时（费时（8 24小时）小时）特点特点3 3回流提取法：样品置有机溶剂中加热回流的回流提取法：样品置有机溶剂中加热回流的提取方法。提取方法。加快溶出速度，省时加快溶出速度，省时适宜受热稳定的药物适宜受热稳定的药物适宜较难溶出的组分适宜较难溶出的组分特点特点通过更换溶剂，使提取更完全通过更换溶剂，使提取更完全4 4连续回流提取法：样品置有机溶剂中加热，连续回流提取法：样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法。蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法。节省
6、溶剂，提高提取效率节省溶剂，提高提取效率适宜受热稳定的药物适宜受热稳定的药物费时费时特点特点使用索氏提取器连续进行提取，提取效率高。使用索氏提取器连续进行提取，提取效率高。5 5水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法：适用于挥发性组分的提取。组分对热应：适用于挥发性组分的提取。组分对热应稳定。稳定。挥发油提取器挥发油提取器 麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油6 6超声提取法：超声波具有助溶作用，提取较冷浸法速度超声提取法：超声波具有助溶作用，提取较冷浸法速度快，一般仅需数十分钟浸出即可达到平衡。由于超声提取快，一般仅需数十分钟浸出即可达到平衡。由于超声提取过程中溶剂可能会有一定的损
7、失，所以用作含量测定时，过程中溶剂可能会有一定的损失，所以用作含量测定时，应于应于超声振荡前先称定重量，提取完毕后，放冷至室温，超声振荡前先称定重量，提取完毕后，放冷至室温，再称重，并补足减失的重量，滤过后，取续滤液备用。用再称重，并补足减失的重量，滤过后，取续滤液备用。用于药材粉末的提取时，由于组分是由细胞内逐步扩散出来，于药材粉末的提取时，由于组分是由细胞内逐步扩散出来，速度较慢，加溶剂后速度较慢，加溶剂后宜先放置一段时间宜先放置一段时间，再超声振荡提取。，再超声振荡提取。原理原理 超声波在液体中以疏密相间的形式向物体辐超声波在液体中以疏密相间的形式向物体辐射，出现射，出现“空化空化”现象
8、（气泡的形成、产生及破现象（气泡的形成、产生及破裂现象），形成超过裂现象），形成超过1000个大气压的冲击力！个大气压的冲击力！超声波振荡器（超声波清洗器）超声波振荡器（超声波清洗器）7 7超临界流体萃取法超临界流体萃取法1 1）超临界流体：是指当压力和温度超过物质的临界）超临界流体：是指当压力和温度超过物质的临界点时，所形成的单一相态。点时，所形成的单一相态。既有与液体相似的密度，又有与气体相似的扩散系数。既有与液体相似的密度，又有与气体相似的扩散系数。常用的超临界流体有常用的超临界流体有超临界超临界COCO2 2，它具有较低的，它具有较低的临界温度（临界温度（3131）和临界压力（）和临界
9、压力（7390kPa7390kPa），惰性、），惰性、无毒、纯净、价廉。无毒、纯净、价廉。2 2）特点：）特点：首先首先，它具有与液体相似的密度，因而具有，它具有与液体相似的密度，因而具有与液体相似的较强的溶解能力；与液体相似的较强的溶解能力；其次其次，溶质在其中扩，溶质在其中扩散系数却与气体相似，因而具有传质快，提取时间短散系数却与气体相似，因而具有传质快，提取时间短的优点，提取完全一般仅需数十分钟；超临界流体的的优点，提取完全一般仅需数十分钟；超临界流体的表面张力为零表面张力为零，这使它很容易渗透到样品的里面，带，这使它很容易渗透到样品的里面，带走测定组分；超临界流体萃取的走测定组分；超临
10、界流体萃取的选择性强选择性强，通过改变，通过改变萃取的条件，如温度、压力等，可以选择性的萃取某萃取的条件，如温度、压力等，可以选择性的萃取某些组分；超临界流体些组分；超临界流体在通常状态下即成为气在通常状态下即成为气，因此萃，因此萃取后溶剂立即变为气体而逸出，取后溶剂立即变为气体而逸出，容易达到浓集容易达到浓集的目的。的目的。3 3）超临界流体萃取的因素：）超临界流体萃取的因素：温度、压力、改性剂和提取时间。温度、压力、改性剂和提取时间。（二）纯化（二）纯化 萃取的方法不仅用于测定组分的提取，也萃取的方法不仅用于测定组分的提取，也可用于纯化。例如二次萃取和柱色谱法。可用于纯化。例如二次萃取和柱
11、色谱法。1、萃取法、萃取法 利用药物与杂质溶解性能的不同进行分离利用药物与杂质溶解性能的不同进行分离2、柱色谱法：是常用的纯化方法、柱色谱法：是常用的纯化方法（1）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适适 当溶剂洗下组分；当溶剂洗下组分；（2）保留杂质于柱上）保留杂质于柱上常用固定相常用固定相硅胶硅胶氧化铝氧化铝大孔吸附树脂大孔吸附树脂 中药制剂分析的一般程序包括：取样、检验依中药制剂分析的一般程序包括：取样、检验依据和分析方法准备、样品的真伪鉴别试验、样品的据和分析方法准备、样品的真伪鉴别试验、样品的杂质检查、样品中主药的含量测定和检验记录等。杂质检查、样品
12、中主药的含量测定和检验记录等。（一）取样（一）取样取样原则：供试品要具有一定的代表性；取样原则：供试品要具有一定的代表性；必须严格按照规定的取样方法进行必须严格按照规定的取样方法进行 取样。取样。三、中药制剂分析的一般程序三、中药制剂分析的一般程序（二）鉴别试验（二）鉴别试验1 1鉴别试验的重要性：中药制剂的鉴别可鉴别试验的重要性：中药制剂的鉴别可以通过确认其中所含药味的存在或某些特以通过确认其中所含药味的存在或某些特征成分的检出而达到鉴别的目的。目前部征成分的检出而达到鉴别的目的。目前部分中药尚无含量测定项目，因此，鉴别就分中药尚无含量测定项目，因此，鉴别就成为中药制剂质量控制的一个非常重要
13、的成为中药制剂质量控制的一个非常重要的环节。环节。2 2鉴别方法鉴别方法 性状鉴别性状鉴别 显微鉴别：显微化学反应鉴别法显微鉴别：显微化学反应鉴别法 理化法鉴别：微量升华法理化法鉴别：微量升华法 颜色反应及沉淀反应颜色反应及沉淀反应 色谱鉴别：纸色谱法色谱鉴别：纸色谱法 TLCTLC、GCGC、HPLCHPLC 光谱鉴别法：专属性差，注意排除干扰光谱鉴别法：专属性差，注意排除干扰1 1）显微鉴别显微鉴别：用光学显微镜或电子显微镜进：用光学显微镜或电子显微镜进行鉴别。含原生药粉末的中药制剂可选此法。行鉴别。含原生药粉末的中药制剂可选此法。鉴别特征如：薄壁组织、木栓组织、淀粉粒、鉴别特征如：薄壁组
14、织、木栓组织、淀粉粒、碳酸钙结晶碳酸钙结晶2 2）TLCTLC法法薄层板：最多的是硅胶薄层板：最多的是硅胶G G板，也可另加板，也可另加0.2%0.2%0.5%0.5%的的CMCCMC作作为黏合剂，可用软铅笔在板上做标记；能经受一般的化学为黏合剂，可用软铅笔在板上做标记；能经受一般的化学试剂处理，如用含浓硫酸的显色剂处理后，可将酸在水中试剂处理，如用含浓硫酸的显色剂处理后，可将酸在水中洗去，然后烘干保存。洗去，然后烘干保存。一般通用的展开剂：无水乙醇一般通用的展开剂：无水乙醇-苯（苯（1 1：4 4）苯苯-氯仿（氯仿（1 1：3 3）丙酮丙酮-甲醇（甲醇（1 1：1 1）显色方法：紫外灯下观察
15、荧光斑点显色方法：紫外灯下观察荧光斑点 选用显色剂选用显色剂2、色谱鉴别、色谱鉴别（2 2）GC GC 含挥发油成分的鉴别含挥发油成分的鉴别（3 3）HPLCHPLC：较少单用于鉴别。常与含量：较少单用于鉴别。常与含量测定同用。测定同用。（三）杂质检查（三）杂质检查主要项目主要项目水分水分总灰分和酸不溶性灰分总灰分和酸不溶性灰分重金属重金属砷盐砷盐残留农药残留农药杂质来源及检查意义杂质来源及检查意义水分水分 结块、霉变或有效成分水解结块、霉变或有效成分水解;灰分灰分 控制药物本身及泥土、沙石控制药物本身及泥土、沙石 等无机杂质等无机杂质;砷盐砷盐 剧毒，常由除草剂、杀虫剂剧毒，常由除草剂、杀虫
16、剂 或化肥引入或化肥引入;重金属重金属 环境污染和使用农药引入环境污染和使用农药引入;残留农药残留农药 有毒有毒(1)烘干法（不含或少含挥发性成分）烘干法（不含或少含挥发性成分）(2)甲苯法甲苯法（含挥发性成分）（含挥发性成分）(3)减压干燥法（含挥发性成分贵重药）减压干燥法（含挥发性成分贵重药）(4)GC法法1、水分测定法、水分测定法甲苯法测定水分甲苯法测定水分原理：原理：水与甲苯在水与甲苯在69.369.3共沸蒸出共沸蒸出，收，收集馏出液，分层后由刻度管测出水的量集馏出液，分层后由刻度管测出水的量适用于含挥发性成分药品的水分测定。适用于含挥发性成分药品的水分测定。含水分量较大的药品测定含水
17、分量较大的药品测定。甲苯法测定水分装置甲苯法测定水分装置A.A.圆底烧瓶圆底烧瓶B.B.水分测定管水分测定管C.C.冷凝管冷凝管酸不溶性灰分的测定酸不溶性灰分的测定总灰分的测定总灰分的测定2、总灰分和酸不溶性灰分的测定、总灰分和酸不溶性灰分的测定WHO规定植物药规定植物药铅铅10ppm镉镉0.3ppm干法破坏干法破坏湿法破坏湿法破坏硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法3、重金属的测定、重金属的测定干法破坏（干法破坏（ChP）湿法破坏（湿法破坏（USP）碱融法破坏碱融法破坏湿法破坏湿法破坏4、砷盐的测定、砷盐的测定5、残留农药的测定、残留农药的测定总有机氯量总有机氯量总有机磷量总有机磷量GC法法（四）（四）
18、含量测定含量测定 1 1、含量测定对象的选择（、含量测定对象的选择（1 1）应选用君药及贵重药建立含量测）应选用君药及贵重药建立含量测定方法，如有毒药应建立含测，若含量太低无法测定，则应在检定方法，如有毒药应建立含测，若含量太低无法测定，则应在检查项下规定限度检查项目；若上述药物无法进行含量测定的，也查项下规定限度检查项目；若上述药物无法进行含量测定的，也可依次选臣药及其他药味测定含量；（可依次选臣药及其他药味测定含量；（2 2）有效成分或指标成分）有效成分或指标成分清楚的，可以测定（清楚的，可以测定（3 3）成分类别清楚的，可测定某一类总成分）成分类别清楚的，可测定某一类总成分的含量，如总黄
19、酮、总生物碱、总皂甙等。（的含量，如总黄酮、总生物碱、总皂甙等。（4 4）所测成分应归）所测成分应归属于某单一药味。如处方中有黄连和黄柏，最好不用小檗碱作为属于某单一药味。如处方中有黄连和黄柏，最好不用小檗碱作为定量成分；（定量成分；（5 5）检测成分应尽量于中医用药的功能主治相近；）检测成分应尽量于中医用药的功能主治相近；（6 6）若确实无法进行含量测定的，可选适当溶剂，测定浸出物）若确实无法进行含量测定的，可选适当溶剂，测定浸出物的含量。的含量。（四）含量测定（四）含量测定 2 2、含量测定方法主要有：化学分、含量测定方法主要有：化学分析法、分光光度法、薄层扫描法和析法、分光光度法、薄层扫描法和HPLCHPLC法。法。
